Efek Ekstrak Sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) terhadap Peningkatan Kadar Superoksida Dismutase (SOD) Plasma Darah Tikus Putih (Rattus norvegicus strain wistar) yang Dipapar Asap Rokok
HA
ASIL PENE
ELITIAN
k Ekstrak Sambiloto (Andrograp
phis panicu
ulata Ness.)) terhadap
Efek
Peningkaatan Kadar Superoksidda Dismuta
ase (SOD) Plasma
P
Darrah Tikus Putih
P
(Rattus norrvegicus strrain wistar) yang Dipaapar Asap R
Rokok
Oleh:
PRAKO
OSA YUDH
HA KUSSUMA
2
2012103303
311144
UNIV
VERSITAS MUHAMM
MADIYAH
H MALANG
G
FAKU
ULTAS KED
DOKTERA
AN
2016
6
LEMBAR PENGESAHAN
LAPORAN HASIL PENELITIAN
Telah disetujui sebagai hasil penelitian
untuk memenuhi persyaratan
Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Malang
Tanggal : 2 Februari 2016
Pembimbing I
dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK
Pembimbing II
dr. Nuryati
Mengetahui,
Fakultas Kedokteran
Dekan,
Dr. Irma Suswati, M.Kes
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Allah SWT, karena atas berkat dan
rahmat-Nya, penulis telah berhasil menyelesaikan Karya Tulis Akhir yang
berjudul “Efek Ekstrak Sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) terhadap
Peningkatan Kadar SOD (Superoksida Dismutase) Plasma Darah Tikus Putih
(Rattus norvegicus strain wistar) yang Dipapar Asap Rokok”. Penulisan Karya
Tulis Akhir ini dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk
mencapai gelar Sarjana Kedokteran Jurusan Pendidikan Dokter pada Fakultas
Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.
Penulis menyadari bahwa, tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai
pihak, dari masa perkuliahan sampai pada penyusunan penelitian ini, sangatlah
tidak mudah. Oleh karena itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Orang tua dan keluarga yang telah memberikan bantuan dukungan
material dan moral.
2. dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK selaku pembimbing I atas bimbingan,
pelajaran, dukungan dan saran yang telah diberikan dalam penyusunan
karya tulis akhir ini.
3. dr. Nuryati selaku pembimbing II atas kesabaran dan ketelitiannya dalam
membimbing dan memberi saran dalam penyusunan karya tulis akhir ini.
4. dr. Moch. Ma’roef, Sp.OG selaku penguji atas saran, kritik dan
bimbingannya.
5. Seluruh dosen FK UMM atas ilmu yang diberikan sehingga penulias
mampu menyelesaikan studi dan karya tulis akhir ini.
6. Staf TU FK UMM yang turut membantu atas kelancaran dan
terlaksananya karya tulis akhir ini; dan
7. Sahabat yang telah banyak membantu saya dalam menyelesaikan karya
tulis akhir ini.
Karya Tulis Akhir ini masih jauh dari kesempurnaan. Dengan kerendahan
hati penulis mohon maaf dan mengharapkan saran dan kritik yang membangun.
Semoga Karya Tulis Akhir ini dapat menambah wawasan dan bermanfaat bagi
pembaca.
Malang, 2 Februari 2016
Penulis
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ……............................................................................... ii
LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................. iii
LEMBAR PENGUJIAN ….............................................................................. iv
KATA PENGANTAR …................................................................................. v
ABSTRAK ……………….............................................................................. vii
ABSTRACT …………..….............................................................................. viii
DAFTAR ISI ……………............................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR ……................................................................................ xii
DAFTAR TABEL
……............................................................................... xiii
DAFTAR SINGKATAN ….............................................................................. xiv
DAFTAR LAMPIRAN…….............................................................................. xv
BAB 1
PENDAHULUAN ...................................................................
1
1.1 Latar Belakang ..................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah ............................................................
