EFFECT ETHANOL EXTRACT OF Morinda citrifolia L TO BLOOD GLUCOSE, NEUTROFIL COUNT, GLOMERULUS FIBRONEKTIN IN DIABETES MELLITUS RAT - Diponegoro University | Institutional Repository (UNDIP-IR)
EFEK EKSTRAK ETANOL Morinda citrifolia L.
TERHADAP KADAR GULA DARAH, JUMLAH
NEUTROFIL, FIBRONEKTIN GLOMERULUS TIKUS
DIABETES MELLITUS
EFFECT ETHANOL EXTRACT OF Morinda citrifolia L
TO BLOOD GLUCOSE, NEUTROPHYL COUNT,
GLOMERULAR FIBRONECTIN IN DIABETES
MELLITUS RATS
Tesis
Untuk memenuhi sebagian persyaratan
mencapai derajat Sarjana S2
Magister Ilmu Biomedik
Sri Sinto Dewi
G4A009010
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2012
TESIS
EFEK EKSTRAK ETANOL Morinda citrifolia L.
TERHADAP KADAR GULA DARAH, JUMLAH
NEUTROFIL FIBRONEKTIN GLOMERULUS TIKUS
DIABETES MELLITUS
disusun oleh :
Sri Sinto Dewi
G4A009010
Telah dipertahankan di depan Tim Penguji
pada tanggal 5 Maret 2012
dan dinyatakan telah memenuhi syarat untuk diterima
Menyetujui,
Pembimbing
PEMBIMBING I
PEMBIMBING II
dr. Indranila Kustarini S, SpPK(K)
NIP. 19570512 198703 2 001
dr. Ika Pawitra Miranti, M.Kes, SpPA
NIP. 19620617 199001 2 001
Mengetahui,
Ketua Program Studi Magister Ilmu Biomedik
Program Pasca Sarjana Universitas Diponegoro
DR. dr. Winarto, SpMK, SpM(K), DMM
NIP. 19490617 1978021 1 001
PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis dengan judul “ Efek Esktrak Etanol
Morinda citrifolia L terhadap Kadar Gula Darah, Jumlah Neutrofil, Fibronektin
Glomerulus Tikus Diabetes Mellitus “ merupakan penelitian payung dengan ketua
peneliti : dr. Indranila Kustarini Samsuria, SpPK(K) hasil pekerjaan saya bersama
pembimbing yang di dalamnya tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk
memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan lembaga pendidikan
lainnya. Pengetahuan yang diperoleh dari hasil penerbitan maupun yang belum atau
tidak diterbitkan, sumbernya dijelaskan di dalam tulisan dan daftar pustaka.
Semarang, 5 Maret 2012
Sri Sinto Dewi
iii
RIWAYAT HIDUP
A.
B.
C.
Identitas
Nama
: Sri Sinto Dewi
Tempat/tanggal lahir
: Semarang, 30 Maret 1965
Agama
: Islam
Jenis Kelamin
: Perempuan
Riwayat Pendidikan
1. SD K
: Lulus tahun 1977
2. SMPN 1 Purwodadi-Grob
: Lulus tahun 1981
3. SMAN 8 Semarang
: Lulus tahun 1984
4. Fakultas Biologi UNSOED
: Lulus tahun 1990
Riwayat Pekerjaan
1. Tahun 1991 – 2003
: Tenaga Pengajar Akademi Analis
Kesehatan Muhammadiyah Semarang
2. Tahun 2003- sekarang
: Tenaga Pengajar Progdi Analis
Kesehatan FIKKES UNIMUS
D.
Riwayat Keluarga
1. Nama Orang Tua
:
Ayah
: Sarmani
Ibu
: Woro Wartinah ( Alm)
2. Nama Suami
: Munadhirin, S.Pd
3. Nama Anak
: 1. Aldila Nugrahaini Sempana
2. Salsabila Rahma Rosyda
γ. Diah Nur’aini Hascaryaningtyas
4. Lukman Arsya Witana (Alm)
DAFTAR ISI
Halaman
Halaman Judul .....................................................................................................
i
Halaman Pengesahan ............................................................................................
ii
Halaman Pernyataan .............................................................................................
iii
Riwayat Hidup ......................................................................................................
iv
Kata Pengantar .....................................................................................................
v
Daftar Isi ..............................................................................................................
viii
Daftar Tabel .........................................................................................................
xi
Daftar Gambar .....................................................................................................
xii
Daftar Lampiran ...................................................................................................
xiii
Daftar Singkatan ...................................................................................................
xiv
Abstrak ..................................................................................................................
xv
Abstract ................................................................................................................
xvi
BAB I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang ...............................................................................................
