AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAGING BUAH SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP Staphylococcus aureus, Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daging Buah Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Shigella
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAGING BUAH
SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP Staphylococcus aureus,
Streptococcus pneumoniae, Shigella sonnei DAN Pseudomonas
aeruginosa BESERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
SKRIPSI
Oleh :
HANUGRAH ARDYA CRISDIAN SARASWATI
K 100 090 028
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
i
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAGING BUAH
SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP Staphylococcus aureus,
Streptococcus pneumoniae, Shigella sonnei DAN Pseudomonas
aeruginosa BESERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh :
HANUGRAH ARDYA CRISDIAN SARASWATI
K 100 090 028
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
1
2
3
4
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh
Alhamdulillahirobbil’alamin, puji syukur penulis panjatkan kepada Allah
SWT atas segala rahmat, anugerah, dan kekuatan yang diberikan pada penulis
sehingga dapat menyelesaikan skripsi dengan judul Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Etanol Daging Buah Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Staphylococcus
aureus, Streptococcus pneumoniae, Shigella sonnei DAN Pseudomonas
aeruginosa Beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis sebagai salah satu syarat
mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) Program Studi Ilmu Farmasi pada
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Sholawat dan salam
semoga senantiasa terlimpah kepada Rosululloh Muhammad SAW, keluarga,
sahabat, dan para generasi yang meneruskan perjuangan beliau.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2.
Bapak Dr. Haryoto, MSc., selaku pembimbing akademik sekaligus
pembimbing utama.
3.
Bapak Peni Indrayudha, M.Biotech., Apt., selaku dosen pembimbing
pendamping.
4.
Ibu Ika Trisharyanti D. K., M. Farm., Apt., selaku penguji I
5.
Ibu Rima Munawaroh, M. Sc., Apt., selaku penguji II
6.
Kedua Orangtua tercinta Bapak (Harsono) dan mama (Ratna Yanti)
7.
Kakak (Dian) dan teman-teman tim peneliti (Evi, Mita, Fisia, Anin)
Penulis menyadari bahwa naskah skripsi ini jauh dari kesempurnaan.
Semoga penelitian ini bermanfaat bagi pengembangan ilmu dan teknologi
khususnya dalam bidang farmasi dan dunia kesehatan pada umumnya.
Wassalamualaikum Wr. Wb
Surakarta , September 2013
Penulis
iv
5
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL...........................................................................................i
HALAMAN PENGESAHAN.............................................................................ii
HALAMAN DEKLARASI.................................................................................iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................iv
DAFTAR ISI .......................................................................................................v
DAFTAR TABEL ...............................................................................................vii
DAFTAR GAMBAR ..........................................................................................viii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................ix
DAFTAR SINGKATAN ....................................................................................x
ABSTRAK ..........................................................................................................xi
BAB I. PENDAHULUAN ..................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah ..........................................................................1
B. Perumusan Masalah.................................................................................3
C. Tujuan Penelitian.....................................................................................3
D. Tinjauan Pustaka .....................................................................................3
1. Buah Sirsak (Annona muricata L.) ....................................................3
2. Staphylococcus aureus .......................................................................5
3. Pseudomonas aeruginosa ..................................................................5
4. Shigella sonnei ...................................................................................5
5. Streptococcus pneumonia..................................................................6
6. Uji Aktivitas Antibakteri ...................................................................7
7. Ekstraksi ............................................................................................7
8. Kromatografi Lapis Tipis ..................................................................8
E. Landasan Teori ........................................................................................8
F. Hipotesis ..................................................................................................8
BAB II. METODE PENELITIAN ......................................................................9
A. Jenis Penelitian dan Variabel Penelitian .................................................9
B. Alat dan Bahan ........................................................................................9
v
6
C. Jalannya Penelitian ..................................................................................10
1. Determinasi Tanaman .......................................................................10
2. Pengambilan Bahan ...........................................................................10
3. Pembuatan Ekstrak Etanol Daging buah sirsak (Annona
muricata Linn) ..................................................................................10
4. Pembuatan Media ..............................................................................10
5. Pemeliharaan Bakteri ........................................................................10
6. Sterilisasi Alat dan Bahan .................................................................11
7. Pembuatan suspensi bakteri ..............................................................11
8. Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daging Buah Sirsak....11
9. Identifikasi Bakteri ............................................................................12
10. Pembuatan Kontrol............................................................................12
11. Uji Antibakteri dengan Metode Dilusi Padat ....................................12
12. Uji Kandungan Senyawa dengan KLT .............................................13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ...........................................................14
A. Determinasi Tanaman ............................................................................14
B. Identifikasi Bakteri ..................................................................................14
C. Penyari dan Ekstraksi ..............................................................................16
D. Uji Aktivitas Antibakteri .........................................................................17
E. Kromatografi Lapis Tipis ........................................................................19
BAB IV. PENUTUP ...........................................................................................22
A. Kesimpulan..............................................................................................22
B. Saran ........................................................................................................22
DAFTAR PUSTAKA .........................................................................................23
LAMPIRAN ........................................................................................................26
vi
7
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Tabel 2.
