Pengaruh Ekstrak Propolis Terhadap Peningkatan Ekspresi Protein P21, Ekspresi Protein Bax dan Apoptosis Pada Kultur Sel Kanker Kolon (Cell Line WiDr).
PENGARUH EKSTRAK PROPOLIS TERHADAP PENINGKATAN
EKSPRESI P21, EKSPRESI PROTEIN BAX DAN APOPTOSIS
PADA KULTUR SEL KANKER KOLON (CELL LINE WiDr)
TESIS
Disusun untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan Mencapai Derajat Magister
Program Studi Magister Kedokteran Keluarga
Minat Utama Ilmu Biomedik
Oleh:
Didik Prasetyo
S 501202021
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2016
PENGARUH EKSTRAK PROPOLIS TERHADAP PENINGKATAN
EKSPRESI P21, EKSPRESI PROTEIN BAX DAN APOPTOSIS
PADA KULTUR SEL KANKER KOLON (CELL LINE WiDr)
TESIS
Oleh
Didik Prasetyo
S 501202021
Telah disetujui oleh Tim Pembimbing
Komisi
Pembimbing
Pembimbing I
Nama
Suradi Maryono,dr. SpPDKHOM, FINASIM
NIP.194708121973101001
Pembimbing II
Prof.Dr. HM.Bambang
Purwanto,dr. SpPD,KGH,
FINASIM
NIP.194807191976091001
Tanda Tangan
Tanggal
………………..
…Juli 2016
………………..
…Juli 2016
Telah dinyatakan memenuhi syarat
Pada tanggal ……Juli 2016
Ketua Program Studi Magister Kedokteran Keluarga
Program Pascasarjana UNS
Prof.Dr.A.A. Subiyanto,dr,MS
NIP. 194811071973101003
PENGARUH EKSTRAK PROPOLIS TERHADAP PENINGKATAN
EKSPRESI P21, EKSPRESI PROTEIN BAX DAN APOPTOSIS
PADA KULTUR SEL KANKER KOLON (CELL LINE WiDr)
TESIS
Oleh:
Didik Prasetyo
S 501202021
Tim Penguji
Jabatan
Ketua
Nama
Tanda Tangan
Tanggal
Dr. Ida Nurwati, dr. M.Kes
NIP. 196502031997022001
....……….............. ......Juli 2016
Sekretaris
Dr. Noer Rachma, dr. Sp.KFR
NIP. 195506281983122001
Penguji
1. Suradi Maryono, dr. SpPDKHOM, FINASIM
NIP. 194708121973101001
2. Prof. Dr. H.M. Bambang
Purwanto, dr. SpPD-KGH,
FINASIM
NIP. 194807191976091001
…...…................... ......Juli 2016
...........................
......Juli 2016
............................
......Juli 2016
Mengetahui
Direktur Program Pascasarjana UNS
Ketua Program Studi
Magister Kedokteran Keluarga
Prof.Dr.M.Furqon Hidayatullah,M.Pd
NIP. 19610717171986011
Prof.Dr.A.A.Subiyanto,dr.MS
NIP. 196210221995031001
PERNYATAAN KEASLIAN DAN PERSYARATAN PUBLIKASI
Penulis menyatakan dengan sebesar-besarnya bahwa:
1. Tesis yang berjudul “Pengaruh Ekstrak Propolis Terhadap Peningkatan
Ekspresi P21, Ekspresi Protein Bax dan Apoptosis Pada Sel Kanker Kolon
(Cell Line WiDr) ” ini adalah karya penelitian penulis sendiri dan tidak
terdapat karya ilmiah yang pernah diajukan oleh orang lain untuk
memperoleh gelar akademik serta tidak terdapat karya atau pendapat yang
pernah ditulis atau diterbitk an oleh orang lain, kecuali yang tertulis dengan
acuan yang disebutkan sumbernya, baik dalam naskah karangan dan daftar
pustaka. Apabila ternyata di dalam naskah tesis ini dapat dibuktikan
terdapat unsur-unsur plagiasi, maka penulis bersedia menerima sanksi,
baik Tesis beserta gelar magister penulis dibatalkan serta diproses sesuai
dengan peraturan perundang-undangan yang berlaku.
2. Publikasi sebagian atau keseluruhan isi Tesis pada jurnal forum ilmiah
harus menyertakan tim promotor sebagai author dan PPs UNS sebagai
institusinya. Apabila penulis melakukan pelanggaran dari ketentuan
publikasi ini, maka penulis bersedia mendapatkan sanksi akademik yang
berlaku.
Surakarta, Juli 2016
Didik Prasetyo
S501202021
KATA PENGANTAR
Puji syukur Alhamdulillaahirabbil’aalamin penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT
atas segala limpahan kasih sayang, rahmat dan hidayah-Nya sehingga penyusunan
tesis yang berjudul: Pengaruh Ekstrak Propolis Terhadap Peningkatan Ekspresi P21,
Ekspresi Protein Bax dan Apoptosis Pada Kultur Sel Kanker Kolon (Cell Line WiDr)
ini dapat terselesaikan dengan baik. Penelitian ini untuk memenuhi sebagian
persyaratan dalam memperoleh Gelar Magister Kedokteran Keluarga dan Spesialis
Penyakit Dalam Program Pendidikan Dokter Spesialis I Penyakit Dalam Fakultas
Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang tulus dan
penghargaan yang tinggi kepada:
1.
Prof. Dr. Ravik Karsidi, M.S., selaku Rektor Universitas Sebelas Maret
Surakarta yang telah memberikan kemudahan penulis dalam melaksanakan
pendidikan Pascasarjana Program studi Magister Kedokteran Keluarga minat
utama Biomedik.
2.
Prof. Dr. Hartono, dr., M.Si selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas
Negeri Sebelas Maret Surakarta, yang telah memberikan kemudahan dan
dukungan kepada penulis selama menjalani pendidikan PPDS Ilmu Penyakit
Dalam.
3.
Prof.Dr.M.Furqon Hidayatullah,M.Pd selaku Direktur Program Pascasarjana
Universitas Negeri Sebelas Maret Surakarta yang telah memberikan
kemudahan penulis dalam melaksanakan pendidikan Pascasarjana Program
studi Magister Kedokteran Keluarga minat utama Biomedik.
4.
