UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR DAUN JAMBU BIJI (Psidium Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol Fraksi Polar, Semipolar, Dan Nonpolar Daun Jambu Biji (Psidium guajava L.) Terhadap Sel Kanker Kolon WiDr.
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR DAUN JAMBU BIJI (Psidium
guajava L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON WiDr
SKRIPSI
Oleh:
APRILIA SHINTA MAHARANI
K100130195
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR DAUN JAMBU BIJI (Psidium
guajava L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON WiDr
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
APRILIA SHINTA MAHARANI
K100130195
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
ii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat serta hidayah-Nya penulis
mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul “UJI SITOTOKSIK EKSTRAK
ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMI POLAR, DAN NON POLAR DAUN
JAMBU BIJI (Psidium guajava L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON”.
Penyusunan penelitian ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu syarat
dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas
Muhammdiyah Surakarta. Dalam kesempatan ini, perkenankan penulis untuk
menyampaikan rasa terimakasih dan penghargaan kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. yang terhormat, selaku Dekan Fakultas
Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Setyo Nurwaini, M.Sc., Apt. selaku pembimbing akademik.
3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt. selaku pembimbing.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St selaku penguji 1 dan Dr. Haryoto, M.Sc
selaku penguji 2
5. Bapak dan Ibuku tercinta yang senantiasa membimbing dan mendoakan
keberhasilanku dalam menyelesaikan tugas akhir ini.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb
Surakarta, 29 Desember 2016
Penulis
vi
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .............................................................................................. i
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ ii
HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iii
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... iv
DEKLARASI ...........................................................................................................v
KATA PENGANTAR ........................................................................................... vi
DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. ix
DAFTAR TABEL ....................................................................................................x
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... xi
ABSTRAK ............................................................................................................ xii
ABSTRACT ......................................................................................................... xiii
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah .............................................................................1
B. Rumusan Masalah ......................................................................................2
C. Tujuan Penelitian ........................................................................................2
D. Tinjauan Pustaka ........................................................................................2
1. Tanaman Jambu Biji (Psidium guajava L.) ..........................................2
2. Kanker Kolon .........................................................................................4
3. Sel Kanker WiDr....................................................................................5
4. Metode MTT assay .................................................................................5
E. Landasan Teori ...........................................................................................6
F. Hipotesis .....................................................................................................7
BAB II METODE PENELITIAN ............................................................................8
A. Kategori dan Rancangan Penelitian............................................................8
B. Variabel Penelitian .....................................................................................8
C. Alat dan Bahan ...........................................................................................8
D. Tempat Penelitian .......................................................................................9
E. Jalannya Penelitian .....................................................................................9
F. Analisa Data .............................................................................................13
vii
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................................15
A. Ekstraksi dan Fraksinasi ...........................................................................15
B. Uji Sitotoksik dengan metode MTT assay ...............................................15
C. Uji Kromatografi Lapis Tipis ...................................................................22
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................................25
A. KESIMPULAN ........................................................................................25
B. SARAN.....................................................................................................25
DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................................26
LAMPIRAN ……………………………………………………………………. 2λ
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Perbandingan morfologi sel WiDr, (a) sel hidup, (b) sel WiDr akibat
perlakuan ekstrak etanol 250 µg/mL dan (c) sel membentuk kristal
formazan setelah penambahan pereaksi MTT .....................................17
Gambar 2. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ..........................................................................................18