Hasil Uji Biokimia Bakteri Pseudomonas aeruginosa,
Shigella sonnei dan Staphylococcus aureus ................................
16
Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol Daging Buah Sirsak....................
20
vii
8
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Tanaman Annona muricata L. ....................................................
Gambar 2. Hasil Pengecatan Gram (a) Staphylococcus aureus, (b)
Streptococcus pneumoniae,(c) Shigella sonnei dan (d)
Pseudomonas aeruginosa ...........................................................
Gambar 3.
Gambar 4.
Gambar 5.
Gambar 6.
4
15
Hasil Uji Biokimia terhadap Streptococcus aureus,
Shigella sonnei dan Pseudomonas aeruginosa ...........................
16
Uji Bakteri Staphylococcus aureus (A), Streptococcus
pneumonia (B), Shigella sonnei (C) dan Pseudomonas
aeruginosa (D) ...........................................................................
18
Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol Daging Buah Sirsak
Bercak Dengan Rf 0,8. Fase Diam Silika Gel GF 254,
Fase Gerak n-Heksan: Etil asetat: Asam asetat alkohol
(3 : 16 : 1) v/v .............................................................................
19
Struktur kandungan buah sirsak ..................................................
21
viii
9
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Determinasi ......................................................................
26
Lampiran 2. Perhitungan Rendemen, Konsentrasi Ekstrak Etanol
Daging Buah Sirsak dan Harga Rf ............................................
28
ix
10
DAFTAR SINGKATAN
ATCC
: American Type Culture Cell
BHI
: Brain Heart Infusion
CFU
: Colony Forming Unit
GF
: Gips Fluorescent
KBM
: Kadar Bunuh Minimum
KHM
: Kadar Hambat Minimum
KIA
: Kligler Iron Agar
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
LIA
: Lysin Iron Agar
MH
: Mueller Hinton
MIO
: Motility Indole Ornithine
MSA
: Manitol Salt Agar
NCIM
: National Collection of Industrial Microorganism
Rf
: Retardation Factor
UV
: Ultraviolet
x
11
INTISARI
Buah sirsak (Annona muricata L.) menjadi obat herbal di banyak negara
dan sekarang menyebar luas di seluruh bagian tropis dan subtropis dari belahan
dunia ini. A.muricata telah digunakan dalam pengobatan alami di daerah tropis
termasuk kulit kayu, daun, akar dan biji.
Ekstrak etanol daun sirsak mempunyai aktivitas antibakteri Staphylococus
aureus, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumonia dan Bacillus subtilis. Tujuan dari
penelitian ini adalah mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daging buah
sirsak terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei, Staphylococcus
aureus dan Streptococcus pneumonia melalui metode dilusi padat serta
mengetahui senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak etanol daging buah
sirsak yang berpotensi sebagai antibakteri. Daging buah sirsak dimaserasi dengan
etanol 96% sehingga diperoleh ekstrak etanol daging buah sirsak. Ekstrak diujikan
terhadap bakteri dengan metode dilusi padat dengan parameter Kadar Hambat
Minimal (KHM) dan Kadar Bunuh Minimal (KBM). Analisis kualitatif
dilanjutkan dengan kromatografi lapis tipis dengan mendeteksi senyawa yang
berpotensi sebagai antibakteri.
Hasil penelitian aktivitas antibakteri menunjukkan terhadap bakteri
Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei, Staphylococcus aureus dan
Streptococcus pneumoniae sampai kadar 5% untuk ke empat bakteri tidak
memiliki nilai KHM maupun KBM. Golongan senyawa yang terdeteksi dalam
kromatografi lapis tipis adalah terpenoid dengan hRf 0,8.