Prof.Dr.A.A.Subiyanto,dr.MS selaku Ketua
Program Studi Magister
Kedokteran Keluarga Universitas Negeri Sebelas Maret yang telah
memberikan
kemudahan
penulis
dalam
melaksanakan
pendidikan
Pascasarjana Program studi Magister Kedokteran Keluarga minat utama
Biomedik
5.
dr. Endang Agustinar, M.Kes sebagai Direktur RSUD Dr. Moewardi beserta
seluruh jajaran staf direksi yang telah berkenan dan mengijinkan untuk
menjalani program pendidikan PPDS interna.
6.
Prof. Dr. HM. Bambang Purwanto, dr., SpPD, KGH, FINASIM selaku
Kepala Bagian Ilmu Penyakit Dalam FK UNS/ RSUD Dr Moewardi dan
Pembimbing II yang telah memberikan ijin, bimbingan dan pengarahan dalam
penyusunan usulan tesis ini, serta memberikan kemudahan penulis dalam
melaksanakan program pendidikan Pascasarjana dan PPDS I Ilmu Penyakit
Dalam.
7.
Dr. Sugiarto, dr., SpPD, KEMD, FINASIM selaku Ketua Program Studi
PPDS I Interna, yang telah membimbing dan memberikan pengarahan penulis
dalam melaksanakan program pendidikan Pascasarjana dan PPDS I Ilmu
Penyakit Dalam.
8.
dr. Suradi Maryono, SpPD-KHOM, FINASIM selaku Pembimbing I yang
telah memberikan ijin, bimbingan dan pengarahan dalam penyusunan usulan
tesis ini.
9.
Dr. dr. Ida Nurwati, M.Kes selaku Penguji I, yang telah memberikan
pengarahan, bimbingan dan koreksi dalam penyusunan tesis ini.
10. Dr. Noer Rachma, dr., Sp.KFR selaku Penguji II, yang telah memberikan
pengarahan, bimbingan dan koreksi dalam penyusunan tesis ini.
11. Drs. Sumardi, MM selaku pembimbing/ konsultan statistik penelitian, yang
dengan kesabaran telah membimbing dan memberikan pengarahan dalam
penyusunan usulan tesis.
12. Seluruh Staf Pengajar Ilmu Penyakit Dalam FK UNS/ RSUD Dr Moewardi
Surakarta. Prof. Dr. HA Guntur Hermawan, dr., SpPD-KPTI FINASIM (alm),
Prof.Dr. Zainal Arifin Adnan,dr., SpPD-KR,FINASIM, Prof.Dr. Djoko
Hardiman, dr., SpPD-KEMD FINASIM, dr. Suradi Maryono, SpPD-KHOM
FINASIM, dr. Sumarmi Soewoto SpPD-KGER FINASIM, dr. Tatar
Sumandjar, SpPD-KPTI FINASIM, dr. Tantoro Harmono, SpPD-KGEH
FINASIM, dr. Tri Yuli Pramana SpPD-KGEH FINASIM, dr. Supriyanto
Kartodarsono, SpPD-KEMD FINASIM, dr. Supriyanto Muktiatmojo, SpPD
FINASIM, dr. Dhani Redhono, SpPD-KPTI FINASIM, dr. Wachid Putranto,
SpPD-KGH FINASIM, dr. Arifin, SpPD-KIC FINASIM, dr. Fatichati
Budiningsih, SpPD-KGer FINASIM, dr. Agung Susanto,SpPD FINASIM, dr.
Arief Nurudin SpPD FINASIM, dr. Agus Joko S,SpPD, FINASIM, dr.
Yulyani Werdiningsih, SpPD FINASIM, dr.Sri Marwanta SpPD Mkes,
dr.Aritantri D SpPD MSc, dr. Bayu Basuki Wijaya SpPD Mkes,
dr.R. Satriyo SpPD Mkes, dr. Evi Nurhayatun SpPD Mkes, dr. Eva N SpPD
Mkes, dr. Ratih Tri K SpPD, dr. Yudhi Hadjianto Sp.PD Mkes, dan dr. Agus
Jati, Sp.PD yang telah memberi dorongan, bimbingan dan bantuan dalam
segala bentuk sehingga penulis bisa menyelesaikan penyusunan tesis.
13. Ayahanda dan Ibunda tercinta Sunardi dan Suryatmi, Orang tua yang kami
hormati dan sayangi Bapak Djoko Susanto dan Ibu Masitah. Istriku tercinta
dr. Ratih Dewi Yudhani, MSc, buah hatiku Bama Radynka Aidan Pradhana
dan Ailsayara Mahya Pradhani, saudara kandung Astuti Prasetya, saudara ipar
Galuh yang telah memberikan kasih sayang dan semangat dengan sabar dan
tulus memberikan dorongan moril dan materiil dalam penyelesaian tesis ini
dan proses menjalani program pendidikan Pasca Sarjana dan PPDS I Ilmu
Penyakit Dalam.
14. Seluruh teman sejawat seperjuangan Residen Penyakit Dalam yang telah
memberikan dukungan dan bantuan kepada penulis dalam penelitian ini dan
selama menjalani pendidikan.
15. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu-persatu, yang telah
membantu penulis baik dalam menjalani pendidikan maupun dalam persiapan
penelitian ini.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan dan penulisan tesis ini masih
banyak terdapat kekurangan, untuk itu penyusun mohon maaf dan sangat
mengharapkan saran serta kritik dalam rangka perbaikan penulisan tesis ini.
Surakarta, Juli 2016
Penulis
Didik Prasetyo. S501202021. 2016. Pengaruh Ekstrak Propolis Terhadap
Peningkatan Ekspresi P21, Ekspresi protein Bax dan Apoptosis Pada Kultur Sel
Kanker Kolon ( Cell line WiDr). TESIS. Pembimbing I: dr. Suradi Maryono,
SpPD-KHOM,FINASIM, Pembimbing II: Prof. Dr.dr.H. Bambang Purwanto,
SpPD-KGH,FINASIM. Program Studi Kedokteran Keluarga, Program
Pascasarjana, Universitas Sebelas Maret Surakarta.
