Desain Penelitian pada Uji In Vivo

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (2), 2016, 171-179

Tersedia online di: ht t p://ej ournal-balit bang.kkp.go.id/index.php/j ra

  

EVALUASI PEM BERIAN PROBIOTIK PADA M EDIA PEM ELIHARAAN TERHADAP

BACILLUS

LAJU PERTUM BUHAN DAN PERUBAHAN HISTOPATOLOGI IKAN LELE DUM BO

( Clarias gariepinus ) YANG DIINFEKSI Aeromonas hydrophila

_{*)# **) *)}

  

Angela M ariana Lusiast uti , M ohammad Faizal Ulkhaq , W idanarni, dan Tri Heru Prihadi

_{*) **)}

Balai Pene litian dan Pe ngemb angan Bu didaya Air Tawar

_***)

Program St udi Budidaya Perairan, Un iversitas Airlan gga, PDD Ban yuwangi

De pate men Budidaya Perairan, Fakult as Perikanan dan Ilm u Ke lautan, Institut Pert anian Bo gor

  ABSTRAK

Pen elitian in i bertujuan unt uk me ngevaluasi pem berian pro biotik Bacillus melalui med ia p emeliharaan

t erhad ap laju pe rtu mb u han d an pe rub ah an h isto p at o lo gi ikan le le d um bo yan g diinfe ksi Aer omonas

hydrophila . Penelit ian t erdiri atas lima perlakuan yaitu budidaya ikan lele dum bo den gan p enambahan

probiotik Bacillus ND2, Bacillus P4I2, kombinasi probiotik Bacillus ND2 + Bacillus P4I2 (Kom), kontrol positif

(K+ ), dan kontrol negatif (K-) (tanpa pemberian probiotik). Ikan lele dumbo (13,354 ± 2,8 g) dipelihara

pada akuarium volume 40 L dengan kepadatan 30 ekor per akuarium selama 30 hari. Bakteri probiotik

ditambahkan pada media pemeliharaan ikan setiap hari diaplikasikan melalui air, sedangkan bakteri patogen

₃ A. hydr ophila (10 CFU/mL) diberikan sekali saja pada awal pe meliharaan (kecuali pad a ko ntro l ne gatif) karena sebagai asumsi bahwa

  A. hydrophila adalah patogen yang selalu ada di air dan akan membentuk

quorum sensing jika kondisi kurang menguntungkan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa laju pertumbuhan

tertinggi dicapai pada perlakuan pemberian probiotik Bacillus ND2 yaitu sebesar 1,708 ± 0,114%. Pengamatan

histopatologi menunjukkan bahwa pada perlakuan probiotik, terjadi kerusakan organ hati dan ginjal yang

lebih ringan dibandingkan perlakuan kontrol positif (K+ ). Pemberian probiotik Bacillus ND2 dengan dosis

₄

10 CFU/mL pada media pemeliharaan efektif meningkatkan pertumbuhan dan mencegah kerusakan hati dan ginjal ikan lele dumbo yang terserang Aeromoniasis.

   Bacillus KATA KUNCI: Aeromoniasis; ; lele; laju pertumbuhan; histopatologi; probiotik

ABSTRACT: The evaluation of probiotic bacillus on growth rate and histopathology changes of African catfish

(

  Clarias gariepinus) infected by Aeromonas hydrophila. By: Angela M ariana Lusiastuti, M ohammad Faizal Ulkhaq, W idanarni, and Tri Heru Prihadi

  

The aim of t his st udy was t o evaluat e t he addition of a probiot ic Bacillus t hrough cult ure medium on growt h rat e and

hist opat hological change in African cat fish who was infect ed by Aeromonas hydrophila. The st udy consist ed of five

t reat ment s such as t he addit ion of probiot ic Bacillus ND2, Bacillus P4I2, Bacillus ND2 + Bacillus P4I2 (Kom), positive

cont rol (K+ ) and negat ive cont rol (K-) (wit hout probiot ic addit ion). African cat fish (13.354 ± 2.8 g) was maint ained

in 15 aquariums (40 L in volume) wit h 30 fishes each for 30 days. Probiot ic bact eria was applied in wat er once a day,

₃

whereas pathogenic bact eria A. hydrophila (10 CFU/mL) were added once in earlier t reatment (except for the negat ive

cont rol) as assumpt ion t hat A. hydrophila will shape up quorum sensing in unfort unat e condit ion. The result showed

t hat t he highest spesific growt h rat e in t he t reat ment of Bacillus ND2 probiot ics (1,708 ± 0.114%). Hist opat hology

showed t hat damaged of liver dan kidney in probiot ics treat ment were lightner t han positive cont rol (K+ ). The addit ion

₄

of Bacillus P4I1 (10 CFU/mL) efect ive t o increased t he spesific growt h rat e of African cat fish and prevent t he damage

of liver and kidney of African cat fish was infect ed by Aeromoniasis.

  KEYW ORDS: _#

Aeromoniasis; Bacillus; Clarias gariepinus; histopathology; probiotic

Ko r e sp o n d e nsi: Balai Pe n elit ian d an Pe n ge m b an g an Bu d id aya Air Tawar. Jl. Se m p ur No . 1 , Bo go r, Jawa Barat 1 6 15 4 ,

  In d o n e sia. Te l.: + (0 2 5 1 ) 8 3 1 3 2 0 0 l usi ast ut i _ 6 1 @ yahoo.co.i d

  E-m ail:

  172

  Tr ypt icase Soy Brot h (TSB) sebanyak 25 mL di dalam wat er bat h shaker

  Bacillus

  ND2 yang diisolasi dari saluran pencernaan ikan nila (

  Oreochromis nilot icus

  ) (Lusiast ut i & Taukhid, 2011) dan Bacillus P4I2 yang diiso lasi dari lingkungan budidaya ikan lele (

  Clarias

  sp.) (No vit a

  et al

  ., 2015), sedangkan bakt eri pat o gen yang digunakan dalam penelit ian ini ad alah

