STIMULASI DENTIN REPARATIF DIRECT PULP CAPPING MENGGUNAKAN EKSTRAK IKAN TERI ( Stolephorus sp)
STIMULASI DENTIN REPARATIF DIRECT PULP CAPPING MENGGUNAKAN
EKSTRAK IKAN TERI ( Stolephorus sp)
- *** *
Yuliana Ratna Kumala , Dini Rachmawati**, Klaudia Hersanto
- Departemen Konservasi Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Brawijaya **Departemen Kedokteran Gigi Anak Universitas Brawijaya ***Program Studi Pendidikan Dokter Gigi Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Brawijaya
ABSTRAK
Vitalitas pulpa gigi harus dilindungi karena pulpa berisi serabut, sel, pembuluh darah, saraf sensoris, dan jaringan limfe. Salah satu cara untuk mempertahankan vitalitas pulpa adalah dengan perawatan direct pulp capping. Ikan teri merupakan salah satu produk perikanan laut Indonesia yang memiliki kandungan kalsium dan fosfor yang tinggi. stem cell menjadi odontoblas maupun
Kalsium fosfat dapat menstimulasi diferensiasi odontoblast-like cells untuk meningkatkan regenerasi dentin sehingga menghasilkan dentin reparatif. Tujuan: Untuk mengetahui apakah ekstrak ikan teri dapat menstimulasi dentin direct pulp capping gigi. Metode: Sampel adalah 3 kelompok reparatif pada perawatan tikus dengan jumlah 21 ekor yang dilakukan preparasi oklusal pada gigi molar pertama menggunakan mata bur gigi mikrodonsia sedalam 1 mm, lalu diberikan zinc oxide eugenol pada kelompok kontrol negatif dan bubuk ekstrak ikan teri 4 mg pada perlakuan 1, 8 mg pada perlakuan 2, 12 mg pada perlakuan 3. Hasil: Uji korelasi antara dosis ekstrak ikan teri terhadap jumlah sel odontoblas menunjukkan angka positif yaitu 0,853 yang merupakan korelasi signifikan. Hasil tersebut menunjukkan peningkatan jumlah sel odontoblas berbanding lurus dengan peningkatan dosis yang diberikan. Kesimpulan: direct pulp capping gigi molar ekstrak ikan teri dapat menstimulasi dentin reparatif pada tikus wistar.
Kata Kunci : Direct pulp capping, ikan teri, odontoblas, dentin reparatif
ABSTRACT
Pulp vitality must be protected because a pulp consists of fibers, cells, blood vessels, sensory nerves and also lymph vessels. Direct pulp capping is one of the ways to maintain pulp vitality. Anchovy is one of the Indonesian marine fisheries’ products which contents high calcium and phosphor. The phosphor was made by blending phosphate and water. Calcium and phosphate form a calcium phosphate complex with hidroxyapatite as one of its compound. Calcium phosphate can stimulate a stem cell differentiation into odontoblasts or odontoblast-like cells that increase the dentin regeneration so it can produce a reparative dentin. Objective: to know whether the anchovy extract can stimulate the reparative dentin in Wistar rat molars’ direct pulp capping. Methode:
The sample was 3 groups of Wistar mice. Conducted occlusal preparation of molar first rat
mandibular teeth using microcosmodial 1 mm deep burden of the teeth, then administered
zinc oxide eugenol in the negative control group and anchovy extract powder 4 mg at a
treatment of 1, 8 mg at treatment 2, 12 mg at treatment 3. Result: the correlation test
between these doses of anchovy extract to the odontoblast cells number is 0,853 which shows a significant correlation. It means that an increase of odontoblast cells numbers directly correlated with an increase of the given dose. Conclusion: the anchovy extract can stimulate the dentin reparative in Wistar rat molars’ direct pulp capping.
Keywords : Direct pulp capping, anchovy, odontoblast, reparative dentin
Vitalitas pulpa harus dilindungi karena
PENDAHULUAN
Karies gigi merupakan penyakit pulpa berisi serabut, sel, dan berbagai infeksi dengan prevalensi sangat tinggi struktur seperti pembuluh darah, saraf 3 dan termasuk dalam 10 besar penyakit sensoris, dan jaringan limfe. 1 yang diderita oleh masyarakat. Menurut Vitalitas pulpa dapat dijaga Riset Kesehatan Dasar (RISKESDAS) dengan cara pulp capping. Direct pulp tahun 2007, prevalensi karies aktif pada capping merupakan salah metode pulp penduduk Indonesia kelompok umur di capping yang banyak digunakan untuk atas 12 tahun sebesar 46,5% dan yang menutup pulpa gigi yang terbuka akibat bebas karies sebesar 27,9%. Karies yang aktivitas mekanik berupa iatrogenik injuri direct tidak dilakukan perawatan akan dengan bahan resin adhesif. Bahan 2 pulp capping terbentuknya dentin reparatif. 4 Pertumbuhan dentin reparatif merupakan indikasi keberhasilan perawatan pulpa terbuka. 5 Indonesia mempunyai sumber daya perikanan laut yang cukup besar.
