LAMPIRAN Lampiran 1 Tabel 1: Hasil Analisis Bakteri Koliform dengan Metode MPN Sampel Kode sampel Tes perkiraan Tes penegasan MPN

  LAMPIRAN Lampiran 1 Tabel 1 : Hasil Analisis Bakteri Koliform dengan Metode MPN Tes

  Sampel Kode sampel Tes perkiraan MPN penegasan

  290/B/AB/02/201 Air Bersih 5-1-0 5-1-0 33

  4

  Lampiran 2 Flowsheet Pembuatan Media Lactose Broth

  Pembuatan Media Lactose Broth Double D bl

  Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 52 gr.

  Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 5 ml dalam 5 tabung. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit.

  Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.

  Hasil Pembuatan media lactose broth single Ditimbang seksama media Lactose Broth sebanyak 13 gr.

  Dimasukkan ke dalam beker gelas. Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml dalam 10 tabung. Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit.

  Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.

  Hasil Media Brilliant Green Lactose Broth Ditimbang seksama media Brilliant Green sebanyak 40 gr.

  Lactose Broth Dimasukkan ke dalam beker gelas.

  Dilarutkan dalam 1 liter aquadest. Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi tabung durham masing-masing 10 ml.

  Disterilkan di dalam oven dengan tekanan atm pada suhu 121˚C selama 15 menit.

  Setelah dingin di simpan di tempat yang bersih dan kering.

  Hasil Uji Perkiraan Pada tes perkiraan digunakan media Lactose

  Broth . Tes perkiraan dilakukan dengan 2 cara, yaitu single dan double.

  Single : 13 gram Lactose Broth dalam 1000 ml aquadest. Caranya : Siapkan 10 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan tabung durham dengan posisi terbalik. 10 tabung diisi dengan masing-masing 10 ml media.

  Double : 52 gram Lactose Broth dalam 1000 ml aquadest. Caranya : Siapkan 5 buah tabung reaksi yang telah diisi dengan tabung durham dengan posisi terbalik. 5 tabung tersebut diisi dengan 10 ml media.

  Hasil Sampel Masukkan sampel yang sudah dihomogenkan secara aseptik ke dalam masing-masing tabung media LB. Tabung-tabung dalam rak digoyang, supaya sampel air dengan media bercampur rata.

  Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35°C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk asam dan gas dalam tabung fermentasi.

  Bila tidak ada reaksi asam atau gas, inkubasikan kembali sampai 48 jam.

  Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan negatif. Bila pada tabung fermentasi terbentuk asam dan gas dalam waktu 48 jam, maka tes perkiraan dinyatakan positif. kemudian tabung-tabung yang positif dilanjutkan ke tes penegasan.

  Hasil Uji Penegasan Setiap tabung yang positif pada tes perkiraan dikocok. kemudian dipindahkan dengan ose/lop ke dalam media Brilliant Green Lactose Broth (BGLB).

  Inkubasikan pada inkubator pada suhu 35°C selama 24 jam. Reaksi dinyatakan positif bila terbentuk gas dalam tabung fermentasi. Bila tidak ada reaksi gas, inkubasikan kembali sampai 48 jam.

  Bila pada tabung fermentasi tidak terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka tes penegasan dinyatakan negatif. Bila pada tabung fermentasi terbentuk gas dalam waktu 48 jam, maka tes penegasan dinyatakan positif. Hitung MPN total koliform dengan menggunakan tabel MPN dari jumlah tabung BGLB yang positif, dibaca pada tabel MPN.

  Hasil Total Koliform Tabung yang dinyatakan positif pada uji perkiraan, diinokulasikan kedalam tabung yang berisi media Brilla. Masing-masing diisi satu sampai dua ose yang pengerjaanya dilakukan secara aseptis. Diinkubasi pada suhu 35˚C selama 2x24 jam. Dilakukan pengamatan dengan melihat tabung yang menunjukkan adanya terbentuk gas dalam tabung durham yang menyatakan positif. Pembacaan hasil dilakukan dengan menghitung jumlah tabung yang positif.

  Angka yang diperoleh dicocokkan dengan tabel MPN.

  Hasil

  Lampiran 3

  Tabel 2. Perkiraan Terdekat Jumlah (MPN) Koliform Untuk Kombinasi Porsi: 5 x 10 ml; 5 x 1 ml; 5 x 0,1 ml dengan 95% batas kepercayaan

  Jumlah tabung yang positif MPN / 100 ml 95% batas kepercayaan 5 tabung

  10 ml 5 tabung 1 ml 5 tabung

  0,1 ml Lebih rendah Lebih tinggi 0 0 0 < 1,8 - 6,8

  0 0 1 1,8 0,090 6,8 0 1 0 1,8 0,090 6,9 0 1 1 3,6 0,70

  10 0 2 0 3,7 0,70 10 0 2 1 5,5 1,8 15 0 3 0 5,6 1,8 15 1 0 0 2,0 0,10 10 1 0 1 4,0 0,70 10 1 0 2 6,0 1,8 15 1 1 0 4,0 0,71 12 1 1 1 6,1 1,8 15 1 1 2 8,1 3,4 22 1 2 0 6,1 1,8 15 1 2 1 8,2 3,4 22 1 3 0 8,3 3,4 22 1 3 1 10 3,5 22 1 4 0 10 3,5 22 2 0 0 4,5 0,79 15 2 0 1 6,8 1,8 15 2 0 2 9,1 3,4 22 2 1 0 6,8 1,8 17 2 1 1 9,2 3,4 22 2 1 2 12 4,1 26 2 2 0 9,3 3,4 22 2 2 1 12 4,1 26 2 2 2 14 5,9 36 2 3 0 12 4,1 26 2 3 1 14 5,9 36 2 4 0 15 5,9 36 3 0 0 7,8 2,1 22 3 0 1 11 3,5 23 3 0 2 13 5,6 35 3 1 0 11 3,5 26 3 1 1 14 5,6 36 3 1 2 17 6,0

  36

  3 2 0 14 5,7

  36 3 2 1 17 6,8 40 3 2 2 20 6,8 40 3 3 0 17 6,8 40 3 3 1 21 6,8 40 3 3 2 24 9,8 70 3 4 0 21 6,8 40 3 4 1 24 9,8 70 3 5 0 25 9,8 70 4 0 0 13 4,1 35 4 0 1 17 5,9 36 4 0 2 21 6,8 40 4 0 3 25 9,8 70 4 1 0 17 6,0 40 4 1 1 21 6,8 42 4 1 2 26 9,8 70 4 1 3 31 10 70 4 2 0 22 6,8 50 4 2 1 26 9,8 70 4 2 2 32 10 70 4 2 3 38 14 100

  4 3 0 27 9,9

  70 4 3 1 33 10 70 4 3 2 39 14 100

  4 4 0 34 14 100 4 4 1 40 14 100 4 4 2 47 15 120 4 5 0 41 14 100 4 5 1 48 15 120 5 0 0 23 6,8

  70 5 0 1 31 10 70 5 0 2 43 14 100

  5 0 3 58 22 150 5 1 0 33 10 100 5 1 1 46 14 120 5 1 2 63 22 150 5 1 3 84 34 220 5 2 0 49 15 150 5 2 1 70 22 170 5 2 2 94 34 230 5 2 3 120 36 250 5 2 4 150 58 400 5 3 0 79 22 220 5 3 1 110 34 250

  5 3 2 140 52 400 5 3 3 170 70 400 5 3 4 210 70 400 5 4 0 130 36 400 5 4 1 170 58 400 5 4 2 220 70 440 5 4 3 280 100 710 5 4 4 350 100 710 5 4 5 430 150 1100 5 5 0 240 70 710 5 5 1 350 100 1100 5 5 2 540 150 1700 5 5 3 920 220 2600 5 5 4 1600 400 4600

• 5 5 5 >1600 700

  Lampiran 4

  Tabel 3. BAKU MUTU MIKROBIOLOGI AIR NOMOR : 492/MENKES/PER/IV/2010 TANGGAL : 19 APRIL 2010

  NO JENIS SATUAN KADAR MAX YG PARAMETER DIPERBOLEHKAN

  1 E. Coli Jumlah per 100 ml Sampel

  2 Total Bakteri Jumlah per Koliform 100 ml Sampel

  Lampiran 5

  Tabel 4. Hasil Pengamatan Bakteri Koliform Jenis Nomor Sampel Hasil Test Koliform MPN

  Sampel Perkiraan Air Minum 289/B/AM/02/2014 1-0-0 1-0-0 2,0

  Air Bersih 290/B/AB/02/2014 5-1-0 5-1-0

  33 Air Badan 291/B/ABA/02/2014 5-1-1 5-1-1

  46 Air Air 292/B/AL/02/2014 4-3-1 4-3-1

  33 Limbah Air Minum 293/B/AM/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600

  Air 294/B/AL/02/2014 5-5-4 5-5-4 1600 Limbah

  Air 295/B/AL/02/2014 5-5-3 5-5-3 920 Limbah

  Air 296/B/AL/02/2014 5-4-5 5-4-5 430 Limbah

  Air 297/B/AL/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600 Limbah

  Air Bersih 298/B/AB/02/2014 3-0-0 3-0-0 7,8 Air Minum 299/B/AM/02/2014 5-0-1 5-0-1

  31 Air Minum 300/B/AM/02/2014 2-1-0 2-1-0 6,8 Air Minum 301/B/AM/02/2014 0-0-0 0-0-0 <1,8

  Air 302/B/AL/02/2014 5-5-3 5-5-2 540 Limbah

  Air 303/B/AL/02/2014 2-1-0 2-1-0 6,8 Limbah

  Air Limbah

  314/B/AL/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600 Air

  Limbah 315/B/AL/02/2014 5-4-1 5-3-1 110

  Air Bersih 316/B/AB/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600 Air Badan

  Air 324/B/ABA/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600

  Air Badan Air

  323/B/ABA/02/2014 5-5-5 5-5-5 >1600

  Lampiran 6 Gambar Alat dan Bahan

  Gambar 1. Alat Timbangan Analitik Gambar 2. Hot Plate Gambar 3. Inkubator Suhu 35°C Gambar 4. Oven

  Gambar 5. Media BGLB Gambar 6. Media Lactose Broth