bening dari masing-masing fage. Fage FB4 cenderung memiliki ukuran lebih besar dan lebih beragam daripada ketiga isolat fage lainnya Gambar 2d.
B. HASIL PENENTUAN KISARAN INANG
Kisaran inang dari fage yang terisolasi spesifik terhadap bakteri EPEC K1.1. Hal ini terlihat dari pembentukan plak yang hanya tampak pada kultur
EPEC K1.1 sedangkan pada E. coli non patogen tidak tampak adanya pembentukan plak Gambar 3b.
a b
Gambar 3 Kisaran inang fage. Plak muncul pada fage yang diinfeksikan dengan EPEC K1.1 a diberi tanda lingkaran; sedangkan pada E. coli non
patogen tidak muncul adanya plak b.
C. HASIL KUANTIFIKASI FAGE
Dari 100 µl kultur EPEC yang diinfeksikan dengan 100 µl fage menghasilkan plak yang terbentuk PFU dengan jumlah atau kuantitas seperti
yang terlihat pada Tabel 1.
Tabel 1 Hasil kuantifikasi dari keempat isolat fage Isolat Fage
Jumlah Plak per 100 µl Konsentrasi Fage
PFU ml FB1 8 80
FB2 410 4100 FB3 25 250
FB4 1600 16000 D. HASIL KARAKTERISASI PROTEIN FAGE
Kadar protein masing-masing fage berbeda satu sama lain. Pada Tabel 1.. terlihat bahwa FB 4 memiliki kadar protein paling tinggi dibanding fage yang lain
sebanyak 222.5 µg ml sedangkan FB1, FB2 dan FB3 secara berurutan memiliki konsentrasi protein sebesar 97.5; 82.5 dan 170µg ml.
Tabel 2 Konsentrasi protein keempat isolat fage
Isolat Fage Konsentrasi Protein
µg ml FB1 97.5
FB2 82.5 FB3 170
FB4 222.5 Analisis Bobot Molekul Protein Fage
Hasil analisis bobot molekul protein fage dengan menggunakan Sodium Dodecyl Sulphate-Poly Acrilamide Gel Electrophoresis SDS-PAGE terlihat
pada Gambar 4. Analisis pada SDS-PAGE dilakukan setelah terlebih dahulu menentukan kadar protein fage dengan menggunakan metode Bradford 1976.
Dengan volume larutan fage yang sama pada masing-masing sumur gel menunjukkan bahwa FB3 menampakkan pita protein pada ukuran 51.8 kDa; 42.6
kDa; 34.6 kDa; dan 30.8 kDa sedangkan FB4 menampakkan pita protein pada
ukuran 40.3 kDa dan 35.9 kDa. Pada FB 1 dan FB2 tidak menampakkan adanya
pita protein, mungkin karena rendahnya kadar protein fage tersebut.
Gambar 4 Kisaran berat molekul protein fage pada SDS-PAGE . 1 Marker. 2 Isolat FB4, dengan ukuran pita protein sebesar 40.3 kDa a dan 35.9
kDa b. 3 Isolat FB3, dengan ukuran pita protein sebesar 51.8 kDa c, 42.6 kDa d, 34.6 kDa e, 30.8 kDa f.
E. HASIL PENGAMATAN MORFOLOGI FAGE DENGAN TEM