3
1.3 Tujuan . ..............................................................................
3
1.3.1 .............................................................................. Tujuan
Umum ........................................................................... 3
1.3.2 .............................................................................. Tujuan
Khusus .......................................................................... 3
1.4 Manfaat .................................................................................. 3
1.4.1 Manfaat Akademis ....................................................... 3
1.4.2 Manfaat Masyarakat ..................................................... 4
1.4.3 Manfaat Klinis . ............................................................ 4
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 5
2.1 SOD (Superoxide Dismutase) ................................................. 5
2.2 Antioksidan ............................................................................ 6
2.3 Stres Oksidatif......................................................................... 7
ix
2.4 Rokok. ..................................................................................... 8
2.4.1 Pengertian Rokok.......................................................... 8
2.4.2 Asap Rokok ................................................................. 9
2.4.3 Bahan yang Terkandung dalam Asap Rokok .............. 10
2.4.4 Asap Rokok sebagai Radikal Bebas ............................ 13
2.5 Sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) .......................... 15
2.5.1 Tata Nama Sambiloto .................................................. 15
2.5.2 Jenis Sambiloto ............................................................. 17
2.5.3 Kandungan Kimia ........................................................ 18
2.5.4 Khasiat Sambiloto......................................................... 20
BAB 3
KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS ................. 22
3.1 Kerangka Konseptual ............................................................. 22
3.2 Hipotesis Penelitian ................................................................ 24
BAB 4
METODE PENELITIAN ........................................................... 25
4.1 Rancangan Penelitian .......................................................... 25
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .............................................. 25
4.3 Populasi dan Sampel ........................................................... 25
4.3.1 Populasi . ........................................................................ 25
4.3.2 Sampel . .......................................................................... 25
4.3.3 Replikasi . ....................................................................... 25
4.3.4 Teknik Pengambilan Sampel ......................................... 26
4.3.5 Karakteristik Sampel Penelitian .................................... 26
4.3.5.1 Kriteria Inklusi...................................................... 26
4.3.5.2 Kriteria Eksklusi .................................................. 27
4.3.6 Variabel Penelitian ........................................................ 27
4.3.6.1 Variabel Bebas ..................................................... 27
4.3.6.2 Variabel Tergantung . ........................................... 27
4.3.7 Definisi Operasional ...................................................... 27
4.4 Alat dan Bahan ..................................................................... 28
x
4.4.1 Alat ................................................................................. 28
4.4.2 Bahan .............................................................................. 29
4.5 Prosedur Penelitian ............................................................. 30
4.5.1 Ekstrak Sambiloto........................................................... 30
4.5.2 Aklimatisasi .................................................................... 30
4.5.3 Penentuan Dosis Ekstrak Sambiloto ............................... 31
4.5.4 Pembagian Kelompok Tikus ......................................... 31
4.5.5 Pemaparan Asap Rokok ................................................. 32
4.5.6 Proses Anastesi dan Pembedahan Hewan Coba ............. 33
4.5.7 Pemeriksaan kadar SOD ................................................. 33
4.6 Alur Penelitian ...................................................................... 34
4.7 Analisis Data ........................................................................ 35
BAB 5
HASIL PENELITIAN ............................................................... 37
5.1 Hasil Penelitian ..................................................................... 37
5.2 Analisa Data ......................................................................... 38
5.2.1 Hasil Analisis Uji Normalitas, Homogenitas, dan One
Way Anova ……………………………………………… 38
5.2.2 Hasil Analisis Uji Korelasi .............................................. 40
5.2.3 Hasil Analisis Uji Regresi ............................................... 41
BAB 6
PEMBAHASAN ............................................................................... 43
BAB 7
KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 47
7.1 Kesimpulan .................................................................................. 47
7.2 Saran ............................................................................................ 48
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................ 49
LAMPIRAN ..................................................................................................... 55
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Kandungan Oksidan Asap Rokok Fase Gas dan Fase Tar
