3.5.5 Analisis Kuantitatif 3.5.5.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Nipagin
Ditimbang 0,0500 gram Nipagin BPFI yang telah dikeringkan diatas silika gel selama 5 jam, kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml,
dilarutkan dalam akuades dan dicukupkan volumenya dengan akuades hingga garis tanda. Diperoleh konsentrasi nipagin pada Larutan Induk Baku LIB I
adalah 500 µgml. Dari LIB I tersebut dipipet 7,5; 10; 11; 12,5 dan 15 ml kemudian
dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 ml dan dicukupkan volumenya dengan akuades hingga garis tanda. Diperoleh konsentrasi nipagin pada LIB II yaitu 75;
100; 110; 125 dan 150 µgml.
3.5.5.2 Penentuan Waktu Kerja
Dari LIB II konsentrasi 110 µgml dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam erlenmeyer bertutup dan ditambahkan 5 ml pereaksi deniges. Dipanaskan pada
penangas air selama 5 menit, didinginkan, kemudian ditambahkan 5 tetes natrium nitrit 2 bv, dikocok dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml. Dicukupkan
volumenya dengan akuades hingga garis tanda konsentrasi 22 µgml. Diukur serapan pada λ maksimum 504 nm mulai menit ke-5 hingga menit ke-60 dengan
interval waktu 1 menit.
3.5.5.3 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum
Dari LIB II konsentrasi 110 µgml dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam erlenmeyer bertutup dan ditambahkan 5 ml pereaksi deniges. Dipanaskan pada
penangas air selama 5 menit, didinginkan, kemudian ditambahkan 5 tetes natrium nitrit 2 bv, dikocok dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml. Dicukupkan
volumenya dengan akuades hingga garis tanda konsentrasi 22 µgml. Didiamkan
selama 42 menit dan diukur serapan λ maksimum 400-800 nm pada menit ke-43. 3.5.5.4 Penentuan Kurva Kalibrasi Larutan Standar Nipagin
LIB II masing-masing dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam erlenmeyer bertutup dan ditambahkan masing-masing 5 ml pereaksi deniges. Dipanaskan
pada penangas air selama 5 menit, didinginkan, kemudian ditambahkan 5 tetes natrium nitrit 2 bv, dikocok dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml.
Dicukupkan volumenya dengan akuades hingga garis tanda konsentrasi 15; 20; 22; 25 dan 30 µgml. Didiamkan selama 42 menit dan diukur serapan pada
λ
maksimum 504 nm pada menit ke-43. 3.5.5.5 Penetapan Kadar Nipagin dalam Sampel
Larutan sampel hasil ekstraksi dipipet 5 ml, dimasukkan ke dalam erlenmeyer bertutup dan ditambahkan 5 ml pereaksi deniges. Dipanaskan pada
penangas air selama 5 menit, didinginkan, kemudian ditambahkan 5 tetes natrium nitrit 2 bv, dikocok dan dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 ml. Dicukupkan
volumenya dengan akuades hingga garis tanda. Didiamkan selama 42 menit dan diukur serapan pada λ maksimum 504 nm pada menit ke-43 Egan et al., 1981.
Kadar ditentukan dengan rumus sebagai berikut:
g Sampel
Berat n
Pengencera Faktor
x ml
Volume x
mcgml i
Konsentras mcgg
Nipagin Kadar
=
Keterangan: konsentrasi µgml diperoleh dari persamaan regresi Y = a X + b ; Y = absorbansi; dan X = konsentrasi.
3.5.6 Analisis Data Secara Statistik