Gambar 3. Profil KLT ekstrak etanol daun jambu biji dengan fase gerak nheksan:etil asetat (8:2) sebelum diberi pereaksi dilihat pada sinar
tampak (a), UV 254 nm (b), UV 366 nm (c), setelah diberi peraksi
sitroborat (d), FeCl3 (e), Dragendorff (f), dan anisaldehid (g) ............23
ix
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Pereaksi semprot untuk deteksi kandungan senyawa ..............................13
Tabel 2. Rendemen fraksi polar, semi polar, dan non polar daun jambu biji ........15
Tabel 3. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ...............................................................................................18
Tabel 4. Pengaruh perlakuan fraksi polar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ...............................................................................................19
Tabel 5. Pengaruh perlakuan fraksi semipolar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ...............................................................................................20
Tabel 6. Pengaruh perlakuan fraksi nonpolar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ...............................................................................................20
Tabel 7. Hasil uji sitotoksik ekstrak etanol fraksi polar, semipolar dan nonpolar
daun jambu biji terhadap sel WiDr dengan metode MTT assay .............21
Tabel 8. Deteksi golongan senyawa ekstrak etanol daun jambu biji dengan
berbagai pereaksi semprot ........................................................................23
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan hasil rendemen ..............................................................29
Lampiran 2. Skema uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, dan
nonpolar daun jambu biji terhadap sel kanker kolon WiDr ..............31
Lampiran 3. Perhitungan kepadatan sel WiDr .......................................................32
Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar
dan non polar daun jambu biji...........................................................33
Lampiran 5. Data uji sitotoksik dengan metode MTT pada 96-well plate
menggunakan ELISA Reader ...........................................................34
Lampiran 6. Data uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar dan non
polar daun jambu biji (Psidium guajava L.) terhadap sel kanker
kolon WiDr .......................................................................................35
Lampiran 7. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan ekstrak
etanol daun jambu biji .......................................................................37
Lampiran 8. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
polar daun jambu biji ........................................................................38
Lampiran 9. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
semipolar daun jambu biji .................................................................39
Lampiran 10. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
nonpolar daun jambu biji ...............................................................40
Lampiran 11. Perhitungan IC50 ..............................................................................41
xi
ABSTRAK
Kanker kolon merupakan salah satu penyebab umum kematian yang berasal
dari transformasi epitel usus normal polip adenomatosa dan kanker invasif.
Operasi, kemoterapi, dan radioterapi merupakan metode yang digunakan dalam
pengobatan kanker. Meskipun menunjukkan keberhasilan terapi, efek samping
yang ditimbulkan dalam penggunaan obat masih tergolong berbahaya sehingga
perlu dikembangkan pengobatan dengan herbal. Daun jambu biji (Psidium
guajava L.) merupakan salah satu tanaman yang dapat dikembangkan sebagai
agen antikanker. Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui efek sitotoksik
ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, dan nonpolar daun jambu biji terhadap sel
kanker kolon WiDr dan mengetahui golongan senyawa yang terdapat pada sampel
yang memiliki IC50 paling baik.
Penyarian pada penelitian dilakukan dengan metode maserasi dengan etanol
96%. Fraksinasi dilakukan dengan metode partisi cair-cair dengan penyari nheksan, etil asetat, dan etanol-air. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT
assay. Skrining fitokima dilakukan dengan metode kromatografi lapis tipis.
Hasil IC50 ekstrak etanol daun jambu biji yaitu 183,888 µg/mL dan nilai IC50
fraksi polar, semipolar, dan nonpolar lebih besar dari 250 µg/mL. Hasil uji
kromatografi lapis tipis menunjukkan bahwa ekstrak etanol mengandung
golongan senyawa flavonoid, tanin, saponin, alkaloid, dan polifenol.
Kata Kunci: MTT assay, Psidium guajava L, WiDr
xii
ABSTRACT
Colon cancer is one of the common causes of death that comes from the
transformation of normal intestinal epithelial adenomatous polyps and invasive
cancer. Surgery, chemotherapy, and radiotherapy is the method used in the
treatment of cancer. Although it shows the success of therapy, side effects in the
use of drugs is still quite dangerous, so should be developed with herbal medicine.
Guava leaf (Psidium guajava L.) is a plant that can be developed as an anticancer
agent. The purpose of this study was to determine the cytotoxic effect of ethanol
extract, fractions polar, semipolar and nonpolar guava leaves against WiDr colon
cancer cells and determine classes of compounds contained in the sample had the
most excellent IC50.
extraction methods on research done by maceration method with 96%
ethanol. Fractionation was conducted using liquid-liquid partition with penyari nhexane, ethyl acetate, and ethanol-water. Cytotoxic test was conducted by MTT
assay. Phytochemical screening was conducted using thin layer chromatography.
Results IC 50 ethanol extract of guava leaves is 183,888 µ g / mL and IC 50
fraction of polar, semipolar and nonpolar greater than 250 µ g / mL. Thin layer
chromatography test results showed that ethanol extracts contain class of
flavonoids, tannins, saponins, alkaloids and polyphenols.