ABSTRAK
Latar Belakang
Kanker kolorektal merupakan kanker ketiga terbanyak dengan lebih dari 1
juta kasus setiap tahunnya dan salah satu kanker dengan mortalitas tertinggi di
seluruh dunia. Radioterapi dan kemoterapi pada kanker relatif terbatas karena
toksisitasnya yang tinggi dan efek samping yang bersifat merusak. Pengembangan
propolis merupakan strategi baru untuk terapi adjuvan yang diharapkan
meminimalkan efek samping terapi standar yang ada. Peran propolis pada
keganasan terkait kemampuannya dalam menginduksi apoptosis dan aktivitas
antiproliferasi. Penelitian in vitro, menunjukkan propolis memiliki aktivitas
proapoptosis pada berbagai jenis sel kanker, meliputi : kanker laring, kanker paru,
kanker pankreas, kanker tiroid, kanker payudara, kanker prostat dan glioma..
Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian propolis
yang berasal dari Kerjo, Karanganyar, Indonesia terhadap aktivitas antiproliferasi,
terkait peningkatan ekspresi p21 dan apoptosis terkait peningkatan ekspresi
protein bax pada kultur sel kanker kolon (cell line WiDr).
Metode Penelitian
Jenis penelitian ini, eksperimental laboratorik dengan post test with control
group design. Penelitian menggunakan kultur sel WiDr (sel kanker kolon) dengan
pemberian ekstrak etanol propolis (EEP). Pengamatan ekspresi p21 dan protein
Bax dengan metode imunositokimia, sedangkan pengamatan apoptosis dengan
flowcytometry. Analisis statistik menggunakan uji Kruskall Wallis dilanjutkan
Mann WhutneyU test.
Hasil Penelitian
EEP cenderung menekan viabilitas sel WiDr dengan IC 50 sebesar 140
µg/mL. EEP konsentrasi 70,140, 280 µg/mL mampu meningkatkan ekspresi p21
yang sebanding dengan peningkatan konsentrasi yang diberikan. EEP konsentrasi
70 µg/mL (1/2 IC50) paling efektif dalam menginduksi apoptosis dan
meningkatkan ekspresi Bax pada sel WiDr. Peningkatan konsentrasi EEP
mengakibatkan kematian sel WiDr ke arah nekrosis.
Kesimpulan
Penelitian ini menunjukkan EEP mampu menekan viabilitas sel WiDr.
Aktivitas ini kemungkinan terkait dengan kemampuannya dalam meningkatkan
ekspresi p21 sebanding dengan peningkatan konsentrasi EEP. EEP pada
konsentrasi 70µg/mL mampu menginduksi apoptosis pada sel WiDr terkait
dengan peningkatan ekspresi Bax. Peningkatan konsentrasi EEP (140 dan 280
µg/mL) mengakibatkan nekrosis sel WiDr.
Kata kunci : EEP, cell line WiDr, p21, apoptosis, protein bax
Didik Prasetyo. S501202021. 2016. Effect of Propolis Extract on Increasing
Expression of P21, Bax protein expression and Apoptosis In Colon Cancer Cell
Culture (Cell line WiDr). THESIS. Supervisor I: dr. Suradi Maryono, SpPDKHOM, FINASIM, Supervisor II: Prof. Dr.dr.H. Bambang Purwanto, SpPDKGH, FINASIM. Master Program of Family Medicine focusing on Biomedical
Sciences, Sebelas Maret University Surakarta.
ABSTRACT
Background
Colorectal cancer is the third leading cancer worldwide, with more than 1
million cases annually. In 2012, this cancer caused 0.7 million of deaths and
became one of the cancers with the highest mortality rates in the world.
Radiotherapy and chemotherapy for cancer are relatively limited because of high
toxicity and side effects. The development of propolis as a stretegy for adjuvant
therapy for cancer which expected reduce the side effects of cancer treatment. The
role of propolis in the treatment of malignancy associated with its ability to induce
apoptosis and its anti-proliferation activities. In studies in vitro, propolis showed
proapoptosis activity on various types of cancer cells, including: laryngeal cancer,
lung cancer, pancreatic cancer, thyroid cancer, breast cancer, prostate cancer and
glioma.
Objectives
This study aimed to determine the effect of propolis originating from Kerjo,
Karanganyar, Indonesia for anti-proliferation activities, especially associated with
the increase in p21 expression and apoptosis associated with increased expression
of Bax protein in culture of colon cancer cells (cell line WiDr).
Methods
This study was experimental study using post test with control group design.
The study was conducted on cell cultures WiDr (colon cancer cells) with ethanol
extract of propolis. Observations expression of p21 and Bax protein expression
using immunocytochemistry, whereas observation of apoptosis by flowcytometry.
Statistical analysis using Kruskall Wallis continue with Mann WhitneyU test.
Result
EEP suppressed WiDr cell viability with IC50 of 140 mg / mL. EEP
concentration of 70, 140, 280 µg/mL able to increase p21 expression in a dose
dependent manner. EEP at certain concentration (70 µg/mL) was most effective in
inducing apoptosis and increasing the expression of Bax in WiDr cells. Increasing
concentrations of EEP (140, 280 µg/mL) resulting in WiDr cell death toward
necrosis.
Conclusion
This study shows EEP was able to suppress viability of WiDr cell. This
ability may associated with its ability to increase p21 expression in a dose
dependent manner. EEP at concentration 70μg / mL was able to induce apoptosis
in cells WiDr associated with increased expression of Bax protein. Increasing
concentrations of EEP (140 and 280 µg/mL) WiDr cell necrosis.
Keywords: EEP, cell line WiDr, p21, bax protein
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR …..….....…………..……………………...................
v
ABSTRAK.............................……...……..…………………..........................
viii
DAFTAR ISI
…………………….....………………………....................
x
DAFTAR GAMBAR ………………………………………...........................
xii
DAFTAR TABEL…………………………………………...….....................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN …………………….……………………………......
xiv
DAFTAR SINGKATAN
…………………………………........................
xv
BAB I. PENDAHULUAN………………………………………..................
1
A. Latar Belakang Masalah ……………………………..........................
1
B. Rumusan Masalah ..………………....…………………......................
3
C. Tujuan Penelitian ..………………………………………..................
4
1. Tujuan umum …………………………………………......……..
4
2. Tujuan khusus …..…………………………………....…………..
4
D. Manfaat penelitian …..………………………………...….……..........
4
1. Manfaat teoritis ……………………………….....……………….
4
2. Manfaat terapan ……………………………….....……………….
4
BAB II. LANDASAN TEORI...............……………….....…….…….............
