EFEK IMUNOSTIMULATORI BEBERAPA FRAKSI TERIPANG LOKAL Phyllophorus sp TERHADAP HISTOLOGI LIMPA MENCIT (Mus musculus) YANG DIINFEKSI Mycobacterium tuberculosis Repository - UNAIR REPOSITORY
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Lampiran 1. Penghitungan Dosis Ekstrak dan Fraksi Teripang Phyllophorus sp
Menurut Dick, et al., (2010) tiap 1 gr berat basah teripang setara dengan 0,025 - 0,04 mg glikosida triterpen dengan kadar air 80-90%. Berdasarkan Chang- Lee et al., (1989) dan Aminin et al. (2004) frondosit A merupakan jenis glikosida triterpen, tiap 100 gr glikosida triterpen mengandung 19,4 gr frondosit A.
Diketahui dosis optimal frondosit A adalah 10μg/kg BB/hr, maka dengan standar berat badan manusia (70 kg) dosis optimalnya menjadi 700μg/70 kg BB/hr. Bila dikonversikan pada mencit yang memiliki berat 20 gr maka dosis optimal pada mencit adalah 700 x faktor konversi hewan-manusia = 700 x 0,0026/ 20 gr mencit = 1,82 μg/ 20 gr mencit Jika dosis optimal yang diberikan tiap 20 gr mencit adalah 1,82 μg/ 20 gr mencit, maka dalam 1,82 μg frondosit A mengandung crude glikosida triterpen sebesar: x 1,82μg = 9,38μg crude glikosida triterpen
Jika 1 gr berat basah setara dengan 0,025 mg glikosida triterpen. Maka berat basah yang diperlukan untuk mengandung 9,38μg glikosida triterpen adalah 0,3752 gr/berat basah. Untuk Phyllophorus sp. presentase kadar air sebesar 87,69 % dan presentase berat kering sebesar x 100% = 12,31 %. Maka berat kering yang mengandung glikosida triterpen sebanyak 0,3752 gr/berat basah adalah 0,3752 x = 0,0462 gr/berat kering.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
a. Dosis ekstrak kasar (crude extract) Berat basah yang didapatkan sebanyak 1.153, 30 gr dan menghasilkan 142 gr berat kering. Berat serbuk yang diekstrak 136,4 gr berat kering dan menghasilkan ekstrak kasar sebanyak 1,91 gr.Banyak ekstrak kasar yang digunakan = = 6,469 x 10-4 gr/20 gr mencit = 6,5 x 10-4 gr/20 gr mencit.
Jika volume yang diberikan per 20 gr mencit = 0,5 ml suspensi EK, maka tiap 0,5 ml mengandung 6,5 x 10-4 gr EK. Sehingga setiap ml setara dengan 0,00128 gr ekstrak kasar/ml suspensi CMC. Jumlah total serbuk kering Phyllophorus sp. adalah 282,3 gr. Setelah dilakukan maserasi dan evaporasi menghasilkan fraksi nonpolar sebesar 1,7919 gr, fraksi semipolar 0,3735 gr, dan fraksi polar 1, 2994 gr.
b. Dosis fraksi nonpolar (FN)
Untuk berat kering 0,0462 gr/20 gr mencit. = 2,9 x 10-4gr/0,5 ml suspensi
Jadi per ml suspensi CMC 0,5 % setara dengan 0,000587 gr/ml fraksi nonpolar.c. Dosis fraksi semipolar (FS)
Untuk berat kering 0,0462 gr/20 gr mencit. = 6,1 x 10-5gr/0,5 ml suspensi
Jadi per ml suspensi CMC 0,5 % setara dengan 0,00012gr/ml fraksi semipolar.d. Dosis fraksi polar
Untuk berat kering 0,0462 gr/20 gr mencit. = 3,07 x 10-4gr/0,5 ml suspensi
Jadi per ml suspensi CMC 0,5 % setara dengan 0,00061 gr/ml fraksi polar.
