Identifikasi jaringan Kulit Normal dan Jaringan Kanker Kulit Menggunakan Handheld Spektroskopi Raman.

IDENTIFIKASI JARINGAN KULIT NORMAL DAN
JARINGAN KANKER KULIT MENGGUNAKAN
HANDHELD SPEKTROSKOPI RAMAN
SKRIPSI

I KADEK YUDIASTRA
1208505068

JURUSAN FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS UDAYANA
2016

ii

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena atas
berkat dan rahmat-Nya lah penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
”Identifikasi


Jaringan

Kulit

Normal

dan

Jaringan

Kanker

Kulit

Menggunakan Handheld Spektroskopi Raman” tepat pada waktunya.
Penyusunan tugas akhri ini tentunya tidak terlepas dari dukungan, bimbingan
dan bantuan dari berbagai pihak. Pada kesempatan ini, penulis ingin mengucapkan
terima kasih kepada:
1. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si. selaku Dekan Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.

2. Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua Jurusan
Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana. Terima kasih atas bimbingan
dan bantuannya.
3. Ni Putu Linda Laksmiani, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing I
yang telah bersedia meluangkan waktunya membimbing, mengarahkan,
serta memberikan motivasi kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini.
4. Ni Made Widi Astuti, S.Farm., M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing II
yang telah bersedia meluangkan waktunya membimbing, mengarahkan,
serta memberikan motivasi kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini.
5. Seluruh dokter dan staf pegawai yang bekerja di Departemen Patologi
Anatomi RSUP Sanglah Kota Denpasar, khususnya dr Ekawati yang telah
bersedia meluangkan waktunya membimbing, mengarahkan, serta
memberikan motivasi kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini.

iii

6. Seluruh dosen dan staf pegawai di Jurusan Farmasi Fakultas MIPA
Universitas Udayana yang telah memberikan bantuan kepada penulis
selama penyusunan skripsi ini.
7. Keluarga khususnya I Made Sudiarta selaku ayah, Ni Wayan Kami selaku

ibu, I Putu Suardita Putra selaku kakak penulis dan Ni Luh Nyoman Niti
Kurniasari selaku adik penulis serta seluruh keluarga besar penulis yang
telah member motivasi dalam menyusun skripsi ini.
8. Seluruh tim penelitian “Raman Sniper” yang senantiasa memberikan
motivasi kepada penulis dan kerja sama tim yang baik.
9. Teman-teman seperjuangan Farmasi Udayana 2012 (Dioscuri Hygeia),
khususnya teman-teman Analisis 2012 (Vanadium Spectra), Ibu Nova, dan
Ibu Dwi selaku staf Laboratorium Forensik Lembaga Sains dan Kriminologi
Universitas Udayana yang memberikan bantuan, semangat dan doa dalam
penyusunan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih jauh dari sempurna.
Untuk itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi perbaikan
penyusunan skripsi selanjutnya. Harapan penulis, semoga skripsi ini dapat
bermanfaat bagi yang memerlukan.
Jimbaran, Juni 2016

Penulis

iv


DAFTAR ISI

Halaman
HALAMAN JUDUL ................................................................................................i
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ ii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iii
DAFTAR ISI ............................................................................................................v
DAFTAR TABEL ................................................................................................ viii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................... x
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
DAFTAR ISTILAH ............................................................................................. xiii
ABSTRAK ............................................................................................................. xv
ABSTRACT ..........................................................................................................xvi
BAB I. PENDAHULUAN ....................................................................................... 1
1.1. Latar Belakang........................................................................................... 1
1.2. Rumusan Masalah ..................................................................................... 4
1.3. Tujuan Penelitian ....................................................................................... 5
1.4. Manfaat Penelitian ..................................................................................... 5
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................6
2.1. Kanker Kulit .............................................................................................. 6

