Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Kulit Buah Manggis (Garcinia Mangostana.L) Terhadap Perubahan Makroskopis, Mikroskopis dan Tampilan Immunohistokimia Antioksidan Copper Zinc Superoxide Dismutase (Cu Zn SOD) Pada Ginjal Mencit Jantan (Mus Musculus.L) Stra

  Pengaruh pemberian ekstrak etanol kulit buah Manggis (Garcinia Mangostana.L) terhadap perubahan makroskopis, mikroskopis dan

tampilan immunohistokimia antioksidan Copper Zinc Superoxide Dismutase

(Cu Zn SOD) pada ginjal mencit jantan (Mus musculus.L) strain DDW yang di papari oleh Monosodium glutamate (MSG) dibandingkan dengan vitamin E

  

TESIS

Oleh:

Lestari Mukti

107008013

  

PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN

2013

  Pengaruh pemberian ekstrak etanol kulit buah Manggis (Garcinia Mangostana.L) terhadap perubahan makroskopis, mikroskopis dan

tampilan immunohistokimia antioksidan Copper Zinc Superoxide Dismutase

(Cu Zn SOD) pada ginjal mencit jantan (Mus musculus.L) strain DDW

yang di papari oleh Monosodium glutamate (MSG)

dibandingkan dengan vitamin E

  

TESIS

Diajukan Untuk Melengkapi Persyaratan Memperoleh Gelar

Magister Biomedik Pada Program Studi Magister Ilmu Biomedik

Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara

oleh :

Lestari Mukti

  

107008013

PROGRAM MAGISTER ILMU BIOMEDIK

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN

  

2013

  

Judul : Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Kulit Buah Manggis

(Garcinia Mangostana.L) Terhadap Perubahan Makroskopis, Mikroskopis dan Tampilan Immunohistokimia Antioksidan Copper Zinc Superoxide Dismutase (Cu Zn SOD) Pada Ginjal Mencit Jantan (Mus Musculus.L) Strain DDW Yang di Papari Oleh Monosodium Glutamate (MSG) Dibandingkan Dengan Vitamin E Nama mahasiswa : Lestari Mukti Nomor Pokok : 107008013 Program Studi : S2 Ilmu Biomedik Minat studi : Farmakologi Menyetujui Komisi Pembimbing dr. Betty.,M.Ked.(PA), Sp.PA dr. Datten Bangun, MSc., SpFK (Ketua) (Anggota) Ketua Program Studi

  

Dekan

Magister Ilmu Biomedik Dr. Yahwardiah Siregar, PhD Prof. dr. Gontar A. Siregar, Sp.PD, KGEH NIP 19550807 198503 2001 NIP 19540220 198011 1001 Tanggal Lulus : 26 Juli 2013

  Telah diuji pada Tanggal : 26 Juli 2013 PANITIA PENGUJI TESIS Ketua : dr. Betty.,M.Ked.(PA), Sp.PA Anggota : dr. Datten Bangun, MSc., SpFK : dr. Lidya Imelda Laksmi., M. Ked.(PA), Sp.PA : Dr. Ir. Herla Rusmarilin, MP

  ABSTRAK Pendahuluan :

  Ekstrak kulit manggis (Garcinia Mangostana L) yang selama ini telah banyak digunakan masyarakat sebagai obat, salah satunya sebagai antioksidan untuk mencegah radikal bebas. Penggunaan MSG sebagai penyedap dalam makanan telah dilaporkan mempunyai efek toksik terhadap ginjal yang dapat menurunkan fungsi ginjal dan menyebabkan peningkatan peroksidasi lipid sehingga menimbulkan stres oksidatif. Pemberian EEKM secara oral diharapkan dapat menurunkan efek radikal bebas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efektifitas EEKM sebagai antioksidan pada mencit yang dipapari dengan MSG.

  Metode :

  Metode penelitian yang digunakan adalah metoda eksperimental yang dilakukan terhadap mencit jantan dengan 5 kelompok perlakuan dan 5 ulangan. Kelompok (P0): kontrol aquadest 0,3 ml/mencit/hari dari hari 1-35, (P1): MSG 8 mg/g BB mencit/hari dari hari 1-21 dan hari ke 22-35 tanpa perlakuan. (P2): MSG 8 mg/g BB mencit/hari dari hari 1-22 dan hari ke 22-35 pemberian EEKM 600mg/kg BB mencit/hari, (P3): MSG 8 mg/g BB mencit/hari dari hari 1-21 dan pada hari ke- 22-35 pemberian vitamin E 0,2 mg/g BB mencit/hari, dan (P4): EEKM sebanyak 600 mg/kg BB mencit/hari selama 14 hari.