5
A. Tinjauan Pustaka ..................................................................................
5
1. Kanker..............................................................................................
5
2. Kanker Kolon...................................................................................
7
a. Epidemiologi......................... …................................................
8
b. Etiologi.......................... …….………………….......................
9
c. Patofisiologi...............................................................................
10
d. Terapi........................................................................................
13
3. Sel WiDr..........................................................................................
15
4. Siklus Sel.........................................................................................
16
5. Protein 21 (P21)...... ………….........................................................
19
6. Apoptosis.........................................................................................
19
7. Propolis............................................................................................
23
B. Penelitian yang relevan …....…………………………………………
31
C. Kerangka Berpikir..... …….....….…………….....…………………...
32
D. Kerangka Konsep.................................................................................
34
…. ……......…………………………...............
35
BAB III. METODE PENELITIAN ...…………………………....................
36
A. Tempat dan Waktu.... .........................................................................
36
B.
Jenis Penelitian........ ……………………………..............................
37
C.
Subyek Penelitian...............................................................................
37
D.
Identifikasi Variabel..........................................................................
37
E.
Definisi Operasional..... ….….........................................................
37
F.
Bahan dan Alat Penelitian.......………..............................................
39
G.
Jalannya Penelitian....... ...................................................................
41
H.
Teknik Analisis Data........................................................................
49
BAB IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .….....…………..
51
A. Hasil Penelitian...................... .…………………………………….
51
E. Hipotesis Penelitian
1. Uji sitotoksisitas MTTassay menetapkan IC50 ekstrak etanol
propolis dan 5-fluorouracil...........................................................
51
2. Pengamatan ekspresi p21.............................................................
54
3. Uji Induksi apoptosis EEP dengan flowcytometry........................
57
4. Pengamatan ekspresi protein bax..................................................
61
B. Pembahasan ….………………………………………………..........
64
1. Aspek Ontologi ………………………………………......……
64
2. Aspek Epistemiologi ……………………………........………..
66
3. Aspek Aksiologi …………………………..........……………...
69
4. Keterbatasan Penelitian ……………..........…………………....
70
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ………………………………….....
71
DAFTAR PUSTAKA …………………………………………………........
72
LAMPIRAN
72
................…….………….…….....………….………….....
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.
Skema dasar molekular kanker.................................…..
6
Gambar 2.
10 besar kanker di RSKD tahun 2010............................
9
Gambar 3.
Perubahan genetik kanker kolorektal.............................
12
Gambar 4.
Sel WiDr.........................................................................
15
Gambar 5.
Siklus Sel.......................... .............................................
18
Gambar 6.
Apoptosis jalur ekstrinsik dan intrinsik...........…….....
21
Gambar 7.
Struktur molekul flavonoid............................................
25
Gambar 8.
Struktur molekul asam fenolat.......................................
28
Gambar 9.
Struktur molekul CAPE...……………………………...
28
Gambar 10.
Kerangka Berpikir.......................................................
32
Gambar 11.
Kerangka Konsep........................................................
34
Gambar 12.
Skema pengisian plat mikrokultur uji sitotoksisitas.......
44
Gambar 13.
Skema pengisian plat mikrokultur p21 dan bax...........
45
Gambar 14.
Alur Penelitian................................................................
49
Gambar 15.
Morfologi Sel WiDr.......................................................
51
Gambar 16.
Pembentukan kristal formazan………..........................
52
Gambar 17.
Hasil imunositokimia p21....………………………......
55
Gambar 18.
Grafik hubungan konsentrasi bahan uji dengan
ekspresi p21...................................................................
56
Gambar 19.
Uji apoptosis sel WiDr inkubasi 24 jam........................
58
Gambar 20.
Hasil Flowcytometry.................................................
59
Gambar 21.
Grafik hubungan konsentrasi bahan uji dengan
apoptosis sel WiDr.........................................................
60
Gambar 22.
Hasil imunositokimia protein bax..................................
62
Gambar 23.
Grafik hubungan konsentrasi bahan uji dengan ekspresi
Protein bax........................................................................
63
DAFTAR TABEL
Tabel 1.
Faktor resiko kanker usus besar..... ................................
10
Tabel 2.
Senyawa utama propolis...................................................
26
Tabel 3.
Jadwal Penelitian......................................................... ...
36
Tabel 4.
Nilai rata-rata viabilitas sel WiDr ....................................
53
Tabel 5.
Persentase ekspresi p21 sel WiDr.........................................
56
Tabel 6.
Persentase sel WiDr yang mengalami apoptosis..............
60
Tabel 7.
Persentase ekspresi protein bax sel WiDr.........................
63
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Ethical clearance
Lampiran 2. Sertifikat kursus kultur jaringan
Lampiran 3. Absorbansi sel WiDr setelah pemberian bahan uji
Lampiran 4. Persentase viabilitas sel WiDr setelah pemberian bahan uji
Lampiran 5. Analisis regresi linear untuk menentukan IC50 EEP
Lampiran 6. Analisis statistik ekspresi p21 dan protein bax pada kelima
kelompok
Lampiran 7. Hasil Flowcytometry
Lampiran 8. Analisis statistik uji induksi apoptosis
Lampiran 9. Dokumentasi penelitian
DAFTAR SINGKATAN
AP-1
: Activator protein-1
APAF 1
: Apoptotic protease activating factor 1
APC
: Antigen Presenting Cell
BCl
: B-cell lymphoma
CAPE
: Caffeic Acid Phenethyl Ester
CDK
: Cyclin dependent kinase
CIN
: Cromosomal Instability
COX2
: Cyclooxygenase-2
DCC
: Deleted in Colon Cancer
DISC
: Death-inducing singnalling complex
DNA
: Deoksiribonucleid Acid
dUMP
: deoxyuridine monophosphite
EEP
: Ekstrak etanol propolis
EGFR
: Endotheal Growth Factor Receptor
FADD
: Fas-associated death domain
FU
: Fluoro Uracil
MIN
: Microsatellite Instability
MMR
: Missmatch repair
NCCN
: National Comprehensive Cancer Network
NFkB
: Nuclear factor kappa B
NFAT
: Nuclear factor of activated cells
P21
: Protein 21
pGP
: P-glikoprotein
PS
: Phosphatidylserine
RB
: Retinoblastoma
RNA
: Ribonucleic acid
TNFR
: Necrosis FactorReceptor
TRADD
: TNF receptor-associated death domain
TS
: Timidilat sintetase
VEGF
: Vascular Endothel Growth Factor
WHO
: World Health Organization
EKSPRESI P21, EKSPRESI PROTEIN BAX DAN APOPTOSIS
PADA KULTUR SEL KANKER KOLON (CELL LINE WiDr)
TESIS
Disusun untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan Mencapai Derajat Magister
Program Studi Magister Kedokteran Keluarga
Minat Utama Ilmu Biomedik
Oleh:
Didik Prasetyo
S 501202021
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2016
PENGARUH EKSTRAK PROPOLIS TERHADAP PENINGKATAN
EKSPRESI P21, EKSPRESI PROTEIN BAX DAN APOPTOSIS
PADA KULTUR SEL KANKER KOLON (CELL LINE WiDr)
TESIS
Oleh
Didik Prasetyo
S 501202021
Telah disetujui oleh Tim Pembimbing
Komisi
Pembimbing
Pembimbing I
Nama
Suradi Maryono,dr. SpPDKHOM, FINASIM
NIP.194708121973101001
Pembimbing II
Prof.Dr. HM.Bambang
Purwanto,dr. SpPD,KGH,
FINASIM
NIP.194807191976091001
Tanda Tangan
Tanggal
………………..