Produksi sumber daya ikan di laut Indonesia menurut Kementerian Kelautan dan Perikanan (KKP) tahun 2010, meningkat rata-rata 2,87% per tahun. Salah satu produksi perikanan laut yang meningkat cukup tajam adalah ikan teri ( Stolephorus sp), dalam periode 2000-2010 peningkatannya hingga sekitar 11,89%. 6 Berdasarkan Nutry
Survey Indonesia, kandungan kalsium dalam ikan teri ( Stolephorus sp), dengan berbagai kelompok diperoleh data ±
2200 mg/100 gram. Selain itu, Stolephorus sp juga kaya akan fosfor yaitu 1500 mg/100 gram. 7 Fosfor ditemukan dalam bentuk fosfat (PO 4 3- ) saat bercampur dengan air
(H 2 O). 8 Fosfat merupakan unsur yang penting dalam membantu proses metabolisme sel suatu organisme. 9 Saat fosfat berikatan dengan kalsium maka akan terbentuk senyawa kompleks kalsium fosfat (Ca 3 (PO 4 ) 2 ). 10 Kalsium fosfat dapat menstimulasi diferensiasi stem cell menjadi odontoblas maupun odontoblast-like cells untuk meningkatkan regenerasi dentin reparatif. 11 Odontoblas bersifat responsibel dalam proses sintesis dentin. 12 Selain itu, odontoblas memiliki peran dalam menginisiasi nukleasi ion untuk menginisiasi proses mineralisasi serta mengaktifkan mekanisme transport intramembran ion Ca 2+ dan ion PO 4 3- untuk mempertahankan keseimbangan ion intraselular. 13 Hasil dari proses mineralisasi tersebut adalah akumulasi ion Ca 2+ dan ion PO 4 3- pada matriks. Data tersebut menunjukkan bahwa ion Ca 2+ dan ion PO 4 3- memiliki peran yang penting dalam mineralisasi matriks dentin reparatif. 14 Beberapa penelitian menyatakan bahwa kalsium fosfat menstimulasi pembentukan dentin reparatif bila diaplikasikan pada pulpa terbuka. 15,16
METODE
Penelitian ini telah mendapatkan kelaikan etik ( ethical clereance) dari komisi etik penelitian Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Sampel yang digunakan adalah tikus galur wistar (
Rattus norvegicus) yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi berjumlah 21 ekor. Tikus wistar jantan diadaptasikan terlebih dahulu selama 1 minggu. Kriteria tikus yang digunakan dalam penelitian adalah berjenis kelamin jantan, usia 6-8 minggu, berat badan 200-300 gram, sehat yang ditandai dengan gerakannya aktif, mata jernih, dan ketebalan bulu normal.
Prosedur penelitian terdiri dari beberapa tahapan kerja yaitu pembuatan Ekstrak Ikan Teri ( Stolephorus sp) dari ikan teri yang masih segar, tidak berbau tajam, tidak berlendir, masih utuh dan teksturnya tidak lembek atau hancur bila ditekan lalu dicuci menggunakan aquadest untuk menghilangkan kotoran. Dikeringkan menggunakan oven pada suhu 50 C sekitar 6 jam, dihaluskan menggunakan blender hingga menjadi bubuk, ditimbang sebesar 10 mg dengan timbangan analitik, dilarutkan dalam aquadest
1 liter dalam tabung erlenmeyer dan ditutup selama 24 jam. Larutan teri disaring dengan kertas saring, direaksikan dengan NaOH sebesar 12,85 gram, dan disentrifugasi 250 rpm selama 15 menit untuk mengambil endapan. Endapan dioven agar kering dengan suhu 50 C selama 5 jam. Dilakukan pengulangan pembuatan sampel sebanyak 5 kali. Kemudian sampel ekstrak diuji kandungan senyawanya.
Pada seluruh tahapan perlakuan dilakukan anastesi total kemudian isolasi daerah kerja dan bersihkan daerah kerja dengan dentin conditioner. Preparasi oklusal gigi molar pertama mandibula tikus menggunakan mata bur gigi mikrodonsia sedalam 1 mm, lalu irigasi natrium klorit. Kemudian diberikan zinc oxide eugenol pada kelompok kontrol negatif dan bubuk ekstrak ikan teri 4 mg pada perlakuan 1; 8 mg pada perlakuan 2; dan 12 mg pada perlakuan 3. Kavitas ditutup menggunakan GIC.