Keywords: Psidium guajava L, MTT assay, WiDr
xiii
SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR DAUN JAMBU BIJI (Psidium
guajava L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON WiDr
SKRIPSI
Oleh:
APRILIA SHINTA MAHARANI
K100130195
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR DAUN JAMBU BIJI (Psidium
guajava L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON WiDr
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
APRILIA SHINTA MAHARANI
K100130195
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
ii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat serta hidayah-Nya penulis
mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul “UJI SITOTOKSIK EKSTRAK
ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMI POLAR, DAN NON POLAR DAUN
JAMBU BIJI (Psidium guajava L.) TERHADAP SEL KANKER KOLON”.
Penyusunan penelitian ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu syarat
dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas
Muhammdiyah Surakarta. Dalam kesempatan ini, perkenankan penulis untuk
menyampaikan rasa terimakasih dan penghargaan kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. yang terhormat, selaku Dekan Fakultas
Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Setyo Nurwaini, M.Sc., Apt. selaku pembimbing akademik.
3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt. selaku pembimbing.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St selaku penguji 1 dan Dr. Haryoto, M.Sc
selaku penguji 2
5. Bapak dan Ibuku tercinta yang senantiasa membimbing dan mendoakan
keberhasilanku dalam menyelesaikan tugas akhir ini.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb
Surakarta, 29 Desember 2016
Penulis
vi
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL .............................................................................................. i
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ ii
HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iii
HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... iv
DEKLARASI ...........................................................................................................v
KATA PENGANTAR ........................................................................................... vi
DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. ix
DAFTAR TABEL ....................................................................................................x
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... xi
ABSTRAK ............................................................................................................ xii
ABSTRACT ......................................................................................................... xiii
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah .............................................................................1
B. Rumusan Masalah ......................................................................................2
C. Tujuan Penelitian ........................................................................................2
D. Tinjauan Pustaka ........................................................................................2
1. Tanaman Jambu Biji (Psidium guajava L.) ..........................................2
2. Kanker Kolon .........................................................................................4
3. Sel Kanker WiDr....................................................................................5
4. Metode MTT assay .................................................................................5
E. Landasan Teori ...........................................................................................6
F. Hipotesis .....................................................................................................7
BAB II METODE PENELITIAN ............................................................................8
A. Kategori dan Rancangan Penelitian............................................................8
B. Variabel Penelitian .....................................................................................8
C. Alat dan Bahan ...........................................................................................8
D. Tempat Penelitian .......................................................................................9
E. Jalannya Penelitian .....................................................................................9
F. Analisa Data .............................................................................................13
vii
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................................15
A. Ekstraksi dan Fraksinasi ...........................................................................15
B. Uji Sitotoksik dengan metode MTT assay ...............................................15
C. Uji Kromatografi Lapis Tipis ...................................................................22
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................................25
A. KESIMPULAN ........................................................................................25
B. SARAN.....................................................................................................25
DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................................26
LAMPIRAN ……………………………………………………………………. 2λ
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Perbandingan morfologi sel WiDr, (a) sel hidup, (b) sel WiDr akibat
perlakuan ekstrak etanol 250 µg/mL dan (c) sel membentuk kristal
formazan setelah penambahan pereaksi MTT .....................................17
Gambar 2. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ..........................................................................................18
Gambar 3. Profil KLT ekstrak etanol daun jambu biji dengan fase gerak nheksan:etil asetat (8:2) sebelum diberi pereaksi dilihat pada sinar