2.1.1 Kulit ................................................................................................. 6
2.1.2 Karsinoma Sel Basal ........................................................................7
2.2. Spektroskopi Raman.................................................................................. 8
2.2.1 Teori Dasar Spektroskopi Raman .................................................... 8

v

2.2.2 Instrumentasi Spektroskopi Raman ............................................... 10
2.2.3 Spektroskopi Raman Sebagai Teknik Diagnosis Kanker .............. 11
2.3. Pemilihan Sampel .................................................................................... 12
2.4. Pemanfaatan Spektroskopi Raman untuk Analisis Kanker Kulit ............14
2.5. Analisis Data dengan Cross Correlation Function ................................. 17
BAB III. METODE PENELITIAN ....................................................................... 18
3.1. Rancangan Penelitian .............................................................................. 18
3.2. Lokasi dan Waktu Penelitian ................................................................... 19
3.3. Bahan Penelitian ...................................................................................... 19
3.4. Alat Penelitian ......................................................................................... 19
3.5. Prosedur Penelitian .................................................................................. 20
3.5.1 Optimasi Metode Sampling ........................................................... 20
3.5.1.1 Pengaruh Pengukuran Background .................................... 20

3.5.1.2 Penentuan Spot Sampling ................................................... 20
3.5.1.3 Penentuan Exposure Time .................................................. 21
3.5.2 Pengukuran Preparat Jaringan Normal dengan Spektroskopi
Raman ............................................................................................ 21
3.5.3 Pengukuran Preparat Jaringan Kanker Kulit Sel Basal dengan
Spektroskopi Raman....................................................................... 22
3.5.4 Membandingkan Spektrum Raman Antara Karsinoma Sel Basal
dan Kulit Normal ............................................................................22
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 23
4.1. Optimasi Metode Sampling ..................................................................... 23
4.1.1 Pengaruh Pengukuran Background ................................................ 23

vi

4.1.2 Penentuan Spot Sampling ............................................................... 27
4.1.3 Penentuan Exposure Time .............................................................. 29
4.2. Identifikasi Spektrum Raman Kulit Normal............................................32
4.3. Indentifikasi Spektrum Raman Karsinoma Sel Basal ............................. 37
4.4. Perbandingkan Spektrum Raman Kanker Kulit Sel Basal dengan
Kulit Normal ............................................................................................ 40

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 46
4.1. Kesimpulan .............................................................................................. 46
4.2. Saran ........................................................................................................47
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 48
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... 51

vii

DAFTAR TABEL

Halaman
Tabel 2.1 Data Hasil Pendataan Konstituen Utama pada Spektrum Raman
Kulit Normal.......................................................................................... 16
Tabel 2.2 Perbandingan Intensitas Raman dari Kulit Normal dan
Karsinoma Sel Basal ............................................................................. 17
Tabel 4.1 Data hasil koefisien korelasi pada spektrum Raman sampel normal
dengan pengukuran background pengulangan enam kali ..................... 25
Tabel 4.2 Data hasil koefisien korelasi pada spektrum Raman sampel normal
tanpa pengukuran background pengulangan enam kali ........................ 26
Tabel 4.3 Data nilai koefisien korelasi (r) spektrum Raman sampel normal

pada titik pengukuran A, B, dan C ........................................................ 28
Tabel 4.4 Data nilai Koefisien Korelasi (r) Spektrum Raman sampel normal
dengan exposure time 2000 Ms ............................................................. 31
Tabel 4.5 Data nilai koefisien korelasi (r) Spektrum Raman lima (5)
jaringan kulit normal ............................................................................. 33
Tabel 4.6 Data koefisien korelasi spektrum Raman kulit normal pada
masing-masing puncak penanda ............................................................ 35
Tabel 4.7 Data nilai koefisien korelasi (r) spektrum Raman lima (5)
jaringan kanker kulit sel basal. .............................................................. 38
Tabel 4.8 Data koefisien korelasi spektrum Raman kanker kulit sel basal pada
masing-masing puncak penanda ............................................................ 39

viii

Tabel 4.9 Nilai koefisien korelasi (r) spektrum Raman jaringan kanker kulit
sel basal dan jaringan kulit normal. ....................................................... 42
Tabel 4.10 Data koefisien korelasi dari spektrum Raman kanker kulit sel basal
dan normal pada masing-masing puncak penanda ................................ 43
Tabel 4.11 Data intensitas dari spektrum Raman kanker kulit sel basal
dan normal pada masing-masing puncak penanda .............................. 44