  A. hydr ophila

  AH2 6 . Se lu ru h iso lat b akt e ri m e r u p a k a n k o le k s i d a r i Ba la i Pe n e lit ia n d a n Pengembangan Budidaya Air Tawar (BPPBAT), Bo go r. Seluruh iso lat bakt eri dikult ur pada media

  , 160 rpm selama 24 jam pada 29°C. Hasil kult ur dipanen dan disent rifugasi pada 5.000 rpm selama 15 menit . Set elah it u, suspensi bakt eri dicuci sebanyak dua kali dengan

  BAHAN DAN M ETODE Persiapan Isolat Probiot ik dan Patogen

  phosfat buffer saline

  (PBS; NaCl 0,8 g; KH ₂ PO ₄ 0,2 g; Na ₂ HPO ₄ 1,5 g; KCl 0,2 g; dan akuades

  1.000 mL). Pengenceran berseri disesuaikan dengan d o sis p e rco b aa n .

  Tot al Pl at e Count

  (TPC) b ak t e ri dit e nt ukan de ngan m et o de cawan sebar (Mad igan

  et al ., 2011).

  Desain Penelit ian pada Uji In Vivo

  Ikan uji yang digunakan adalah ikan lele dumbo seh at d an t id ak m en un ju kkan ge jala sakit d en gan panjang 12,692 ± 0,94 cm dan bobo t 13,354 ± 2,8 g. Perco baan dilakukan pada akuarium berukuran 60 cm x 70 cm x 40 cm dengan vo lume air 40 L dan kepadatan 3 0 e ko r pe r akuariu m. Pe m be rian p ro b io t ik pad a media pemeliharaan (10 ⁴ CFU/mL), dilakukan set iap hari pada pagi hari selama 30 hari. Bakt eri pat o gen

  A. hydrophila

  d ib e rikan p ad a me d ia p e m e lih araan (kecuali kontro l negat if), sebanyak satu kali pemberian (1 0 ³ CFU/m L) pada awal pe me liharaan (H0 ). Pakan be ru pa p elet ko me rsial d en gan kadar p ro t e in 3 6% diberikan secara

  at sat iat ion set iap pagi dan so re hari.

  Is o la t p r o b io t ik ya n g d ig u n a k a n m e r u p a k a n kelo mpo k bakt eri Bacillus yang t erdiri at as pro bio t ik

  Aeromonas hydrophila .

  Evaluasi pemberian probiot ik Bacillus pada media pemeliharaan ..... (Angela Mariana Lusiast ut i) PENDAHULUAN

  hydrophila

  Pe n ya kit m e ru p ak an sa lah s at u ke n d a la p a d a budidaya ikan lele dumbo sistem int ensif, di antaranya a d a la h

  M ot i l e Aer om on ad s Sep t i ca em i a

  a t a u Aero m o niasis yang disebab kan o leh infeksi bakt eri

  Aeromonas hydrophila

  . Bakt eri

  A. hydrophila

  t ermasuk bakt eri pat o gen o po rtunistik dan terdapat pada ko lam budidaya ikan lele dumbo dengan persent ase sebesar 25% dari t o t al bakt eri dalam media pemeliharaan (Al- Harbi & Uddin, 2010). Bakt eri o po rt unist ik berperan se bagai b io filt e r alam i d alam p ro se s p e ro m b akan bahan o rganik dalam air, sert a t idak membahayakan o rganisme budidaya jika ko ndisi lingkungan budidaya dalam kisaran no rmal (Ibrahem

  et al

  ., 2008). Penyakit Aero mo niasis sering menyerang ikan lele (

  Clarias

  sp.) dan je nis ikan air t awar t ro pis lainnya se pert i dari g o lo n g an Silu r id a e , Ict alu r id a e , Cla r iid a e , s e r t a Cyprin idae. Tingkat kem at ian p ada ikan lele dap at mencapai 80%, bahkan 100% dalam wakt u sekitar sat u m in ggu (Din i & Pu rb o m art o n o , 2 0 0 9 ). Aer omonas

  adalah pat o gen opo rt unis yang mempunyai strategi komunikasi ant ar bakteri yang disebut

  d a p a t m e n in g k a t k a n la ju pert umbuhan spesifik dan memiliki pat o fisio lo gi hat i d an insan g yang le bih baik d ib an d in gkan ko n t ro l. Berdasarkan hal tersebut tujuan melakukan penelitian ini adalah mengevaluasi efek pemberian probiot ik pada media pemeliharaan t erhadap laju pert umbuhan dan perubahan hist o pat o lo gi o rgan ikan lele dumbo yang diinfeksi

  qourum sensing , jika m e n cap ai qour um m aka A. hydr ophila

  m e n g e lu a r k a n p r o d u k e k s t r a s e lu le r n ya ya n g menyebabkan ikan menjadi sakit (Chen

  et al ., 2010).

  Pe milihan jenis d an do sis ant ibio t ik yang t ep at untuk pengendalian penyakit masih merupakan kendala dalam upaya manajemen penyakit pada budidaya ikan, t ermasuk penyakit Aero mo niasis. Efek samping dari penggunaan bahan ant ibio t ik yang t idak t epat ant ara la in d ap at m e n im b u lk an r e s is t e n s i p a d a b ak t e ri pat o gen, mencemari lingkungan perairan, dan adanya residu kimia dari ant ibio t ik pada pro duk perikanan yang diko nsumsi (Flo res, 2011). Salah sat u alt ernat if yang dapat dipilih untuk pencegahan penyakit ini adalah dengan aplikasi pro bio t ik.

