UJI IMUNOSTIMULAN EKSTRAK ETANOL KELOPAK BUNGA ROSELA (Hibiscus sabdariffa L.) TERHADAP AKTIVITAS FAGOSITOSIS MAKROFAG DAN DETEKSI SENYAWA FLAVONOID

  

UJI IMUNOSTIMULAN EKSTRAK ETANOL

KELOPAK BUNGA ROSELA (Hibiscus sabdariffa L.)

TERHADAP AKTIVITAS FAGOSITOSIS MAKROFAG

DAN DETEKSI SENYAWA FLAVONOID

  Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi

  

RISSA EKA SUSANTI

0808010092

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

PURWOKERTO

  

2013

UJI IMUNOSTIMULAN EKSTRAK ETANOL KELOPAK BUNGA ROSELA (Hibiscus sabdariffa L.) TERHADAP AKTIVITAS FAGOSITOSIS MAKROFAG DAN DETEKSI SENYAWA FLAVONOID

  Skripsi Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

  Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi

PERNYATAAN

  Yang bertandatangan dibawah ini, saya: Nama : Rissa Eka Susanti Nim : 0808010092 program studi : Farmasi Fakultas/Universitas : Farmasi/Universitas Muhammadiyah Purwokerto

  Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses penelitian saya yang telah dilakukan sesuai dengan prosedur penelitian yang benar dengan arahan dari dosen pembimbing dan bukan hasil penjiplakan dari hasil karya orang lain. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun yang tidak diterbitkan dari penulis lain, telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam daftar pustaka dibagian akhir skripsi ini.

  Demikian pernyataan ini dan apabila dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggung jawabkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku.

  Purwokerto, Januari 2013 Yang menyatakan,

  Rissa Eka Susanti

  

INTISARI

RISSA EKA SUSANTI. Uji Imunostimulan Ekstrak Etanol Kelopak Bunga Rosela

(Hibiscus sabdariffa L.) terhadap Aktivitas Fagositosis Makrofag dan Deteksi Senyawa

Flavonoid Di bawah bimbingan DINIATIK dan SUPARMAN.

  

Latar belakang : Manusia memerlukan imunostimulan untuk meningkatkan kualitas

imun tubuh dalam menghadapi beberapa penyakit infeksi. Imunostimulan adalah bahan

yang dapat meningkatkan kerja komponen sistem imun manusia. Flavonoid pada

tumbuhan dapat berfungsi sebagai imunostimulan. Bunga rosela memiliki kandungan

flavonoid sehingga diduga memiliki aktivitas imunostimulan.

  Tujuan Penelitian : Membuktikan bahwa ekstrak etanol kelopak bunga Rosela (Hibiscus

sabdariffa L.) mempunyai efek imunostimulan terhadap aktivitas fagositosis makrofag

serta mengidentifikasi golongan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam

ekstrak etanol kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.).

  Metode Penelitian : Penelitian ini menggunakan model bakteri Staphylococcus aureus sebagai antigen penstimulasi fagositosis makrofag in vivo dan latex sebagai antigen in

vitro . Kemampuan fagositosis makrofag ditunjukkan oleh aktivitas dan kapasitas

makrofag dalam memfagosit latex. Perhitungan jumlah sel menggunakan

haemocytometer. Analisis kandungan senyawa flavonoid menggunakan kromatografi

lapis tipis. _®

  Hasil : Hasil pengamatan morfologi makrofag setelah infeksi S. aureus pada Levamisol _®

dan Stimuno serta ekstrak dosis 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB dan 400 mg/KgBB

menunjukan adanya makrofag teraktivasi. Peningkatan dosis ekstrak mengakibatkan

peningkatan jumlah makrofag yang memfagosit latex dan jumlah latex yang difagosit

makrofag. Kemampuan fagositosis makrofag pada ekstrak etanol kelopak bunga Rosela

dosis 400 mg/KgBb tidak berbeda nyata atau sebanding dengan terhadap Levamisol dan _® Stimuno dosis 9,1 mg/KgBb. Hasil kromatografi lapis tipis menunjukkan bahwa ekstrak etanol kelopak bunga Rosela memiliki kandungan flavonoid.

  

Kesimpulan : Ekstrak etanol kelopak bunga Rosela memiliki efek imunostimulan

terhadap aktivitas fagositosis makrofag. Ekstrak etanol kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L .) memiliki kandungan flavonoid.

  Kata kunci : Imunostimulan, Fagositosis, Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa L.), Flavonoid

  

ABSTRACT

RISSA EKA SUSANTI. Imunostimulant Test of Rosela Flower Ethanolic Extract

(Hibiscus sabdariffa L.) to the Macrophaga phagocyitosis Activity and Flavonoid

Compound Detection.