ix

DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 2.1 Anatomi Kulit ...................................................................................... 6
Gambar 2.2 Karsinoma Sel Basal ............................................................................7
Gambar 2.3 Diagram Biasan Raman dan Biasan Rayleigh ................................... 10
Gambar 2.4 Instrumen FirstGuardTM Handheld Raman Analyzer ........................ 11
Gambar 2.5 Spektrum Raman Paraffin .................................................................. 12
Gambar 2.6 Spektrum Raman jaringan payudara tanpa pewarnaan H&E (a),
Spektrum Raman jaringan payudara dengan pewarnaan H&E (b) ..... 13
Gambar 2.7 Spektrum Raman dari Jaringan Kulit Normal (N),
Kanker Sel Basal (BCC), dan Melanoma (MEL) ............................... 15
Gambar 4.1 Spektrum Raman background (a), Spektrum Raman sampel normal
dengan pengukuran background (b), Spektrum Raman sampel normal
tanpa pengukuran background (c) ....................................................... 24
Gambar 4.2 Preparat sampel normal pada titik pengukuran A, B, dan C .............. 27
Gambar 4.3 Spekrum Raman sampel normal pada titik pengukuran

A, B, dan C .......................................................................................... 28
Gambar 4.4 Spektrum Raman sampel normal pada exposure time 1000 Ms,
1500 Ms, dan 2000 Ms ........................................................................30
Gambar 4.5 Spektrum Raman lima (5) jaringan kulit normal ............................... 32
Gambar 4.6 Puncak penanda spektrum Raman jaringan kulit normal ................... 34
Gambar 4.7 Spektrum Raman lima (5) jaringan kanker kulit sel basal ................. 37
Gambar 4.8 Puncak penanda spektrum Raman jaringan kanker kulit sel basal .... 38

x

Gambar 4.9 Spektrum Raman jaringan kanker kulit sel basal dan
jaringan kulit normal pada kelima sampel ..........................................41

xi

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman
Lampiran 1. Skema Umum Penelitian ................................................................... 51
Lampiran 2. Tabel Pendataan Puncak Pada Spektrum Raman Kulit Normal,

Karsinoma Sel Basal, dan Melanoma ............................................... 52
Lampiran 3. Cross Correlation Fuction ................................................................ 54
Lampiran 4. Keterangan Kelaikan Etik ................................................................. 56
Lampiran 5. Surat Ijin Penelitian ...........................................................................57
Lampiran 6. Foto Sampel Tissue Slide Jaringa Kanker Kulit Sel Basal dan
Normal .............................................................................................. 58
Lampiran 7. Data nilai koefisien korelasi (r) spektrum Raman pada titik A, B,
Dan C ................................................................................................ 59
Lampiran 8. Nilai koefisien korelasi (r) spektrum Raman pada setiap variasi
exposure time (1000 Ms, 1500 Ms, dan 2000 Ms) ........................... 60
Lampiran 9. Identifikasi Kanker Kulit Sel Basal ................................................... 61
Lampiran 10. Identifikasi Jaringan Kulit Normal .................................................. 63

xii

DAFTAR ISTILAH

Absorpsi

: penyerapan sinar yang dilakukan oleh
molekul dalam suatu senyawa

Background

: Latar belakang

Diagnosis

: identifikasi sifat-sifat penyakit atau kondisi
atau membedakan satu penyakit atau kondisi
dari yang lainnya

Eksitasi

: penyerapan energi radiasi suatu atom yang
mengalihkannya dari keadaan dasarnya ke
suatu keadaan dengan tenaga lebih tinggi

Exposure time

: waktu penembakan laser pada sampel

Fluoresensi

: proses pemancaran radiasi cahaya oleh suatu
materi

Foton

: pembawa radiasi elektromagnetik

Kanker

: penyakit akibat pertumbuhan tidak normal
dari sel-sel jaringan tubuh

Karsinoma

: jenis kanker yang berasal dari sel yang
melapisi permukaan tubuh atau permukaan
saluran tubuh