…Juli 2016
………………..
…Juli 2016
Telah dinyatakan memenuhi syarat
Pada tanggal ……Juli 2016
Ketua Program Studi Magister Kedokteran Keluarga
Program Pascasarjana UNS
Prof.Dr.A.A. Subiyanto,dr,MS
NIP. 194811071973101003
PENGARUH EKSTRAK PROPOLIS TERHADAP PENINGKATAN
EKSPRESI P21, EKSPRESI PROTEIN BAX DAN APOPTOSIS
PADA KULTUR SEL KANKER KOLON (CELL LINE WiDr)
TESIS
Oleh:
Didik Prasetyo
S 501202021
Tim Penguji
Jabatan
Ketua
Nama
Tanda Tangan
Tanggal
Dr. Ida Nurwati, dr. M.Kes
NIP. 196502031997022001
....……….............. ......Juli 2016
Sekretaris
Dr. Noer Rachma, dr. Sp.KFR
NIP. 195506281983122001
Penguji
1. Suradi Maryono, dr. SpPDKHOM, FINASIM
NIP. 194708121973101001
2. Prof. Dr. H.M. Bambang
Purwanto, dr. SpPD-KGH,
FINASIM
NIP. 194807191976091001
…...…................... ......Juli 2016
...........................
......Juli 2016
............................
......Juli 2016
Mengetahui
Direktur Program Pascasarjana UNS
Ketua Program Studi
Magister Kedokteran Keluarga
Prof.Dr.M.Furqon Hidayatullah,M.Pd
NIP. 19610717171986011
Prof.Dr.A.A.Subiyanto,dr.MS
NIP. 196210221995031001
PERNYATAAN KEASLIAN DAN PERSYARATAN PUBLIKASI
Penulis menyatakan dengan sebesar-besarnya bahwa:
1. Tesis yang berjudul “Pengaruh Ekstrak Propolis Terhadap Peningkatan
Ekspresi P21, Ekspresi Protein Bax dan Apoptosis Pada Sel Kanker Kolon
(Cell Line WiDr) ” ini adalah karya penelitian penulis sendiri dan tidak
terdapat karya ilmiah yang pernah diajukan oleh orang lain untuk
memperoleh gelar akademik serta tidak terdapat karya atau pendapat yang
pernah ditulis atau diterbitk an oleh orang lain, kecuali yang tertulis dengan
acuan yang disebutkan sumbernya, baik dalam naskah karangan dan daftar
pustaka. Apabila ternyata di dalam naskah tesis ini dapat dibuktikan
terdapat unsur-unsur plagiasi, maka penulis bersedia menerima sanksi,
baik Tesis beserta gelar magister penulis dibatalkan serta diproses sesuai
dengan peraturan perundang-undangan yang berlaku.
2. Publikasi sebagian atau keseluruhan isi Tesis pada jurnal forum ilmiah
harus menyertakan tim promotor sebagai author dan PPs UNS sebagai
institusinya. Apabila penulis melakukan pelanggaran dari ketentuan
publikasi ini, maka penulis bersedia mendapatkan sanksi akademik yang
berlaku.
Surakarta, Juli 2016
Didik Prasetyo
S501202021
KATA PENGANTAR
Puji syukur Alhamdulillaahirabbil’aalamin penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT
atas segala limpahan kasih sayang, rahmat dan hidayah-Nya sehingga penyusunan
tesis yang berjudul: Pengaruh Ekstrak Propolis Terhadap Peningkatan Ekspresi P21,
Ekspresi Protein Bax dan Apoptosis Pada Kultur Sel Kanker Kolon (Cell Line WiDr)
ini dapat terselesaikan dengan baik. Penelitian ini untuk memenuhi sebagian
persyaratan dalam memperoleh Gelar Magister Kedokteran Keluarga dan Spesialis
Penyakit Dalam Program Pendidikan Dokter Spesialis I Penyakit Dalam Fakultas
Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.
Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang tulus dan
penghargaan yang tinggi kepada:
1.
Prof. Dr. Ravik Karsidi, M.S., selaku Rektor Universitas Sebelas Maret
Surakarta yang telah memberikan kemudahan penulis dalam melaksanakan
pendidikan Pascasarjana Program studi Magister Kedokteran Keluarga minat
utama Biomedik.
2.
Prof. Dr. Hartono, dr., M.Si selaku Dekan Fakultas Kedokteran Universitas
Negeri Sebelas Maret Surakarta, yang telah memberikan kemudahan dan
dukungan kepada penulis selama menjalani pendidikan PPDS Ilmu Penyakit
Dalam.
3.
Prof.Dr.M.Furqon Hidayatullah,M.Pd selaku Direktur Program Pascasarjana
Universitas Negeri Sebelas Maret Surakarta yang telah memberikan
kemudahan penulis dalam melaksanakan pendidikan Pascasarjana Program
studi Magister Kedokteran Keluarga minat utama Biomedik.
4.