Pembedahan dilakukan pada hari ke-30 pada tikus yang telah dianastesi total dengan kloroform. Tulang mandibula dipotong seluruhnya kemudian dipotong lagi menjadi dua, sehingga gigi molar kanan dan kiri tikus terdapat pada masing-masing potongan mandibula kemudian diberi tanda sesuai kelompok perlakuan. Potongan-potongan mandibula direndam pada 10% neutral buffered formalin untuk memfiksasi jaringan selama 7 hari dan 10% EDTA untuk mendekalsifikasi jaringan.
Jaringan tulang mandibula dan gigi dimasukkan pada blok parafin hasil embedding pada penjepit (block holder) mikrotom dengan ukuran tertentu. Irisan jaringan diambil dengan kuas dan dimasukkan ke dalam air pada suhu 38- 40 °C. Irisan yang terentang diletakkan pada object glass.
Selanjutnya dikeringkan dan diletakkan di atas hot plate 38-40°C sampai kering.
Pewarnaan HE dilakukan dengan memasukkan spesimen ke dalam hematoksilin. Lalu dimasukkan ke dalam eosin selama 5 menit dan diakhiri dengan pengeringan. Setiap langkah diikuti Mengamati jaringan pulpa dengan melihat dan menghitung peningkatan jumlah sel odontoblas pada preparat di mikroskop. Analisis histopatologi subyektif menggunakan mikroskop
Olympus
51
Stolephorus sp) mampu meningkatkan jumlah sel odontoblas dalam berbagai konsentrasi yang diberikan. Dari uji kandungan senyawa ekstrak ikan teri didapatkan prosentase kandungan senyawa kalsium fosfat dalam bentuk hidroksiapatit adalah sebesar 76%. Kemampuan ekstrak ikan teri (
Berdasarkan hasil penelitian dan analisis data didapatkan bahwa pemberian ekstrak ikan teri (
PEMBAHASAN
Post Hoc Multiple Comparison didapatkan didapatkan perbedaan bermakna antar kelompok kecuali antara kelompok 4 mg dan 8 mg. Pada kelompok perlakuan yang diberi paparan ekstrak ikan teri dengan dosis 12 mg terdapat perbedaan bermakna dengan kelompok kontrol negatif, kelompok 4 mg, dan kelompok 8 mg. Sedangkan pada kelompok perlakuan yang diberi paparan ekstrak ikan teri dengan dosis 4 mg dan 8 mg terdapat perbedaan bermakna terhadap kelompok kontrol negatif dan kelompok 12 mg.
Dari hasil uji Oneway ANOVA pada penelitian ini didapatkan nilai signifikansi 0,0 (p<0,05), terdapat perbedaan signifikan jumlah sel odontoblas antara sebelum dan sesudah paparan ekstrak ikan teri. Hasil uji
60 69 137
19
51 58 101
15
36 63 114
16
52
47
XC10 dengan pembesaran 40x.
22
99
73
50
26
91
25
39
14
Tabel 1. Jumlah Sel Odontoblas Pada Hari ke-30 Kontrol (sel) Klp. 4 mg (sel) Klp. 8 mg (sel) Klp.12 mg (sel)
Hasil uji homogenitas varian Levene Statistic yang telah dilakukan menunjukkan angka signifikasi 0,161 (p>0,05). Data berdistribusi normal dan memiliki varian yang homogen sehingga dapat dilakukan uji Oneway ANOVA.
Dari tabel 1 dapat diamati bahwa semakin tinggi paparan dosis ekstrak ikan teri yang diberikan maka jumlah sel odontoblas yang terbentuk juga semakin banyak. Berdasarkan uji normalitas Shapiro-Wilk yang telah dilakukan, data jumlah sel odontoblas memiliki angka signifikansi 0,089 (p > 0,05). Data jumlah sel odontoblas berdistribusi normal.
Stolephorus sp) dalam menstimulasi dentin reparatif pada direct pulp capping kandungan ekstrak ikan teri yaitu kalsium (Ca 2+ ) dan fosfat (PO 4 3- ) dapat berikatan membentuk senyawa kompleks kalsium fosfat dengan hidroksiapatit (HA) sebagai bagian dari senyawa kalsium fosfat yang paling stabil.
