MAJOR CATEGORY I (GRAM-NEGATIVE EUBACTERIA THAT HAVE CELL WALLS)

  

Lindawati Alimsardjono

Surabaya, 4 April 2011

   MAJOR CATEGORY I (GRAM-NEGATIVE EUBACTERIA THAT HAVE

   Group 5 : Facultatively anaerobic Gram- negative rods

   Subgroup 1 : Family Enterobacteriaceae

  

  Salmonella

  

  Shigella

  

  Diarrheagenic Escherichia coli

  

  Yersinia

  

  Batang Gram negatif : 0.5 m X 3.0 m

  

  Spora (-)

  

  Motilitas :

  (+) – peritrichous fagella (-) – Shigella & Klebsiella 

  Kapsul :

  ◦ Well-defned : Klebsiella

  

  Fimbriae (Pili) :

  ◦ Ikatan dengan bakteri lain, faga & sel inang

  ◦ Transfer materi genetik

  

  Dinding sel kompleks

  

  Produksi energi :

  ◦ Fermentasi karbohidrat (Anaerob / O 2 )

  ◦ Siklus TCA & sistem transpor elektron (O cukup) 2

  

  Meragi glukosa  asam (mixed acid pathway), kecuali Klebsiella (Butanediol

  fermentative pathway) 

  Reduksi nitrat  nitrit

  This is why we Fart! 

  Swiss cheese.

  Beer, wine, bread.

  Flatulence! LAB & our own muscles.

  

  Oksidase (-)

  

  DNA : 39-59% G + C

  

  Gas (+) : H 2 & CO 2 ; kecuali :

  ◦ Shigella

  ◦ Salmonella typhi

   Adanya cytochrome c dalam rantai transpor elektron

   Solusi Phenylenediamine pada kertas flter – jangan disentuh!

   Positif = biru / negatif = abu-abu

  

  Media nondiferensial / non selektif : tidak dapat dibedakan

  

  Koloni : moist, smooth – rough, gray

  

  Hemolisa - / + (tipe )

  

  Media diferensial & selektif Media cair enrichment :

  ◦ Selenite broth

  ◦ G-N broth

  ◦ Tetrathionate broth Media diferensial :

  ◦ Mac Conkey agar ◦ Eosin Methylene Blue agar (EMB) ◦ Desoxycholate agar

  Media selektif :

  ◦ Salmonella – Shigella agar

  ◦ Desoxycholate citrate agar ◦ Hektoen enteric agar ◦ Xylose-lysine desoxycholate agar

  Rusak :

  

  Panas

  

  Germisida & Desinfektan [ ] 

  ◦ Bakterisidal :

   Phenol

   Formaldehid

   -glutaraldehid

   Halogen

  ◦ Bakteriostatik :

   Quaternary ammonium compound Peka : kekeringan Tahan :

  

  Garam empedu

  

  Zat warna bakteriostatik

  

  Dingin – jangka lama

   UTI

   Wound infections

   Pneumonia

   Meningitis

   Sepsis

   Beberapa gangguan gastrointestinal

  Spesimen : Dahak Jaringan Pus

Cairan tubuh

Usapan rektal

  Media transpor :

  

  Medium Cary - Blair

  

  Medium Stuart

  

  Medium Amies Media :

  

  Kuman enterik subur, kuman lain dihambat

  

  Isi :

  ◦ karbohidrat & indikator asam basa  peragian karbohidrat

  

Media TSI (Triple Sugar Iron) agar

Uji biokimia : 

  Indole 

  Methyl red 

  Voges-Prouskauer reaction 

  Urea 

  Simmon’s Citrate agar

  

Uji serologi

DNA probe

PCR

  The disks are impregnated with specifc antibiotics.

  The streaks make up a bacterial “lawn”.

  Endotoxin shock : 1.

  Atasi shock : sistim kardiovaskuler

  ◦ Perbaikan volume intravaskuler ◦ Digitalisasi ◦

  Isoproterenol 2.

  Atasi infeksi 3. Bila perlu :

  ◦ Steroid ◦ Pressor amines ◦ Norepinephrine

  

Escherichia

   Klebsiella

   Enterobacter

  GENUS : Escherichia SPECIES :

Escherichia coli Escherichia fergusonii

   Escherichia hermannii Escherichia vulneri Escherichia blattae

  

  Batang gram negatif

  

  Spora (-)

  

  Kapsul – slime layer

  

  Fimbriae (Pili)

  ◦ Ikatan dengan bakteri lain, faga & sel inang

  ◦ Transfer materi genetik

  

  Fakultatif anaerob

  

  Meragi glukosa  asam (mixed acid pathway)

  

  Reduksi nitrat  nitrit

  

  Oksidase (-)

  

  Gas (+) : H 2 & CO 2

  

  O Ag – 164

  