Prof.Dr.A.A.Subiyanto,dr.MS selaku Ketua
Program Studi Magister
Kedokteran Keluarga Universitas Negeri Sebelas Maret yang telah
memberikan
kemudahan
penulis
dalam
melaksanakan
pendidikan
Pascasarjana Program studi Magister Kedokteran Keluarga minat utama
Biomedik
5.
dr. Endang Agustinar, M.Kes sebagai Direktur RSUD Dr. Moewardi beserta
seluruh jajaran staf direksi yang telah berkenan dan mengijinkan untuk
menjalani program pendidikan PPDS interna.
6.
Prof. Dr. HM. Bambang Purwanto, dr., SpPD, KGH, FINASIM selaku
Kepala Bagian Ilmu Penyakit Dalam FK UNS/ RSUD Dr Moewardi dan
Pembimbing II yang telah memberikan ijin, bimbingan dan pengarahan dalam
penyusunan usulan tesis ini, serta memberikan kemudahan penulis dalam
melaksanakan program pendidikan Pascasarjana dan PPDS I Ilmu Penyakit
Dalam.
7.
Dr. Sugiarto, dr., SpPD, KEMD, FINASIM selaku Ketua Program Studi
PPDS I Interna, yang telah membimbing dan memberikan pengarahan penulis
dalam melaksanakan program pendidikan Pascasarjana dan PPDS I Ilmu
Penyakit Dalam.
8.
dr. Suradi Maryono, SpPD-KHOM, FINASIM selaku Pembimbing I yang
telah memberikan ijin, bimbingan dan pengarahan dalam penyusunan usulan
tesis ini.
9.
Dr. dr. Ida Nurwati, M.Kes selaku Penguji I, yang telah memberikan
pengarahan, bimbingan dan koreksi dalam penyusunan tesis ini.
10. Dr. Noer Rachma, dr., Sp.KFR selaku Penguji II, yang telah memberikan
pengarahan, bimbingan dan koreksi dalam penyusunan tesis ini.
11. Drs. Sumardi, MM selaku pembimbing/ konsultan statistik penelitian, yang
dengan kesabaran telah membimbing dan memberikan pengarahan dalam
penyusunan usulan tesis.
12. Seluruh Staf Pengajar Ilmu Penyakit Dalam FK UNS/ RSUD Dr Moewardi
Surakarta. Prof. Dr. HA Guntur Hermawan, dr., SpPD-KPTI FINASIM (alm),
Prof.Dr. Zainal Arifin Adnan,dr., SpPD-KR,FINASIM, Prof.Dr. Djoko
Hardiman, dr., SpPD-KEMD FINASIM, dr. Suradi Maryono, SpPD-KHOM
FINASIM, dr. Sumarmi Soewoto SpPD-KGER FINASIM, dr. Tatar
Sumandjar, SpPD-KPTI FINASIM, dr. Tantoro Harmono, SpPD-KGEH
FINASIM, dr. Tri Yuli Pramana SpPD-KGEH FINASIM, dr. Supriyanto
Kartodarsono, SpPD-KEMD FINASIM, dr. Supriyanto Muktiatmojo, SpPD
FINASIM, dr. Dhani Redhono, SpPD-KPTI FINASIM, dr. Wachid Putranto,
SpPD-KGH FINASIM, dr. Arifin, SpPD-KIC FINASIM, dr. Fatichati
Budiningsih, SpPD-KGer FINASIM, dr. Agung Susanto,SpPD FINASIM, dr.
Arief Nurudin SpPD FINASIM, dr. Agus Joko S,SpPD, FINASIM, dr.
Yulyani Werdiningsih, SpPD FINASIM, dr.Sri Marwanta SpPD Mkes,
dr.Aritantri D SpPD MSc, dr. Bayu Basuki Wijaya SpPD Mkes,
dr.R. Satriyo SpPD Mkes, dr. Evi Nurhayatun SpPD Mkes, dr. Eva N SpPD
Mkes, dr. Ratih Tri K SpPD, dr. Yudhi Hadjianto Sp.PD Mkes, dan dr. Agus
Jati, Sp.PD yang telah memberi dorongan, bimbingan dan bantuan dalam
segala bentuk sehingga penulis bisa menyelesaikan penyusunan tesis.
13. Ayahanda dan Ibunda tercinta Sunardi dan Suryatmi, Orang tua yang kami
hormati dan sayangi Bapak Djoko Susanto dan Ibu Masitah. Istriku tercinta
dr. Ratih Dewi Yudhani, MSc, buah hatiku Bama Radynka Aidan Pradhana
dan Ailsayara Mahya Pradhani, saudara kandung Astuti Prasetya, saudara ipar
Galuh yang telah memberikan kasih sayang dan semangat dengan sabar dan
tulus memberikan dorongan moril dan materiil dalam penyelesaian tesis ini
dan proses menjalani program pendidikan Pasca Sarjana dan PPDS I Ilmu
Penyakit Dalam.
14. Seluruh teman sejawat seperjuangan Residen Penyakit Dalam yang telah
memberikan dukungan dan bantuan kepada penulis dalam penelitian ini dan
selama menjalani pendidikan.
15. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu-persatu, yang telah
membantu penulis baik dalam menjalani pendidikan maupun dalam persiapan
penelitian ini.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan dan penulisan tesis ini masih
banyak terdapat kekurangan, untuk itu penyusun mohon maaf dan sangat
mengharapkan saran serta kritik dalam rangka perbaikan penulisan tesis ini.
Surakarta, Juli 2016
Penulis
Didik Prasetyo. S501202021. 2016. Pengaruh Ekstrak Propolis Terhadap
Peningkatan Ekspresi P21, Ekspresi protein Bax dan Apoptosis Pada Kultur Sel
Kanker Kolon ( Cell line WiDr). TESIS. Pembimbing I: dr. Suradi Maryono,
SpPD-KHOM,FINASIM, Pembimbing II: Prof. Dr.dr.H. Bambang Purwanto,
SpPD-KGH,FINASIM. Program Studi Kedokteran Keluarga, Program
Pascasarjana, Universitas Sebelas Maret Surakarta.