1
1.2. Perumusan Masalah .......................................................................................
3
1.3. Tujuan Penelitian ...........................................................................................
4
1.4. Manfaat Penelitian .........................................................................................
5
1.5. Orisinalitas .....................................................................................................
5
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Diabetes Mellitus ...........................................................................................
8
2.1.1.Komplikasi Diabetes Mellitus .............................................................
8
2.1.2. Kadar Gula Darah ................................................................................
12
2.2. Jumlah neutrofil pada DM...............................................................................
15
2.3. Fibronektin glomerulus pada DM ...................................................................
19
2.4. Sprague Dawley yang diinduksi STZ .............................................................
24
2.5. Streptozotocin ................................................................................................
26
2.6.Ekstrak etanol Morinda citrifolia L ………………………………................
27
2.6.1. Antioksidan pada Morinda citrifolia L .................................................
28
2.6.2. Aktivitas imunologi Morinda citrifolia L ……………… ....................
29
2.6.3. Aspek keamanan ekstrak etanol Morinda citrifolia L … .....................
29
BAB III.KERANGKA TEORI, KERANGKA KONSEP, DAN HIPOTESIS
3.1. Kerangka Teori .............................................................................................
30
γ.β. Kerangka Konsep ……………………………………………….. ..................
31
3.3. Hipotesis ………………………………………………………… .................
31
BAB IV. METODA PENELITIAN
4.1. Desain Penelitian ............................................................................................
32
4.2. Populasi dan Sampel Penelitian ......................................................................
34
4.γ. Variabel Penelitian ………………………………………………… .............
35
4.4. Definisi Operasional ……………………………………………….. .............
36
4.5. Alat dan Bahan ...............................................................................................
37
4.6. Prosedur Perlakuan .........................................................................................
37
4.7. Alur Penelitian ...............................................................................................
40
4.8. Tempat dan waktu penelitian …………………………………….. ...............
41
4.9. Pengolahan dan Analisis Data ........................................................................
41
4.10. Etika penelitian .............................................................................................
42
BAB V. HASIL PENELITIAN
5.1. Ekstrak etanol Morinda citrifolia L ………………………………................
43
5.2. Kadar gula darah ............................................................................................
43
5.3. Jumlah neutrofil .............................................................................................
46
5.4. Ekspresi fibronektin glomerulus ……………………………. ........................
47
BAB VI. PEMBAHASAN
6.1. Ekstrak etanol Morinda citrifolia L terhadap kadar gula ................................
50
6.2. Ekstrak etanol Morinda citrifolia L terhadap jumlah
neutrofil .........................................................................................................
51
6.3. Ekstrak etanol Morinda citrifolia L terhadap fibronektin
glomerulus ....................................................................................................
53
6.4. Keterbatasan penelitian ..................................................................................
55
BAB VII. SIMPULAN DAN SARAN ...............................................................
56
7.1. Simpulan ........................................................................................................
56
7.2. Saran ..............................................................................................................
56
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................
57
LAMPIRAN ........................................................................................................
62
DAFTAR TABEL
Judul Tabel
Halaman
1. Penelitian terkait ...................................................................................
6
2. Difinisi Operasional .............................................................................
38
γ. Data analisis kadar gula darah sebelum dan sesudah pemberian …. .....
43
4. Data analisis kadar gula darah sebelum, setelah pemberian ekstrak
etanol Morinda dan selisih gula darah .................................................
44
DAFTAR GAMBAR
Judul Gambar
Halaman
1. Bagan hubungan gula darah , Neutrofil, ...........................................
12
2. Aktivasi neutrofil pada Inflamasi ........................................................
17
3. AGE- protein sebagai pemicu terhadap peningkatan ...........................
19
sekresi berbagai sitokin proinflamasi oleh sel leukosit
4. IHC Fibronektin Glomerulus ...............................................................
23
5. Bagan kerangka teori penelitian .........................................................
30
6. Bagan kerangka konsep .......................................................................
31
7. Bagan Desain Penelitian ......................................................................
32
……………………………………………....
