AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI METANOL-AIR EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH KAKAO (Theobroma cacao L.) TERHADAP Streptococcus mutans Aktivitas Antibakteri Dan Bioautografi Fraksi Metanol-Air Ekstrak Etanol Kulit Buah Kakao (Theobroma cacao L.) T

AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI
METANOL-AIR EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH KAKAO
(Theobroma cacao L.) TERHADAP Streptococcus mutans
DAN Bacillus subtilis

SKRIPSI

Oleh :

LUSI HANDAYANI
K 100 090 108

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013

i 
 

AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI

METANOL-AIR EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH KAKAO
(Theobroma cacao L.) TERHADAP Streptococcus mutans DAN
Bacillus subtilis

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta

Oleh :
LUSI HANDAYANI
K 100 090 108

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
ii 

 

iii 
 

iv 
 

KATA PENGANTAR
Assalamuallaikum wr.wb.
Segala puji bagi Allah SWT yang telah melimpahkan karunianya sehingga
penulis memperoleh kesempatan untuk menyelesaikan penyusunan skripsi ini.
Skripsi yang berjudul “AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI
FRAKSI METANOL-AIR EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH KAKAO
(Theobroma cacao L.) TERHADAP Streptococcus mutans DAN Bacillus
subtilis” ini, disusun sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana
strata I (SI) Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta (UMS).
Penulis banyak mendapatkan bimbingan, dukungan dan bantuan dari
berbagai pihak sehingga penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan. Untuk itu
penulis menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :

1. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Peni Indrayudha, M.Biotech., Apt. selaku dosen pembimbing utama
dan Ibu Rima Munawaroh M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing
pendamping.
3. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech., St. selaku penguji I dan Ibu Ika Trisharyanti
D.K., M.Farm., Apt. selaku penguji II.
4. Kedua orang tuaku, Bapak Sumarsono dan Ibu Kasmi.
5. Kakakku Rahmadi Subagio dan adikku Devi Suharti.
6. Teman seperjuangan Nur, Eka, Rio, dan Candra.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari kesempurnaan. Oleh karena
itu, penulis mengharapkan kritik dan saran membangun demi kesempurnaan
skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi
pembaca pada umumnya dan khususnya dapat bermanfaat bagi penulis sendiri.
Wassalamualaikum wr. wb.
Surakarta, 1 Februari 2013

(Penulis)

v 

 

DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL DEPAN……………………………………… i
HALAMAN SAMPUL DALAM ……………………………………… ii
HALAMAN PENGESAHAN………………………………………… iii
HALAMAN DEKLARASI ….………………………………………… iv
KATA PENGANTAR ….……………………………………………… v
DAFTAR ISI …………………………………………………………… vi
DAFTAR GAMBAR…………………………………………………… ix
DAFTAR TABEL….…………………………………………………… x
DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………….… xi
DAFTAR SINGKATAN…………………………………………………xii
INTISARI ….…………………………………………………………

xiii

BAB I. PENDAHULUAN……………………………………………...…. 1
A. Latar Belakang Masalah………………………………………...…. 1

B. Perumusan Masalah…….………………………………………….. 2
C. Tujuan Penelitian………………………………………………...... 3
D. Tinjauan Pustaka…………………………………………………... 3
1. Tanaman Kakao..…………………………………………...... 3
a. Klasifikasi tanaman kakao……….……………………..... 3
b. Deskripsi tanaman….............…..……………………....

3

c. Khasiat ……………..…………………………………….... 4
d. Kandungan kimia………………………………………….. 4
2. Metode penyarian dan fraksinasi.…………………………..... 4
a. Maserasi………..…………………………………............. 4
b. Fraksinasi………..…………………………………............ 5
3. Streptococcus mutans………………………………………… 5
4. Bacillus subtilis………..................………………………........ 6
5. Antibakteri………..………………………………….............

6

6. Uji Aktivitas Antibakteri…………………………..……….….. 7
7. Bioautografi……………………………………………….…… 7
vi 
 

E. Landasan Teori…………………………………...………………... 7
F. Hipotesis…………………….……………………………………... 8
BAB II. METODE PENELITIAN….……………………………………... 9
A. Kategori Penelitian….……………………………………………... 9
B. Variabel Penelitian….……………………………………………... 9
C. Bahan dan Alat……………...…………………………...……….... 9
D. Tempat Penelitian……………...………………………...……….... 10
E. Jalannya Penelitian………….………………………...………….... 10
1. Determinasi Tanaman…….……………………………………. 10
2. Penyiapan Bahan……….....……………………...……………. 10
3. Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Kakao….……………... 11
4. Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Kakao…...……………... 11
5. Pembuatan Media……….............……………………………... 11
6. Sterilisasi Alat dan Bahan……….………………………….….. 11
7. Pengecatan Bakteri……......………………………………….... 12

8. Pembuatan Suspensi Bakteri…………………………….…….. 12
9. Pengujian Aktivitas Antibakteri Fraksi Metanol-Air ...………. 12
10. Kromatografi Lapis Tipis Fraksi Metanol-Air ...………. ........... 13
11. Uji Bioautografi…………………………………………........... 13
F. Analisis Data ..……………………………………………….......... 13
1. Analisis Antibakteri …………………………………………. 13
2. Analisis Biouatografi ……………………………………….