ABSTRAK
Latar Belakang
Kanker kolorektal merupakan kanker ketiga terbanyak dengan lebih dari 1
juta kasus setiap tahunnya dan salah satu kanker dengan mortalitas tertinggi di
seluruh dunia. Radioterapi dan kemoterapi pada kanker relatif terbatas karena
toksisitasnya yang tinggi dan efek samping yang bersifat merusak. Pengembangan
propolis merupakan strategi baru untuk terapi adjuvan yang diharapkan
meminimalkan efek samping terapi standar yang ada. Peran propolis pada
keganasan terkait kemampuannya dalam menginduksi apoptosis dan aktivitas
antiproliferasi. Penelitian in vitro, menunjukkan propolis memiliki aktivitas
proapoptosis pada berbagai jenis sel kanker, meliputi : kanker laring, kanker paru,
kanker pankreas, kanker tiroid, kanker payudara, kanker prostat dan glioma..
Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian propolis
yang berasal dari Kerjo, Karanganyar, Indonesia terhadap aktivitas antiproliferasi,
terkait peningkatan ekspresi p21 dan apoptosis terkait peningkatan ekspresi
protein bax pada kultur sel kanker kolon (cell line WiDr).
Metode Penelitian
Jenis penelitian ini, eksperimental laboratorik dengan post test with control
group design. Penelitian menggunakan kultur sel WiDr (sel kanker kolon) dengan
pemberian ekstrak etanol propolis (EEP). Pengamatan ekspresi p21 dan protein
Bax dengan metode imunositokimia, sedangkan pengamatan apoptosis dengan
flowcytometry. Analisis statistik menggunakan uji Kruskall Wallis dilanjutkan
Mann WhutneyU test.
Hasil Penelitian
EEP cenderung menekan viabilitas sel WiDr dengan IC 50 sebesar 140
µg/mL. EEP konsentrasi 70,140, 280 µg/mL mampu meningkatkan ekspresi p21
yang sebanding dengan peningkatan konsentrasi yang diberikan. EEP konsentrasi
70 µg/mL (1/2 IC50) paling efektif dalam menginduksi apoptosis dan
meningkatkan ekspresi Bax pada sel WiDr. Peningkatan konsentrasi EEP
mengakibatkan kematian sel WiDr ke arah nekrosis.
Kesimpulan
Penelitian ini menunjukkan EEP mampu menekan viabilitas sel WiDr.
Aktivitas ini kemungkinan terkait dengan kemampuannya dalam meningkatkan
ekspresi p21 sebanding dengan peningkatan konsentrasi EEP. EEP pada
konsentrasi 70µg/mL mampu menginduksi apoptosis pada sel WiDr terkait
dengan peningkatan ekspresi Bax. Peningkatan konsentrasi EEP (140 dan 280
µg/mL) mengakibatkan nekrosis sel WiDr.
Kata kunci : EEP, cell line WiDr, p21, apoptosis, protein bax
Didik Prasetyo. S501202021. 2016. Effect of Propolis Extract on Increasing
Expression of P21, Bax protein expression and Apoptosis In Colon Cancer Cell
Culture (Cell line WiDr). THESIS. Supervisor I: dr. Suradi Maryono, SpPDKHOM, FINASIM, Supervisor II: Prof. Dr.dr.H. Bambang Purwanto, SpPDKGH, FINASIM. Master Program of Family Medicine focusing on Biomedical
Sciences, Sebelas Maret University Surakarta.
ABSTRACT
Background
Colorectal cancer is the third leading cancer worldwide, with more than 1
million cases annually. In 2012, this cancer caused 0.7 million of deaths and
became one of the cancers with the highest mortality rates in the world.
Radiotherapy and chemotherapy for cancer are relatively limited because of high
toxicity and side effects. The development of propolis as a stretegy for adjuvant
therapy for cancer which expected reduce the side effects of cancer treatment. The
role of propolis in the treatment of malignancy associated with its ability to induce
apoptosis and its anti-proliferation activities. In studies in vitro, propolis showed
proapoptosis activity on various types of cancer cells, including: laryngeal cancer,
lung cancer, pancreatic cancer, thyroid cancer, breast cancer, prostate cancer and
glioma.
Objectives
This study aimed to determine the effect of propolis originating from Kerjo,
Karanganyar, Indonesia for anti-proliferation activities, especially associated with
the increase in p21 expression and apoptosis associated with increased expression
of Bax protein in culture of colon cancer cells (cell line WiDr).
Methods
This study was experimental study using post test with control group design.
The study was conducted on cell cultures WiDr (colon cancer cells) with ethanol
extract of propolis. Observations expression of p21 and Bax protein expression
using immunocytochemistry, whereas observation of apoptosis by flowcytometry.
Statistical analysis using Kruskall Wallis continue with Mann WhitneyU test.
Result
EEP suppressed WiDr cell viability with IC50 of 140 mg / mL. EEP
concentration of 70, 140, 280 µg/mL able to increase p21 expression in a dose
dependent manner. EEP at certain concentration (70 µg/mL) was most effective in
inducing apoptosis and increasing the expression of Bax in WiDr cells. Increasing
concentrations of EEP (140, 280 µg/mL) resulting in WiDr cell death toward
necrosis.
Conclusion
This study shows EEP was able to suppress viability of WiDr cell. This
ability may associated with its ability to increase p21 expression in a dose
dependent manner. EEP at concentration 70μg / mL was able to induce apoptosis
in cells WiDr associated with increased expression of Bax protein. Increasing
concentrations of EEP (140 and 280 µg/mL) WiDr cell necrosis.
Keywords: EEP, cell line WiDr, p21, bax protein
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR …..….....…………..……………………...................
v
ABSTRAK.............................……...……..…………………..........................
viii
DAFTAR ISI
…………………….....………………………....................
x
DAFTAR GAMBAR ………………………………………...........................
xii
DAFTAR TABEL…………………………………………...….....................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN …………………….……………………………......
xiv
DAFTAR SINGKATAN
…………………………………........................
xv
BAB I. PENDAHULUAN………………………………………..................
1
A. Latar Belakang Masalah ……………………………..........................
1
B. Rumusan Masalah ..………………....…………………......................
3
C. Tujuan Penelitian ..………………………………………..................
4
1. Tujuan umum …………………………………………......……..
4
2. Tujuan khusus …..…………………………………....…………..
4
D. Manfaat penelitian …..………………………………...….……..........
4
1. Manfaat teoritis ……………………………….....……………….
4
2. Manfaat terapan ……………………………….....……………….
4
BAB II. LANDASAN TEORI...............……………….....…….…….............
5
A. Tinjauan Pustaka ..................................................................................
5
1. Kanker..............................................................................................
5
2. Kanker Kolon...................................................................................
7
a. Epidemiologi......................... …................................................