  Hasil penelitian :

  Hasil penelitian menunjukkan pemberian MSG menyebabkan kerusakan makroskopis ginjal walaupun secara tidak bermakna (p>0,05), namun menyebabkan kerusakan mikroskopis pada ginjal secara bermakna (p<0,05) dan dapat diperbaiki dengan pemberian EEKM secara bermakna (p<0,05). MSG dapat menurunkan tampilan immunohistokimia antioksidan copper zinc superoxide

  dismutase (Cu Zn SOD) pada ginjal secara bermakna (p<0,05), namun tampilan

  immunohistokimia copper zinc superoxide dismutase (Cu Zn SOD) ini dapat ditingkatkan secara bermakna dengan pemberian EEKM (p<0,05).

  Kesimpulan:

  Dari hasil penelitian disimpulkan bahwa EEKM dapat berfungsi sebagai antioksidan dan dapat memperbaiki kerusakan jaringan ginjal secara mikroskopis.

  

Kata kunci: Monosodium Glutamat, Ekstrak etanol kulit manggis (EEKM),

vitamin E, Cu Zn SOD.

  ABSTRACT Introduction : Extract of Mangosteen rind (Garcinia Mangostana L) is widely used as a medicine, one of them as antioxidants to prevent the effect of free radicals. The use of MSG as a flavoring in food have been reported have a toxic effects in the kidney caused decreased kidney function and increased lipid peroxidation leading to oxidative stress. Giving ethanolic extract of mangosteen rind orally sugested reduce effects of free radicals. This study aimed to know the effectiveness ethanolic extract of mangosteen rind as antioxidants in mice given MSG.

  Method : This is an experimental investigation, using mice. The mice divided into 5 groups.

  First group (P0) was a control group only given distilled water 0.3 ml/mouse/day on 1-35 days, (P1):was given MSG 8 mg/g bw/day on 1-21 days and 22-35 days no treatment. (P2): was given MSG 8 mg/g bw/day on 1-21 days and 22-35 days given ethanolic extract of mangosteen rind 600 mg/kg bw/day, (P3): was given MSG 8 mg/g bw/day on 1-21 days and on 22-35 days of vitamin E 0.2 mg/g bw/day, and (P4):only given mangosteen rind extracts as much as 600 mg/kg bw/day for 14 days.

  Result : The results showed MSG in the given dose produced macroscopic damage to the kidney although not significant (p>0.05), but microscopically significant (p<0.05) and with ethanolic extract of mangosteen rind could be repaired significantly (p<0,05). MSG could suppress the immunohistochemistry appearance of copper zinc superoxide dismutase (Cu Zn SOD) in the kidney significantly (P<0.05), but with ethanolic extract of mangosteen rind this appearance improved significantly (p<0,05).

  Conclusion: In this experiments, it was found that the ethanolic extracts of the mangosteen rind could repair the damage in the kidney induced by MSG, microscopicallay and also improved the immunohistochemistry appearance .

  Keywords:

Monosodium Glutamate, Ethanolic extract of Mangosteen rind, vitamin E,

Cu Zn SOD.

  Alhamdulillah segala puji dan syukur penulis sampaikan kehadirat Allah SWT atas berkat, rahmat dan anugerah-Nya sehingga penulis dapat menyusun dan menyelesaikan tesis yang berjudul Pengaruh pemberian ekstrak etanol kulit buah

  ” Manggis (Garcinia Mangostana.L) terhadap perubahan makroskopis, mikroskopis dan tampilan immunohistokimia antioksidan Copper Zinc Superoxide Dismutase (Cu Zn SOD) pada ginjal mencit jantan (Mus musculus.L) strain DDW yang di papari oleh Monosodium glutamate (MSG) dibandingkan dengan vitamin E

  ”. Penulisan tesis ini merupakan salah satu persyaratan dalam memperoleh Gelar Magister pada Program Studi Magister Ilmu Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara Medan.

  Proses penulisan tesis ini tidak terlepas dari bimbingan, bantuan, dukungan, doa dan perhatian dari berbagai pihak, pada kesempatan ini ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada yang terhormat:

  1. Bapak Prof. dr. Gontar A. Siregar, SpPD-KGEH., Dekan Fakultas Kedokteran dan Ibu dr. Yahwardiah Siregar, Ph.D., Ketua Program Studi Magister Ilmu Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara.

  2. Ibu dr. Betty.,M.Ked.(PA), Sp.PA selaku Ketua Komisi Pembimbing dan Ibu dr. Datten Bangun, MSc., SpFK selaku anggota Komisi Pembimbing yang senantiasa bersedia meluangkan waktu untuk membimbing, memberi masukan, motivasi dan pemikiran dengan penuh kesabaran kepada penulis dalam menyelesaikan tesis ini.