Fungsi penting hidroksiapatit yaitu mampu mempertahankan vitalitas pulpa yang mengalami perforasi dengan berperan dalam pembentukan jaringan keras gigi. 17,18 Hidroksiapatit juga merupakan bahan yang biokompatibel sehingga dapat menunjang fungsinya dalam membentuk dentin reparatif. 19 Ion
Ca 2+ dapat menurunkan permeabilitas kapiler yang akan mengurangi produksi cairan interseluler dan meningkatkan konsentrasi pada area yang sedang mengalami mineralisasi seperti saat pembentukan dentin reparatif. 20 Fosfat
(PO 4 3- ) merupakan unsur yang penting dalam membantu proses metabolisme sel suatu organisme. 9 Mekanisme kerja kalsium fosfat yaitu menstimulasi diferensiasi stem cell. Stem cell yang terdiferensiasi akan menjadi odontoblas maupun odontoblast-like cells yang berfungsi meningkatkan regenerasi dentin sehingga menghasilkan dentin reparatif. 11 Jika injuri yang terjadi menyebabkan kematian sel odontoblas, maka odontoblast-like cells akan membentuk dentin reparatif pada daerah yang dekat dengan injuri untuk 21 kerja kalsium fosfat adalah dengan menstimulasi pembentukan dentin reparatif tanpa adanya lapisan jaringan nekrotik bila diaplikasikan pada pulpa terbuka. 15,16
Hasil dari aktivitas odontoblas adalah terbentuknya predentin. Predentin terletak berdekatan dengan jaringan pulpa dan lebarnya sekitar 2-6 μm. Lebar ini tergantung pada aktivitas odontoblas. Predentin merupakan pembentukan awal dari dentin dan predentin tidak termineralisasi. 22 Serat kolagen bertanggung jawab dalam proses mineralisasi antara dentin dan predentin, di mana predentin menjadi dentin dan terbentuk sebuah lapisan baru dari predentin. 21 Karies atau iatrogenik injuri dapat menyebabkan timbulnya respon protektif melalui pembentukan dentin reparatif. Pembentukan dentin reparatif merupakan suatu mekanisme penutupan alamiah tubulus dentin yang terpotong pada permukaan pulpa. 22 Mekanisme pembentukan ini terjadi dengan cara serabut-serabut kolagen mendukung tubulus-tubulus dentin mengalami kalsifikasi serta aktifnya odontoblas yang tersebar di dekat pulpa. Kemudian odontoblas mensintesis dan mensekresi matriks anorganik sehingga menciptakan lingkungan yang memungkinkan terjadinya mineralisasi matriks. Hal reparatif. Terbentuknya dentin reparatif memungkinkan gigi mempertahankan diri terhadap efek karies maupun bentuk lain dari trauma. Bukti menunjukkan bahwa dentin reparatif melindungi pulpa dengan mengurangi masuknya iritan. 23 Kecepatan, kualitas, dan kuantitas dentin reparatif yang terbentuk tergantung dari keparahan dan lamanya injuri pada odontoblas. 24 Apabila luas jaringan yang terekspos kecil dan terdapat suplai darah yang bagus maka akan mendukung terjadinya penyembuhan yang potensial. 25 KESIMPULAN
Sabir, Tabbu, Agustiono, Sosroseno
J Oral Sci; 47(3):135- 8.Chang, R. 2005.
7. Mobonggi, Liska. 2014. Uji Formalin Pada Ikan Teri (Stolephorus Sp) Asin Kering di Kota Gorontalo. Teknologi
Perikanan. 2010. Jakarta: Jumlah Produksi Perikanan Republik Indonesia.
6. Kementerian Kelautan dan
2012. The Adverse Effects of Nano bond Adhesive Systems Used as Direct Pulp Capping Materials. European Journal of Dentistry and Medicine, 4: 14-25.
5. Sahar, Halim and Dalia, El-Rouby.
Kimia Dasar: Konsep-konsep Inti Edisi Ketiga Jilid 1. Jakarta: Erlangga, p. 105-133.
Kesimpulan dari penelitian ini adalah ekstrak ikan teri ( Stolephorus sp) dapat menstimulasi dentin reparatif pada direct pulp capping gigi molar tikus wistar. Ekstrak ikan teri (Stolephorus sp) dapat meningkatkan jumlah sel odontoblas pada direct pulp capping gigi molar tikus wistar.
SARAN
3. Harty, Ogston Robia. 2012. Kamus Kedokteran Gigi. Alih bahasa, Narlan S. Jakarta: EGC 4.
Jakarta: Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, Departemen Kesehatan, Republik Indonesia.