  Pro bio t ik d idefinisikan seb agai mikro o rganisme ya n g m e m ilik i ke m a m p u a n u n t u k m e m o d ifika s i ko mpo sisi bakt eri dalam saluran pencernaan hewan akuatik, air, dan sedimen, sert a dapat digunakan untuk suplemen pakan yang dapat meningkat kan kesehat an inang dan berperan sebagai agen bio ko nt ro l (Flo res, 2011). Salah sat u mekanisme kerja pro bio t ik di dunia p e rikanan yait u d e n gan m e m p ro d u ksi ko m p o n e n pe ngh amb at un t uk me nekan pert um bu han bakt e ri p at o ge n d alam p e rairan (Ib rah e m , 2 0 1 5 ). Bacillus m e r u p ak an sa lah sat u je n is b ak t e ri yan g b an yak d im anfaat kan se bagai pro bio t ik d alam aku aku lt u r ka re n a ke m am p u an n ya m e n gh a silk an e n z im d an ko m p o n e n an t im ikro b a yan g d ap at m e n gh a m b at bakt eri pat o gen (Ho ng et al ., 2004).

  Pe m e r ik s a a n h is t o p a t o lo g i o r g a n d a p a t memberikan gambaran mengenai ko ndisi kesehat an ikan. Selain it u, pengamat an laju pert umbuhan ikan dapat digunakan sebagai salah sat u indikat o r unt uk menge valuasi efekt ivit as pemberian pro bio t ik pada m e d ia p e m e lih a r a a n . Ch e lla d u r a i

  et a l

  . (2 0 1 3 ) menyat akan bahwa pemberian pro bio t ik Lact obacillus

  acidophilus

  melalu i pakan selam a 60 hari pada ikan

  M yst u s m ont a n us

  Selama pemeliharaan, akuarium t idak disipo n dan tidak dilakukan pergantian air. Pengujian dilakukan sebanyak lima perlakuan dan t iga kali ulangan (Tabel 1).

   

  10

  Bacillus

  ND2 d i sa m p in g se b a ga i an t i b a kt e r ia l ju ga m e m p u n yai ke mamp uan seb agai quor um quenching yait u d ap at m e n g e b lo k s in yal

  A. hydr ophil a

  k e t ik a m e n cap ai

  quor um

  . Se lain it u ,

  Bacillus

  ND2 ju ga m e m p u n yai ke m am p u an se b aga i im m u n o st im u lan d an d ap at meningkat kan kecernaan pakan karen a mempunyai enzim lipo litik, pro teolit ik, dan amilolit ik.

  Bacillus

  P412 Tabel 1. Ko mbinasi perlakuan aplikasi pro bio tik Bacillus secara in vivo pada budidaya ikan lele dumbo (

  Clarias gariepinus

  )

  Table 1. Combination treatment of probiotic Bacillus in vivo in African cat fish

ND 2 P4I2

ND2

  4

  3 P4 I2 -

• 1 0

  10

  4 1 0

  3 Ko m

  10

  4

  10

  4 1 0

  3 K+ - - 1 0

  3 K- - - - Probi ot i k

  

Pr obiotic

(CFU/m L) Perl akuan

  Tr eatments Aer omonas hydrophila (CFU/m L)

  100 x t Wo ln Wt ln

  SGR

  P4I2. Perbedaan kemampuan ini diduga disebabkan karena perbedaan ko mponen yang dihasilkan oleh masing-masing bakteri p ro b io t ik u n t u k me m p ercep at p ro se s p e n ce rn aan p akan m e njad i e ne rgi. Cara ke rja

  Bacillus

  ND2 m e m ilik i kemampuan dalam merangsang pertumbuhan ikan lebih baik dibandingkan pro bio t ik

  La ju p e r t u m b u h a n s p e s ifik ik a n le le d u m b o ditampilkan pada Gambar 1. Berdasarkan pengamat an laju pe rt um b u han ikan se lam a 3 0 hari p e rlaku an , d ike t a h u i b ah wa p e rla ku a n p e m b e r ian p ro b io t ik

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (2), 2016, 171-179

  Paramet er yang diamat i pada penelit ian ini adalah laju p ert um bu h an sp esifik, hist o p at o lo gi hat i dan ginjal, sert a kualit as air meliput i suhu, o ksigen t erlarut (DO), d e r aja t k e a s a m a n (p H), d a n a m o n ia . La ju pert umbuhan spesifik ikan dihit ung mulai bo bo t awal sampai akhir penelit ian berdasarkan Effendi (2002) yaitu:

  d i mana: SGR = laju p e rtu mbuh an sp e sifik (%) ln Wt = lo g nat ural bo bo t ikan p ad a akhir p engamat an (g) ln Wo = lo g natu ral bo b o t ikan p ad a awal p eng amat an (g) t = lama waktu p eng amatan (hari)

  Samp el un t u k pen gamat an h ist o p at o lo gi o rgan yang diambil hat i dan ginjal dari satu eko r ikan dengan masing-masing perlakuan pasca infeksi berdasarkan met o de yang dijelaskan o leh Ho ssain

  et al . (20 07).

  Param et er kualit as air yang m eliput i DO, suhu , pH, dan amo nia diukur pada hari ke-0, 7, 14, 21, dan 28.

  Ran can gan yang digun akan p ada pe ne lit ian in i adalah rancangan acak lengkap (RAL). Laju pertumbuhan sp e s ifik d ia n alis is se car a s t at is t ik m e n g gu n ak an p e r a n g k a t lu n a k IBM SPSS 1 6 . 0 , p a d a s e la n g kep ercayaan 9 5% (

  alpha

  = 0 ,0 5 ). Ap abila b erb ed a nyat a, maka akan dilanjut kan dengan

  Duncan’s M ul- t iple Range Test

  (DMRT). Dat a hist o pat o lo gi dianalisis secara deskript if berdasarkan jumlah kerusakan pada o rgan ikan pada beberapa bagian o rgan. Jika jumlah ke ru sakan o rgan h an ya d i sat u b agian (fo kal), d i beberapa t empat (mult ifo kal), dan di semua t empat (d ifus), m aka d ib eri t an da m asin g-masin g + , + + ,

  et al ., 2012).