Kata Kunci : Annona muricata L., Antibakteri, Kromatografi Lapis Tipis,
Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei, Staphylococcus
aureus dan Streptococcus pneumoniae
xi
SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP Staphylococcus aureus,
Streptococcus pneumoniae, Shigella sonnei DAN Pseudomonas
aeruginosa BESERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
SKRIPSI
Oleh :
HANUGRAH ARDYA CRISDIAN SARASWATI
K 100 090 028
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
i
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAGING BUAH
SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP Staphylococcus aureus,
Streptococcus pneumoniae, Shigella sonnei DAN Pseudomonas
aeruginosa BESERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh :
HANUGRAH ARDYA CRISDIAN SARASWATI
K 100 090 028
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
1
2
3
4
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh
Alhamdulillahirobbil’alamin, puji syukur penulis panjatkan kepada Allah
SWT atas segala rahmat, anugerah, dan kekuatan yang diberikan pada penulis
sehingga dapat menyelesaikan skripsi dengan judul Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Etanol Daging Buah Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Staphylococcus
aureus, Streptococcus pneumoniae, Shigella sonnei DAN Pseudomonas
aeruginosa Beserta Profil Kromatografi Lapis Tipis sebagai salah satu syarat
mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) Program Studi Ilmu Farmasi pada
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Sholawat dan salam
semoga senantiasa terlimpah kepada Rosululloh Muhammad SAW, keluarga,
sahabat, dan para generasi yang meneruskan perjuangan beliau.
Penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2.
Bapak Dr. Haryoto, MSc., selaku pembimbing akademik sekaligus
pembimbing utama.
3.
Bapak Peni Indrayudha, M.Biotech., Apt., selaku dosen pembimbing
pendamping.
4.
Ibu Ika Trisharyanti D. K., M. Farm., Apt., selaku penguji I
5.
Ibu Rima Munawaroh, M. Sc., Apt., selaku penguji II
6.
Kedua Orangtua tercinta Bapak (Harsono) dan mama (Ratna Yanti)
7.
Kakak (Dian) dan teman-teman tim peneliti (Evi, Mita, Fisia, Anin)
Penulis menyadari bahwa naskah skripsi ini jauh dari kesempurnaan.
Semoga penelitian ini bermanfaat bagi pengembangan ilmu dan teknologi
khususnya dalam bidang farmasi dan dunia kesehatan pada umumnya.
Wassalamualaikum Wr. Wb
Surakarta , September 2013
Penulis
iv
5
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL...........................................................................................i
HALAMAN PENGESAHAN.............................................................................ii
HALAMAN DEKLARASI.................................................................................iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................iv
DAFTAR ISI .......................................................................................................v
DAFTAR TABEL ...............................................................................................vii
DAFTAR GAMBAR ..........................................................................................viii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................ix
DAFTAR SINGKATAN ....................................................................................x
ABSTRAK ..........................................................................................................xi
BAB I. PENDAHULUAN ..................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah ..........................................................................1
B. Perumusan Masalah.................................................................................3
C. Tujuan Penelitian.....................................................................................3
D. Tinjauan Pustaka .....................................................................................3
1. Buah Sirsak (Annona muricata L.) ....................................................3
2. Staphylococcus aureus .......................................................................5
3. Pseudomonas aeruginosa ..................................................................5
4. Shigella sonnei ...................................................................................5
5. Streptococcus pneumonia..................................................................6
6. Uji Aktivitas Antibakteri ...................................................................7
7. Ekstraksi ............................................................................................7
8. Kromatografi Lapis Tipis ..................................................................8
E. Landasan Teori ........................................................................................8
F. Hipotesis ..................................................................................................8
BAB II. METODE PENELITIAN ......................................................................9
A. Jenis Penelitian dan Variabel Penelitian .................................................9
B. Alat dan Bahan ........................................................................................9
v
6
C. Jalannya Penelitian ..................................................................................10
1. Determinasi Tanaman .......................................................................10
2. Pengambilan Bahan ...........................................................................10
3. Pembuatan Ekstrak Etanol Daging buah sirsak (Annona
muricata Linn) ..................................................................................10
4. Pembuatan Media ..............................................................................10
5. Pemeliharaan Bakteri ........................................................................10
6. Sterilisasi Alat dan Bahan .................................................................11
7. Pembuatan suspensi bakteri ..............................................................11
8. Pembuatan Seri Konsentrasi Ekstrak Etanol Daging Buah Sirsak....11
9. Identifikasi Bakteri ............................................................................12
10. Pembuatan Kontrol............................................................................12
11. Uji Antibakteri dengan Metode Dilusi Padat ....................................12
12. Uji Kandungan Senyawa dengan KLT .............................................13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ...........................................................14
A. Determinasi Tanaman ............................................................................14
B. Identifikasi Bakteri ..................................................................................14
C. Penyari dan Ekstraksi ..............................................................................16
D. Uji Aktivitas Antibakteri .........................................................................17
E. Kromatografi Lapis Tipis ........................................................................19
BAB IV. PENUTUP ...........................................................................................22
A. Kesimpulan..............................................................................................22
B. Saran ........................................................................................................22
DAFTAR PUSTAKA .........................................................................................23
LAMPIRAN ........................................................................................................26
vi
7
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Tabel 2.
