STUDY OF ALKALI AND ENZYMATIC PRETREATMENTS ON SUGARCANE BAGASSE TO PRODUCE REDUCED SUGAR

(1)

ABSTRACT

STUDY OF ALKALI AND ENZYMATIC PRETREATMENTS ON SUGARCANE BAGASSE TO PRODUCE REDUCED SUGAR

By REFIARIOEN

Sugarcane bagasse is one of solid waste from sugar factories. It contains lignocelluloses that can be hydrolyzed into reduced sugar. Objectives of this study were to find out (1) the best condition (alkali concentration, lignin degradation time and temperature) of bagasse lignin degradation, and (2) the best substrate concentration and enzymatic incubation time for hydrolyzing baggase holocelluloses into reduced sugar.

This study was performed into two phases, namely lignin degradation and enzymatic hydrolysis. During the former phase, sugarcane bagasse was immersed in alkali (NaOH, H2O2) solution at a variety of concentrations for a variety of times and temperatures. After degradation, samples were taken and analyzed for degree of lignin degradation. During the latter phases, 3.75% - 6.25% baggase lignocelluloses were hydrolyzed with 10 FPU cellulase enzyme for 0 – 24 hours at pH 4.8, 50oC, and 200 rpm. After hydrolyzation process, samples were taken and analyzed for determining their reduced sugar contents. Collected data were analyzed descriptively and presented graphycally. Results of this study shown that (1) the best condition for lignin degradation (> 99% lignin degraded) was immersion of the sugarcane baggase into 1.0 M NaOH solution at 121 oC for 15


(2)

minutes, and (2) the best treatment for sugarcane bagasse enzymataic hydrolysis was a substrate concentration of 6.25% and a hydrolysis time of 18 hours. The hydrolysis treatment yielded a reduced sugar content of 19.29g/L and a bagasse carbon conversion of 12,4%.


(3)

ABSTRAK

KAJIAN PERLAKUAN AWAL SECARA BASA DAN ENZIMATIS UNTUK MENGHIDROLISIS AMPAS TEBU MENJADI GULA REDUKSI

Oleh REFI ARIOEN

Ampas tebu merupakan salah satu limbah padat pabrik gula. Ampas tebu mengandung lignoselulosa dan dapat dimanfaatkan sebagai bahan baku produksi bioetanol. Tujuan penelitian ini adalah : (1) untuk menemukan kondisi (konsentrasi basa, waktu dan suhu) degradasi lignin, (2) untuk menemukan konsentrasi substrat dan waktu inkubasi terbaik dalam hidrolisis holoselulosa ampas tebu secara enzimatik menjadi gula reduksi.

Penelitian ini dilakukan dalam dua tahap; yaitu tahap degradasi lignin dan tahap hidrolisis holoselulosa ampas tebu menjadi gula reduksi. Pada tahap pertama, ampas tebu direndam dalam larutan basa (NaOH, H2O2) dalam berbagai konsentrasi, dan pada berbagai suhu dan waktu degradasi. Setelah degradasi, sampel diambil untuk menentukan tingkat degradasi lignin. Pada tahap kedua, 3.75% - 6.25% holoselulosa ampas tebu dihidrolisis dengan 10 FPU enzim selulase selama 0 – 24 jam pada pH 4.8, suhu 50oC, dan goyangan 200 rpm. Setelah inkubasi, sampel diambil dan kadar gula reduksi ditentukan. Data yang diperoleh kemudian dianalisis secara deskriptif dan disajikan dalam bentuk grafik. Hasil penelitian menunjukan bahwa (1) kondisi degradasi lignin ampas tebu


(4)

Ampas tebu, perlakuan awal basa, gula reduksi, hidrolisis enzimatik, NaOH.

terbaik (tingkat degradasi > 99%) terjadi pada perlakuan awal NaOH 1 M dengan waktu degradasi 15 menit pada suhu 121oC dan (2) perlakuan hidrolisis terbaik terjadi pada perlakuan 6,25% substrat (holoselulosa ampas tebu) dan lama hidrolisis 18 jam. Gula reduksi yang dihasilkan dari perlakuan tersebut adalah 19.29g/L dan jumlah karbon ampas tebu yang terkonvesi menjadi gula reduksi hanya 12,4%.


(5)

V. SIMPULAN DAN SARAN

A. Simpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilaksanakan, maka dapat diambil simpulan sebagai berikut:

1. Proses degradasi lignin ampas tebu menggunakan NaOH 1,0 M pada suhu 121oC selama 15 menit mampu menurunkan 99,8% kandungan lignin.

2. Kosentrasi substrat 6,25% dari lama inkubasi 18 jam perlakuan terbaik pada penelitian ini gula reduksi yang dihasilkan dengan perlakuan tersebut adalah 19,29 g/L. Hal tersebut belum menunjukan hasil yang maksimal sebab hanya 12,4% ampas tebu yang terkonversi menjadi gula reduksi.

B. Saran

Saran dari penelitian ini adalah:

 Hasil penelitian ini belum mendapatkan gula reduksi yang optimal. Masih diperlukan optimasi dengan menaikan, kosentrasi enzim, substrat dan lama inkubasi agar didapat gula reduksi yang lebih optimal (100g/L) untuk bahan baku pembuatan bioetanol.


(6)

I. PENDAHULUAN

1.1.Latar Belakang dan Masalah

Kebutuhan energi makin lama makin meningkat. Peningkatan kebutuhan energi ini disebabkan oleh pertambahan penduduk yang sangat pesat dan peningkatan kesejahteraan umat manusia khususnya di negara berkembang (Karakashev et al., 2007). Kebutuhan BBM Indonesia pada tahun 2004 adalah 64.700.000 kilo liter (kL) (Hayun, 2008). Menurut Hayun (2008) perkiraan kebutuhan BBM pada tahun 2010 menjadi 97.100.000 kL, sedangkan pada tahun 2015 kebutuhan BBM menjadi 136.200.000 kL.

Kebutuhan bahan bakar minyak yang terus meningkat menyebabkan Indonesia harus mengimpor bahan bakar minyak (BBM). Salah satu upaya pemerintah untuk mengurangi import BBM adalah dengan mengeluarkan kebijakan yang dituangkan pada Inpres nomor 1 tahun 2006, Inpres nomor 2 tahun 2006, dan Pepres nomor 5 tahun 2006 (Hayun, 2008). Inpres dan Pepres tersebut mengamanatkan pengembangan dan penggunaan bahan bakar alternatif untuk mengurangi ketergantungan terhadap BBM.

Salah satu bahan bakar alternatif pengganti BBM adalah bioetanol. Bioetanol yang diproduksi dari bahan pangan yang mengandung pati-patian disebut bioetanol


(7)

generasi pertama. Bioetanol generasi pertama bahan bakunya bersaing dengan bahan pangan dan pakan. Untuk menghindari persaingan tersebut bioetanol generasi kedua perlu dikembangkan. Bioetanol generasi kedua menggunakan biomasa limbah agroindustri seperti ampas tebu, tandan kosong kelapa sawit, jerami, dan kertas bekas. sebagai bahan baku bioetanol (Arifin, 2009). Indonesia khususnya Provinsi Lampung kaya akan biomasa limbah agroindustri yang berpotensi sebagai bahan baku bioethanol generasi kedua. Salah satu biomasa limbah agroindustri tersebut adalah ampas tebu. Produksi ampas tebu di Indonesia cukup tinggi. Pada tahun 2009, areal perkebunan Indonesia adalah 443,832 Ha (Indonesia Commercial Newsletter, 2010). Dengan total produksi tebu 70 ton per Ha. Jumlah ampas tebu yang dihasilkan dari pabrik gula + 40% dari jumlah tebu yang digiling. Dari jumlah tersebut lebih kurang dua pertiganya digunakan sebagai bahan bakar pembangkit tenaga listrik ( Arioen 2009). Jadi jumlah ampas tebu yang belum termanfaatkan oleh pabrik gula adalah 4.101.007,68 ton. Sehingga selama musim giling (170 hari) akan dihasilkan tumpukan ampas tebu sebanyak 86.9910.720 ton.

Ampas tebu mengandung 52,7% selulosa, 20,0% hemiselulosa, dan 24,2% lignin (Samsuri et al., 2007) Jumlah bioetanol yang dapat dihasilkan dari ampas tebu sangat tinggi. Badger (2002) menyatakan bahwa ampas tebu menghasilkan mampu menghasilkan bioetanol 0,001436 kg/L. Berdasarkan perhitungan Badger (2002) jumlah bioetanol yang dapat diproduksi oleh Indonesia pada tahun 2009 adalah 623.286,031 kL.

Ampas tebu tidak dapat langsung difermentasi menjadi bioetanol. Ampas tebu harus diberiperlakuan awal secara fisik (suhu, tekanan), kimia (asam, basa) atau


(8)

secara biologi (enzim, mikroba) untuk menghidrolisis selulosa dan hemiselulosa menjadi gula reduksi yang kemudian difermentasi menjadi bioetanol oleh mikroba oleh sebab itu, penelitian tentang perlakuan awal ampas tebu untuk menghasilkan gula reduksi perludilakukan.

1.2. Tujuan Penelitian Tujuan penelitian ini adalah :

1. Untuk menemukan kondisi terbaik perlakuan awal secara basa dalam mendegradasi lignin ampas tebu

2. Untuk mengetahui konsentrasi substrat, dan lama inkubasi enzim selulase terhadap kadar gula reduksi ampas tebu.

1.3. Kerangka Pemikiran

Ampas tebu merupakan biomasa limbah agroindustri yang persediaannya berlimpah dan murah di Indonesia, khususnya di Lampung. Ampas tebu tidak dapat langsung difermentasi menjadi bioetanol karena selulosa dan hemiselulosa masih terhalang oleh lignin (Gambar 1). Lignin dapat di degradasi dengan basa.


(9)

Cara kerja NaOH dalam mendegradasi lignin yang membungkus selulosa dan hemiselulosa yaitu dengan cara merusak lignin yang membungkus selulosa dan hemiselulosa sehingga lignin yang membungkus akan pecah atau rusak (Dawson dan Boopathy, 2008). Mission et al (2009) menggunakan perendaman TKKS dengan memberi perlakuan basa Ca(OH)2 dan H2O2 dengan lama perendaman selama 48 jam pada suhu 27 oC tingkat degradasi lignin yang dicapai sebesar 31% sedangkan perendaman TKKS dengan NaOH dan H2O2 pada perlakuan yang sama tingkat degradasi lignin yang dicapai sebesar 72%.

Gambar 2. Konfigurasi Dinding Sel Tanaman Sumber: Perez et al. (2002).

Pada perendaman TKKS hanya menggunakan NaOH dengan lama perendaman yang sama 48 jam pada suhu 27oC tingkat degradasi lignin mencapai 65%, (Misson et. Al, 2009)). Berdasarkan penelitian Chang et al. (1981), perlakuan alkali dapat berfungsi sebagai agen pengembung untuk selulosa (Swelling agent).

Lignin-matriks hemiselulosa Selulosa


(10)

Perlakuan awal alkali (NaOH 2 %) pada bahan baku bagas tebu pada suhu 70oC selama 90 menit yang diikuti dengan hidrolisis dapat mendegradasi lignin mendekati 100%.

Pada penelitian ini, ampas tebu diberi perlakuan NaOH) di kombinasikan dengan H2O2. Perlakuan awal basa ampas tebu dilakukan terlebih dahulu supaya proses hidrolisis enzimatik lignoselulosa dapat berlangsung secara optimal. Tujuan proses hidrolisis enzimatik setelah perlakuan awal ampas tebu adalah untuk mengkonversi selulosa dan hemiselulosa menjadi gula reduksi (Perez et al., 2002). Pada penelitian ini hidrolisis selulosa dan hemiselulosa dilakukan menggunakan enzim selulase. Selulase termasuk salah satu enzim jenis hidrolase karena aktivitasnya dapat menhidrolisis ikatan β (1-4) pada selulosa menjadi monomernya (glukosa) (Poedjiadi, 1994). Perlakuan dengan hidrolisis enzimatik ampas tebu dipengaruhi oleh berbagai faktor yang mempengaruhi kerja enzim, seperti jenis enzim, konsentrasi enzim, bahan baku, pH, suhu, substrat atau nutrisi media, dan lama inkubasi (Gong etal., 1981).

Samsuri et al. (2009) menunjukkan bahwa gula reduksi tertinggi pada ampas tebu yang diberi perlakuan awal yaitu pengecilan ukuran dihasilkan pada konsenterasi enzim selulase 10 (FPU) pada suhu 50oC, pH 4,8 lama inkubasi selama 72 jam menghasilkan gula reduksi terbaik sebanyak 12,76 g/L. Sementara itu, Septiyani (2011) menggunakan enzim selulase untuk menghidrolisis selulosa dan hemiselulosa pada ampas tebu yang terlebih dahulu diberi perlakuan NaOH 1M, dihasilkan kadar gula reduksi yang tertinggi pada konsentrasi enzim 10 FPU dan lama inkubasi 18 jam yaitu sebesar 14,07 g/L.