  HASIL DAN BAHASAN Laju Pertumbuhan Spesifik

  Bacillus ND2 m en un ju kkan laju p ert um bu han yang

  Baci l l u s

  signifikan lebih t inggi (1,708%) dibanding perlakuan pemberian probiot ik

  Bacillus

  P4I2 (1,386%) dan kont ro l p o s it if (K+ , 1 ,1 8 4 %) (P< 0 ,0 5 ); ak an t e t ap i t id ak b e rb e d a sign ifikan d e n ga n p e rlaku a n p e m b e rian kombinasi pro biot ik (

  Bacillus

  ND2 +

  Bacillus

  P4I2) yaitu 1,512% dan ko ntrol negat if (K-) 1,548% (P> 0,05). Selain it u, perlakuan pemberian pro bio t ik

  Bacillus

  P4I2 t idak b e rb e d a n yat a d e n gan se lu ru h p e rlaku an ke cu ali perlakuan pemberian pro bio tik

  Bacillus ND2 (P> 0,05).

  Berdasarkan hasil pengamat an laju pert umbuhan s p e s ifik , p e m b e r ia n p r o b io t ik

  Baci l l u s

  ND2 menunjukkan nilai pert umbuhan yang paling t inggi dibandingkan perlakuan lain, t erutama ko nt ro l. Hal ini d id u g a b a h w a p r o b io t ik

• (Adinat a

2 ND2 P4I2 Kom K+ K-

  Gambar 1. Laju pert umbuhan ikan lele dumbo (

  Selain it u, peningkat an pert umbuhan diduga juga d ise b ab kan kare n a p e n u r u n an t in gkat st re s ikan t erhadap fakto r kualit as air. Sehingga energi dari pakan yan g m asu k ke d alam b ad an ikan se b agian be sar d ia r ah k an u n t u k p e r t u m b u h a n . Fu

  et al

  . (2 0 0 7 ) menyebut kan bahwa energi yang masuk dalam badan ikan yang b erasal d ari pakan akan seb agian be sar d ig u n a k a n u n t u k m e t a b o lis m e , s e b a g ia n la g i digunakan unt uk pert umbuhan dan sisanya dibuang dalam ben t uk fe ses. St res pada ikan me nyebab kan penurunan pert umbuhan, t ingkah laku yang abno rmal, penurunan sist em imun ikan, dan resist ensi t erhadap penyakit (Lupat sch

  et al

  ., 2010). Fakt or penyebab st res (stresso r) pada ikan dapat berasal dari kualit as air (Luz

  et al

  ., 20 08; Bro go wski

  et al

  ., 2 005; Mallya, 20 07), ke pad at an (Naserizadeh

  et al

  ., 2 01 3), sert a pro ses penanganan dan pengangkut an yang buruk (Adeyemo

  et al ., 2009).

  Hist opat ologi

  An alisis hist o pat o lo gi dapat d igunakan seb agai bio marker unt uk menget ahui ko ndisi kesehat an ikan melalui perubahan st rukt ur yang t erjadi pada o rgan

  C. gariepinus

  melalui pakan dapat meningkat kan laju pert u mbu han ikan t e rse but dan m en unjukkan p e r u b a h a n h is t o p a t o lo g i ya n g le b ih r in g a n dibandingkan ko nt ro l set elah diuji t ant ang dengan

  ) pada perlakuan pro bio t ik

  Bacillus

  ND2 ,

  

Bacillus

  P4I2, Ko m (

  Bacillus

  ND2+

  Bacillus

  P4I2) dan ko nt ro l

  

Figure 1. Growt h rat e of African cat fish (C. gariepinus) t reat ed wit h probiot ic Bacil-

lus ND2, Bacillus P412, Kom (Bacillus ND2+ Bacillus P412) and cont rol (K+ and K-) a b ab bc ab

  0,2 0,4 0,6 0,8

  1 1,2 1,4 1,6 1,8

  L a ju p e r tu m b u h a n h a ria n (% ) Pe rlakuan Ke terang an (

  Not e ): Hu ruf yan g b erbe d a men unju kkan h asil yang

berbed a nyata (P< 0,05)

  A. hydr ophila .

  174

  Evaluasi pemberian probiot ik Bacillus pada media pemeliharaan ..... (Angela Mariana Lusiast ut i)

  Ziaei-Nejad

  adalah bakt eri yang mempunyai kemampuan

  quorum quenchi ng

  yan g m e n ce ga h t e r b e n t u k n ya

  quor um sensing.

  Kemampuan

  Bacillus

  P412 belum cukup unt uk membantu mengendalikan penyakit

  M ot ile Aeromonads Sept icemia

  yang diesebabkan o leh

  A. hydrophila

  . Hasil penelit ian Sun

  et al

  . (2010) yang menyebut kan bahwa pro biot ik jenis Bacillus pumilus dan Bacillus clausii dapat meningkat kan perfo rma p ert umb uhan d an respo ns imun ikan

  Epinephelus coloides.

  et al

  pada ikan

  . (2005) m e n ya t a k an b a h w a p ro b io t ik Bacil l us s p p . ya n g d ia p lik a s ik a n le w a t m e d ia p e m e lih a r a a n d a p a t m e n in gkat kan p e rt u mb u h an dan t in gkat sin t asan udang putih India (

  Fenneropenaeus indicus

  ). Peningkat an la ju p e r t u m b u h a n s p e s ifik in i s e ja la n d e n g a n peningkat an

  survival rat e

  dan paramat er hemat o lo gi yang t erdiri at as t o t al erit ro sit , t o t al leuko sit , kadar h e m a t o k r it , k a d a r h e m o g lo b in , d a n d ife r e n s ia l leu ko sit (Ulkhaq

  et al

  ., 201 4). Hal in i m enandakan b a h w a p e m b e r ian p ro b io t ik

  Bacil lus

  ND2 , s e lain m am pu m en in gkat kan laju p ert u mb uh an ikan lele dumbo juga dapat meningkat kan t ingkat sint asan dan imunit as ikan lele dumbo dari infeksi

  A. hydrophila .

  Hasil penelit ian ini sejalan dengan hasil penelitian dari Abu mo u rad

  et al

  . (2 01 4 ) yan g m en yat akan b ahwa pemberian pro bio t ik

  Ent erococcus faecium

  Oreochomis nilot icus

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (2), 2016, 171-179 Ke terang an ( Not e ): + : Kerusakan sel fo kal ( focal cell necr osi s ), + + : ke rusakan se l m ult ifo kal ( mult i focal

cell necrosi s ), + + + : keru sakan sel d ifu sa ( di ffuse cell necrosi s ); V: vakuo lisasi

( vacuolizat ion ), I: infilt rasi (i nfil t rat at ion ), H: Haemo rrhagi ( haemor rhage ),

N: Ne kro sis ( necrosi s )

  Gambar 2. Hist o pat o lo gi hat i dan ginjal ikan lele dumbo (

  Clarias gariepinus

  ) pada perlakuan penambahan pro bio t ik dan bakt eri pat o gen dalam pemeliharaan selama 30 hari

  Figure 2. Hist opat hological feat ures of liver and kidney of African cat fish (Clarias gariepinus) t reat ed wit h probiot ic and pat hogen bact eria for 30 days

  176

  p a d a m e d ia peme liharaan yang t inggi dan t idak adanya bakt eri pro b io t ik di d alamn ya yang be rpe ran m en uru nkan jumlah pat o gen

  A. hydr ophila

  m e n gh a silkan p ro d u k e kst rase lu le r yan g b e rsifat t o ksin bagi inangnya. Abero um & Jo o yandeh (2010) m e n ge m u kakan b ah wa

  Aer omonas

  m e n ye kre sikan b e b e r ap a je n is p ro t e in e kst ra se lu le r, an t ara lain :

  amilase , chit inase , elast ase , aerolysin , nuclease , gelatinase , lecit hinase

  ,

  lipase

  , dan

  prot ease .

  De r a ja t k e r u s a k a n p a d a s e lu r u h p e r la k u a n pro bio t ik dan ko nt ro l negat if (K-) hanya t erjadi secara fo ka l (+ ). Hal in i d id u ga k are n a e fe k p e m b e rian pro bio t ik yang dapat menurunkan jumlah pat o gen

  A. hydrophila seh ingga t idak m enyeb abkan ke rusakan

  o rgan yang parah. Sedangkan pada perlakuan ko nt ro l po sit if (K+ ) menun jukkan derajat kerusakan o rgan yang lebih parah yait u berkisar pada mult ifo kal sampai d ifu s (+ + sam p ai + + + ). Hal in i d id u ga k are n a p o p u la s i p a t o g e n

  A. h yd r op h i l a

  A. hydrophila

  et al

  . Hasil penelit ian Ulkhaq

  et al

  . (201 4) m enyat akan bahwa t erjadi pen urun an ju m lah b akt eri p at o ge n

  A. hydrophila p ad a m e d ia

  pemeliharaan ikan lele dumbo yang diberi pro bio t ik

  Bacillus .

  Kualitas Air

  Paramet er kualit as air yang diamat i pada penelit ian ini adalah o ksigen t erlarut , suh u pH, sert a amo nia yang diukur pada hari ke-0, 7, 14, 21, dan 28. Hasil pengamat an dit ampilkan pada Tabel 2.

  Berdasarkan h asil p en gamat an su hu air selam a penelit ian, dipero leh nilai berkisar ant ara 26°C-28°C. Nilai ini merupakan kisaran suhu o pt imum menurut

  Depart ement of Wat er Affairs and Forest r y (1996), yait u

  pada kisaran 25°C-30°C. Di luar kisaran t ersebut , ikan a ka n m e n ga la m i p e r t u m b u h a n ya n g la m b a t d a n penurunan resist ensi terhadap penyakit, terutama yang disebabkan karena infeksi bakt eri dan jamur.

  Pengukuran o ksige n t erlarut be rkisar pada n ilai 1,2-6,0 mg/L. Ko ndisi t ersebut menunjukkan bahwa kandungan o ksigen t erlarut masih dapat dit o leransi m en u rut

  Depar t ement of Wat er Affair s and Forest r y

  ., 2000). Kelainan pada o rgan d alam in i d ise b ab kan ka re n a

  (Prio so er yant o

  Evaluasi pemberian probiot ik Bacillus pada media pemeliharaan ..... (Angela Mariana Lusiast ut i)

  Hemo ragi merupakan peristiwa keluarnya darah dari pembuluh darah dan banyak terdapat di kulit, membran mu ko sa, d an d i ant ara sel-sel jaringan at au o rgan. He m o ragi d ap at d ise b ab k an o le h t rau m a, ru p t u r pembuluh darah at au peningkat an po ro sit as akibat infeksi bakt eri, virus at au bahan t o ksik. Sedangkan nekro sis adalah kemat ian sel-sel at au jaringan yang menyert ai degenerasi sel pada set iap kehidupan hewan d a n m e r u p a k a n t a h a p a k h ir d e g e n e r a s i ya n g irreversibel. Nekro sis dapat disebabkan o leh t rauma, agen-agen bio lo gis (virus, bakt eri, jamur, dan parasit ), agen-agen kimia at au t erjadinya gangguan t erhadap penyediaan darah pada suat u daerah khusus (Plumb, 1 9 9 4 ). Pa d a h as il p e n e lit ia n , vak u o lisa si d id u g a t e rb e n t u k s e b ag a i ak ib a t g a n gg u a n m e k a n is m e p e n ye rap an n u t rie n se d an g kan

  d a la m (St e n t ifo r d et a l . , 2 0 1 4 ). Pe m e r ik s a a n hist o pat o lo gi dalam penelit ian ini dilakukan pada o r- gan hat i dan ginjal. Hal ini sesuai dengan pernyat aan Lait h & Najiah (2013) yait u gejala ikan yang t erserang

  A. hydrophila

  adalah ikan lemas, nafsu makan menurun, nekro sis dan hipert ro pi pada kulit , hiperplasia dan infilt rasi leuko sit pada insang, inflamasi pada ginjal, hat i, dan limpa.

  Ha s il p e n g a m a t a n h is t o p a t o lo g i ik a n u ji (Gam b a r 2 ) m e n u n ju kkan b ah wa t e rjad i in filt rasi (pemasukan) sel leuko sit dan haemo rrhagi pada hat i dan ginjal pada seluruh perlakuan probiotik (ND2, P4I2, Ko m ), se rt a p ad a p e rlaku an ko n t ro l (K+ d an K-). Kh u s u s p a d a p e r la k u a n k o n t r o l p o s it if (K+ ), m e n gala m i ke ru sak an p alin g p ar ah , yait u t e rjad i vaku o lisa si se l e p it e l h at i se cara e kst e n s if, se rt a t erjadi haemo rrhagi dan nekro sis pada t ubulus ginjal.

  Derajat kerusakan pada seluruh perlakuan pro bio t ik dan ko nt ro l negat if (K-) hanya t erjadi secara fo kal (+ ). Se d an gk a n p a d a p e rlak u a n k o n t r o l p o sit if (K+ ) menunjukkan derajat kerusakan o rgan yang lebih parah yait u b erkisar p ad a m u lt ifo kal sam p ai difu s (+ + sampai + + + ).

  Pada seluruh perlakuan pro bio t ik (ND2, P4I2, dan Ko m), se rt a ko n t ro l t e rjad i in filt rasi leu ko sit pada o rgan hat i dan ginjal. Hal ini diduga t erjadi karena ikan mu lai b ere spo ns t e rhadap adan ya pat o gen A.

  hydrophila

  dalam air, se hin gga t e rjad i infilt rasi se l leuko sit dalam o rgan hat i dan ginjal. Rey

  et al

  . (2009) menyat akan bahwa infeksi

  A. hydrophila st rain

  KJ 99 m e nye b ab kan in filt rasi m akro fag se t elah d u a jam pascainfeksi pada ikan t ilapia hibrid ( Oreochromis sp.). Pe n gam at an p ad a p e rlaku an ko n t ro l p o sit if (K+ ) menunjukkan perubahan pat o lo gis yang paling parah dibandingkan perlakuan lain, yait u t erjadi vakuo lisasi s e l e p it e l h a t i s e ca r a e k s t e n s if, s e r t a t e r ja d i

  haemorrhage dan nekro sis pada t ubulus ginjal.

  haemor r hag e

  hydrophila

  d a n nekro sis t erjadi karena adanya akt ivit as t o ksin dan e n z im ya n g d ih a silka n o le h

  A. hydr ophil a . Ha s il

  penelit ian Miyazaki

  et al

  . (2001) menyebut kan bahwa ik an co lo r car p (

  Cypr i nus car pio

  ) d i Je p a n g yan g t erinfeksi virus co ro na dan

  A. hydrophila mengalami haemorrhage

  pada hat i, ginjal, limpa, dan permukaan kulit . Vakuo lisasi pada sel hat i juga dit emukan pada kat ak

  bullfr og

  (

  Rana cat esbeiana

  ) yang t erinfeksi A.

  (1 9 96 ), yait u p ada kisaran 1 -8 m g/L. Pe n in gkat an kandungan o ksigen t erlarut dalam air sampai > 20 mg/L dapat menyebabkan supersat urasi pada yuwana dan lar va ikan lele dumbo (Fo urie , 200 6). Oksigen

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (2), 2016, 171-179

  Chen, R., Zho u, Z., Cao , Y., Bai, Y., & Yao , B. (2010).

  Journal of Applied Aquacult ure

  , 22, 187–193. Bro go wski, Z., Sie we rt , H., & Kep lin ger, D. (20 05 ).

  Fee din g an d gro wt h resp o n se s o f blu egill fish (

  Lepomis macrochirus

  ) at vario us pH levels

  . Polish Journal of Environment al St udies , 14(4), 517-519.

  Chelladurai, G., Felicit t a, J., & Nagarajan, R. (2013).

  Pr o t e c t ive e ffe c t o f p r o b io t ic d ie t s o n haemat o bio chemical and hist o pat o lo gy changes o f

  M yst u s m ont a n us

  (Je r d o n 1 8 4 9 ) a g a in s t

  Aeromonas hydrophila .

  Journal of Coast al Life M edi- cine , 1(4), 259-264.

  High yield expressio n o f an AHL-lact o nase fro m

  Al-Harbi, A.H., & Uddin, N.M. (2010). Bact erial po pu- la t io n s o f Afr ica n ca t fis h ,

  Bacillus

  sp. B546 in Pichia past o ris and it s applica- t io n t o reduce

  Aeromonas hydrophila

  mo rt alit y in a q u a cu lt u r e .

  M i cr ob i a l Cel l Fa ct or i es, 9 : 3 9 (doi:10.1186/1475-2859-9-39).

  De part me nt o f Wat e r Affairs an d Fo re st r y. (1 99 6).

  So ut h African Wat er Qualit y Guidelines, Vo lume

  Oksi gen Oxygen (m g/L)

  Suhu Temper atur e (°C) pH Am oni a

  Ammonia (m g/L)

ND2 2.7 2-4 .6 2 6-2 8 5 -7.5 0 .0 1 -0 .03

P4 I2 2 .7 -5 .4 2 6-2 7 5 -7 0 .0 1 -0 .03

Ko m 2 .1 8 -5 .98 2 6-2 7 5 .5 -7 0 .0 2 -0 .04

K+ 1 .2 -3 .5 2 5-2 7 5 -8 0 .0 1 -0 .14

K- 3 .0 -6 .0 2 6-2 8 6 -7 0 .0 1 -0 .14

  Param et er ( Parameters

  ) Perl akuan Treatments

  Cl ar i as g ar i epi nus (Burchell 1822) cult ured in eart hen po nds.

  M us mus- culus ). Bulet in Vet eriner Udayana , 4(2), 55-62.

  t e rlarut d ibut uhkan o leh ikan unt u k me nghasilkan energi dari pakan yang m asuk ke d alam badannya. Se h in g ga jika DO d a lam k o n d isi o p t im u m m a ka met abolisme dalam badan ikan akan o ptimal dan energi yang dihasilkan akan banyak, sehingga akan banyak t erdapat kelebihan energi yang dapat digunakan untuk pert umbuhan.

  , 2(6), 519-523. Abumourad, I.M.K., Kenwy, A.M., Ibrahim, T.B., Hanna, M.I., & So liman, W.S. (2014).

  Kadar amo nia air pemeliharaan ikan lele dumbo mulai awal sampai akhir penelitian berkisar antara 0,01- 0,14 mg/L. Ko ndisi ini masih aman unt uk kehidupan dan pert umbuhan ikan lele dumbo karena kandungan amo nia yang mampu dit o lerir o leh ikan lele dumbo adalah 0-0,3 mg/L (

  memengaruhi laju reaksi, sert a t ekanan o smo sis dalam badan ikan , se hingga secara t idak langsu ng d ap at memengaruhi pert umbuhan ikan.

  Depart ement of Wat er Af fai r s and Forest r y , 1 9 9 6 ). Nila i p H d ap at

  Nilai pH air pemeliharaan ikan lele dumbo berkisar ant ara 5-8. Nilai pH ini berada pada kisaran o pt imum unt uk pemeliharaan ikan lele karena pH o pt imal untuk pert umbuhan ikan lele adalah 4,5-8,5 (

  ) t erhadap gambaran hist o pat o lo gi ginjal mencit (

  Tabel 2. Kisaran nilai kualit as air media pemeliharaan ikan lele dumbo

  

Table 2. The average value of wat er qualit y in African cat fish cult ure media

species fro m marine fishes.

  World Journal of Fish; M arine Sciences

  Ent erococcus faecium

  , 1996).

  pro b io t ic as a gro wt h p ro mo t e r and it s im pact o n t he expressio n o f t he ho st innat e immune in cult u red

  Oreochromis nilot icus .

  Reseach Journal of Pharmaceut ical, Biological, and Chemical Sciences

  , 5(2), 1747-1761. Adeyamo , O.K., Naigaga, I., & Alli, R.A. (2009). Effect o f handling and t ranspo rt at io n o n haemat o lo gy o f African cat fish (

  Clar ias gariepinus ).

   Journal of Fisheries Sciences

  , 3(4), 333-341. Adinat a, M.O., Sudira, I.W., & Berat a, I.K. (2012). Efek ekst rak daun asibat a (

  Angelica keisken

  Depart ement of Wat er Affairs and Forest r y

KESIM PULAN DAN SARAN

  Pemberian probio t ik

  Bacillus

  ND2 dengan dosis 10 ⁴ CFU/m L p a d a m e d ia p e m e lih a r a a n e fe k t if m e n in g ka t k a n laju p e r t u m b u h a n d a n m e n ce ga h ke ru s aka n h at i d an gin ja l ikan le le d u m b o ya n g t erserang Ae ro mo niasis.

  UCAPAN TERIM A KASIH

  Te r im a k a s ih ke p a d a t e k n is i lit k a ya s a Lab o ra t o riu m Ke se h at an Ikan ; Sau d ara Ed y Farid Wadjdy, Ahmad Wahyudi, Set iadi, dan Jo han Affandi yang membant u kelancaran penelit ian ini.

  DAFTAR ACUAN

  Abero um, A., & Jo o yandeh, H. (2010). A revie w o n o ccurrence and charact erizat io n o f t he

  Aeromonas

  178

   Diseases of Aquat ic Organism

   Basic Sciences , 4(6), 1518-1523.

  ;

  Int ernat ional Research Jour- nal of Applied

  Piaract us brachypomus ).

  (201 3). Th e relat io nship bet ween wat er qualit y paramet ers and respo nse t o densit y st ress in Pacu (

  , 44, 109-120. Naserizadeh, M., Nemat o llahi, M.A., & Ho sseini, S.V.

  Cyprinus carpio in Japan.

  (20 15). Karakt erisasi bakt eri ant i quo rum se ns- ing (AQS) sebagai penghambat virulensi penyakit pada ikan le le dumbo ( Clarias gariepinus ). J. Ris.

  in co lo r carp

  A. hydrophila

  (2001). Histo pat ho lo gy o f viremia-asso ciat ed ana- aki-byo in co mbinat io n wit h

  . 30 pp. Miyazaki, T., Kageyama, T., Miura, M., & Yo shida, T.

   Tourism Tanzania

  dan

  Kingolwira Nat ional Fish Farming Cent re, Fisheries Division M in- ist r y of Nat ural Resources

  No vit a, H., Rusmana, I., Yuhana, M., & Pasaribu, F.H.

  Akuakult ur , 10(1), 72-81.

  Mad igan , M.T., Mart in ko , J.M., & Parker, J. (2 01 1).

  Hist o pat ho lo gical sur vey o f po t ent ial bio markers fo r t he asse ssment o f co nt aminant relat ed bio - lo gical effect in species o f fish and shellfish co l- lect ed fro m Kuwait Bay, Arabian Gulf.

  Fish and Shellfish Im- munology

  Epinephelus coioides .

  st rains wit h ant ago nist ic act ivit y impro ved t he gro wt h p erfo rmance and immune resp o nses o f gro uper

  lus

  Pro bio t ic applicat io ns o f t wo do minant gut Bacil-

  , 98, 60-67. Sun , Y.Z., Yan g, H.L., Ma, R.L., & Lin , W.Y. (2 0 1 0).

  M arine Envi- ronment al Research

  St ent ifo rd, G.D., Masso ud, M.S., Al-Mudh hi, S., Al- Sarawi, M.A., Al-Enezi, M., & Lyo ns, B.P. (2014).