15
2.2 Sambiloto ( Andrographis paniculata Nees.)
17
3.1 Kerangka Konsep
21
4.1 Alur penelitian
33
5.1 Grafik Rerata Kadar SOD Serum Tikus Putih
38
5.2 Grafik regresi antara dosis ekstrak sambiloto dengan kadar SOD serum
tikus putih
42
xii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
5.1 Rerata Kadar SOD Serum Tikus Putih ................................................. 37
5.2 Hasil Uji Anova...................................................................................... 39
5.3 Hasil Uji Tukey...................................................................................... 39
5.4 Hasil Uji Koefisien Regresi..................................................................... 41
xiii
DAFTAR SINGKATAN
AIDS
:
Acquired Immunodeficiency Syndrome
BHA
:
Butil Hidroksi Anisol
BHT
:
Butil Hidroksi Toluen
CNS
:
Central Nervus System
CO
:
Karbon Monoksida
DNA
:
Deoxyribonucleic Acid
ETS
:
Environtment Tobacco Smoke
GSH
:
Glutathione Sulphydril
INGCAT
:
International Non Government Coaltion Against
Tobacco
MDA
:
Malondialdehyde
nAChRs
:
Nicotinic Acetylcholine Receptors
NO
:
nitrit oksida
ROS
:
Reactive Oxygen Stress
SOD
:
Superoxide Dismutase
TBHQ
:
Tert-Butil Hidroksi Quinon
VTA
:
Ventral Tegmental Area
xiv
Daftar Pustaka
Ali. D, Sudarminto .S dan Siti. N .2007. Studi Kadar Nikotin dan Tar Sembilan Merk
Rokok Kretek Filter yang Beredar di Wilayah Kabupaten Nganjuk Jurusan
Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Unibraw Malang.
J.Tek..Pert Vol. 5. No. 3: 151 – 55
Arsana, I. N. 2014. Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.) dan
Pelatihan Fisik Menurunkan Stres Oksidatif pada Tikus Wistar (Rattus
norvegicus) Selama Aktivitas Fisik Maksimal. Publikasi Ilmiah (Disertasi)
Program Studi Ilmu Kedokteran Program Pascasarjana Universitas Udayana.
Astuti dan Sussi. 2008. Isoflavon Kedelai dan Potensinya sebagai Penangkap Radikal
Bebas. Publikasi Ilmiah Teknologi Industri Pertanian Fakultas Pertanian
Universitas Lampung. Jurnal Teknologi Industri dan Hasil Pertanian Volume
13, No. 2
Darbar .S dan Anirbandeep. 2009. Bose Antioxidant and Hepatopretective effect of
Andrographis paniculata Ness. Leaf Extract on Diclofenac Induced
Hepatotoxic In rats, Bioequivalence Study Centre, Department of
Pharmaceutical Technology, Jadavpur University, Kolkata-700032, India.
Pharmacologyonline 2: 95-108
Dalimunthe .A . 2009. Interaksi sambiloto. Fakultas Kedokteran bagian
Departemen Farmakologi Universitas Sumatera Utara
Dian .R, Laksmitawati dan Yopi .A. 2008. Efek Hipoglikemi dan Proteksi Fungsi
Pankreas Ekstrak Etanol Daun Sambiloto (Andrographis paniculata
xv
[Burm.f.] Nees) pada mencit (Mus musculus) Terinduksi Aloksan. Fakultas
Farmasi Universitas Pancasila. Proseeding Kongres Ilmiah ISFI XVI 2008
Direktorat Obat Asli Indonesia. 2007. Acuan Sediaan Herbal, Volume Kedua, Badan
Pengawas Obat dan Makanan. Jakarta. 115-120.9.
Gondodiputro dan Sharon. 2007. Bahaya Tembakau dan Bentuk-bentuk Sediaan
Tembakau. Jurnal Fakultas Kedokteran, Universitas Padjajaran, Bandung.
Halliwell B. 2006. Reactive spesies and antioxidants: Redoxbiology is a fudamental
theme of aerobic life. Plant Physiol. 141:312-322.
Hassan S. F. 2010. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Sambiloto (Andrographis paniculata
[Burm.f.] Nees) terhadap Ginjal Mencit Balb/C. Fakultas Kedokteran
Universita Diponegoro.
Ivan Prapanza E.P. dan Lukito A.M. 2008. Khasiat & Manfaat Sambiloto. Raja
Pahit Penakluk Aneka Penyakit
Jarukamjorn, K dan Nemoto, N. 2008. Pharmacological Aspect of Andrographis
paniculata
on
Health
and
Its
Major
Diterpenoid
Constituent
Andrographolide. Jepang : Journal of Health Sciences. Vol.54. Hal. 370-381.
Kusumastuty I., E. Falahi a dan P. Adi. 2014. Pengaruh Daun Ubi Jalar Ungu
Terhadap Kadar Superoksidase Dismutase Tikus yang Dipapar Asap Rokok.
Jurusan Gizi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Indonesian Journal
of Human Nutrition, Vol. 1 No.2 : 128 – 134.
Marciniak, A.P., V. Jisha, P.P. BAG, B. Adhikary, M.M. PAI, A. Hedge, & M.