tampak (a), UV 254 nm (b), UV 366 nm (c), setelah diberi peraksi
sitroborat (d), FeCl3 (e), Dragendorff (f), dan anisaldehid (g) ............23
ix
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Pereaksi semprot untuk deteksi kandungan senyawa ..............................13
Tabel 2. Rendemen fraksi polar, semi polar, dan non polar daun jambu biji ........15
Tabel 3. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ...............................................................................................18
Tabel 4. Pengaruh perlakuan fraksi polar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ...............................................................................................19
Tabel 5. Pengaruh perlakuan fraksi semipolar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ...............................................................................................20
Tabel 6. Pengaruh perlakuan fraksi nonpolar daun jambu biji terhadap sel kanker
kolon WiDr ...............................................................................................20
Tabel 7. Hasil uji sitotoksik ekstrak etanol fraksi polar, semipolar dan nonpolar
daun jambu biji terhadap sel WiDr dengan metode MTT assay .............21
Tabel 8. Deteksi golongan senyawa ekstrak etanol daun jambu biji dengan
berbagai pereaksi semprot ........................................................................23
x
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan hasil rendemen ..............................................................29
Lampiran 2. Skema uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, dan
nonpolar daun jambu biji terhadap sel kanker kolon WiDr ..............31
Lampiran 3. Perhitungan kepadatan sel WiDr .......................................................32
Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar
dan non polar daun jambu biji...........................................................33
Lampiran 5. Data uji sitotoksik dengan metode MTT pada 96-well plate
menggunakan ELISA Reader ...........................................................34
Lampiran 6. Data uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar dan non
polar daun jambu biji (Psidium guajava L.) terhadap sel kanker
kolon WiDr .......................................................................................35
Lampiran 7. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan ekstrak
etanol daun jambu biji .......................................................................37
Lampiran 8. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
polar daun jambu biji ........................................................................38
Lampiran 9. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
semipolar daun jambu biji .................................................................39
Lampiran 10. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
nonpolar daun jambu biji ...............................................................40
Lampiran 11. Perhitungan IC50 ..............................................................................41
xi
ABSTRAK
Kanker kolon merupakan salah satu penyebab umum kematian yang berasal
dari transformasi epitel usus normal polip adenomatosa dan kanker invasif.
Operasi, kemoterapi, dan radioterapi merupakan metode yang digunakan dalam
pengobatan kanker. Meskipun menunjukkan keberhasilan terapi, efek samping
yang ditimbulkan dalam penggunaan obat masih tergolong berbahaya sehingga
perlu dikembangkan pengobatan dengan herbal. Daun jambu biji (Psidium
guajava L.) merupakan salah satu tanaman yang dapat dikembangkan sebagai
agen antikanker. Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui efek sitotoksik
ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, dan nonpolar daun jambu biji terhadap sel
kanker kolon WiDr dan mengetahui golongan senyawa yang terdapat pada sampel
yang memiliki IC50 paling baik.
Penyarian pada penelitian dilakukan dengan metode maserasi dengan etanol
96%. Fraksinasi dilakukan dengan metode partisi cair-cair dengan penyari nheksan, etil asetat, dan etanol-air. Uji sitotoksik dilakukan dengan metode MTT
assay. Skrining fitokima dilakukan dengan metode kromatografi lapis tipis.
Hasil IC50 ekstrak etanol daun jambu biji yaitu 183,888 µg/mL dan nilai IC50
fraksi polar, semipolar, dan nonpolar lebih besar dari 250 µg/mL. Hasil uji
kromatografi lapis tipis menunjukkan bahwa ekstrak etanol mengandung
golongan senyawa flavonoid, tanin, saponin, alkaloid, dan polifenol.
Kata Kunci: MTT assay, Psidium guajava L, WiDr
xii
ABSTRACT
Colon cancer is one of the common causes of death that comes from the
transformation of normal intestinal epithelial adenomatous polyps and invasive
cancer. Surgery, chemotherapy, and radiotherapy is the method used in the
treatment of cancer. Although it shows the success of therapy, side effects in the
use of drugs is still quite dangerous, so should be developed with herbal medicine.
Guava leaf (Psidium guajava L.) is a plant that can be developed as an anticancer
agent. The purpose of this study was to determine the cytotoxic effect of ethanol
extract, fractions polar, semipolar and nonpolar guava leaves against WiDr colon
cancer cells and determine classes of compounds contained in the sample had the
most excellent IC50.
extraction methods on research done by maceration method with 96%
ethanol. Fractionation was conducted using liquid-liquid partition with penyari nhexane, ethyl acetate, and ethanol-water. Cytotoxic test was conducted by MTT
assay. Phytochemical screening was conducted using thin layer chromatography.
Results IC 50 ethanol extract of guava leaves is 183,888 µ g / mL and IC 50
fraction of polar, semipolar and nonpolar greater than 250 µ g / mL. Thin layer
chromatography test results showed that ethanol extracts contain class of
flavonoids, tannins, saponins, alkaloids and polyphenols.
Keywords: Psidium guajava L, MTT assay, WiDr
xiii