(11)

1.4.Hipotesis

1. Terdapat kondisi perlakuan awal secara basa terbaik dalam mendegradasi lignin sehingga selulosa dan hemiselulosa dapat dihidrolisis secara optimal. 2. Terdapat konsentrasi substrat ampas tebu dan lama inkubasi enzim selulase


(1)

I. PENDAHULUAN

1.1.Latar Belakang dan Masalah

Kebutuhan energi makin lama makin meningkat. Peningkatan kebutuhan energi ini disebabkan oleh pertambahan penduduk yang sangat pesat dan peningkatan kesejahteraan umat manusia khususnya di negara berkembang (Karakashev et al., 2007). Kebutuhan BBM Indonesia pada tahun 2004 adalah 64.700.000 kilo liter (kL) (Hayun, 2008). Menurut Hayun (2008) perkiraan kebutuhan BBM pada tahun 2010 menjadi 97.100.000 kL, sedangkan pada tahun 2015 kebutuhan BBM menjadi 136.200.000 kL.

Kebutuhan bahan bakar minyak yang terus meningkat menyebabkan Indonesia harus mengimpor bahan bakar minyak (BBM). Salah satu upaya pemerintah untuk mengurangi import BBM adalah dengan mengeluarkan kebijakan yang dituangkan pada Inpres nomor 1 tahun 2006, Inpres nomor 2 tahun 2006, dan Pepres nomor 5 tahun 2006 (Hayun, 2008). Inpres dan Pepres tersebut mengamanatkan pengembangan dan penggunaan bahan bakar alternatif untuk mengurangi ketergantungan terhadap BBM.

Salah satu bahan bakar alternatif pengganti BBM adalah bioetanol. Bioetanol yang diproduksi dari bahan pangan yang mengandung pati-patian disebut bioetanol


(2)

generasi pertama. Bioetanol generasi pertama bahan bakunya bersaing dengan bahan pangan dan pakan. Untuk menghindari persaingan tersebut bioetanol generasi kedua perlu dikembangkan. Bioetanol generasi kedua menggunakan biomasa limbah agroindustri seperti ampas tebu, tandan kosong kelapa sawit, jerami, dan kertas bekas. sebagai bahan baku bioetanol (Arifin, 2009). Indonesia khususnya Provinsi Lampung kaya akan biomasa limbah agroindustri yang berpotensi sebagai bahan baku bioethanol generasi kedua. Salah satu biomasa limbah agroindustri tersebut adalah ampas tebu. Produksi ampas tebu di Indonesia cukup tinggi. Pada tahun 2009, areal perkebunan Indonesia adalah 443,832 Ha (Indonesia Commercial Newsletter, 2010). Dengan total produksi tebu 70 ton per Ha. Jumlah ampas tebu yang dihasilkan dari pabrik gula + 40% dari jumlah tebu yang digiling. Dari jumlah tersebut lebih kurang dua pertiganya digunakan sebagai bahan bakar pembangkit tenaga listrik ( Arioen 2009). Jadi jumlah ampas tebu yang belum termanfaatkan oleh pabrik gula adalah 4.101.007,68 ton. Sehingga selama musim giling (170 hari) akan dihasilkan tumpukan ampas tebu sebanyak 86.9910.720 ton.

Ampas tebu mengandung 52,7% selulosa, 20,0% hemiselulosa, dan 24,2% lignin (Samsuri et al., 2007) Jumlah bioetanol yang dapat dihasilkan dari ampas tebu sangat tinggi. Badger (2002) menyatakan bahwa ampas tebu menghasilkan mampu menghasilkan bioetanol 0,001436 kg/L. Berdasarkan perhitungan Badger (2002) jumlah bioetanol yang dapat diproduksi oleh Indonesia pada tahun 2009 adalah 623.286,031 kL.

Ampas tebu tidak dapat langsung difermentasi menjadi bioetanol. Ampas tebu harus diberiperlakuan awal secara fisik (suhu, tekanan), kimia (asam, basa) atau


(3)

secara biologi (enzim, mikroba) untuk menghidrolisis selulosa dan hemiselulosa menjadi gula reduksi yang kemudian difermentasi menjadi bioetanol oleh mikroba oleh sebab itu, penelitian tentang perlakuan awal ampas tebu untuk menghasilkan gula reduksi perludilakukan.