  H Ag – 50 Epidemiologi

  

  K Ag – 100 O157 : H7 – Shiga like toxin – Haemorrhagic colitis O78 : H11

  Enterotoxigenic O78 : H12 O111a, 111b : H2 – Infantile diarrhea O124 : H30 - Enteroinvasive

  

  Ag permukaan :

  ◦ Fimbriae (2 tipe)

   Mannose sensitive (common pili)

   Mannose resistant

  ◦ K1 Capsular Ag

  

  Enterotoksin :

  ◦ LT ◦ ST 

  Verotoksin

  

  Lain faktor :

  ◦ Hemolisin

  ◦ Kemampuan penetrasi

  

  UTI : Cystitis s/d Pyelonephritis

  ◦ ♀ muda :

  

  Struktur anatomis

  

  Maturasi seksual

  

  Perubahan pada masa kehamilan & melahirkan

  

  Adanya tumor

  ◦ ♂ > 45 tahun : hipertrof prostat

  ◦ Predisposisi :

  

  Pemakaian alat – kateter

  

  Manipulasi mekanik pada traktus urinarius

  

  Obstruksi

  

  Diabetes

  

  Kehamilan

  

  Kegagalan pengosongan kandung kemih secara komplit

  

  Infeksi paru :

  ◦ Pneumonia

  

  > 50 tahun + underlying chronic disease

  

  Terutama aspirasi endogenous

  ◦ Empyema (> 6 hari pneumonia) 

  Neonatal meningitis

  

  Wound infection

  

  Peritonitis – sering akibat komplikasi ruptur appendix

  

  Sepsis Gram negatif – Endotoxic shock Spesimen :

  

  Urine

  

  Cairan tubuh

  

  Sputum

  

  Jaringan

  

  Pus

  

  Usapan rektal

  

  Tinja Transport media :

  

  Medium Carry-blair

  

  Medium Stuart

  

  Medium Amies Media isolasi enterik :

  

  Medium enrichment

  

  Medium diferensial

  ◦ Mac Conkey

  ◦ EMB (Eosin Methylene Blue)

  

  Medium selektif

  

  Uji Biokimia

  

  Uji Serologi

  

  DNA probe

  

  PCR

  

  Uji Sereny

  Enterobacteriaceae

Uji Biokimia Escherichia coli

.

   Lysine + Citrate - Indol + Acetate + Lactose + Motile Urease - Hydrogen sulfde - Growth on MacConkey's, EMB and blood Acid slant and acid butt in TSI, gas +

  E. coli on EMB

  

  Antimikroba

  

  Keseimbangan cairan & elektrolit (diare)

  

  Proflaksis dengan Trimethoprim- Sulfamethoxazole -  insidens Traveler’s diarrhea

  

  ETEC - Enterotoxigenic Escherichia coli

  

  EPEC - Enteropathogenic Escherichia coli

  

  EIEC - Enteroinvasive Escherichia coli

  

  VTEC - Vero cytotoxin-producing E. coli

  (= EHEC - Enterohaemorrhagic Escherichia coli = STEC - Shiga toxin-producing E. coli

  )

  

  EAEC - Enteroaggregative Escherichia coli (= EAggEC)

  Capsule, type I pili, S-fmbrial adhesin, Neonatal sepsis, meningitis

  Septic (SEC) Type I pili, P pili, Afa, hemolysin,

  CNF-1 UTI’s Uropathogenic (UPEC)

  Adhesins and Esp- like proteins Watery diarrhea Difusely adhering (DAEC)

  AAF adhesins, EAST- 1, Pet, Pic, hemolysin Watery to mucoid diarrhea Enteroaggregative

  (EAEC) EPEC factors + shigatoxin(s), EspP and hemolysin HC, HUS Enterohemorrhagic

  (EHEC) Intimin, Tir, BFP Watery diarrhea Enteropathogenic (EPEC) Ipas, VirG/IcsA Watery diarrhea to dysentery

  Enteroinvasive (EIEC) LT, ST, CF Watery to cholera- like diarrhea

  Enterotoxigenic (ETEC) Virulence Factors Disease Type

  

Summary

E. coli type Symptoms Epidemiology Pathogenesis Primary

site worldwide; all LT or ST toxins small traveler 's

  Enterotoxigenic ages; humans pili intestine diarrhea

  (ETEC) only infant diarrhea; watery, no fever, no WBC Fever, nausea, Important cause adherence to small

  Enteropathogenic vomiting. Watery of pediatric enterocytes, intestine

  (EPEC) diarrhea, no diarrhea destroys villi WBC bloody diarrhea, humans only plasmid-mediated large

  Enteroinvasive and fever associated with invasion. intestine

  (EIEC) (resembles travel Destruction of Shigella) colon cells Little or no fever Zoonosis Cytotoxic large