2. Riset Kesehatan Dasar. 2007.
Indonesian Journal of Pharma
Capability of Boiling Water of Bay Leaf (Eugenia polyantha W) for Reducing Streptococcus sp. Colony.
1. Wulan Agustin, Sumono Agus. 2009.
Perlu adanya penelitian lebih lanjut dengan menggunakan dosis yang lebih bervariasi, uji klinik untuk mengetahui dosis terapeutik, dosis toksis, dan efek samping yang mungkin timbul pada penggunaan ekstrak ikan teri pada manusia.
2005. Histological Analysis of Rat Dental Pulp Tissue Capped with Propolis.
Pertanian Universitas Negeri Gorontalo.
15. Ogisu, Takahito. Suzuki, Masaya.
Ceramics International. Vol. 33, No.
Hsing, Tuan. 2007. Effect of Zirconia Addition on the Microstructural Evolution of Porous Hydroxyapatite.
Int J Oral-Med Sci, 5(1):50-56 18.
17. Okamoto Harunori, Kiyoshi, Saori, et al. 2006. The Usefulness of New Hydroxyapatite as a Pulp Capping Agent in Rat Molars.
Dental Materials Journal; 28(6): 743 –749.
16. Kato, Ogisu Takahito, Suzuki Masaya, Shinkai Koichi, et al. 2009. Dentin Bond Strength of a New Adhesive System Containing Calcium Phosphate Experimentally Developed for Direct Pulp Capping.
Capping with Experimentally Developed Adhesive Resin Systems Containing Reparative Dentin- Promoting Agents. The Journal of Oral Laser Applications, 8: 257-273.
Shinkai, Koichi. Katoh, Yoshiroh. 2008. Effect on Pulp Healing of CO 2 Laser Irradiation and Direct Pulp
14. Aparicio Conrado, Ginebra Maria- Pau. 2015. Biomineralization and Biomaterials Fundamentals and Applications. Woodhead Publishing.
8. Kreger, 2004, Plant Layout and Material Handling, 3rd Edition, Apple, Malabar.
Pathological Processes in the Early Stages. Roma; Springer.
13. Bonucci, Ermanno. 2007. Biological Calcification Normal and
12. Hao, Narayanan, Ramachandan, He, et al. 2010. Odontoblast Cells Immortalized by Telomerase Produce Mineralized Dentin-like Tissue Both in Vitro andin Vivo. The Journal of Biological Chemistry, DOI 10.1074/jbc.M112223200.
The Formation of Tertiary Dentin After Pulp Capping with a Calcium Phosphate Cement, Loaded with PLGA Microparticles Containing TGF- b1. Journal of Biomedical Materials Research Part A; DOI: 10.1002/jbm.a.31558.
11. Zhang, Walboomers, Jansen. 2007.
Fresh Water Ecology, Principles, and Application. John Wiley and Sons, Chisester, UK. 285.
10. Jeffries Michael, Mills Derek. 2006.
Skripsi. Tidak diterbitkan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor, Bogor.
9. Asmara, Anjar. 2005. Hubungan Struktur Komunitas Plankton dengan Kondisi Fisika-Kimia Perairan Pulau Pramuka dan Pulau Panggang Kepulauan Seribu.
Chiu, Hsiu Ching Hsu, and Wei
19. Palard, Combes, Champion, Sylvie, et al. 2009. Effect of Silicon Content on the Sintering and Biological Behaviour of Ca10(PO4)6- x(SiO4)x(OH)2-x Ceramics. Acta Biomaterialia. Vol. 5, No. 4, pp. 1223-1232.
20. Karin Christina, Caroll Leslie, Atta et al.
Maria Teresa, Alberto Carlos, 2009. Cytotoxicity And Biocompatibility Of Direct and Indirect Pulp Capping Materials. J Appl Oral Sci; 17(6):544-54.
21. Huang, Zhang,
Tsurumachi
Hayashi, et al. 2008. Scanning Electron Microscopic Study of Dentinal Pulpal Walls in Relation to
Oral Science J; Age and Tooth Area. 50: 199-203.
22. Sandrasegaram, Devibalan. 2015.
Mikrostruktur Dentin Tertier Gigi Molar Penyirih di Pancur Batu Medan dengan Scanning Electron Microscope.
23. Madhura. 2006. Dentinal Changes in Attrition and Abrasion- A Combined Light and Scanning Electron Microscopic Study. Rajiv Gandhi Univ. India.
24. Tarigan, Rasinta. 2006. Perawatan Pulpa Gigi, Ed. 2. Jakarta: EGC 25.
Frigoletto RT. 2002. Pulp Therapy in
J Am Dent Assoc; Pedodontics. 86:1344.