  Plumb, J.A. (1994). Healt h maint enance o f cult ured fish es. Principal Micro b ial Disease. CRC Pre ss, Unit ed St at es, 239 pp. Prio so er yant o , B.P., Humint o , H., Agungpriyo no , D.R., Harlina, E., Est uningsih, S., & Simanullang, S.T.P.

  Vet erinar y Record , 164, 493-499.

  st rain KJ99 infec- t io n and it s ext racellular pro duct s in t wo species o f fish.

  A. hydr ophila

  Pat ho gene sis o f

  Rey, A., Verján, N., Ferguso n, H.W., & Iregui, C. (2009).

  Pet ernakan dan Vet eriner , 4 hlm.

  (2000). St udi pat o lo gi dari abses mult ifo kal pada k a t a k ( Ran a ca t esb ei a na ). Sem i n ar N asi ona l

  Bro ck bio lo gy o f micro o rganisms. 1 3 ^th Edit io n. Prent ice-Hall Inc., USA. Mallya, Y.J. (2007). The effect o f disso lved oxygen o n fish gro wth in aquacult ure [final pro ject].

  Aquacult ure , 276, 171-178.

  Evaluasi pemberian probiot ik Bacillus pada media pemeliharaan ..... (Angela Mariana Lusiast ut i)

  Fo urie, J.J. (2006).

  Ho ssain, M.K., Ho ssain, M.D., & Rahman, H. (2007).

  FEM S M icrobiology Reviews , 29, 813-835.

  , 70, 347-361. Ho n g, H.A., Duc, L.H., & Cut t ing, S.M. (200 4). The use o f bact erial spo re fo rmers as pro bio t ics.

  . Journal of Fish Biology

  Gro wt h and energy budget o f F ₂ ‘all-fish’ gro wt h ho rmo ne gene t ransgenic co mmo n Carp

  . Dise rt at io n . Un ive rsit y o f t h e Free St at e. 116 pp. Fu , C., Li, D., Hu , W., Wan g, Y., & Zhu , W. (2 00 7).

  A pract ical invest igat ion int o cat fish (Clarias gariepinus) farming in t he Vaalhart s irriga- t ion scheme

  Int ernat ional Research Journal of M icrobiology , 2(12), 471-478.

  Life Eart h Sciences , 2(2), 47-50.

  Biologi perikanan. Yayasan Pustaka Nusant ara. Bo go r, Indo nesia. Flo res, M.L. (2011). The use o f pro bio t ic in aquacul- t ure: an o ver view.

  Pur wo kert o , In do nesia. Effendi, M.I. (2002) .

  Lap o ran Pe n e lit ian Hib ah Be rs ain g Pe rgu r u an Tinggi XIII/1 perguruan Tinggi Anggaran 2008/2009 FKIP Un ive rsit as Mu h am m ad iyah Pu r wo ke rt o .

  Clarias gar iepinus ).

  (penambahan vit amin C dan adju vant ) p ada le le du mb o (

  Aeromonas hydrophila

  6, Agricult ural Use. Aquacult ure Seco nd Edit io n. Pret o ria Republic o f So ut h Africa, 185 pp. Dini, S.M., & Purbo mart o no , M. (2009). Penggunaan vaksin p o livalen d an vaksin p o livale n p lu s se l

  Hist o pat ho lo gy o f so me diseased fishes. Journal

  Ibrahem, M.D., Mo st afa, M.M., Arab, R.M.H., & Rezk, M.A. (2008). Prevalence o f

  Luz, R.K., Mart in e z-Alvare z, R.M., De Ped ro , N., & Delgado , M.J. (2008). Gro wt h, fo o d int ake regu- lat io n an d m e t a b o lic a d a p t a t io n in Go ld fis h ( Carassius aurat us ) expo sed t o different salinit ies.

  micro bial suscept ibilit y and hist o patho lo gy o f iso - lat e s fro m d isease d Cat fish ,

  u n t u k pengendalian penyakit ikan air t awar. Balai Riset Perikanan Budidaya Air Tawar. Bo go r, 13 hlm.

  Aer om on as h ydr oph i l a

  Lusiast ut i, A.M., & Taukhid. (2011). Seleksi kandidat p r o b io t ik a n t i

  Dicent rarchus labrax . Aquacult ure , 298, 245-250.

  J.A.J. (2010). Effect o f st o cking densit y and feed- ing level o n energy expendit ure and st ress respo n- siveness in Euro pean sea bass

  , 5(2), 1-7. Lupat sch, I., Sant o s, G.A., Schrama, J.W., & Verret h,

  Clar ias gar iepinus (Burchell). Aquacult ure Research & Development

  A. hydrophila : Ant i-

  A. hydrophila infect io n

  , 6, 765-791. Lait h, A.R., & Najiah, M. (2013).

  Jour nal of Advanced Re- search

  Ibrahem, M.D. (2015). Evolut ion o f pro bio tic in aquatic wo rld: Po t ential effect , t he current stat us in Egypt an d recent pro spect ive.

   8 ^{t h} Int ernat ional Symposium on Tilapia in Aquacult ure 2008. p. 1257-1271.

  ) in Egyp t .

  O. nilot icus

  in wild and cult ured t ilapia nilo t ica (

  , 29, 803-809.

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (2), 2016, 171-179

  Ulkhaq, M.F., Widan arni, & Lusiast ut i, A.M. (2 014). Ziae i-Ne jad, S., Re zaei, M.H., Takam i, G.A., Lo vet t ,

  Bacillus

  Aplikasi probiotik untuk pencegahan infeksi D.L., Mir vaghefi, A.R., & Shako uri, M. (2005). The

  Aer om onas hydr ophi l l a Jur nal Bacillus

  p a d a ik a n le le . effect o f spp. bact eria used as pro bio t ics

  Akuakult ur Indonesia , 13(2), 105-114. o n digest ive enzyme act ivit y, sur vival, and gro wt h Fenneropenaeus indicus

  in t he Indian whit e shrimp .

  Aquacult ure , 252(2-4), 516-524.