  Enterohemorrhagic Hemorrhagic foodborne Shiga-like intestine

  (EHEC) O157:H7 colitis. HUS verotoxin

  Enterobacteriaceae E.coli

  Klebsiella

  GENUS : SPECIES :

  Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca Klebsiella ozaenae Klebsiella rhinoscleromatis Klebsiella granulomatis (Calymmatobacterium granulomatis)

Klebsiella ornithinolytica Raoultella ornithinolytica

Klebsiella planticola Raoultella planticola Klebsiella terrigena Raoultella terrigena

  

  Batang Gram-negatif : 1-2 m X 0.5-0.8 m

  

  Kapsul (+) – media kaya karbohidrat

  

  Non motil

  

  Tumbuh 12 - 43C (optimal 37C)

  

  Fakultatif anaerob

  

  Hemolisa (-) sel darah merah kuda atau domba

  

  Lysine decarboxylase (+)

  

  Citrate (+)

  

  V.P. (+)

  

  K Ag (capsular Ag) : 80

  ◦ Isolat UK : K2, K3 dan K21 (predominan)

  

  O Ag : 5

  Resistensi terhadap : 

  Complement-mediated serum killing – O Ag

  

  

  Mati – pemanasan basah 55C dalam 30 menit

  

  Tahan kekeringan selama berbulan-bulan

  

  Kultur tetap viable beberapa minggu (tC kamar) Sistem pengambilan zat besi dengan afnitas tinggi

  

  Aerobactin

  ◦ Produksinya dapat dikorelasikan dengan virulensi

  ◦ Lokasi gen pengkodenya di Plasmid

  

  Enterochelin

   UTI

   Bronchopneumonia berat

   Lesi destruksi kronik

   Pembentukan abscess paru yang multipel (Friedlander’s pneumoniae)

   Bakteremia

   Penyakit saluran nafas atas kronik (K. rhinoscleroma)

   Donovanosis (K. granulomatis)

   Growth on MacConkey's with pink colonies Growth on EMB Lysine + Citrate + Indol -

  • /+ TSI (with gas) Non-motile Ornithine - Hydrogen sulfde -
Resisten alami : 

  Ampicillin 

  Amoxycillin 

  Penicillin lainnya 

  Chloramphenicol 

  Tetracycline Biasanya sensitif : 

  Cephalosporin (derivat yang stabil thd. - laktamase – cefuroxime & cefotaxime) 

  Gentamicin 

  Aminoglikosida lainnya Urine : 

  Trimethoprim 

  Nitrofurantoin 

  Co-amoxiclav 

  Oral Cephalosporin

  

  Complement-mediated serum killing – O Ag

  

  Fagositosis – K Ag

  Enterobacteriaceae Klebsiella pneumoniae, ESBL

  ESBLtest Cefotaxim Ceftazidim Amoxycilin/ klavulanát Aztreonam Ceftriaxon

  Enterobacteriaceae

Klebsiella pneumoniae

  GENUS : Enterobacter SPECIES : Enterobacter aerogenes Enterobacter cloacae Enterobacter agglomerans group Enterobacter gergoviae Enterobacter sakazakii Enterobacter taylorae (cancerogenus) Enterobacter amnigenus biogroup 1 Enterobacter amnigenus biogroup 2 Enterobacter asburiae Enterobacter hormaechei Enterobacter intermedium Enterobacter cancerogenus Enterobacter dissolvens Enterobacter nimipressuralis

  

  Batang Gram negatif

  

  Motil

  

  Agak mukoid

  

  Aktiftas fermentasi lebih terbatas dibanding dengan Klebsiella

   Enterobacter aerogenes :

  ◦ lysine decarboxylase (+) 

  Enterobacter cloacae :

  ◦ arginine decarboxylase (+)

  

  Kadang-kadang : faeces dan saluran respirasi manusia

  

  Infeksi rumah sakit :

  ◦ UTI

  ◦ Bakteremia Resisten :

  

  Penicillin

  

  Cephalosporin (awal)  Produksi Chromosomal -lactamase dengan aktiftas cephalosporinase

  

  Tetracyclin

  

  Chloramphenicol

  

  Streptomycin Sensitif : 

  Aminoglycoside lain : Gentamicin 

  Fluoroquinolone 

  Cefotaxime – permulaan uji; sering memiliki

inducible chromosomal cephalosporinase 

cepat terjadi resistensi selama pengobatan

   Polymixin (beda dengan Serratia)

  Enterobacteriaceae

Enterobacter cloacae

   7 species, hanya S. marcescens – penting secara klinis

  

Sering didapatkan pada infeksi nosokomial dari

traktus urinarius atau respiratori

   Implikasi kejadian bakteremik pada bangsal perawatan, bedah jantung, dan unit luka bakar

   Resistensi sedang terhadap antibiotik

   Karakteristik Utama

  ◦ Fermentasi laktosa lambat

  ◦ Produksi pigmen merah muda (pink) khas, terutama bila kultur pada suhu kamar

  S. marcescens pada media nutrient agar →

  Enterobacteriaceae

Serratia marcescens

   Hafnia alvei satu-satunya species

   Isolat dari berbagai bagian anatomi manusia dan lingkungan

   Kadang diisolasi dari tinja

   Reaksi sitrat lambat merupakan karakteristik utama

   Salmonella

   Shigella

   Yersinia

   Citrobacter

   Proteus

   Morganella

   Providencia

  GENUS : Salmonella SPECIES : Salmonella Group I strain

  Serotype Typhi Serotype Choleraesuis Serotype Paratyphi A Serotype Gallinarum Serotype Pullorum

  Salmonella Group II strain Salmonella Group IIIa strain Salmonella Group IIIb strain Salmonella Group IV strain Salmonella Group V strain (Salmonella bongori) Salmonella Group VI strain

   Kaufman – White

  ◦ Species – tipe antigenik

  Bergey (1984) ◦ 5 subgenus (I, II, III, IV, V)

  Ewing ◦ Hanya 3 species :

  Salmonella choleraesuis Salmonella typhi Salmonella enteritidis Studi Genetika

  ◦ Salmonella enterica = Genus Salmonella + Arizona

  Studi Hibridisasi DNA

◦ Salmonella subgroup ……….. Subspecies …………

  

Group 5 : Facultatively anaerobic Gram-negative

rods Subgroup 1 : FAMILY ENTEROBACTERIACEAE Genus : Salmonella Species : Salmonella bongori Salmonella choleraesuis

   Salmonella choleraesuis subsp. arizonae Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis Salmonella choleraesuis subsp. diarizonae Salmonella choleraesuis subsp. houtenae Salmonella choleraesuis subsp. indica Salmonella choleraesuis subsp. salamae

   Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis serovar choleraesuis Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis serovar gallinarum Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis serovar paratyphi A Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis serovar pullorum Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis serovar typhi Salmonella choleraesuis subsp. choleraesuis serovar typhimurium

   Batang Gram negatif : 0.7 – 1.5 X 2 – 5 m

   Spora (-)

   Kapsul (-)

   Motil – Peritrichous fagella, kecuali :

  ◦ Salmonella enterica subspecies enterica serovar gallinarum

  ) (Salmonella Group I strain Serotype Gallinarum (Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar gallinarum)

  ◦ Salmonella enterica subspecies enterica serovar pullorum (Salmonella Group I strain Serotype Pullorum) (Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar pullorum)

  

  Fakultatif anaerob

  

  Medium sederhana -  2-4 mm

  

  Laktosa Ө

  

  Sukrosa Ө

  

  Glukosa   Gas, kecuali :

  ◦ Salmonella enterica subspecies enterica serovar gallinarum (Salmonella Group I strain Serotype Gallinarum) (

  Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar gallinarum) ◦ Salmonella enterica subspecies enterica serovar typhi

  (Salmonella Group I strain Serotype Typhi)

(Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar typhi)

  Mannosa 

   Produksi H S, kecuali :

  2 ◦

  Salmonella enterica subspecies enterica serovar paratyphi A (Salmonella Group I strain Serotype Paratyphi A) (Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar paratyphi A)

   Indol Ө, VP Ө, MR , Urea Ө

   Simmon’s Citrate , kecuali :

  ◦ Salmonella enterica subspecies enterica serovar (Salmonella Group I strain Serotype Cholerasuis)

(Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar choleraesuis)

choleraesuisSalmonella enterica subspecies enterica serovar

(Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar gallinarum)

(Salmonella Group I strain Serotype Gallinarum) gallinarum

  ◦ Salmonella enterica subspecies enterica serovar (Salmonella Group I strain Serotype Paratyphi A)

(Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar paratyphi A)

paratyphi A(Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar pullorum) (Salmonella Group I strain Serotype Pullorum) Salmonella enterica subspecies enterica serovar pullorum(Salmonella Group I strain Serotype Typhi) Salmonella enterica subspecies enterica serovar typhi

  

  Lysine decarboxylase , kecuali :

  ◦ Salmonella enterica subspecies enterica serovar (Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar paratyphi A)

paratyphi A (Salmonella Group I strain Serotype Paratyphi A)

  

  Ornithine decarboxylase , kecuali :

  ◦ Salmonella enterica subspecies enterica serovar (Salmonella Group I strain Serotype Gallinarum) (Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar gallinarum) gallinarum

  ◦ (Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar typhi) ( Salmonella Group I strain Serotype Typhi) Salmonella enterica subspecies enterica serovar typhi

  Reduksi nitrat  nitrit

   Patogen intraseluler fakultatif – survive di dalam fagosit nonaktif sebaik sel epitel

  

  ◦

  ◦

   Toleransi terhadap empedu relatif besar  media isolasi Tahan terhadap bahan-bahan kimia

  ◦ Brilliant green

  ◦ Sodium tetrathionate

  ◦ Sodium dioxycholate

   Salmonella enterica subspecies enterica serovar (Salmonella Group I strain Serotype Cholerasuis) choleraesuis (Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar choleraesuis) - Kuman standar Uji preparat phenol

   Ag - Common Ag  group A s/d I H Ag – Diphasic : Phase 1 & Phase 2, kecuali a.l.:

  ◦ (Salmonella Group I strain Serotype Typhi) Salmonella enterica subspecies enterica serovar typhi

(Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar typhi)

Vi Ag : - Peranan dalam klasifikasi genus kecil

   Mungkin penting dalam patogenitas Salmonella enterica subspesies strain Serotype Typhi / Salmonella choleraesuis subspecies enterica serovar typhi (Salmonella Group I choleraesuis serovar typhi)  mencegah destruksi

   Endotoksin

  ◦

Bertanggung jawab atas terjadinya panas – stadium

bakteremia

   Enterotoksin

  ◦ Serupa labile toxin dan stable toxin dari Escherichia coli

   Cytotoxin

  ◦ Mungkin penting dalam invasi seluler

   Diperankan oleh :

  ◦ Surface antigen – Vi Ag Salmonella enterica subspecies Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar typhi) enterica serovar typhi (Salmonella Group I strain Serotype Typhi /

  ◦ Endotoksin

  ◦ Enterotoksin ◦ Kemampuan mengadakan invasi Menyerang : GI tract & Jaringan Ekstraintestinal Transmisi : oral route – makanan / minuman terkontaminasi Dosis efektif rata-rata : 3 10 Salmonella enterica subspecies enterica serovar choleraesuis subspecies choleraesuis serovar typhi) typhi (Salmonella Group I strain Serotype Typhi / Salmonella 5 8

  ◦

   Asam lambung Normal fora usus Kekebalan lokal usus

  • - 3 tipe penyakit pada manusia : Demam enterik – demam tifoid
    • - Sepsis -

      Gastroenteritis - Enterokolitis

       Terutama : Salmonella enterica subspecies enterica serovar typhi (Salmonella Group I strain Serotype Typhi / Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar typhi) Salmonella enterica subspecies enterica serovar paratyphi A (Salmonella Group I strain Serotype Paratyphi A / Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar paratyphi A) Salmonella enterica subspecies enterica serovar paratyphi B (Salmonella Group I strain Serotype Paratyphi B / Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar paratyphi B) (= S. schottmuelleri)

      ◦ Gejala lebih ringan dan angka kematian lebih rendah Masa inkubasi : 10 – 14 hari Manusia : satu-satunya hospes Salmonella enterica subspecies enterica serovar typhi (Salmonella Group I strain Serotype Typhi / Salmonella

       Angka kematian : 2 – 10%

       Mortalitas menurun pada terapi suportif yang adekuat

       Relaps : 10% penderita tanpa pengobatan

       3% penderita demam tifoid menjadi carrier kronik

      ◦ Terapi : cholecystectomy

      

      Minggu I : demam, lethargy, malaise dan rasa sakit seluruh badan, konstipasi lebih sering daripada diare

      

      Minggu II : penderita tampak sangat sakit, suhu 40C, delirium, nyeri abdomen, rose colored spot, diare

      

      Minggu III : sembuh atau terjadi

      ◦ Perforasi usus

      ◦ Perdarahan hebat

      ◦ Thrombophlebitis

      ◦ Cholecystitis

      ◦ Pneumonia

      ◦ Abscess

      

    Terutama : Salmonella enterica subspecies enterica serovar

    Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar choleraesuis) choleraesuis (Salmonella Group I strain Serotype Cholerasuis / Bisa oleh Salmonella serovar lainnya Infeksi oral  invasi melalui aliran darah  lesi fokal pada organ-organ

      ◦ Paru : Pneumonia, Pulmonary abscess ◦ Tulang : Osteomyelitis ◦ Meningen : Meningitis ◦ Jantung : Endocarditis ◦ Dll.

      Gejala : lama, demam, menggigil, anorexia, anemia dan lesi fokal, GE seringkali absen Biakan darah 

       Salmonella enterica subspecies enterica ( Salmonella Group I strain serovar typhimurium Serotype Typhimurium / Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar typhimurium)

      

      Gejala : 18-24 jam setelah termakan

      ◦

    Nausea, vomiting, headache, demam, diare

    profus, nyeri abdomen

      

      Sembuh sendiri

      

      Anak-anak dan orang tua : dehidrasi dan ketidak-seimbangan elektrolit

      

      Biakan darah (-)

      

      Biakan feces (+), pada umumnya tetap (+) stelah beberapa minggu klinis sembuh

       PEMERIKSAAN LABORATORIUM – PENTING NONTYPHOID SALMONELLA

      ◦ KULTUR TINJA

      ◦

    DETERMINASI PARAMETER EPIDEMIOLOGIK

    (GEJALA DAN MASA INKUBASI)

      ◦

      ISOLASI DARI FOOD VEHICLE YANG DICURIGAI ◦ KULTUR DARAH - SEPSIS

      TYPHOID SALMONELLA ◦

      KULTUR DARAH, TINJA ATAU URIN ◦

      OBSERVASI KLINIS : RASH YANG KHAS PADA ABDOMEN PENDERITA (ROSE SPOT)

      Bahan pemeriksaan Darah : (+) pada minggu I – Demam enterik dan sepsis Sumsum tulang : mungkin (+) setelah darah (-) Feces : (+) pada minggu I : GE dan demam tifoid (25%) minggu II & III : demam tifoid (85%) demam enterik

      Urine : (+) setelah minggu II Sputum : Pulmonary abscess Duodenal drainage : Carrier – saluran empedu

      

      Isolasi kuman Salmonella

      ◦ Medium enrichment : medium Selenite F / Tetrathionate broth

      ◦

    Medium diferential : Mac Conkey, EMB,

    Deoxycholate

      ◦ Medium selektif : S.S. agar, Deoxycholate Citrate agar, Bismuth Sulfte agar

      ◦ Direct immunofuorescence Final identifcation : suspect colonies :

    • Uji biokimia
    • Slide agglutination test dengan antisera

      Salmonella typhimurium K

       Lysine + Hydrogen sulfde + Indole + Citrate + ONPG - Malonate - Hydrogen sulfde +

    • /+ TSI reaction (with gas) Growth on MacConkey's, EMB, HEK

       Uji ko-aglutinasi

       PCR

       DNA probe

       Serologi

      

      Serum aglutinin meningkat cepat

      ◦ Minggu 2 – 3 infeksi Salmonella

      

      Minimal diambil serum diambil 2 X

      ◦ Interval 7 – 10 hari – kenaikan titer

    • Identifkasi preliminar biakan
    • Hasil (+) - clumping 2.

      Tube dilution agglutination test (Uji Widal)

    • Interpretasi hasil (+) – kenaikan titer

      4 X

      O-agglutination H-agglutination

      

      G.E. tanpa komplikasi :

      ◦ Tanpa antibiotik ◦ Obat-obatan suportif ◦

      Cegah dehidrasi dan ketidak-seimbangan elektrolit

       Demam enterik / Sepsis

      ◦ Sulfamethoxazole-Trimethoprim

      ◦ Chloramphenicol

      ◦ Ampicillin

      ◦ Quinolone

      

      Chronic Salmonella enterica subspecies

      enterica serovar typhi (Salmonella Group I strain Serotype Typhi / Salmonella choleraesuis subspecies choleraesuis serovar typhi) carriers :

      ◦ Tanpa penyakit/gangguan kandung empedu : Ampicillin

      

    ◦ Dengan penyakit/gangguan kandung empedu –

    batu : cholecystectomy

      

      Sanitasi makanan dan minuman

      

      Carrier :

      ◦ Tidak boleh berperan sebagai food handler

      ◦ Diawasi kebersihannya

      ◦ Cholecystectomy

      ◦ Ampicillin

      

      Vaksinasi

       Mary Mallon, the cook who became known as Typhoid Mary, due to her alarming tendency to spread typhoid fever via the kitchens of 1904

    New York City. When she was

    frst suspected to be the cause of the outbreak, she disappeared, becoming the subject of an intense pursuit.

      

    Once caught, she escaped, thus

    beginning the chase anew ……

       NONTYPHOID SALMONELLA PENDAPAT YANG BERBEDA :

      

    ◦ Terapi antimikroba – terjadinya status carrier

    pada orang dengan gastroenteritis

      ◦ Terapi simptomatik (rehidrasi) ◦ Terapi antimikroba selalu esensial untuk mengobati sepsis akibat nontyphoid Salmonella Tidak ada vaksin yang efektif Praktek sanitasi yang baik :

    ◦ Penyimpanan dan pengolahan makanan yang

    tepat

      ◦ Memasak makanan yang sempurna

      

      Terapi antimikroba yang cepat dan efektif

    • – esensial

      

      Dini : menurunkan derajat berat dan durasi gejala, mereduksi fatalitis dan menurunkan status carrier

      

      Peningkatan masalah dengan resistensi antibiotik

      

      Cholecystectomy – carrier dengan batu empedu

      

      Vaksin – belum jelas

      

      Sanitasi - penting A.