Nandini. 2009. Effect of Phyllanthus niruri L. Treatment on liver, kidney, and
xvi
testes in CCl4 induced hepatotoxic rats. Indian Journal of Experimental
Biology.
Prangdimurti, E. 2007. Metode Evaluasi Antioksidan Secara In Vitro dan In Vivo.
Naskah Publikasi Ilmu dan Teknologi Pangan Fakultas Teknologi Pertanian.
Institut Pertanian Bogor, Indonesia.
Ramaniya dan Kirana. 2008. Pengaruh Pemberian teh hijau terhadap kerusakan
struktur histologis alveolus paru mencit yang dipapar asap rokok. Jurusan
Fakultas
Kedokteran
Universitas
Sebelas
Maret
Surakarta.
Jurnal
Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta Vol. 5 No.12 : 144 – 169
Sari dan Novita. 2009. Efek Pemberian Virgin Coconut Oil (VCO) terhadap Profil
Imunohistokimia Antioksidan Superoxide Dismutase (SOD) pada Jaringan
Ginjal Tikus Diabetes Mellitus. Naskah Publikasi Fakultas Kedokteran
Hewan Institut Pertanian Bogor, Indonesia.
Krestiani, V. 2013. Uji aktivitas ekstrak daun sambiloto sebagai penangkap radikal
bebas. Fakultas Kedokteran Jurusan Farmasi Universitas Muria Kudus.
Jurnal Kedokteran Vol. 1 No.6 : 3 – 11
Wardhani, M, dan E. Teti. 2014. Pengaruh Seduhan Bubuk Kakao Lindak terhadap
Stres Oksidatif Tikus Wistar Jantan Akibat Pemberian Minyak Jelantah.
Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung. Jurnal Pangan dan Agroindustri
Vol.2 No.2 p.43-49.
Wardatun, S. 2011. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Akar, Kulit, Batang
dan Daun Tanaman Sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) dengan
metode Linoleat – Tiosinat. Program Studi Farmasi, FMIPA, Universitas
Pakuan. Fitofarmaka, Vol. 1 No.2 , Pebruari 2011: 9-13
xvii
Widyawati. 2010. Aspek Farmakologi Sambiloto (Andrographis paniculata Nees).
Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas
Sumatera Utara
Widigdo. 2014. Pengaruh Pemberian Dosis Bertingkat Madu terhadap Gambaran
Mikroskopis Hepar pada Mencit (Strain Balb/c) Jantan yang Diberi Paparan
Asap
Rokok.
Publikasi
Ilmiah
Fakultas
Kedokteran,
Universitas
Diponegoro.
Widjajanto, M., E. Karyono dan Setyawati. 2010. Pengaruh Pemberian Ekstrak Biji
Jinten Hitam (Nigella sativa) terhadap Kadar GSH, MDA, Jumlah serta
Fungsi Sel Makrofag Alveolar Paru Tikus Wistar yang Dipapar Asap Rokok
Kronis. Jurnal Kedokteran Brawijaya, Vol. XXI, No.3, Desember 2010.
Winarsi, H. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Potensi dan Aplikasinya
dalam Kesehatan. Kanisius. Yogyakarta. 11-23, 77-82.
Yanbaeva, D.G., Dentener, M.A., Creutzberg, E.C., Wesseling. G.,& Wouters, E.F.
2007. Systemic Effect of Smoking. Chest, 131(5), 1557-1566.
xviii
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Merokok merupakan suatu kebiasaan pada sebagian besar masyarakat di Indonesia.
Perilaku merokok penduduk Indonesia cenderung meningkat dari 34,2% pada tahun 2008
menjadi 36,3% pada tahun 2013 (WHO, 2013). Laporan GAPPRI (Gabungan Perserikatan
Pabrik Rokok Indonesia) menunjukkan pangsa pasar rokok kretek mendominasi sebanyak
88% dan 12% rokok putih. Rokok mengandung ribuan komponen kimia termasuk oksidan
dan radikal bebas yang dapat menginisiasi kerusakan oksidatif (Kusumastuty, Falahia dan
Adi, 2014).