Hasil Uji Biokimia Bakteri Pseudomonas aeruginosa,
Shigella sonnei dan Staphylococcus aureus ................................
16
Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol Daging Buah Sirsak....................
20
vii
8
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Tanaman Annona muricata L. ....................................................
Gambar 2. Hasil Pengecatan Gram (a) Staphylococcus aureus, (b)
Streptococcus pneumoniae,(c) Shigella sonnei dan (d)
Pseudomonas aeruginosa ...........................................................
Gambar 3.
Gambar 4.
Gambar 5.
Gambar 6.
4
15
Hasil Uji Biokimia terhadap Streptococcus aureus,
Shigella sonnei dan Pseudomonas aeruginosa ...........................
16
Uji Bakteri Staphylococcus aureus (A), Streptococcus
pneumonia (B), Shigella sonnei (C) dan Pseudomonas
aeruginosa (D) ...........................................................................
18
Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol Daging Buah Sirsak
Bercak Dengan Rf 0,8. Fase Diam Silika Gel GF 254,
Fase Gerak n-Heksan: Etil asetat: Asam asetat alkohol
(3 : 16 : 1) v/v .............................................................................
19
Struktur kandungan buah sirsak ..................................................
21
viii
9
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Determinasi ......................................................................
26
Lampiran 2. Perhitungan Rendemen, Konsentrasi Ekstrak Etanol
Daging Buah Sirsak dan Harga Rf ............................................
28
ix
10
DAFTAR SINGKATAN
ATCC
: American Type Culture Cell
BHI
: Brain Heart Infusion
CFU
: Colony Forming Unit
GF
: Gips Fluorescent
KBM
: Kadar Bunuh Minimum
KHM
: Kadar Hambat Minimum
KIA
: Kligler Iron Agar
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
LAF
: Laminar Air Flow
LIA
: Lysin Iron Agar
MH
: Mueller Hinton
MIO
: Motility Indole Ornithine
MSA
: Manitol Salt Agar
NCIM
: National Collection of Industrial Microorganism
Rf
: Retardation Factor
UV
: Ultraviolet
x
11
INTISARI
Buah sirsak (Annona muricata L.) menjadi obat herbal di banyak negara
dan sekarang menyebar luas di seluruh bagian tropis dan subtropis dari belahan
dunia ini. A.muricata telah digunakan dalam pengobatan alami di daerah tropis
termasuk kulit kayu, daun, akar dan biji.
Ekstrak etanol daun sirsak mempunyai aktivitas antibakteri Staphylococus
aureus, Proteus vulgaris, Klebsiella pneumonia dan Bacillus subtilis. Tujuan dari
penelitian ini adalah mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daging buah
sirsak terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei, Staphylococcus
aureus dan Streptococcus pneumonia melalui metode dilusi padat serta
mengetahui senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak etanol daging buah
sirsak yang berpotensi sebagai antibakteri. Daging buah sirsak dimaserasi dengan
etanol 96% sehingga diperoleh ekstrak etanol daging buah sirsak. Ekstrak diujikan
terhadap bakteri dengan metode dilusi padat dengan parameter Kadar Hambat
Minimal (KHM) dan Kadar Bunuh Minimal (KBM). Analisis kualitatif
dilanjutkan dengan kromatografi lapis tipis dengan mendeteksi senyawa yang
berpotensi sebagai antibakteri.
Hasil penelitian aktivitas antibakteri menunjukkan terhadap bakteri
Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei, Staphylococcus aureus dan
Streptococcus pneumoniae sampai kadar 5% untuk ke empat bakteri tidak
memiliki nilai KHM maupun KBM. Golongan senyawa yang terdeteksi dalam
kromatografi lapis tipis adalah terpenoid dengan hRf 0,8.
Kata Kunci : Annona muricata L., Antibakteri, Kromatografi Lapis Tipis,
Pseudomonas aeruginosa, Shigella sonnei, Staphylococcus
aureus dan Streptococcus pneumoniae
xi