13

3. Analisis Uji KLT..…………………………………………… 14
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN………………………………….. 15
A. Determinasi Tanaman…….……………………………………. 15
B. Identifikasi Bakteri ………………………………..…………... 15
C. Ekstraksi..……………………………………………….......... 16
D. Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Kakao ……………….. 16
E. Uji Pendahuluan Antibakteri Fraksi Teraktif………………..

17

F. Uji Aktivitas Antibakteri………………………………………. 18
G. Uji Kandungan Senyawa Fraksi Metanol-Air dengan KLT…… 22

vii 
 

H. Uji Bioautografi…………………………………………...…… 23
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN………………………………….. 25
A. Kesimpulan

……………………………………………………... 25

B. Saran ……………………………………………………………... 25
DAFTAR PUSTAKA ……………………………………………………... 26
LAMPIRAN ……………………………………………………………... 29

viii 
 

DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 1. Kakao (Theobroma cacao L.) .............................................. .............. 3
Gambar 2. Hasil Pengecatan Gram S. mutans dan B. subtilis.................................. 16
Gambar 3.Hasil Uji aktivitas Antibakteri Fraksi Metanol-Air Ekstrak Etanol
Kulit Buah Kakao terhadap Streptococcus mutans dan Bacillus
subtilis..................................................................................................... 20
Gambar 4. Kromatografi Lapis Tipis Fraksi Metanol-Air Ekstrak Etanol Kulit
Buah Kakao .......................................................................................... 22
Gambar 5. Hasil Bioautografi Fraksi Metanol-Air Ekstrak Etanol Kulit Buah
Kakao terhadap Streptococcus mutans dan Bacillus subtilis.................. 23

ix 
 

DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Fraksinasi Ekstrak Kulit Buah Kakao..................................... 14
Tabel 2. Hasil Uji Pendahuluan Antibakteri Fraksi Metanol-Air, Fraksi
Etil Asetat dan Fraksi n-Heksan terhadap Streptococcus mutans
dan Bacillus subtilis........................................................................... 15

Tabel 3. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri terhadap Streptococcus mutans
dan Bacillus subtilis........................................................................... 17
Tabel 4. Hasil Identifikasi Kromatografi Lapis Tipis Fraksi Metanol-Air
Ekstrak Etanol Kulit Buah Kakao.................................................... 20

x 
 

DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Determinasi................................................................. 29
Lampiran 2. Perhitungan Rendemen Ekstrak ........................................... 31
Lampiran 3. Perhitungan Rendemen Fraksi ............................................. 32
Lampiran 4. Pembuatan Seri Konsentrasi Fraksi Metanol-Air Kulit Buah
Kakao................................................................................... 34
Lampiran 5. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Metanol-Air ............. 35

xi 
 

DAFTAR SINGKATAN

GF

:

Gips Flourecense

UV

:

Ultraviolet

VIS

:

Visibel

KLT

:

Kromatografi Lapis Tipis

LB

:

Liebermann Burchard (LB)

µL

:

Mikroliter

mL

:

Mililiter

g

:

Gram

µg

:

Mikrogram

mg

:

Miligram

mm

:

Milimeter

DMSO

:

Dimetilsulfoksida

BHI

:

Brain Heart Infusion

MH

:

Mueller Hilton

xii 
 

INTISARI

Kakao (Theobroma cacao L.) memiliki kandungan fenolik seperti asam
sinamat, tanin, pirogalol, epikatekin-3-galat, kuersetin dan resorsinol. Kakao kaya
polifenol yang bermanfaat untuk antioksidan, antibakteri, antikarsinogenik, dan
antiinflamasi. Polifenol bersifat polar sehingga dapat tersari oleh penyari polar
seperti metanol:air. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri
fraksi metanol-air ekstrak etanol kulit buah kakao dan golongan senyawa yang
bertanggung jawab sebagai antibakteri terhadap Streptococcus mutans dan
Bacillus subtilis.
Kulit buah kakao diekstraksi dengan etanol 96% hingga diperoleh ekstrak
kental etanol. Ekstrak dilarutkan dalam metanol : air (1:1 v/v) kemudian
difraksinasi dengan partisi cair-cair menggunakan n-heksan dan etil asetat. Fraksi
metanol-air diuji aktivitas antibakteri dengan metode difusi Kirby Bauer dengan
parameter diameter zona hambat. Kandungan senyawa diuji dengan Kromatografi
Lapis Tipis (KLT), fase diam silika gel GF 254 dan fase gerak etil asetat :
methanol : air (3:5:2 v/v/v). Uji bioautografi dilakukan dengan metode
bioautografi kontak.
Hasil penelitian menunjukkan fraksi metanol-air ekstrak etanol kulit buah
kakao memiliki aktivitas antibakteri terhadap Streptococcus mutans dan Bacillus
subtilis dengan zona hambat terbesar berturut-turut 10±0,5 mm dan 11,25±0,0 mm
pada konsentrasi 3 mg/disk. Berdasarkan hasil KLT dan bioautografi, golongan
senyawa yang bertanggung jawab sebagai antibakteri adalah senyawa golongan
fenolik yaitu tanin.
Kata kunci: Theobroma cacao L., antibakteri, fraksi metanol-air, Streptococcus
mutans, Bacillus subtilis, bioautografi

xiii