8
b. Etiologi.......................... …….………………….......................
9
c. Patofisiologi...............................................................................
10
d. Terapi........................................................................................
13
3. Sel WiDr..........................................................................................
15
4. Siklus Sel.........................................................................................
16
5. Protein 21 (P21)...... ………….........................................................
19
6. Apoptosis.........................................................................................
19
7. Propolis............................................................................................
23
B. Penelitian yang relevan …....…………………………………………
31
C. Kerangka Berpikir..... …….....….…………….....…………………...
32
D. Kerangka Konsep.................................................................................
34
…. ……......…………………………...............
35
BAB III. METODE PENELITIAN ...…………………………....................
36
A. Tempat dan Waktu.... .........................................................................
36
B.
Jenis Penelitian........ ……………………………..............................
37
C.
Subyek Penelitian...............................................................................
37
D.
Identifikasi Variabel..........................................................................
37
E.
Definisi Operasional..... ….….........................................................
37
F.
Bahan dan Alat Penelitian.......………..............................................
39
G.
Jalannya Penelitian....... ...................................................................
41
H.
Teknik Analisis Data........................................................................
49
BAB IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN .….....…………..
51
A. Hasil Penelitian...................... .…………………………………….
51
E. Hipotesis Penelitian
1. Uji sitotoksisitas MTTassay menetapkan IC50 ekstrak etanol
propolis dan 5-fluorouracil...........................................................
51
2. Pengamatan ekspresi p21.............................................................
54
3. Uji Induksi apoptosis EEP dengan flowcytometry........................
57
4. Pengamatan ekspresi protein bax..................................................
61
B. Pembahasan ….………………………………………………..........
64
1. Aspek Ontologi ………………………………………......……
64
2. Aspek Epistemiologi ……………………………........………..
66
3. Aspek Aksiologi …………………………..........……………...
69
4. Keterbatasan Penelitian ……………..........…………………....
70
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ………………………………….....
71
DAFTAR PUSTAKA …………………………………………………........
72
LAMPIRAN
72
................…….………….…….....………….………….....
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.
Skema dasar molekular kanker.................................…..
6
Gambar 2.
10 besar kanker di RSKD tahun 2010............................
9
Gambar 3.
Perubahan genetik kanker kolorektal.............................
12
Gambar 4.
Sel WiDr.........................................................................
15
Gambar 5.
Siklus Sel.......................... .............................................
18
Gambar 6.
Apoptosis jalur ekstrinsik dan intrinsik...........…….....
21
Gambar 7.
Struktur molekul flavonoid............................................
25
Gambar 8.
Struktur molekul asam fenolat.......................................
28
Gambar 9.
Struktur molekul CAPE...……………………………...
28
Gambar 10.
Kerangka Berpikir.......................................................
32
Gambar 11.
Kerangka Konsep........................................................
34
Gambar 12.
Skema pengisian plat mikrokultur uji sitotoksisitas.......
44
Gambar 13.
Skema pengisian plat mikrokultur p21 dan bax...........
45
Gambar 14.
Alur Penelitian................................................................
49
Gambar 15.
Morfologi Sel WiDr.......................................................
51
Gambar 16.
Pembentukan kristal formazan………..........................
52
Gambar 17.
Hasil imunositokimia p21....………………………......
55
Gambar 18.
Grafik hubungan konsentrasi bahan uji dengan
ekspresi p21...................................................................
56
Gambar 19.
Uji apoptosis sel WiDr inkubasi 24 jam........................
58
Gambar 20.
Hasil Flowcytometry.................................................
59
Gambar 21.
Grafik hubungan konsentrasi bahan uji dengan
apoptosis sel WiDr.........................................................
60
Gambar 22.
Hasil imunositokimia protein bax..................................
62
Gambar 23.
Grafik hubungan konsentrasi bahan uji dengan ekspresi
Protein bax........................................................................
63
DAFTAR TABEL
Tabel 1.
Faktor resiko kanker usus besar..... ................................
10
Tabel 2.
Senyawa utama propolis...................................................
26
Tabel 3.
Jadwal Penelitian......................................................... ...
36
Tabel 4.
Nilai rata-rata viabilitas sel WiDr ....................................
53
Tabel 5.
Persentase ekspresi p21 sel WiDr.........................................
56
Tabel 6.
Persentase sel WiDr yang mengalami apoptosis..............
60
Tabel 7.
Persentase ekspresi protein bax sel WiDr.........................
63
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Ethical clearance
Lampiran 2. Sertifikat kursus kultur jaringan
Lampiran 3. Absorbansi sel WiDr setelah pemberian bahan uji
Lampiran 4. Persentase viabilitas sel WiDr setelah pemberian bahan uji
Lampiran 5. Analisis regresi linear untuk menentukan IC50 EEP
Lampiran 6. Analisis statistik ekspresi p21 dan protein bax pada kelima
kelompok
Lampiran 7. Hasil Flowcytometry
Lampiran 8. Analisis statistik uji induksi apoptosis
Lampiran 9. Dokumentasi penelitian
DAFTAR SINGKATAN
AP-1
: Activator protein-1
APAF 1
: Apoptotic protease activating factor 1
APC
: Antigen Presenting Cell
BCl
: B-cell lymphoma
CAPE
: Caffeic Acid Phenethyl Ester
CDK
: Cyclin dependent kinase
CIN
: Cromosomal Instability
COX2
: Cyclooxygenase-2
DCC
: Deleted in Colon Cancer
DISC
: Death-inducing singnalling complex
DNA
: Deoksiribonucleid Acid
dUMP
: deoxyuridine monophosphite
EEP
: Ekstrak etanol propolis
EGFR
: Endotheal Growth Factor Receptor
FADD
: Fas-associated death domain
FU
: Fluoro Uracil
MIN
: Microsatellite Instability
MMR
: Missmatch repair
NCCN
: National Comprehensive Cancer Network
NFkB
: Nuclear factor kappa B
NFAT
: Nuclear factor of activated cells
P21
: Protein 21
pGP
: P-glikoprotein
PS
: Phosphatidylserine
RB
: Retinoblastoma
RNA
: Ribonucleic acid
TNFR
: Necrosis FactorReceptor
TRADD
: TNF receptor-associated death domain
TS
: Timidilat sintetase
VEGF
: Vascular Endothel Growth Factor
WHO
: World Health Organization