  3. Ibu dr. Lidya Imelda Laksmi., M. Ked.(PA), Sp.PA selaku ketua Komisi Pembanding dan Ibu Dr. Ir. Herla Rusmarilin, MP selaku anggota Komisi Pembanding yang telah banyak memberi masukan dan saran untuk perbaikan dalam penyelesaian tesis ini.

  4. Terima kasih yang tulus penulis ucapkan kepada Ayahanda H. Imam dan Ibunda Alm Hj. Lasimah, serta mami mertua Hj. Ratna Juita berkat doa dan dukungan yang selalu menyertai dalam kehidupan sehingga mampu melindungi dan menghantarkan penulis dalam meraih cita-cita. Terima kasih kepada suami tercinta Rudi Putra, Dipl, atas segala kesabaran, doa, pengertian dan pengorbanan dalam mendukung cita-cita penulis selama proses pendidikan, Ananda Elang Samudra yang menjadi penyemangat untuk segera menyelesaikan pendidikan, keluarga besar Kakanda Sri Rejeki, AMK dan Kompol Husni serta keluarga besar Adinda drh. Agus Rahayu yang selalu memberikan dukungan selama penulis menjalani pendidikan di Sekolah Pasca sarjana Program Studi Magister Ilmu Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara Medan.

  5. Pimpinan dan seluruh staf Laboratorium Fisiologi Hewan Jurusan Biologi FMIPA, Laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi dan Laboratorium Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara Medan, yang menyediakan tempat dan membantu penulis untuk penelitian dalam menyelesaikan tesis ini.

  6. Bapak Bupati Aceh Timur dan Bapak Direktur RSUD IDI Kabupaten Aceh Timur, yang telah memberikan kesempatan kepada penulis untuk mengikuti pendidikan pada Sekolah Pasca sarjana Program Studi Magister Ilmu Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara Medan.

  7. Seluruh staf pengajar, tenaga administrasi dan semua rekan-rekan mahasiswa khususnya angkatan 2010 di lingkungan Progran Studi Magister Ilmu Biomedik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara Medan, yang telah banyak memberikan bimbingan, arahan, motivasi dan bantuan selama penulis mengikuti pendidikan.

  Penulis menyadari bahwa tesis ini masih perlu mendapat koreksi dan masukan untuk kesempurnaan. Oleh karena itu Penulis berharap adanya kritik serta saran untukpenyempurnaan tulisan ini. Akhir kata penulis berharap kiranya tesis ini dapat bermanfaat bagi kita semua dan menambah wawasan bagi yang membaca. Amin

  Medan, Juli 2013 Penulis

  Lestari Mukti

A. Identitas Diri

  Nama : Lestari Mukti Tempat / tgl lahir : Wonosobo, 12 September 1979 Agama : Islam Alamat : Gang Sedar No 64, Sriwijaya,

  Kuala Simpang, Aceh Tamiang Telp/Hp : 085262509099 Email

  B. Riwayat pendidikan SD Simpang III Pasaman : Tamat Tahun 1991 SMPN Simpang III Pasaman : Tamat Tahun 1994 SMF Prayoga Padang : Tamat Tahun 1997 Universitas Andalas Padang : Tamat Tahun 2004

  C. Riwayat pekerjaan 2005 sampai sekarang : Staf RSUD IDI Kab. Aceh Timur

  DAFTAR ISI Halaman ABSTRAK...............................................................................................

  1.5. Manfaat Penelitian ..............................................................

  8 BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .........................................................

  7

  7

  6

  6

  6

  1

  1.4. Hipotesis .............................................................................

  ABSTRACT ..............................................................................................

  1.3.2 Tujuan Khusus...........................................................

  1.3.1 Tujuan Umum ............................................................

  1.3. Tujuan Penelitian.................................................................

  1.2. Perumusan Masalah ............................................................

  1 1.1. Latar Belakang ...................................................................

  DAFTAR ISI .......................................................................................... vii DAFTAR GAMBAR .............................................................................. xi DAFTAR TABEL................................................................................... xii DAFTAR SINGKATAN......................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................... xv BAB 1 PENDAHULUAN ...................................................................

  KATA PENGANTAR............................................................................ DAFTAR RIWAYAT HIDUP................................................................ i ii iii vi

  9

  2.1. Monosodium Glutamat .......................................................

  34

  3.5.2 Variabel Tergantung...................................................

  3.6. Kerangka Operasional .......................................................

  3.7. Definisi Operasional ..........................................................

  3.8. Bahan Dan Alat Penelitian .................................................

  34

  34

  34

  35

  3.5. Variabel Penelitian .............................................................

  36

  36

  36

  36

  36

  36

  37

  38

  3.5.1 Variabel Bebas...........................................................

  3.4.2 Kriteria Eksklusi........................................................

  2.2. Garcinia mangostana L. ....................................................

  20

  2.3. Radikal Bebas .....................................................................

  2.4. Antioksidan .......................................................................

  2.5. Vitamin E ...........................................................................

  2.6. Ginjal...................................................................................

  2.7. Kerangka Teori....................................................................

  9

  13

  18

  22

  3.4.1 Kriteria Inklusi...........................................................

  24

  33 BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN ............................................

  34 3.1. Desain Penelitian ...............................................................

  3.2.Tempat dan Waktu Penelitian .............................................

  3.3. Populasi Dan Sampel .........................................................

  3.3.1 Populasi Penelitian.....................................................

  3.3.2 Sampel Penelitian.......................................................

  3.4. Kriteria Sampel .................................................................

  44

  BAB 4 BAB 5 3.9. Etika Penelitian .................................................................

  45

  68 DAFTAR PUSTAKA .............................................................................

  67

  67

  61

  56

  53

  53

  51

  50

  49

  48

  47

  46

  45

  45

  3.10.Pelaksanaan Penelitian.......................................................

  5.2. Saran....................................................................................

  5.1. Kesimpulan..........................................................................

  

KESIMPULAN DAN SARAN................................................

  4.3.Tampilan Pewarnaan Immunohistokimia Cu Zn SOD.......

  4.2 Pemeriksaan Mikroskopis Ginjal ........................................

  4.1 Pemeriksaan Makroskopis Ginjal .......................................

  

HASIL DAN PEMBAHASAN................................................

  3.11. Analisa Data......................................................................

  3.10.6 Prosedur Pewarnaan Immunohistokimia Copper Zinc SOD................................................................

  3.10.5 Prosedur Pewarnaan Haematoxylin Eosin ………...

  3.10.4 Prosedur Pembuatan Preparat Histologi Ginjal Mencit…………………………………………….

  3.10.3 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Manggis ………..

  3.10.2 Prosedur Pembedahan Hewan mencit ….……...….

  3.10.1 Persiapan Dan Pemeliharaan Hewan Percobaan ….

  69

  DAFTAR GAMBAR

Gambar Judul Halaman

2.1. Rumus bangun Monosodium glutamat..................................

  4.1

  62

  57

  55

  53

  33

  31

  30

  Gambar makro skopis ginjal………………………………... Gambar mikroskopis ginjal………………………………...

  …….……. Kerangka teori ………………………………………….…. Gambar kurva berat ginjal………………………………….

  Gambaran histologi ginjal yang terpapar MSG...

  4.4 Gambaran histologi kortek ginjal normal..………….….......

  4.3

  4.2

  2.13

  9

  2.10.

  2.8. Histologi glomerulus ginjal…………………………...…… 27 2.9.

  26

  25 2.7. Struktur nefron………...……………………………………

  22 2.6. Anatomi ginjal normal……………………………………...

  α- Tokoferol ………………………….……

  2.5. Rumus bangun

  18

  2.4. Struktur ROS ………………….…………………….………

  16

  2.3. Struktur inti Xanthone ……………………………………...

  …………………………………. 14

  2.2. Garcinia Mangostana Linn

Tampilan pewarnaan immunohistokimia Cu Zn SOD …….

  DAFTAR TABEL

Tabel Judul Halaman

  3.1. Dosis pemberian ekstrak kulit manggis pada kelompok perlakuan .................................................................................

  46 4.1. Hasil pengamatan kerusakan ginjal secara makroskopis.........

  56 4.2. Hasil pengamatan kerusakan ginjal secara mikroskopis.........

  58 4.3. Tampilan pewarnaan immunohistokimia Cu Zn SOD ginjal...

  63

  ADI α- AMPA CPK Cu Zn SOD DPPH EC SOD

  EEKM

  FAO FDA GM GOT GPx GRAS GST HE

  IFIC KA LDH Mn SOD MSG NMDA Acceptable Daily Intake amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionate receptor Creatinine Phosphokinase Cooper Zinc Superoxide Dismutase 2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl Extracellular Sod

  Ekstrak etanol kulit manggis

  Food Additive Asosiatian Food and Drugs Administration Garcinia Mangostana. L Glutamat Oxaloacetate Transaminase Gluthation Peroxidase Generally Recognized As Safe Gluthation S Transferase Hematoxylin Eosin International Food Information Council foundation Kainite Receptor Lactate Dehydrogenase Mangan SOD Monosodium Glutamate N-methyl-D-aspartate NTA

  Ni SOD ROS SOD Strain DDW WHO

  Nekrosis Tubular Akut

  Nickel SOD Reactive Oxygen Species Superoxide Dismutase Strain Double Distsch Webster World Health Organization