      Sumber Infeksi Makanan / minuman terkontaminasi Salmonella

      1. Air

      2. Susu dan produk sehari-hari (ice cream, cheese, custard)

      3. Shellfsh

      4. Dried or frozen eggs

      5. Daging dan produk daging

      6. Recreational drugs

      7. Animal dyes

      8. Household pets : turtles, dogs, cats

      ◦ Feces : Kasus subklinis tak diduga Carrier

      ◦ Binatang : sapi, rodent Insidens demam tifoid menurun

      Insidens infeksi salmonella lainnya meningkat

    • Kandung empedu
    • Saluran empedu
    • Jarang : usus & traktus urinarius

      1

      Salmonella gastroenteritis = Salmonella food poisoning

      

      Transmisi :

      ◦ Makanan

      ◦ Ingesti air terkontaminasi tinja

      

      Tipikal : penanganan makanan yang kurang tepat – makanan yang kurang sempurna memasaknya

      

      Resiko : penderita dengan asam lambung yang rendah atau tidak ada

       Reservoir zoonotik :

      ◦ Poultry

      ◦ Poultry products (telur)

      ◦ Susu pasteurisasi yang kurang tepat

      ◦ Hewan peliharaan : kura, anjing, kucing 6 Dosis infeksius : >10 Penyebaran juga dari orang ke orang melalui rute fekal-oral Carrier

      GENUS : SHIGELLA SPECIES : SHIGELLA DYSENTERIAE - SEROGROUP A SHIGELLA FLEXNERI - SEROGROUP B

    SHIGELLA BOYDII - SEROGROUP C

    SHIGELLA SONNEI - SEROGROUP D

      SHIGELLA SPECIES :

      Dapat didiferensiasi berdasarkan antigen

    • O dan reaksi biokimia Penyebab penyakit gastrointestinal =
    • disentri basiler = SHIGELLOSIS
    • BERAT RINGAN PENYAKIT

    • MORTALITAS
    • EPIDEMIOLOGI BERVARIASI PADA SETIAP SPESIES

      

      

      

       FAKULTATIF ANAEROB, TETAPI TUMBUH BAIK DALAM SUASANA AEROB

      

      

      LAKTOSA (-), KECUALI SHIGELLA SONNEI

      

      SALICIN (-)

       GLUKOSA (+), GAS (-), KECUALI S.

      FLEXNERI 6 

      H S (-) 2

      

      LYSINE DECARBOXYLASE (-)

       MANNITOL (+) – S. FLEXNERI, S. BOYDII, S.

      SONNEI

      

      MANNITOL (-) – S. DYSENTERIAE

       < RESISTEN TERHADAP AGEN FISIK & KIMIA

      

       TOLERANS - SUHU RENDAH DAN LEMBAB

       TAHAN > 6 BULAN DALAM AIR PADA SUHU KAMAR

      

      ◦ A - 12

      ◦ B - 6

      ◦ C - 18

      ◦ D - 1 MINOR ANTIGEN : A, B, C  SUBGROUP ANTIGEN K / ENVELOPE :

      ◦

      ◦ MEMPENGARUHI REAKSI SEROLOGI DARI ANTIGEN O H ANTIGEN (-)

    FIMBRIAE (+) – SEROGROUP B – SEROTIPE 1 – 5

    FIMBRIAE (-) – SEROGROUP B – SEROTIPE 6, DLL.

      

      LPS :

      ◦ SMOOTH – TIPE KOLONI FASE I

      

      SHIGELLA SONNEI & SHIGELLA FLEXNERI

      

      PLASMID – BESAR, 120 – 140 Mda

      

       O-SPECIFIC SIDE CHAINS

      ◦ ROUGH – TIPE KOLONI FASE II

      

      PLASMID (-) - AVIRULEN

       GENE UNTUK PROTEIN TOKSIN ADA PADA KHROMOSOM

       NEUROTOKSIK, SITOTOKSIK & ENTEROTOKSIK

       BM. 70.000 :

      ◦

      1 SUBUNIT A – 32.000 BM ◦

      5 SUBUNIT B – 6. 500 BM

       ENDOTOKSIN

      ◦ LPS – BERPERAN PADA INFLAMASI USUS PROTEIN Ipa

      ◦ MEDIASI INVASI PROTEIN Mxi-Spa

      ◦ TERLIBAT DALAM SEKRESI DARI PROTEIN Ipa ◦ MUNGKIN TERLIBAT PADA PERLEKATAN DARI SHIGELLA PADA SEL HOSPES PROTEINS IcsA DAN IcsB

      ◦ TERLIBAT DALAM PENYEBARAN INTERSELULER DARI SHIGELLA SHIGA TOXIN

      ◦

      Shigella dysenteriae

      BERPERAN DENGAN MENGHAMBAT SINTESA PROTEIN SEL HOSPES – SEBUAH EFEK YANG MENYUMBANG PERKEMBANGAN KERUSAKAN MUKOSA KOLON SELAMA SHIGELLOSIS