40
9. Grafik boxplot selisih gula darah dan perlakuan …………………. ....
45
10. Grafik boxplot jumlah neutrofil dan perlakuan ....................................
46
11. Grafik boxplot fibronektin dan perlakuan ...........................................
48
12. Ekspresi fibronektin glomerulus .........................................................
49
8. Bagan Alur Penelitian
DAFTAR LAMPIRAN
Judul Lampiran
1. Prosedur Pengukuran Gula darah .......................................................
Halaman
62
2. Pemeriksaan Jumlah Neutrofil / Darah rutin (Hematology Analyser
Cell-Dyn 3700) ....................................................................................
64
3. Pemeriksaan Imunohistokimia Fibronektin glomerulus ………….. .....
65
4. Ekstrasi etanol Morinda citrifolia L ...................................................
67
5. Perlakuan pemberian STZ .....................................................................
68
6. Prosedur pemberian pakan ....................................................................
69
7. Prosedur pemberian ekstrak Morinda citrifolia L..................................
70
8. Surat keterangan standarisasi pemeliharaan hewan coba .......................
71
9. Ethical clearance ..................................................................................
73
10. Analisis Statistik ...................................................................................
74
DAFTAR SINGKATAN
DM
: Diabetes mellitus
AGEs
: Advance glycation endproducts
TNF
: Tumor necrosis factor
TGF-1
: Transforming growth factor-1
IDDM
: Insulin dependent diabetes mellitus
NIDDM
: Non insulin dependent diabetes mellitus
NO
: Nitric oxide
ROS
: Reactive oxygen species
ROT
: Reactive oxygen intermediate
STZ
: Streptozotocin
NF- B
: Nuclear factor -kB
eNOS
: Endothelial nitric oxide synthase
MAPK
: Mitogen activated protein kinase
PKC
: Protein kinase C
IFN-
: Interferon-
VEGF
: Vascular endothelial growth factor
TGF-
: Transforming growth factor
GFR
: Glomerular filtration rate
ECM
: Extracellular matrix
EBM
: Endothelial basement membrane
TERHADAP KADAR GULA DARAH, JUMLAH
NEUTROFIL, FIBRONEKTIN GLOMERULUS TIKUS
DIABETES MELLITUS
EFFECT ETHANOL EXTRACT OF Morinda citrifolia L
TO BLOOD GLUCOSE, NEUTROPHYL COUNT,
GLOMERULAR FIBRONECTIN IN DIABETES
MELLITUS RATS
Tesis
Untuk memenuhi sebagian persyaratan
mencapai derajat Sarjana S2
Magister Ilmu Biomedik
Sri Sinto Dewi
G4A009010
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2012
TESIS
EFEK EKSTRAK ETANOL Morinda citrifolia L.
TERHADAP KADAR GULA DARAH, JUMLAH
NEUTROFIL FIBRONEKTIN GLOMERULUS TIKUS
DIABETES MELLITUS
disusun oleh :
Sri Sinto Dewi
G4A009010
Telah dipertahankan di depan Tim Penguji
pada tanggal 5 Maret 2012
dan dinyatakan telah memenuhi syarat untuk diterima
Menyetujui,
Pembimbing
PEMBIMBING I
PEMBIMBING II
dr. Indranila Kustarini S, SpPK(K)
NIP. 19570512 198703 2 001
dr. Ika Pawitra Miranti, M.Kes, SpPA
NIP. 19620617 199001 2 001
Mengetahui,
Ketua Program Studi Magister Ilmu Biomedik
Program Pasca Sarjana Universitas Diponegoro
DR. dr. Winarto, SpMK, SpM(K), DMM
NIP. 19490617 1978021 1 001
PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis dengan judul “ Efek Esktrak Etanol
Morinda citrifolia L terhadap Kadar Gula Darah, Jumlah Neutrofil, Fibronektin
Glomerulus Tikus Diabetes Mellitus “ merupakan penelitian payung dengan ketua
peneliti : dr. Indranila Kustarini Samsuria, SpPK(K) hasil pekerjaan saya bersama
pembimbing yang di dalamnya tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk
memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan lembaga pendidikan
lainnya. Pengetahuan yang diperoleh dari hasil penerbitan maupun yang belum atau
tidak diterbitkan, sumbernya dijelaskan di dalam tulisan dan daftar pustaka.
Semarang, 5 Maret 2012
Sri Sinto Dewi
iii
RIWAYAT HIDUP
A.
B.
C.
Identitas
Nama
: Sri Sinto Dewi
Tempat/tanggal lahir
: Semarang, 30 Maret 1965
Agama
: Islam
Jenis Kelamin
: Perempuan
Riwayat Pendidikan
1. SD K
: Lulus tahun 1977
2. SMPN 1 Purwodadi-Grob
: Lulus tahun 1981
3. SMAN 8 Semarang
: Lulus tahun 1984
4. Fakultas Biologi UNSOED
: Lulus tahun 1990
Riwayat Pekerjaan
1. Tahun 1991 – 2003
: Tenaga Pengajar Akademi Analis
Kesehatan Muhammadiyah Semarang
2. Tahun 2003- sekarang
: Tenaga Pengajar Progdi Analis
Kesehatan FIKKES UNIMUS
D.
Riwayat Keluarga
1. Nama Orang Tua
:
Ayah
: Sarmani
Ibu
: Woro Wartinah ( Alm)
2. Nama Suami
: Munadhirin, S.Pd
3. Nama Anak
: 1. Aldila Nugrahaini Sempana
2. Salsabila Rahma Rosyda
γ. Diah Nur’aini Hascaryaningtyas
4. Lukman Arsya Witana (Alm)
DAFTAR ISI
Halaman
Halaman Judul .....................................................................................................
i
Halaman Pengesahan ............................................................................................
ii
Halaman Pernyataan .............................................................................................
iii
Riwayat Hidup ......................................................................................................
iv
Kata Pengantar .....................................................................................................
v
Daftar Isi ..............................................................................................................
viii
Daftar Tabel .........................................................................................................
xi
Daftar Gambar .....................................................................................................
xii
Daftar Lampiran ...................................................................................................
xiii
Daftar Singkatan ...................................................................................................
xiv
Abstrak ..................................................................................................................
xv
Abstract ................................................................................................................
xvi
BAB I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang ...............................................................................................
1
1.2. Perumusan Masalah .......................................................................................
3
1.3. Tujuan Penelitian ...........................................................................................
4
1.4. Manfaat Penelitian .........................................................................................
5
1.5. Orisinalitas .....................................................................................................
5
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Diabetes Mellitus ...........................................................................................
8
2.1.1.Komplikasi Diabetes Mellitus .............................................................
8
2.1.2. Kadar Gula Darah ................................................................................
12
2.2. Jumlah neutrofil pada DM...............................................................................
15
2.3. Fibronektin glomerulus pada DM ...................................................................
19
2.4. Sprague Dawley yang diinduksi STZ .............................................................
24
2.5. Streptozotocin ................................................................................................
26
2.6.Ekstrak etanol Morinda citrifolia L ………………………………................
27
2.6.1. Antioksidan pada Morinda citrifolia L .................................................
28
2.6.2. Aktivitas imunologi Morinda citrifolia L ……………… ....................
29
2.6.3. Aspek keamanan ekstrak etanol Morinda citrifolia L … .....................
29
BAB III.KERANGKA TEORI, KERANGKA KONSEP, DAN HIPOTESIS
3.1. Kerangka Teori .............................................................................................
30
γ.β. Kerangka Konsep ……………………………………………….. ..................
31
3.3. Hipotesis ………………………………………………………… .................
31
BAB IV. METODA PENELITIAN
4.1. Desain Penelitian ............................................................................................
32
4.2. Populasi dan Sampel Penelitian ......................................................................
34
4.γ. Variabel Penelitian ………………………………………………… .............