  Under direction of DINIATIK and SUPARMAN.

  

Background : Human need imunostimulant for increase the quality of imune system to

confront some infection deseases. Imunostimulant is the materials which can increase

performance of imune system element of human. Flavonoid in plants have function as

imunostimulan. Rosela flowers had contains flavonoid so that its expected to have

imunostimulant.

  Objective : The aims of this research was to prove that Rosela flower ethanolic Extract

(Hibiscus sabdariffa L.) have imunostimulant effect represented by macrophaga

phagocytosis activity, and determine the seconda rymetabolic compounds contained in

ethanolic extract of Rosela flower.

  Methods : The researh used Staphylococcus aureus as respons imune model. Its function

as in vivo antigen of macrophaga phagocytosis imunostimulator and latex as in vitro

antigen . The phagocytosis ablity was shown by activities and capacyties of macrophag in latex phagocyt. The plant compounds analized used Tin Layer Cromatografy.

  

Result : The observe result of macrophaga morphology after infect by S. Aureus in

_{® ®} Levamisol , Stimuno and extract dose 100 mg/KgBB, 200 mg/KgBB and 400 mg/KgBB

showed presence of macrophaga activated. The increasing of extract dose caused the

increasing of macrophaga number which phagocyt of latex and the number of latex which

was phagocyt by macrophaga. The macrophaga phagocytosis ablity of flower ethanolic

_®

extract in dose 400 mg/KgBb weren’t deference with Stimuno 9,1 mg/KgBb. Tin Layer

  

Cromatografy showed that flavonoid compound contained in Rosela flower Petals

ethanolic extract.

  

Conclution : Rosela flower Petals ethanolic Extract (Hibiscus sabdariffa L.) had

imunostimulant effect to the macrophaga’s phagocytosis. Rosela flower Petals ethanolic Extract (Hibiscus sabdariffa L) contain flavonoid.

  Key words : Imunostimulant, phagosytosisy, Rosela flower(Hibiscus sabdariffa L.), Flavonoid .

PERSEMBAHAN Karya ini saya persembahkan kepada:

  

 Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan hidayah-Nya

sehingga penulis dapat membuat karya ini.

  

 Bapak dan Ibu yang telah memberikan kasih sayang, doa dan segala

dukungannya sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ini.

   Maz aziz, ragil, anak-anak tcc,

 Teman-teman yang selalu ada dan memberikan dukungan kepada

penulis.

   Anak-anak tcc

  M

 O T T O 

   

  “Kita  dapat menjadi satu diantara yang terbaik atau sekedar satu diantara sisa dari  yang  lainnya” 

    “Masa  depan terletak pada orang‐orang yang mampu melihat kemungkinan sebelum  kemungkinan

   itu menjadi terlalu pasti”    “Iman  tanpa ilmu sama dengan pelita ditangan bayi, sedangkan ilmu tanpa iman  bagaikan  pelita ditangan pencuri” 

    “Semakin  banyak Anda  belajar, semakin sadar Anda betapa banyak yang tidak Anda  ketahui”

      Apa

 gunanya mempunyai pengetahuan yang baik, tetapi menyimpannya untuk diri Anda 

sendiri”  

                                           

KATA PENGANTAR

  Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT, berkat rahmat dan karunia-Nya, penulis memperoleh kekuatan, tenaga, dan pikiran, sehingga dapat menyelesaikan skripsi dengan judul“UjiImunostimulan Ekstrak EtanolBunga Rosela (Hibiscus sabdariffa L.)Terhadap Aktivitas FagositosisMakrofagdan Profil Kromatografi Lapis Tipis” memenuhi salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi program studi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  Penulismengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Diniatik,M.Sc., Apt selaku pembimbing I dan Bapak Suparman, M.Sc., Apt selaku pembimbing II yang telah berkenan memberikan saran, nasehat, dan koreksi yang sangat penting sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas skripsi ini. Terima kasih penulis ucapkan pula kepada :

  1. Drs. H.Moeslich Hasanmihardja, Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  2. Bapak dan Ibu tercinta.

  3. Bapak dan Ibu dosen serta staf TU Fakultas Farmasi yang telah memberi kemudahan sehingga skripsi terselesaikan.

  4. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah membantu dari pelaksanaan penelitian hingga penyusunan tugas skripsi ini.

  Penulis menyadari bahwa masih banyak terdapat kekurangan dalam skripsi ini. Penulis berharap semoga hasil penelitian ini dapat bermanfaat.