Kemometrik

: disiplin ilmu kimia yang menggunakan
matematika dan metode statistika untuk
memberikan informasi kimia melalui analisis
data kimia

xiii

Laser power

: daya laser yang ditembakan

Metastasis

: penyebaran kanker dari suatu organ tubuh ke
organ tubuh lain

Peaks Pattern Recognition

: pengenalan pola puncak

Sampling

: pengambilan sebagian dari populasi (sampel)

Spektrum

: hubungan antara bilangan gelombang dan
intensitas

Spektrum vibrasional

: spektrum dari hasil getaran molekul karena
ditembakan suatu sinar yang menyebabkan
peningkatan momen dipole

Virtual State

: keadaan tidak stabil suatu molekul ketika
ditembakkan laser pada spektroskopi Raman
namun sebenarnya keadaan ini tidak nyata
adanya

xiv

ABSTRAK

Karsinoma sel basal adalah contoh dari kanker kulit. Karsinoma sel basal
didiagnosis dengan metode biopsi tetapi memiliki kelemahan yaitu hasil yang
subjektif. Spektroskopi Raman memiliki potensi untuk digunakan dalam proses
diagnosis dan mengamati perkembangan suatu penyakit. Penelitian ini bertujuan
untuk mengidentifikasi pola puncak spektrum Raman dari jaringan kanker kulit sel
basal dan jaringan kulit normal menggunakan Handheld spektroskopi Raman.
Sampel tissue slide kanker kulit sel basal dan normal diukur dengan Handheld
Spektroskopi Raman. Pengukuran dilakukan pada rentang bilangan gelombang
200-2000 cm-1. Pola puncak spektrum Raman antara kanker kulir sel basal dan
normal dianalisis dengan metode cross correlation function. Nilai koefisien
korelasi (r) ≥ 0,900 menunjukkan bahwa spektrum yang dibandingkan adalah mirip.
Nilai koefisien korelasi (r) dari spektrum normal dan kanker adalah ≥ 0,900.
Kanker kulit sel basal dan normal tidak dapat dibedakan berdasarkan bentuk
spektrum Ramannya. Spektrum Raman kanker kulit sel basal dan normal dibedakan
berdasarkan perbedaan intensitas pada puncak-puncak di daerah gugus fungsi
marker kanker. Intensitas puncak-puncak penanda spektrum Raman kanker kulit sel
basal lebih rendah dari pada normal.
Kata Kunci : Handheld Raman Analyzer; Karsinoma sel basal; Spektrum Raman;
cross correlation function; Pola puncak

xv

ABSTRACT

Basal cell carcinoma is a sample of skin cancer. Basal cell carcinoma is
diagnosed by biopsy method but has the disadvantage that the subjective results.
Raman spectroscopy has the potential to be used in the diagnostic process and
observe the development of a disease. This study aims to identify the pattern of
Raman spectral peaks of basal cell skin cancer tissue and normal skin tissue using
Raman spectroscopy Handheld.
Samples of tissue slides basal cell skin cancer and normal analyzed by
Handheld Raman Spectroscopy. Sampel measurements were made in the range of
wave numbers 200-2000 cm-1. Analysis of the Raman spectrum peak pattern
between basal cell carcinoma and normal to do based on the value correlation
function (r). The correlation coefficient ≥ 0.900, indicating that the spectrum being
compared are similar.
Correlation coefficient (r) of the spectrum of normal and cancer cells are ≥
0,900. Basal cell skin cancer and normal can not be distinguished by the shape of
the spectrum Ramannya. Raman spectrum of basal cell skin cancer and normal
differentiated by differences in the intensity of the peaks in the area of functional
groups of cancer marker. The intensity of the peaks of the Raman spectrum marker
of basal cell skin cancer is lower than normal.
Kata Kunci : Handheld Raman Analyzer; Basal cell carcinoma; Raman spectrum;
cross correlation function; Band

xvi