      

      MASA TUNAS : 1 – 3 HARI

      

      KAKU PERUT / CRAMPS, DEMAM, MENGGIGIL, KEJANG, TENESMUS, TINJA CAIR, LENDIR & DARAH

      

      ORANG SEHAT : 2 – 7 HARI SEMBUH

      

      INDIVIDU MUDA / TUA / MALNUTRISI  LEBIH LAMA

      

      KEMATIAN :

      ◦ DEHIDRASI & KETIDAK SEIMBANGAN ELEKTROLIT

      ◦

      

      Dapat didefnisikan dalam berbagai cara yang berbeda

      

      Diare dalam volume kecil yang sering berisi darah dan lendir

      

    the petechial hemorrhages in the cecum of a Rhesus

      

    the appearance of the intestinal mucosa in a case of colitis

    due to Shigella sp. bacteria in a Rhesus monkey.

      

    This man developed necrosis of the intestines due to

    a Shigellosis infection resulting in his death.

       SPESIMEN :

      ◦ TINJA

      ◦ USAP REKTAL - SIGMOIDOSCOPY 

      ◦ ADANYA JUMLAH LEKOSIT YANG MENINGKAT

       KULTUR

      ◦

      ◦

      IDENTIFIKASI DARI ISOLAT DENGAN UJI BIOKIMIA DAN SEROLOGI 

      SEGERA : ◦ MEDIA ISOLASI ◦

       Dapat tumbuh pada

      ◦ simple media

       nutrient agar

      ◦ enriched media

       blood agar

       Koloni : konveks sirkuler transparan

    dengan tepi intak

       Ukuran : 1-2 mm

      

    colonial morphology displayed by Gram-negative

    Shigella bacteria on a blood agar plate (BAP).

       media selektif

      ◦ MacConkey’s agar

      ◦ NON lactose fermenting colonies

       MacConkey agar : koloni colorless

      Desoxycholate Citrate Agar Lactose Lactose non

      colonial morphology displayed by Shigella boydii bacteria

    cultivated on a Hektoen enteric (HE) agar surface; colonies of

      

    Lysine iron agar tests

    for the detection of both lysine decarboxylase

    (LDC), and hydrogen

    sulfide (H2S) production, when

    attempting to identify

    members of the family Enterobacteriaceae, especially for Salmonella spp. and

       REHIDRASI

       ANTIBIOTIK

      ◦ AMPICILLIN / AMOXYCILLIN

      ◦ TRIMETHOPRIM – SULFAMETHOXAZOLE 

      MENGURANGI DERAJAT BERATNYA PENYAKIT DAN DURASI DARI GEJALA SHIGELLOSIS

      

      ◦

      

      ◦ MISAL : LOMOTIL ◦ KONTRAINDIKASI UNTUK SHIGELLOSIS DAN DIARE INVASIF

    LAINNYA – CENDERUNG UNTUK

    MENIMBULKAN EKSASERBASI GEJALA

       MANUSIA – RESERVOIR SATU-SATUNYA

       PENULARAN : 4 F – FOOD, FINGERS, FECES, FLIES

      

      LIVE ATTENUATED SHIGELLA VACCINE

      

      PRAKTEK SANITASI YANG BAIK

      ◦

      ◦ PENGOLAHAN AIR YANG BAIK - KHLORINASI AIR

      ◦

      ◦ PEMAKAIAN SARUNG TANGAN OLEH PERSONIL

    • DETEKSI & PENGOBATAN “CARRIER”

      GENUS : Yersinia SPECIES :

    Yersinia enterocolitica

    Yersinia frederiksenii Yersinia intermedia Yersinia kristensenii Yersinia rohdei Yersinia aldovae Yersinia bercovieri Yersinia mollaretii Yersinia pestis Yersinia pseudotuberculosis

      

    Yersinia

      ◦ Y. pestis

      ◦

    plague

       Batang pendek atau kokobasil Gram negatif

       Spora (-)

       Non-motil

       Single, berpasangan atau rantai (media cair)

       Pleomorphism – terutama pada kultur tua : pear shaped atau globular cells (diduga sel yeast)

       Kapsul (+) – smear eksudat atau kultur 37C

       Smear jaringan dengan metilen biru atau Giemsa : bipolar staining (“safety pin” appearance)

      

    Aerobik atau anaerobik 0 - 37C (optimum

    27C)

       BAP : koloni kecil, translucent, non-hemolisa (24 jam)

      

    Mac Conkey medium : tumbuh – otolisis

    setelah 2-3 hari

        : 55C – 5 menit atau 0.5% phenol – 15 menit

       Sensitif – kekeringan

       Tetap viable : kultur basah – beberapa

      Klinis : 

      3 bentuk pada manusia : bubonic, pneumonic, sepsis 