Radikal bebas pada asap rokok diperkirakan dalam satu kali hisap sebanyak 1014
molekul radikal bebas yang masuk ke dalam tubuh antara lain nikotin, karbon monoksida, tar
dan eugenol (dalam rokok kretek). Asap rokok juga mengandung molekul oksidan seperti
superoksida, hidrogen peroksida, hidroksil dan peroksil dalam satu kali hisapan (Yanbaeva et
al., 2007). Paparan asap rokok dapat meningkatkan radikal superoksida dalam tubuh dan
menurunkan kadar Superoxide Dismutase (SOD) sehingga menyebabkan ketidakseimbangan
level antioksidan dari jumlah radikal bebas dalam tubuh. SOD merupakan salah satu
antioksidan endogen yang berfungsi mengkatalisis reaksi dismutasi radikal bebas anion
superoksida (O2-) menjadi hidrogen peroksida dan molekul oksigen (Wardhani dan Teti,
2014).
Enzim Superoxide Dismutase (SOD) merupakan enzim utama yang melindungi paru-paru
dari kerusakan akibat terbentuknya superoxide anion (O2) aktivasi reactive oxygen species
(ROS) (Ramaniya dan Kirana, 2008). Dengan kemajuan teknik imunositokimia, sel-sel
penghasil SOD telah dapat dideteksi pada jaringan tikus. Profil SOD juga telah dilaporkan
secara imuno-histokimia pada kondisi patofisiologis seperti stres oksidatif, diabetes mellitus
dan hiperkolesterolemia (Wresdiyati et al., 2012).
Bahan pangan alami yang mengandung antioksidan sebagai scavenger radikal bebas
dilaporkan Astuti dan Sussi (2008) dapat menekan proses oksidasi, peroksidasi lipid dan
kerusakan sel spermatozoa mencegah kondisi stres oksidatif dan meningkatkan status
antioksidan. Sambiloto adalah tanaman yang mempunyai efek antioksidan (Dian dan Yopi,
2008). Antioksidan alami yang berasal dari tumbuhan ini adalah senyawa flavonoid, fenol,
polifenol, kurkuminoid dan tanin. Daya antioksidan terbesar terdapat pada ekstrak akar
dengan konsentrasi sebesar 79,37% dan kandungan flavonoid total ekstrak etanol sambiloto
sebesar 46,322 g/kg (Wardatun, 2011). Pada daun, kadar senyawa andrographolid adalah
sebesar 2,5-4,8% dari berat keringnya (Dalimunthe, 2009).
Untuk itu dilakukan penelitian yang bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian
ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) terhadap kadar Superoxide Dismutase
(SOD) tikus Rattus novergicus strain Wistar yang dipapar asap rokok.
1.2 Rumusan Masalah
Apakah efek pemberian ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) dapat
meningkatkan kadar SOD plasma darah tikus putih (Rattus norvegicus strain wistar) yang
dipapar asap rokok?
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
Membuktikan bahwa efek pemberian ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata
Ness.) dapat meningkatkan kadar Superoxide Dismutase (SOD) plasma darah tikus
putih (Rattus norvegicus strain wistar) yang dipapar asap rokok
1.3.2 Tujuan Khusus
Mengetahui dosis efektif ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) dalam
meningkatan kadar Superoxide Dismutase (SOD) plasma darah tikus putih (Rattus
norvegicus strain wistar) yang dipapar asap rokok
1.4 Manfaat Penelitian
1.4.1 Manfaat Akademik
1.4.1.1 Dapat memberikan tambahan informasi antioksidan ekstrak sambiloto
(Andrographis paniculata Ness.) terhadap peningkatan kadar Superoxide
Dismutase (SOD) plasma darah tikus putih (Rattus norvegicus strain wistar)
yang dipapar asap rokok.
1.4.1.2 Dapat digunakan sebagai dasar bagi penelitian selanjutnya mengenai manfaat
ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) untuk pencegahan
terhadap perokok yang mengandung zat aktif radikal bebas dan oksidan.
1.4.2 Manfaat Klinis
1.4.2.1 Sebagai terapi pencegahan untuk melindungi tubuh dari radikal bebas yang
disebabkan oleh paparan asap rokok.