35
4.4. Definisi Operasional ……………………………………………….. .............
36
4.5. Alat dan Bahan ...............................................................................................
37
4.6. Prosedur Perlakuan .........................................................................................
37
4.7. Alur Penelitian ...............................................................................................
40
4.8. Tempat dan waktu penelitian …………………………………….. ...............
41
4.9. Pengolahan dan Analisis Data ........................................................................
41
4.10. Etika penelitian .............................................................................................
42
BAB V. HASIL PENELITIAN
5.1. Ekstrak etanol Morinda citrifolia L ………………………………................
43
5.2. Kadar gula darah ............................................................................................
43
5.3. Jumlah neutrofil .............................................................................................
46
5.4. Ekspresi fibronektin glomerulus ……………………………. ........................
47
BAB VI. PEMBAHASAN
6.1. Ekstrak etanol Morinda citrifolia L terhadap kadar gula ................................
50
6.2. Ekstrak etanol Morinda citrifolia L terhadap jumlah
neutrofil .........................................................................................................
51
6.3. Ekstrak etanol Morinda citrifolia L terhadap fibronektin
glomerulus ....................................................................................................
53
6.4. Keterbatasan penelitian ..................................................................................
55
BAB VII. SIMPULAN DAN SARAN ...............................................................
56
7.1. Simpulan ........................................................................................................
56
7.2. Saran ..............................................................................................................
56
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................
57
LAMPIRAN ........................................................................................................
62
DAFTAR TABEL
Judul Tabel
Halaman
1. Penelitian terkait ...................................................................................
6
2. Difinisi Operasional .............................................................................
38
γ. Data analisis kadar gula darah sebelum dan sesudah pemberian …. .....
43
4. Data analisis kadar gula darah sebelum, setelah pemberian ekstrak
etanol Morinda dan selisih gula darah .................................................
44
DAFTAR GAMBAR
Judul Gambar
Halaman
1. Bagan hubungan gula darah , Neutrofil, ...........................................
12
2. Aktivasi neutrofil pada Inflamasi ........................................................
17
3. AGE- protein sebagai pemicu terhadap peningkatan ...........................
19
sekresi berbagai sitokin proinflamasi oleh sel leukosit
4. IHC Fibronektin Glomerulus ...............................................................
23
5. Bagan kerangka teori penelitian .........................................................
30
6. Bagan kerangka konsep .......................................................................
31
7. Bagan Desain Penelitian ......................................................................
32
……………………………………………....
40
9. Grafik boxplot selisih gula darah dan perlakuan …………………. ....
45
10. Grafik boxplot jumlah neutrofil dan perlakuan ....................................
46
11. Grafik boxplot fibronektin dan perlakuan ...........................................
48
12. Ekspresi fibronektin glomerulus .........................................................
49
8. Bagan Alur Penelitian
DAFTAR LAMPIRAN
Judul Lampiran
1. Prosedur Pengukuran Gula darah .......................................................
Halaman
62
2. Pemeriksaan Jumlah Neutrofil / Darah rutin (Hematology Analyser
Cell-Dyn 3700) ....................................................................................
64
3. Pemeriksaan Imunohistokimia Fibronektin glomerulus ………….. .....
65
4. Ekstrasi etanol Morinda citrifolia L ...................................................
67
5. Perlakuan pemberian STZ .....................................................................
68
6. Prosedur pemberian pakan ....................................................................
69
7. Prosedur pemberian ekstrak Morinda citrifolia L..................................
70
8. Surat keterangan standarisasi pemeliharaan hewan coba .......................
71
9. Ethical clearance ..................................................................................
73
10. Analisis Statistik ...................................................................................
74
DAFTAR SINGKATAN
DM
: Diabetes mellitus
AGEs
: Advance glycation endproducts
TNF
: Tumor necrosis factor
TGF-1
: Transforming growth factor-1
IDDM
: Insulin dependent diabetes mellitus
NIDDM
: Non insulin dependent diabetes mellitus
NO
: Nitric oxide
ROS
: Reactive oxygen species
ROT
: Reactive oxygen intermediate
STZ
: Streptozotocin
NF- B
: Nuclear factor -kB
eNOS
: Endothelial nitric oxide synthase
MAPK
: Mitogen activated protein kinase
PKC
: Protein kinase C
IFN-
: Interferon-
VEGF
: Vascular endothelial growth factor
TGF-
: Transforming growth factor
GFR
: Glomerular filtration rate
ECM
: Extracellular matrix
EBM
: Endothelial basement membrane