1.2. Tujuan Penelitian Tujuan penelitian ini adalah :

1. Untuk menemukan kondisi terbaik perlakuan awal secara basa dalam mendegradasi lignin ampas tebu

2. Untuk mengetahui konsentrasi substrat, dan lama inkubasi enzim selulase terhadap kadar gula reduksi ampas tebu.

1.3. Kerangka Pemikiran

Ampas tebu merupakan biomasa limbah agroindustri yang persediaannya berlimpah dan murah di Indonesia, khususnya di Lampung. Ampas tebu tidak dapat langsung difermentasi menjadi bioetanol karena selulosa dan hemiselulosa masih terhalang oleh lignin (Gambar 1). Lignin dapat di degradasi dengan basa.


(4)

Cara kerja NaOH dalam mendegradasi lignin yang membungkus selulosa dan hemiselulosa yaitu dengan cara merusak lignin yang membungkus selulosa dan hemiselulosa sehingga lignin yang membungkus akan pecah atau rusak (Dawson dan Boopathy, 2008). Mission et al (2009) menggunakan perendaman TKKS dengan memberi perlakuan basa Ca(OH)2 dan H2O2 dengan lama perendaman selama 48 jam

pada suhu 27 oC tingkat degradasi lignin yang dicapai sebesar 31% sedangkan perendaman TKKS dengan NaOH dan H2O2 pada perlakuan yang sama tingkat

degradasi lignin yang dicapai sebesar 72%.

Gambar 2. Konfigurasi Dinding Sel Tanaman Sumber: Perez et al. (2002).

Pada perendaman TKKS hanya menggunakan NaOH dengan lama perendaman yang sama 48 jam pada suhu 27oC tingkat degradasi lignin mencapai 65%, (Misson et. Al, 2009)). Berdasarkan penelitian Chang et al. (1981), perlakuan alkali dapat berfungsi sebagai agen pengembung untuk selulosa (Swelling agent).

Lignin-matriks hemiselulosa Selulosa


(5)

Perlakuan awal alkali (NaOH 2 %) pada bahan baku bagas tebu pada suhu 70oC selama 90 menit yang diikuti dengan hidrolisis dapat mendegradasi lignin mendekati 100%.

Pada penelitian ini, ampas tebu diberi perlakuan NaOH) di kombinasikan dengan H2O2. Perlakuan awal basa ampas tebu dilakukan terlebih dahulu supaya

proses hidrolisis enzimatik lignoselulosa dapat berlangsung secara optimal. Tujuan proses hidrolisis enzimatik setelah perlakuan awal ampas tebu adalah untuk mengkonversi selulosa dan hemiselulosa menjadi gula reduksi (Perez et al., 2002). Pada penelitian ini hidrolisis selulosa dan hemiselulosa dilakukan menggunakan enzim selulase. Selulase termasuk salah satu enzim jenis hidrolase karena aktivitasnya dapat menhidrolisis ikatan β (1-4) pada selulosa menjadi monomernya (glukosa) (Poedjiadi, 1994). Perlakuan dengan hidrolisis enzimatik ampas tebu dipengaruhi oleh berbagai faktor yang mempengaruhi kerja enzim, seperti jenis enzim, konsentrasi enzim, bahan baku, pH, suhu, substrat atau nutrisi media, dan lama inkubasi (Gong etal., 1981).

Samsuri et al. (2009) menunjukkan bahwa gula reduksi tertinggi pada ampas tebu yang diberi perlakuan awal yaitu pengecilan ukuran dihasilkan pada konsenterasi enzim selulase 10 (FPU) pada suhu 50oC, pH 4,8 lama inkubasi selama 72 jam menghasilkan gula reduksi terbaik sebanyak 12,76 g/L. Sementara itu, Septiyani (2011) menggunakan enzim selulase untuk menghidrolisis selulosa dan hemiselulosa pada ampas tebu yang terlebih dahulu diberi perlakuan NaOH 1M, dihasilkan kadar gula reduksi yang tertinggi pada konsentrasi enzim 10 FPU dan lama inkubasi 18 jam yaitu sebesar 14,07 g/L.


(6)

1.4.Hipotesis

1. Terdapat kondisi perlakuan awal secara basa terbaik dalam mendegradasi lignin sehingga selulosa dan hemiselulosa dapat dihidrolisis secara optimal. 2. Terdapat konsentrasi substrat ampas tebu dan lama inkubasi enzim selulase