1.4.2.2 Merupakan
program
penunjang
pencegahan
terhadap
kardiovaskuler, degeneratif dan dapat di jangkau oleh masyarakat.
penyakit
ASIL PENE
ELITIAN
k Ekstrak Sambiloto (Andrograp
phis panicu
ulata Ness.)) terhadap
Efek
Peningkaatan Kadar Superoksidda Dismuta
ase (SOD) Plasma
P
Darrah Tikus Putih
P
(Rattus norrvegicus strrain wistar) yang Dipaapar Asap R
Rokok
Oleh:
PRAKO
OSA YUDH
HA KUSSUMA
2
2012103303
311144
UNIV
VERSITAS MUHAMM
MADIYAH
H MALANG
G
FAKU
ULTAS KED
DOKTERA
AN
2016
6
LEMBAR PENGESAHAN
LAPORAN HASIL PENELITIAN
Telah disetujui sebagai hasil penelitian
untuk memenuhi persyaratan
Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Malang
Tanggal : 2 Februari 2016
Pembimbing I
dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK
Pembimbing II
dr. Nuryati
Mengetahui,
Fakultas Kedokteran
Dekan,
Dr. Irma Suswati, M.Kes
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Allah SWT, karena atas berkat dan
rahmat-Nya, penulis telah berhasil menyelesaikan Karya Tulis Akhir yang
berjudul “Efek Ekstrak Sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) terhadap
Peningkatan Kadar SOD (Superoksida Dismutase) Plasma Darah Tikus Putih
(Rattus norvegicus strain wistar) yang Dipapar Asap Rokok”. Penulisan Karya
Tulis Akhir ini dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk
mencapai gelar Sarjana Kedokteran Jurusan Pendidikan Dokter pada Fakultas
Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang.
Penulis menyadari bahwa, tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai
pihak, dari masa perkuliahan sampai pada penyusunan penelitian ini, sangatlah
tidak mudah. Oleh karena itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Orang tua dan keluarga yang telah memberikan bantuan dukungan
material dan moral.
2. dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK selaku pembimbing I atas bimbingan,
pelajaran, dukungan dan saran yang telah diberikan dalam penyusunan
karya tulis akhir ini.
3. dr. Nuryati selaku pembimbing II atas kesabaran dan ketelitiannya dalam
membimbing dan memberi saran dalam penyusunan karya tulis akhir ini.
4. dr. Moch. Ma’roef, Sp.OG selaku penguji atas saran, kritik dan
bimbingannya.
5. Seluruh dosen FK UMM atas ilmu yang diberikan sehingga penulias
mampu menyelesaikan studi dan karya tulis akhir ini.
6. Staf TU FK UMM yang turut membantu atas kelancaran dan
terlaksananya karya tulis akhir ini; dan
7. Sahabat yang telah banyak membantu saya dalam menyelesaikan karya
tulis akhir ini.
Karya Tulis Akhir ini masih jauh dari kesempurnaan. Dengan kerendahan
hati penulis mohon maaf dan mengharapkan saran dan kritik yang membangun.
Semoga Karya Tulis Akhir ini dapat menambah wawasan dan bermanfaat bagi
pembaca.
Malang, 2 Februari 2016
Penulis
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ……............................................................................... ii
LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................. iii
LEMBAR PENGUJIAN ….............................................................................. iv
KATA PENGANTAR …................................................................................. v
ABSTRAK ……………….............................................................................. vii
ABSTRACT …………..….............................................................................. viii
DAFTAR ISI ……………............................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR ……................................................................................ xii
DAFTAR TABEL
……............................................................................... xiii
DAFTAR SINGKATAN ….............................................................................. xiv
DAFTAR LAMPIRAN…….............................................................................. xv
BAB 1
PENDAHULUAN ...................................................................
1
1.1 Latar Belakang ..................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah ............................................................