  Purwokerto, Januari 2013 Penyusun

RIWAYAT PENDIDIKAN

  Nama : Rissa Eka Susanti Tempat, tanggal lahir : Brebes, 21 Desember 1989 Riwayat Pendidikan : SMA N 1 Bumiayu

  Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Purwokerto

  DAFTAR ISI Halaman

  HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN ........................................................................ ii HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... iii SURAT PERNYATAAN ............................................................................... iv

  INTISARI ........................................................................................................ v

  ABSTRACT ...................................................................................................... vi

  PERSEMBAHAN ........................................................................................... vii MOTTO .......................................................................................................... viii KATA PENGANTAR .................................................................................... ix RIWAYAT HIDUP ......................................................................................... x DAFTAR ISI ................................................................................................... xi DAFTAR TABEL .......................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xv DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xvi

  BAB I PENDAHULUAN .......................................................................... 1 A. Latar Belakang ......................................................................... 1 B. Perumusan Masalah ................................................................. 2 C. Tujuan Penelitian ..................................................................... 3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................. 4 A. Uraian Tumbuhan .................................................................... 4 1. Sistematika Tanaman ........................................................ 4 2. Nama Lain ........................................................................ 4 3. Morfologi Tanaman .......................................................... 4 4. Kegunaan Bagi Masyarakat .............................................. 5 5. Kandungan Kimia ............................................................. 5 B. Imunostimulan ......................................................................... 6 C. Fagositosis ............................................................................... 6 D. Makrofag ................................................................................. 7

  E. Staphylococcus aureus ............................................................ 8

  F. Kontrol Positif ......................................................................... 8

  G. Levamisol HCL ......................................................................... 9

  H. Kromatografi Lapis Tipis .......................................................... 9

  BAB III METODE PENELITIAN ............................................................... 11 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................... 11 B. Alat dan Bahan ......................................................................... 11 a. Alat ................................................................................... 11 b. Bahan ................................................................................ 11 C. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................. 12 D. Batasan Variabel Penelitian ..................................................... 12 E. Cara Kerja ................................................................................ 13 1. Penyiapan dan Pengumpulan Bahan Tanaman ................ 13 2. Pembuatan Simplisia ........................................................ 13 3. Pembuatan Ekstrak Etanol Bunga Rosela ........................ 13 4. Penyiapan Bakteri Uji ...................................................... 14 5. Penetapan Dosis Ekstrak Etanol Bunga Rosela ............... 14 6. Penetapan Dosis Levamisol HCL ..................................... 15 7. Penetapan Dosis Stimuno ® ............................................. 15 8. Pemberian Ekstrak Pada Hewan Uji Per Oral .................. 16 9. Pembuatan Larutan Stok untuk Mencit ............................ 16 10. Pembuatan Medium RPMI untuk Kultur Makrofag .......... 17 11. Uji Fagositosis..................................................................... 17 12. Identifikasi Senyawa Flavonoid ......................................... 19 F. Analisis Data ........................................................................... 20 1. Uji Aktivitas Fagositosis Makrofag ................................. 20 2. Analisis untuk KLT .......................................................... 20 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... 21 A. Hasil penelitian ......................................................................... 21

  1. Determinasi Tanaman .......................................................... 21

  2. Penyiapan Bahan Simplisia .................................................. 21

  3. Pembuatan Ekstrak Etanol Bunga Rosela ............................ 21

  4. Penyiapan Bakteri Uji........................................................... 22

  5. Uji Fagositosis ...................................................................... 23

  B. Pembahasan ............................................................................... 26

  1. Uji Fagositosis ...................................................................... 26

  2. Uji Kandungan Senyawa ...................................................... 28

  BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 31 A. KESIMPULAN ....................................................................... 31 B. SARAN .................................................................................... 31 DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 32 LAMPIRAN .................................................................................................... 35

  

DAFTAR TABEL

Halaman

  1. Hasil ekstraksi simplisia Bunga Rosela ..................................................... 22

  2. Perhitungan Jumlah Bakteri ....................................................................... 23

  3. Pengamatan jumlah makrofag yang memfagosit latex tiap 100 sel ............ 25

  4. Pengamatan jumlah latex makrofag yang difagosit tiap 100 sel ................ 25

  5. Profil KLT flavonoid ................................................................................. 29

  

DAFTAR GAMBAR

Halaman

  1. Hasil pengamatan morfologi makrofag pada perbesaran 400x ............................. 24

  3. Pengamatan morfologi makrofag .......................................................................... 25

  4. Hasil uji kandungan senyawa flavonoid dengan KLT .......................................... 29