Pembuatan larutan CMC 0,5 % Larutan CMC 0,5 % = 0,5 gr serbuk CMC dilarutkan dalam 100 ml aquadesLampiran 2. Data diameter Germinal Center
Ulangan Injeksi M.tb 1 kali Injeksi M.tb 2 kali ke-
FN
Rerata 103,563 90,731
FS 1 75,6465 69,3195 2 74,037
65,490
3 76,4235 70,4295 4 82,251 76,923 5 76,146 71,373
Rerata 76,901 70,707
FP
1 73,038 71,484 2 70,374 72,372 3 72,2055 71,595 4 75,924 71,096 5 74,259 69,875
KN
1 54.384 56.115 2 56.665 68.614 3 62.612 52.614 4 58.219 54.547 5 62.049 55.333
1 99,8445 88,36 2 102,675 87,024 3 105,9495 85,5255 4 102,7305 95,4045 5 106,6155 97,347
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Rerata 73,161 71,284
Rerata 58,786 57,445
53.29 5 56.665 54.511 Rerata 58,388 58,673
1 56.511 56.115 2 60.534 64.216 3 56.215 65.234 4 62.014
KP
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Lampiran 3. Output uji statistik diameter germinal center dengan SPSS 16.0 Test of Homogeneity of Variances
diameter_GC Levene Statistic df1 df2 Sig.
2.476
9 40 .024
ANOVA
diameter_GC Sum of Squares df Mean Square F Sig. Between 10619.943
9 1179.994 73.917 .000 Groups Within Groups 638.551 40 15.964 Total 11258.495
49 Robust Tests of Equality of Means diameter_GC a Statistic df1 df2 Sig.
Brown-
73.917 9 24.789 .000
Forsythe a. Asymptotically F distributed.Post Hoc Tests Multiple Comparisons
Dependent Variable:diameter_GC
(I) Sed_wa ktu
(J) Sed_ waktu
Mean Difference (I- J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound
Games-Howell KN17 KN28 1.341200 3.257270 1.000 -13.41294 16.09534 KP17 .398000 1.980532 1.000 -8.04924 8.84524 KP28 .112600 2.967297 1.000 -12.98516 13.21036 FP17 -14.374200
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
- 1.830565 .003 -22.53429 -6.21411
- 1.625181 .011 -20.91229 -4.08491
- 2.105727 .001 -26.95995 -9.26965
- 2.426791 .022 -22.14905 -1.69295
- 1.997552 .000 -53.27124 -36.28236
- 2.842160 .000 -44.34682 -19.54558
- 3.002076 .042 -30.76740 -.66340
- 3.177353 .014 -34.21126 -4.70074
- 3.106719 .000 -60.93741 -31.29859
- 3.706665 .000 -48.94629 -17.62851
- 1.524847 .000 -21.26149 -8.28291
- 1.270985 .002 -19.23432 -6.55888
- 1.846152 .000 -26.28718 -10.73842
FN17 -44.776800
FS28 -11.921000
KN28 KN17 -1.341200 3.257270 1.000 -16.09534 13.41294 KP17 -.943200 3.095803 1.000 -15.77861 13.89221 KP28 -1.228600 3.803464 1.000 -17.21453 14.75733 FP17 -15.715400
FP28 -13.839800 2.881441 .075 -29.43529 1.75569 FS17 -19.456000
FS28 -13.262200 3.398648 .085 -28.16073 1.63633 FN17 -46.118000
FN28 -33.287400
KP17 KN17 -.398000 1.980532 1.000 -8.84524 8.04924 KN28 .943200 3.095803 1.000 -13.89221 15.77861 KP28 -.285400 2.789093 1.000 -13.30896 12.73816 FP17 -14.772200
FP28 -12.896600
FS17 -18.512800
FS17 -18.114800
FP28 -12.498600
FN28 -31.946200
- 2.205336 .014 -21.97712 -2.66088
- 1.721744 .000 -52.38109 -37.96851
- 2.655572 .000 -44.58394 -20.10446
- 2.684679 .034 -27.66383 -1.30977
- 2.879344 .010 -31.24500 -5.20980
- 2.801205 .000 -57.90613 -31.87267
- 3.454621 .000 -46.53079 -17.58681
FN28 -32.058800
FN28 -19.447600
KP28 12.611200 2.549068 .067 -1.10275 26.32515 FP17 -1.875600 1.021697 .705 -6.73823 2.98703 FS17 -5.616200 1.458417 .135 -13.05621 1.82381 FS28 .577600 1.892673 1.000 -9.38503 10.54023 FN17 -32.278200
FN28 -17.572000
FP28 1.875600 1.021697 .705 -2.98703 6.73823 FS17 -3.740600 1.684261 .515 -11.08039 3.59919 FS28 2.453200 2.071706 .950 -7.10229 12.00869 FN17 -30.402600