3
1.3 Tujuan . ..............................................................................
3
1.3.1 .............................................................................. Tujuan
Umum ........................................................................... 3
1.3.2 .............................................................................. Tujuan
Khusus .......................................................................... 3
1.4 Manfaat .................................................................................. 3
1.4.1 Manfaat Akademis ....................................................... 3
1.4.2 Manfaat Masyarakat ..................................................... 4
1.4.3 Manfaat Klinis . ............................................................ 4
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 5
2.1 SOD (Superoxide Dismutase) ................................................. 5
2.2 Antioksidan ............................................................................ 6
2.3 Stres Oksidatif......................................................................... 7
ix
2.4 Rokok. ..................................................................................... 8
2.4.1 Pengertian Rokok.......................................................... 8
2.4.2 Asap Rokok ................................................................. 9
2.4.3 Bahan yang Terkandung dalam Asap Rokok .............. 10
2.4.4 Asap Rokok sebagai Radikal Bebas ............................ 13
2.5 Sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) .......................... 15
2.5.1 Tata Nama Sambiloto .................................................. 15
2.5.2 Jenis Sambiloto ............................................................. 17
2.5.3 Kandungan Kimia ........................................................ 18
2.5.4 Khasiat Sambiloto......................................................... 20
BAB 3
KERANGKA KONSEPTUAL DAN HIPOTESIS ................. 22
3.1 Kerangka Konseptual ............................................................. 22
3.2 Hipotesis Penelitian ................................................................ 24
BAB 4
METODE PENELITIAN ........................................................... 25
4.1 Rancangan Penelitian .......................................................... 25
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .............................................. 25
4.3 Populasi dan Sampel ........................................................... 25
4.3.1 Populasi . ........................................................................ 25
4.3.2 Sampel . .......................................................................... 25
4.3.3 Replikasi . ....................................................................... 25
4.3.4 Teknik Pengambilan Sampel ......................................... 26
4.3.5 Karakteristik Sampel Penelitian .................................... 26
4.3.5.1 Kriteria Inklusi...................................................... 26
4.3.5.2 Kriteria Eksklusi .................................................. 27
4.3.6 Variabel Penelitian ........................................................ 27
4.3.6.1 Variabel Bebas ..................................................... 27
4.3.6.2 Variabel Tergantung . ........................................... 27
4.3.7 Definisi Operasional ...................................................... 27
4.4 Alat dan Bahan ..................................................................... 28
x
4.4.1 Alat ................................................................................. 28
4.4.2 Bahan .............................................................................. 29
4.5 Prosedur Penelitian ............................................................. 30
4.5.1 Ekstrak Sambiloto........................................................... 30
4.5.2 Aklimatisasi .................................................................... 30
4.5.3 Penentuan Dosis Ekstrak Sambiloto ............................... 31
4.5.4 Pembagian Kelompok Tikus ......................................... 31
4.5.5 Pemaparan Asap Rokok ................................................. 32
4.5.6 Proses Anastesi dan Pembedahan Hewan Coba ............. 33
4.5.7 Pemeriksaan kadar SOD ................................................. 33
4.6 Alur Penelitian ...................................................................... 34
4.7 Analisis Data ........................................................................ 35
BAB 5
HASIL PENELITIAN ............................................................... 37
5.1 Hasil Penelitian ..................................................................... 37
5.2 Analisa Data ......................................................................... 38
5.2.1 Hasil Analisis Uji Normalitas, Homogenitas, dan One
Way Anova ……………………………………………… 38
5.2.2 Hasil Analisis Uji Korelasi .............................................. 40
5.2.3 Hasil Analisis Uji Regresi ............................................... 41
BAB 6
PEMBAHASAN ............................................................................... 43
BAB 7
KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 47
7.1 Kesimpulan .................................................................................. 47
7.2 Saran ............................................................................................ 48
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................ 49
LAMPIRAN ..................................................................................................... 55
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Kandungan Oksidan Asap Rokok Fase Gas dan Fase Tar
15
2.2 Sambiloto ( Andrographis paniculata Nees.)
17
3.1 Kerangka Konsep
21
4.1 Alur penelitian
33
5.1 Grafik Rerata Kadar SOD Serum Tikus Putih
38
5.2 Grafik regresi antara dosis ekstrak sambiloto dengan kadar SOD serum
tikus putih
42
xii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
5.1 Rerata Kadar SOD Serum Tikus Putih ................................................. 37
5.2 Hasil Uji Anova...................................................................................... 39
5.3 Hasil Uji Tukey...................................................................................... 39
5.4 Hasil Uji Koefisien Regresi..................................................................... 41
xiii
DAFTAR SINGKATAN
AIDS
:
Acquired Immunodeficiency Syndrome
BHA
:
Butil Hidroksi Anisol
BHT
:
Butil Hidroksi Toluen
CNS
:
Central Nervus System
CO
:
Karbon Monoksida
DNA
:
Deoxyribonucleic Acid
ETS
:
Environtment Tobacco Smoke
GSH
:
Glutathione Sulphydril
INGCAT
:
International Non Government Coaltion Against
Tobacco
MDA
:
Malondialdehyde
nAChRs
:
Nicotinic Acetylcholine Receptors
NO
:
nitrit oksida
ROS
:
Reactive Oxygen Stress
SOD
:
Superoxide Dismutase
TBHQ
:
Tert-Butil Hidroksi Quinon
VTA
:
Ventral Tegmental Area
xiv
Daftar Pustaka
Ali. D, Sudarminto .S dan Siti. N .2007. Studi Kadar Nikotin dan Tar Sembilan Merk
Rokok Kretek Filter yang Beredar di Wilayah Kabupaten Nganjuk Jurusan
Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Unibraw Malang.
