3.7.4 Mensterilkan Bahan Coba Sea Cucumber Stichopus variegatus
Sediakan bahan coba yang akan disterilkan. Ditimbang sebanyak 1,04 gram Sea Cucumber Stichopus variegatus yang akan diautoclave 121
C selama 2,5 jam. Tujuannya adalah untuk mengetahui apakah bahan coba Sea Cucumber Stichopus
variegatus tersebut tidak terkontaminasi dengan yang lain.
Gambar 3.10. Pengambilan bahan coba Gambar 3.11. 1,04 gr Bahan coba
Gambar 3.12. Autoclave
3.7.5 Pembuatan BHI Brain Heart Infusion Agar dan BHI Brain Heart
Infusion Broth 3.7.5.1 BHI
Brain Heart Infusion Agar
Sebanyak 13 gram bubuk BHI Brain Heart Infusion Agar ditimbang dengan menggunakan timbangan analitik. Kemudian dimasukkan kedalam botol elemeyer
dan diambil sebanyak 250ml aquadest. Diaduk sampai merata lalu ditutup dengan kapas dan aluminium foil. Autoclave pada suhu 121
o
C selama 2,5 jam.
Gambar 3.13. 13 gram BHI Brain Heart Gambar 3.14. BHI Brain Heart Infusion Agar Infusion Agar
Gambar 3.15. 13 gram BHI Agar dan 250 ml aquadest
3.7.5.2 BHI Brain Heart Infusion Broth
Sebanyak 3,7 gram bubuk BHI Brain Heart Infusion Broth di timbang dengan menggunakan timbangan analitik. Kemudian dimasukkan ke dalam tabung
elemeyer dan dicampur dengan 100ml aquadest. Diaduk sampai merata dan ditutup dengan kapas dan aluminium foil, kemudian disterilkan didalam autoclave pada suhu
121
o
C selama 2,5 jam.
Gambar 3.16. 3,7 gram BHI Brain Gambar 3.17. BHI Brain Heart Infusion Broth Heart Infusion Broth
Gambar 3.18. 3,7 gram BHI Gambar 3.19. BHI Brain Heart Brain Brain Heart Infusion Infusion Agar dan BHI Brain Heart
dan 100 ml aquadest Infusion Broth
3.7.6 Pembuatan konsentrasi bahan coba Sea Cucumber Stichopus
variegatus dan CaOH2
Pembuatan konsentrasi Sea Cucumber Stichopus variegatus 0,1, 0,2, 0,25, 0,3, 0,4, 0,5 dan CaOH2 0,5. Dengan rumus V
1
.C
1
= V
2
.C
2.
dimana V
1
adalah jumlah pelarut ml, C
1
adalah konsentrasi dari pelarut , V
2
adalah jumlah bahan coba ml, C
2
adalah konsentrasi yang dicari dari bahan coba .
Gambar 3.20. Sea Cucumber Gambar 3.21. Sea Cucumber Stichopus variegatus Stichopus variegatus+ CaOH2
Bahan coba Sea Cucumber Stichopus variegatus dilakukan pengenceran dengan menambahkan BHI Brain Heart Infusion Broth dan dicampur
dengan menggunakan alat pemanas dan diaduk dengan menggunakan pengaduk.
Gambar 3.22 Pemanasan dengan Stir Gambar 3.23 Pengaduk Plate + BHI Brain Heart Infusion Broth
Pada konsentrasi 0,1 membutuhkan 0,001 ml Sea Cucumber Stichopus variegatus + 0,999 ml BHI Brain Heart Infusion Broth. Pada konsentrasi 0,2
membutuhkan 0,002 ml Sea Cucumber Stichopus variegatus + 0,998 ml BHI Brain Heart Infusion Broth. Pada konsentrasi 0,25 membutuhkan 0,0025 ml Sea
Cucumber Stichopus variegatus + 0,9975 ml BHI Brain Heart Infusion Broth. Pada konsentrasi 0,3 membutuhkan 0,003 ml Sea Cucumber Stichopus variegatus
+ 0,997 ml BHI Brain Heart Infusion Broth. Pada konsentrasi 0,4 membutuhkan 0,004 ml Sea Cucumber Stichopus variegatus + 0,996 ml BHI Brain Heart
Infusion Broth. Pada konsentrasi 0,5 membutuhkan 0,005 ml Sea Cucumber Stichopus variegatus + 0,995 ml BHI Brain Heart Infusion Broth. Pada CaOH2
diambil konsentrasi 0,5 membutuhkan 0,005 ml Sea Cucumber Stichopus variegatus + 0,995 ml BHI Brain Heart Infusion Broth. Semua bahan diambil
dengan menggunakan pipet steril.
Gambar 3.24. Pipet Gambar 3.25.Tips Biru dan kuning steril
Dan masing-masing konsentrasi dimasukkan kedalam tabung kecil dan didekatkan dengan bunsen tujuannya agar tidak terjadi kontaminasi. Lalu di campur
dengan menggunakan vorteks tujuan agar tercampur dengan homogen antara Sea Cucumber Stichopus variegatus dengan BHI Brain Heart Infusion Broth. Dan
setiap tabung diberi label dengan tujuan agar tidak terjadi kesalahan dalam pengambilan sampel. Kemudian disimpan di dalam kulkas dengan suhu 37
C.
Gambar 3.26. Vorteks Gambar 3.27. Konsentasi Sea Cucumber Stichopus variegatus +CaOH2
Gambar 3.28. Pencampuran dengan menggunakan vorteks
3.7.7 Perlakuan I Nilai
Kategori