Karakterisasi Enzim dan Studi Pendahuluan Kloning Gen Dekstranase Dari Streptococcus sp.B1
Ringkasrn
MISWAK. Karakterisasi Enzim dan Studi Pendahuluan Kloning G m Dekstranase
Dari Streptococcus sp. B1, dengan pernbimbing Dr. Maria Bintang. MS. Sebagai Ketua
Komisi, Dr. Hasim, DEA. dan Dr. Ir. Untung Murdiyatmo sebagai Angsota komisi.
Dekstran dalam tebu lnaupun nira merupakan senyawa ekstrapolisakarida yang
dihasilkan oleh aktivitas bakteri tanah terutalna Leucortostoc mrsee~tteroides.Dalam
industri gula keberadaan dekstran yang tinggi dalam nira sangat nienghambat proses
petnbentukan kristal sukrosa (gula) dan menurunkan kualitas lnaupun kuantitas gula yang
dihasilkan. Dalaln bidang kesehatan, dekstran yang dihasilkan oleh bakteri dalam mulut
menyebabkan tejadinyapluyue yang dapat lnenyakibatkan kerusakan gigi (curies tlen/ul).
Dekstranase (EC. 3.2.1.11)
adalah enzim ckstraselular yang dapat dihasilkan
oleh beberapa jamur, yeast dan bak~eri.Enzirn ini nlenghidrolisis dekstran dengan nieliiutus
ikatan a-1,6-glikosida menjadi oligosakarida atau isornaltooligosakarida (IMO). Dalam
industri gula, pe~nakaiandekstranase dapat meningkatkan kualitas dan produksi kristal gula
salnpai 10%~.
Streptococcus sp. B1 merupakan isolat lokal yang telah diketahui dapat menghasilkan dekstranase bi!a ditumbuhkan secara aerob dalaln media yang lnengandung dekstran.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa dekstranase 8 1 mempunyai p H dan suhu
optimum masing-masing pada
5,s dan 40°C-50°C
1,12 pbl (0,22%). Berdasarkan
dengan V.,,,,, 5,S8 mMlmenit dan K,,
SDS-PAGE dan N-PAGE
Streptococcus sp. B1
rnenghasilkan dekstranase 3 bentuk dengan bobot molekul masing-masing 66 kDa, 61
kDa dan 55 kDa dan merupakan enzim monomer. Aktivitas dekstranase ini sangat
dihambat oleh adanya &NO3 cian lIgC12 dalam calnpuran reaksi pada konsentrasi 1 I ~ M
dan 10 tnM. Sebaliknya keberadaan glukosa, frulitos:~dan sukrosa pzda konsentrasi 10
mM dapat meningkatkan aktivitasnya.
Usaha uutuk mengkloning gel1 dekstranase ini ke E. coli J h I l 0 9 beluln diperoleh
koloni transforinan yang menunjukkan koloni dekstranolitik.
KARAKTERISASI E N Z I M D A N STUD1 PENDAHULUAN
KLONING GEN DEKSTRANASE D A R I
Streptococcus sp. B 1
Enzyme Characterization and Preliminary Gene Cloning of
The Dextranase From Streptococcus sp. B1
MISWAR
.
.
Tesis Sebagni Salnh Sntu Synrnt
ul;t"k Meii~~eroleh
Gelnr Mngister Sniiis
Pnda
Program Pnscnsnrjnnn
Iristitut Pertnniaii Bogor
."-.,
S'
PROGRAM PASCASARJANA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
1998
MISWAK. Karakterisasi Enzim dan Studi Pendahuluan Kloning G m Dekstranase
Dari Streptococcus sp. B1, dengan pernbimbing Dr. Maria Bintang. MS. Sebagai Ketua
Komisi, Dr. Hasim, DEA. dan Dr. Ir. Untung Murdiyatmo sebagai Angsota komisi.
Dekstran dalam tebu lnaupun nira merupakan senyawa ekstrapolisakarida yang
dihasilkan oleh aktivitas bakteri tanah terutalna Leucortostoc mrsee~tteroides.Dalam
industri gula keberadaan dekstran yang tinggi dalam nira sangat nienghambat proses
petnbentukan kristal sukrosa (gula) dan menurunkan kualitas lnaupun kuantitas gula yang
dihasilkan. Dalaln bidang kesehatan, dekstran yang dihasilkan oleh bakteri dalam mulut
menyebabkan tejadinyapluyue yang dapat lnenyakibatkan kerusakan gigi (curies tlen/ul).
Dekstranase (EC. 3.2.1.11)
adalah enzim ckstraselular yang dapat dihasilkan
oleh beberapa jamur, yeast dan bak~eri.Enzirn ini nlenghidrolisis dekstran dengan nieliiutus
ikatan a-1,6-glikosida menjadi oligosakarida atau isornaltooligosakarida (IMO). Dalam
industri gula, pe~nakaiandekstranase dapat meningkatkan kualitas dan produksi kristal gula
salnpai 10%~.
Streptococcus sp. B1 merupakan isolat lokal yang telah diketahui dapat menghasilkan dekstranase bi!a ditumbuhkan secara aerob dalaln media yang lnengandung dekstran.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa dekstranase 8 1 mempunyai p H dan suhu
optimum masing-masing pada
5,s dan 40°C-50°C
1,12 pbl (0,22%). Berdasarkan
dengan V.,,,,, 5,S8 mMlmenit dan K,,
SDS-PAGE dan N-PAGE
Streptococcus sp. B1
rnenghasilkan dekstranase 3 bentuk dengan bobot molekul masing-masing 66 kDa, 61
kDa dan 55 kDa dan merupakan enzim monomer. Aktivitas dekstranase ini sangat
dihambat oleh adanya &NO3 cian lIgC12 dalam calnpuran reaksi pada konsentrasi 1 I ~ M
dan 10 tnM. Sebaliknya keberadaan glukosa, frulitos:~dan sukrosa pzda konsentrasi 10
mM dapat meningkatkan aktivitasnya.
Usaha uutuk mengkloning gel1 dekstranase ini ke E. coli J h I l 0 9 beluln diperoleh
koloni transforinan yang menunjukkan koloni dekstranolitik.
KARAKTERISASI E N Z I M D A N STUD1 PENDAHULUAN
KLONING GEN DEKSTRANASE D A R I
Streptococcus sp. B 1
Enzyme Characterization and Preliminary Gene Cloning of
The Dextranase From Streptococcus sp. B1
MISWAR
.
.
Tesis Sebagni Salnh Sntu Synrnt
ul;t"k Meii~~eroleh
Gelnr Mngister Sniiis
Pnda
Program Pnscnsnrjnnn
Iristitut Pertnniaii Bogor
."-.,
S'
PROGRAM PASCASARJANA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
1998