KP28 14.486800
KP17 14.772200
KN28 15.715400
FP17 KN17 14.374200
FP28 -12.611200 2.549068 .067 -26.32515 1.10275 FS17 -18.227400
FS28 -12.033600 3.121834 .083 -25.42695 1.35975 FN17 -44.889400
KP28 KN17 -.112600 2.967297 1.000 -13.21036 12.98516 KN28 1.228600 3.803464 1.000 -14.75733 17.21453 KP17 .285400 2.789093 1.000 -12.73816 13.30896 FP17 -14.486800
FN28 -32.344200
FN17 -45.174800
FS28 -12.319000
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
- 1.830565 .003 6.21411 22.53429
- 3.002076 .042 .66340 30.76740
- 1.524847 .000 8.28291 21.26149
- 2.684679 .034 1.30977 27.66383
- 1.546889 .000 -37.00574 -23.79946
- 2.545688 .011 -29.92601 -5.21799
- KN28 13.839800 2.881441 .075 -1.75569 29.43529 KP17 12.896600
- 1.270985 .002 6.55888 19.23432
- 1.297347 .000 -38.77143 -25.78497
- 2.402243 .011 -32.32716 -6.56804
- 2.105727 .001 9.26965 26.95995
- 3.177353 .014 4.70074 34.21126
- 1.846152 .000 10.73842 26.28718
- 2.879344 .010 5.20980 31.24500
- 2.750208 .028 -26.10755 -1.55525
KP17 32.344200
KN28 33.287400
FN28 KN17 31.946200
FN28 12.830600
FS28 32.855800
FS28 KN17 11.921000
FP28 32.278200
KP17 45.174800
KN28 46.118000
FN17 KN17 44.776800
FN28 -20.025200
KP28 12.033600 3.121834 .083 -1.35975 25.42695 FP17 -2.453200 2.071706 .950 -12.00869 7.10229 FP28 -.577600 1.892673 1.000 -10.54023 9.38503 FS17 -6.193800 2.318423 .323 -16.09567 3.70807 FN17 -32.855800
KN28 13.262200 3.398648 .085 -1.63633 28.16073 KP17 12.319000
FS17 26.662000
FP17 3.740600 1.684261 .515 -3.59919 11.08039 FP28 5.616200 1.458417 .135 -1.82381 13.05621 FS28 6.193800 2.318423 .323 -3.70807 16.09567 FN17 -26.662000
FN28 -13.831400
KP28 18.227400
KP17 18.512800
KN28 19.456000
FS17 KN17 18.114800
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
- 1.864398 .000 -34.49966 -18.82434
- 2.426791 .022 1.69295 22.14905
- 2.205336 .014 2.66088 21.97712
- 2.220633 .000 -42.53984 -23.17176
- 3.003144 .004 -32.80022 -7.25018
- 1.997552 .000 36.28236 53.27124
- 3.106719 .000 31.29859 60.93741
- 1.721744 .000 37.96851 52.38109
- FP17 30.402600
- 1.546889 .000 23.79946 37.00574
- 1.297347 .000 25.78497 38.77143
- 1.864398 .000 18.82434 34.49966
- 2.220633 .000 23.17176 42.53984
- 2.668290 .040 .59232 25.06888
- 2.842160 .000 19.54558 44.34682
- 3.706665 .000 17.62851 48.94629
- 2.655572 .000 20.10446 44.58394
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
- 3.454621 .000 17.58681 46.53079
KP28 32.058800
- 2.545688 .011 5.21799 29.92601
FP17 17.572000
- 2.402243 .011 6.56804 32.32716
FP28 19.447600
- 2.750208 .028 1.55525 26.10755
FS17 13.831400
- 3.003144 .004 7.25018 32.80022
FS28 20.025200
- 2.668290 .040 -25.06888 -.59232
- . The mean difference is significant at the 0.05 level .
FN17 -12.830600
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Homogeneous Subsets diameter_GC
Subset for alpha = 0.05 Sed_wa ktu N
1
2
3
4
5
a
Duncan KN28 5 5.74446E1 KP17 5 5.83878E1 KP28 5 5.86732E1 KN17 5 5.87858E1 FS28
5 7.07068E1 FP28 5 7.12844E1 FP17
5 7.31600E1 7.31600E1 FS17 5 7.69006E1 FN28
5 9.07320E1 FN17
5 1.03563E2
Sig. .634 .367 .147 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
Hasil nilai absorbansi ekstrak dan fraksi Phyllophorus sp. yang dibaca pada panjang gelombang (λ) 535 nm adalah sebagai berikut:EK = 0,0977 FP = 0,0342 FS = 0,0880 FN = 0,1061
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga
ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga