UJI AKTIVITAS ANTIKANKER EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR HERBA Uji Aktivitas Antikanker Ekstrak Etanol, Fraksi Polar, Semipolar, dan Nonpolar Herba Kitolod (Isotoma longiflora (L) C.Presl) terhadap Sel T47D.
UJI AKTIVITAS ANTIKANKER EKSTRAK ETANOL,
FRAKSI POLAR, SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR HERBA
KITOLOD (Isotoma longiflora (L) C. Presl.) TERHADAP SEL
T47D
SKRIPSI
Oleh :
SELVIANA
K100130199
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2016
UJI AKTIVITAS ANTIKANKER EKSTRAK ETANOL,
FRAKSI POLAR, SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR HERBA
KITOLOD (Isotoma longiflora (L) C. Presl.) TERHADAP SEL
T47D
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
Di Surakarta
Oleh :
SELVIANA
K100130199
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2016
ii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr.wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT, karena atas rahmat dan karunia-Nya
sehingga penulis telah dapat menyelesaikan penelitian dan skripsi dengan judul
“UJI AKTIVITAS ANTIKANKER EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR HERBA KITOLOD (Isotoma longiflora
(L) C. Presl) TERHADAP SEL T47D” secara baik sebagai syarat untuk
memperoleh gelar sarja farmasi. Penulis mengucapkan terimakasih kepada pihakpihak yang membantu dalam penulisan skripsi ini:
1. Bapak Azis Safudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan penguji.
2. Ibu Maryati., Ph.D., Apt selaku pembimbing utama skripsi.
3. Bapak Andi Suhendi, M.Sc., Apt selaku penguji.
4. Ibu Ratna Yuliani SSi, M. Biotech. St selalu pembimbing akademik.
5. Kedua orangtua dan adik yang selalu memberikan doa dan semangat
sehingga pengerjaan skripsi ini dapat selesai dengan baik.
6. Segenap rekan-rekan dalam penelitian ini serta pihak-pihak yang telah
membantu dan memberikan bantuan atas terselesaikannya skripsi ini
yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Akhir kata penulis menyadari bahwa dalam penulisan dan penyusunan
skripsi ini masih memiliki kekurangan dan jauh dari sempurnaan, oleh karena itu
semoga skripsi ini bisa menunculkan kritik, saran, serta penelitian lanjutan bagi
pembacanya guna memperkaya khasanah dalam dunia penelitian farmasi
kedepannya.
Wassalamu’alaikum wr.wb
Surakarta, 17 Desember 2016
(Penulis)
v
DAFTAR ISI
Halaman
PENGESAHAN SKRIPSI ..................................................................................... iii
DEKLARASI ......................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ............................................................................................ v
DAFTAR ISI .......................................................................................................... vi
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ................................................................................................ ixx
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ....................................................................................... xi
ABSTRAK ............................................................................................................ xii
BAB I. PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
A. Latar Belakang .......................................................................................... 1
B. Perumusan Masalah .................................................................................. 2
C. Tujuan Penelitian ...................................................................................... 2
D. Tinjauan Pustaka ....................................................................................... 3
1. Tanaman Kitolod (Isotoma longiflora (L) C. Presl.) ........................... 3
2. Kanker Payudara .................................................................................. 5
3. Sel kanker T47D .................................................................................. 6
4. Fraksinasi .............................................................................................. 7
5. Sitotoksik .............................................................................................. 7
6. MTT Assay............................................................................................ 8
E. KETERANGAN EMPIRIS ....................................................................... 8
BAB II. METODOLOGI PENELITIAN ................................................................ 9
A. Kategori dan Rancangan Penelitian .......................................................... 9
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ........................................... 9
1. Variabel bebas....................................................................................... 9
2. Variabel terikat...................................................................................... 9
3. Variabel terkendali ................................................................................ 9
vi
C. Alat dan Bahan ........................................................................................ 10
1. Alat yang digunakan ........................................................................... 10
2. Bahan yang digunakan ........................................................................ 10
D. Tempat Penelitian ................................................................................... 11
E. Jalannya Penelitian .................................................................................. 11
1. Determinasi Tanaman ........................................................................ 11
2. Penyiapan Bahan ................................................................................ 11
3. Pembuatan Ekstrak Herba Kitolod...................................................... 11
4.Optimasi fase gerak.............................................................................. 12
5. Fraksinasi ............................................................................................ 12
6. Pembuatan Media Kultur .................................................................... 12
7. Pemanenan Sel T47D.......................................................................... 13
8. Pembuatan Larutan Uji ....................................................................... 13
9. Uji Aktivitas Sitotoksik....................................................................... 13
10. Uji Kandungan Senyawa................................................................... 15
F. Analisis Data ........................................................................................... 15
1. Analisis KLT ....................................................................................... 15
2. Uji Sitotoksik ...................................................................................... 15
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................. 17
A. Determinasi Tanaman Kitolod ................................................................ 17
B. Ekstraksi .................................................................................................. 17
C. Fraksinasi ................................................................................................ 17
D. Uji Golongan Senyawa yang Terkandung pada Ekstrak Etanol, Fraksi
Polar, Semipolar, dan Nonpolar Herba Kitolod .......................................... 20
E. Uji Aktivitas Sitotoksik Terhadap sel T47D ........................................... 24
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 30
A. Kesimpulan ............................................................................................. 30
B. Saran ....................................................................................................... 30
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 31
LAMPIRAN ..........................................................................................................34
vii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Tanaman Kitolod (Isotoma longiflora (L) C.Presl .................................. ...3
Gambar 2. Struktur aesculetin ...................................................................................... 4
Gambar 3. Skema uji sitotoksik ................................................................................. 14
Gambar 4. Kromatogram hasil optimasi fase gerak. .................................................. 18
Gambar 5. Kromatogram hasil fraksinasi................................................................... 19
Gambar 6. Kromatogram hasil KLT Ekstrak Etanol Herba Kitolod. ......................... 22
Gambar 7. Kromatogram hasil KLT Fraksi Polar. ..................................................... 22
Gambar 8. Kromatogram hasil Fraksi Semipolar....................................................... 23
Gambar 9. Kromatogram hasil KLT Fraksi Nonpolar. .............................................. 23
Gambar 10. Reaksi reduksi MTT menjadi kristal formazan ...................................... 25
Gambar 11. Sel T47D normal tanpa perlakuan (A), sel yang mendapat perlakuan
ekstrak etanol 250 µg/mL (a: sel yang mati, b: sel yang hidup) (B), dan
terbentuknya kristal formazan pada perlakuan ekstrak etanol 250 µg/mL
setelah MTT (c: kristal formazan) (C). ........................................................ 25
Gambar 12. Grafik hubungan konsentrasi dengan % sel hidup ................................. 27
viii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Reagen Deteksi Senyawa ............................................................................ 15
Tabel 2. Fase gerak yang digunakan dalam fraksinasi............................................... 18
Tabel 3. Rendemen dari masing-masing fraksi dari hasil fraksinasi. ....................... 20
Tabel 4. Hasil uji kandungan senyawa. ...................................................................... 24
Tabel 5. Hasil uji sitotoksik. ...................................................................................... 26
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Determinasi tanaman kitolod ............................................................ 34
Lampiran 2. Perhitungan rendemen fraksi polar, semipolar, dan nonpolar herba
kitolod................................................................................................. 35
Lampiran 3. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar,
dan nonpolar herba kitolod................................................................. 36
Lampiran 4. Pehitungan kepadatan sel T47D pada uji sitotoksik dengan metode
MTT Assay ......................................................................................... 38
Lampiran 5. Perhitungan % sel hidup ................................................................... 39
x
DAFTAR SINGKATAN
DMSO
: Dimetilsulfoksida
ELISA
: Enzym Linked Immuno Sorbent Assay
ER
: Estrogen Reseptor
FBS
: Fetal Bovine Serume
GCMS
: Gas Chromatography Mass Spectrometer
IC50
: Inhibitory Concentration 50
KCV
: Kromatografi Cair Vakum
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
MTT
: 3-(4-5-dimetiliazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium bromida
Nf-KB
: Nuclear Factor Kappa B
PBS
: Phosphate Buffer Saline
PR
: Progesteron Reseptor
Rf
: Retardation Factor
RPMI 1640
: Rosewell Park Memorial Institute 1640
SDS
: Sodium Dodecyl Sulphate
xi
ABSTRAK
Tanaman Kitolod (Isotoma longiflora (L) C.Presl) diduga memiliki
aktivitas antikanker. Pada penelitian sebelumnya tanaman kitolod memiliki
aktivitas antikaker terhadap sel WiDr dan sel HeLa. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, dan
nonpolar tanaman kitolod terhadap sel kanker payudara T47D dan golongan
senyawa yang terkandung pada sampel.
Serbuk herba kitolod dimaserasi dengan pelarut etanol 96%. Fraksinasi
menggunakan metode kromatografi cair vakum dengan menggunakan fase diam
silika G60 dan fase gerak n-heksan:etil asetat (9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5) dan etanol
96%. Identifikasi golongan senyawa menggunakan metode KLT dengan fase
gerak n-heksan:etil asetat (7:3). Hasil KLT divisualisasi menggunakan reagen
semprot dragendorf, anisaldehid, FeCl3, dan sitoborat. Uji sitotoksik dilakukan
menggunakan metode MTT assay.
Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa ekstrak etanol, fraksi polar,
semipolar, dan nonpolar tanaman kitolod memiliki aktivitas sitotoksik yang lemah
terhadap sel T47D dengan nilai IC50 secara berurutan 418,46; 665,74; 526,18;
856,12 µg/mL. Hasil identifikasi golongan senyawa menunjukkan pada ekstrak
etanol dan fraksi polar mengandung alkaloid, terpenoid, saponin, fenolik, tanin,
dan flavonoid, sedangkan fraksi semipolar dan nonpolar mengandung golongan
senyawa yang sama dengan ekstrak etanol kecuali alkaloid.
Kata kunci : Isotoma longiflora (L) C.Presl, Sitotoksik, Sel T47D, MTT assay.
xii
ABSTRACT
Kitolod herbs (Isotoma longiflora (L) C.Presl) predicted have anticancer
activity. In the previous research, kitolod herbs have anticancer activity on WiDr
and HeLa cells. This study aims to determine the cytotoxic activity of ethanol
extracts, polar, semipolar and nonpolar fractions of kitolod herbs against breast
cancer cells T47D and the chemical compounds contained in the samples.
Samples was macerated by 96% ethanol. Fractionation performed by
Vacum Liquid Chromatography method with G60 silica as stationary phase and
as the mobile phase n-hexane: ethyl acetate (9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5) and ethanol
96%. The chmical compounds were identificatied by TLC method with n-hexane:
ethyl acetate (7:3) as mobility phase and used reagents like dragendorf,
anisaldehid, FeCl3, and sitoborat. Cytotoxic test performed on cancer cells T47D
using MTT assay method.
Cytotoxic test results showed that the ethanol extract, polar, semipolar,
and nonpolar fractions of kitolod herbs have low cytotoxic activity to against
T47D cells with IC 50 values respectively were 418,46; 665,74; 526,18; 856,12
µg/mL. The chemical compounds classes showed the ethanol extracts and polar
fraction contains alkaloids, terpenoids, saponins, phenolic, tannins and
flavonoids. The semipolar and nonpolar fractions contains similiar compounds
with similiar to ethanol extract except alkaloids.
Keywords: Isotoma longiflora (L) C.Presl, Cytotoxic, T47D cells, MTT assay.
xiii
FRAKSI POLAR, SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR HERBA
KITOLOD (Isotoma longiflora (L) C. Presl.) TERHADAP SEL
T47D
SKRIPSI
Oleh :
SELVIANA
K100130199
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2016
UJI AKTIVITAS ANTIKANKER EKSTRAK ETANOL,
FRAKSI POLAR, SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR HERBA
KITOLOD (Isotoma longiflora (L) C. Presl.) TERHADAP SEL
T47D
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
Di Surakarta
Oleh :
SELVIANA
K100130199
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2016
ii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr.wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT, karena atas rahmat dan karunia-Nya
sehingga penulis telah dapat menyelesaikan penelitian dan skripsi dengan judul
“UJI AKTIVITAS ANTIKANKER EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMIPOLAR, DAN NONPOLAR HERBA KITOLOD (Isotoma longiflora
(L) C. Presl) TERHADAP SEL T47D” secara baik sebagai syarat untuk
memperoleh gelar sarja farmasi. Penulis mengucapkan terimakasih kepada pihakpihak yang membantu dalam penulisan skripsi ini:
1. Bapak Azis Safudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan penguji.
2. Ibu Maryati., Ph.D., Apt selaku pembimbing utama skripsi.
3. Bapak Andi Suhendi, M.Sc., Apt selaku penguji.
4. Ibu Ratna Yuliani SSi, M. Biotech. St selalu pembimbing akademik.
5. Kedua orangtua dan adik yang selalu memberikan doa dan semangat
sehingga pengerjaan skripsi ini dapat selesai dengan baik.
6. Segenap rekan-rekan dalam penelitian ini serta pihak-pihak yang telah
membantu dan memberikan bantuan atas terselesaikannya skripsi ini
yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Akhir kata penulis menyadari bahwa dalam penulisan dan penyusunan
skripsi ini masih memiliki kekurangan dan jauh dari sempurnaan, oleh karena itu
semoga skripsi ini bisa menunculkan kritik, saran, serta penelitian lanjutan bagi
pembacanya guna memperkaya khasanah dalam dunia penelitian farmasi
kedepannya.
Wassalamu’alaikum wr.wb
Surakarta, 17 Desember 2016
(Penulis)
v
DAFTAR ISI
Halaman
PENGESAHAN SKRIPSI ..................................................................................... iii
DEKLARASI ......................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ............................................................................................ v
DAFTAR ISI .......................................................................................................... vi
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ................................................................................................ ixx
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ....................................................................................... xi
ABSTRAK ............................................................................................................ xii
BAB I. PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
A. Latar Belakang .......................................................................................... 1
B. Perumusan Masalah .................................................................................. 2
C. Tujuan Penelitian ...................................................................................... 2
D. Tinjauan Pustaka ....................................................................................... 3
1. Tanaman Kitolod (Isotoma longiflora (L) C. Presl.) ........................... 3
2. Kanker Payudara .................................................................................. 5
3. Sel kanker T47D .................................................................................. 6
4. Fraksinasi .............................................................................................. 7
5. Sitotoksik .............................................................................................. 7
6. MTT Assay............................................................................................ 8
E. KETERANGAN EMPIRIS ....................................................................... 8
BAB II. METODOLOGI PENELITIAN ................................................................ 9
A. Kategori dan Rancangan Penelitian .......................................................... 9
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ........................................... 9
1. Variabel bebas....................................................................................... 9
2. Variabel terikat...................................................................................... 9
3. Variabel terkendali ................................................................................ 9
vi
C. Alat dan Bahan ........................................................................................ 10
1. Alat yang digunakan ........................................................................... 10
2. Bahan yang digunakan ........................................................................ 10
D. Tempat Penelitian ................................................................................... 11
E. Jalannya Penelitian .................................................................................. 11
1. Determinasi Tanaman ........................................................................ 11
2. Penyiapan Bahan ................................................................................ 11
3. Pembuatan Ekstrak Herba Kitolod...................................................... 11
4.Optimasi fase gerak.............................................................................. 12
5. Fraksinasi ............................................................................................ 12
6. Pembuatan Media Kultur .................................................................... 12
7. Pemanenan Sel T47D.......................................................................... 13
8. Pembuatan Larutan Uji ....................................................................... 13
9. Uji Aktivitas Sitotoksik....................................................................... 13
10. Uji Kandungan Senyawa................................................................... 15
F. Analisis Data ........................................................................................... 15
1. Analisis KLT ....................................................................................... 15
2. Uji Sitotoksik ...................................................................................... 15
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................. 17
A. Determinasi Tanaman Kitolod ................................................................ 17
B. Ekstraksi .................................................................................................. 17
C. Fraksinasi ................................................................................................ 17
D. Uji Golongan Senyawa yang Terkandung pada Ekstrak Etanol, Fraksi
Polar, Semipolar, dan Nonpolar Herba Kitolod .......................................... 20
E. Uji Aktivitas Sitotoksik Terhadap sel T47D ........................................... 24
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 30
A. Kesimpulan ............................................................................................. 30
B. Saran ....................................................................................................... 30
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 31
LAMPIRAN ..........................................................................................................34
vii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Tanaman Kitolod (Isotoma longiflora (L) C.Presl .................................. ...3
Gambar 2. Struktur aesculetin ...................................................................................... 4
Gambar 3. Skema uji sitotoksik ................................................................................. 14
Gambar 4. Kromatogram hasil optimasi fase gerak. .................................................. 18
Gambar 5. Kromatogram hasil fraksinasi................................................................... 19
Gambar 6. Kromatogram hasil KLT Ekstrak Etanol Herba Kitolod. ......................... 22
Gambar 7. Kromatogram hasil KLT Fraksi Polar. ..................................................... 22
Gambar 8. Kromatogram hasil Fraksi Semipolar....................................................... 23
Gambar 9. Kromatogram hasil KLT Fraksi Nonpolar. .............................................. 23
Gambar 10. Reaksi reduksi MTT menjadi kristal formazan ...................................... 25
Gambar 11. Sel T47D normal tanpa perlakuan (A), sel yang mendapat perlakuan
ekstrak etanol 250 µg/mL (a: sel yang mati, b: sel yang hidup) (B), dan
terbentuknya kristal formazan pada perlakuan ekstrak etanol 250 µg/mL
setelah MTT (c: kristal formazan) (C). ........................................................ 25
Gambar 12. Grafik hubungan konsentrasi dengan % sel hidup ................................. 27
viii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Reagen Deteksi Senyawa ............................................................................ 15
Tabel 2. Fase gerak yang digunakan dalam fraksinasi............................................... 18
Tabel 3. Rendemen dari masing-masing fraksi dari hasil fraksinasi. ....................... 20
Tabel 4. Hasil uji kandungan senyawa. ...................................................................... 24
Tabel 5. Hasil uji sitotoksik. ...................................................................................... 26
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Determinasi tanaman kitolod ............................................................ 34
Lampiran 2. Perhitungan rendemen fraksi polar, semipolar, dan nonpolar herba
kitolod................................................................................................. 35
Lampiran 3. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar,
dan nonpolar herba kitolod................................................................. 36
Lampiran 4. Pehitungan kepadatan sel T47D pada uji sitotoksik dengan metode
MTT Assay ......................................................................................... 38
Lampiran 5. Perhitungan % sel hidup ................................................................... 39
x
DAFTAR SINGKATAN
DMSO
: Dimetilsulfoksida
ELISA
: Enzym Linked Immuno Sorbent Assay
ER
: Estrogen Reseptor
FBS
: Fetal Bovine Serume
GCMS
: Gas Chromatography Mass Spectrometer
IC50
: Inhibitory Concentration 50
KCV
: Kromatografi Cair Vakum
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
MTT
: 3-(4-5-dimetiliazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium bromida
Nf-KB
: Nuclear Factor Kappa B
PBS
: Phosphate Buffer Saline
PR
: Progesteron Reseptor
Rf
: Retardation Factor
RPMI 1640
: Rosewell Park Memorial Institute 1640
SDS
: Sodium Dodecyl Sulphate
xi
ABSTRAK
Tanaman Kitolod (Isotoma longiflora (L) C.Presl) diduga memiliki
aktivitas antikanker. Pada penelitian sebelumnya tanaman kitolod memiliki
aktivitas antikaker terhadap sel WiDr dan sel HeLa. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, dan
nonpolar tanaman kitolod terhadap sel kanker payudara T47D dan golongan
senyawa yang terkandung pada sampel.
Serbuk herba kitolod dimaserasi dengan pelarut etanol 96%. Fraksinasi
menggunakan metode kromatografi cair vakum dengan menggunakan fase diam
silika G60 dan fase gerak n-heksan:etil asetat (9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5) dan etanol
96%. Identifikasi golongan senyawa menggunakan metode KLT dengan fase
gerak n-heksan:etil asetat (7:3). Hasil KLT divisualisasi menggunakan reagen
semprot dragendorf, anisaldehid, FeCl3, dan sitoborat. Uji sitotoksik dilakukan
menggunakan metode MTT assay.
Hasil uji sitotoksik menunjukkan bahwa ekstrak etanol, fraksi polar,
semipolar, dan nonpolar tanaman kitolod memiliki aktivitas sitotoksik yang lemah
terhadap sel T47D dengan nilai IC50 secara berurutan 418,46; 665,74; 526,18;
856,12 µg/mL. Hasil identifikasi golongan senyawa menunjukkan pada ekstrak
etanol dan fraksi polar mengandung alkaloid, terpenoid, saponin, fenolik, tanin,
dan flavonoid, sedangkan fraksi semipolar dan nonpolar mengandung golongan
senyawa yang sama dengan ekstrak etanol kecuali alkaloid.
Kata kunci : Isotoma longiflora (L) C.Presl, Sitotoksik, Sel T47D, MTT assay.
xii
ABSTRACT
Kitolod herbs (Isotoma longiflora (L) C.Presl) predicted have anticancer
activity. In the previous research, kitolod herbs have anticancer activity on WiDr
and HeLa cells. This study aims to determine the cytotoxic activity of ethanol
extracts, polar, semipolar and nonpolar fractions of kitolod herbs against breast
cancer cells T47D and the chemical compounds contained in the samples.
Samples was macerated by 96% ethanol. Fractionation performed by
Vacum Liquid Chromatography method with G60 silica as stationary phase and
as the mobile phase n-hexane: ethyl acetate (9:1, 8:2, 7:3, 6:4, 5:5) and ethanol
96%. The chmical compounds were identificatied by TLC method with n-hexane:
ethyl acetate (7:3) as mobility phase and used reagents like dragendorf,
anisaldehid, FeCl3, and sitoborat. Cytotoxic test performed on cancer cells T47D
using MTT assay method.
Cytotoxic test results showed that the ethanol extract, polar, semipolar,
and nonpolar fractions of kitolod herbs have low cytotoxic activity to against
T47D cells with IC 50 values respectively were 418,46; 665,74; 526,18; 856,12
µg/mL. The chemical compounds classes showed the ethanol extracts and polar
fraction contains alkaloids, terpenoids, saponins, phenolic, tannins and
flavonoids. The semipolar and nonpolar fractions contains similiar compounds
with similiar to ethanol extract except alkaloids.
Keywords: Isotoma longiflora (L) C.Presl, Cytotoxic, T47D cells, MTT assay.
xiii