J.Tek..Pert Vol. 5. No. 3: 151 – 55
Arsana, I. N. 2014. Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.) dan
Pelatihan Fisik Menurunkan Stres Oksidatif pada Tikus Wistar (Rattus
norvegicus) Selama Aktivitas Fisik Maksimal. Publikasi Ilmiah (Disertasi)
Program Studi Ilmu Kedokteran Program Pascasarjana Universitas Udayana.
Astuti dan Sussi. 2008. Isoflavon Kedelai dan Potensinya sebagai Penangkap Radikal
Bebas. Publikasi Ilmiah Teknologi Industri Pertanian Fakultas Pertanian
Universitas Lampung. Jurnal Teknologi Industri dan Hasil Pertanian Volume
13, No. 2
Darbar .S dan Anirbandeep. 2009. Bose Antioxidant and Hepatopretective effect of
Andrographis paniculata Ness. Leaf Extract on Diclofenac Induced
Hepatotoxic In rats, Bioequivalence Study Centre, Department of
Pharmaceutical Technology, Jadavpur University, Kolkata-700032, India.
Pharmacologyonline 2: 95-108
Dalimunthe .A . 2009. Interaksi sambiloto. Fakultas Kedokteran bagian
Departemen Farmakologi Universitas Sumatera Utara
Dian .R, Laksmitawati dan Yopi .A. 2008. Efek Hipoglikemi dan Proteksi Fungsi
Pankreas Ekstrak Etanol Daun Sambiloto (Andrographis paniculata
xv
[Burm.f.] Nees) pada mencit (Mus musculus) Terinduksi Aloksan. Fakultas
Farmasi Universitas Pancasila. Proseeding Kongres Ilmiah ISFI XVI 2008
Direktorat Obat Asli Indonesia. 2007. Acuan Sediaan Herbal, Volume Kedua, Badan
Pengawas Obat dan Makanan. Jakarta. 115-120.9.
Gondodiputro dan Sharon. 2007. Bahaya Tembakau dan Bentuk-bentuk Sediaan
Tembakau. Jurnal Fakultas Kedokteran, Universitas Padjajaran, Bandung.
Halliwell B. 2006. Reactive spesies and antioxidants: Redoxbiology is a fudamental
theme of aerobic life. Plant Physiol. 141:312-322.
Hassan S. F. 2010. Uji Toksisitas Akut Ekstrak Sambiloto (Andrographis paniculata
[Burm.f.] Nees) terhadap Ginjal Mencit Balb/C. Fakultas Kedokteran
Universita Diponegoro.
Ivan Prapanza E.P. dan Lukito A.M. 2008. Khasiat & Manfaat Sambiloto. Raja
Pahit Penakluk Aneka Penyakit
Jarukamjorn, K dan Nemoto, N. 2008. Pharmacological Aspect of Andrographis
paniculata
on
Health
and
Its
Major
Diterpenoid
Constituent
Andrographolide. Jepang : Journal of Health Sciences. Vol.54. Hal. 370-381.
Kusumastuty I., E. Falahi a dan P. Adi. 2014. Pengaruh Daun Ubi Jalar Ungu
Terhadap Kadar Superoksidase Dismutase Tikus yang Dipapar Asap Rokok.
Jurusan Gizi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Indonesian Journal
of Human Nutrition, Vol. 1 No.2 : 128 – 134.
Marciniak, A.P., V. Jisha, P.P. BAG, B. Adhikary, M.M. PAI, A. Hedge, & M.
Nandini. 2009. Effect of Phyllanthus niruri L. Treatment on liver, kidney, and
xvi
testes in CCl4 induced hepatotoxic rats. Indian Journal of Experimental
Biology.
Prangdimurti, E. 2007. Metode Evaluasi Antioksidan Secara In Vitro dan In Vivo.
Naskah Publikasi Ilmu dan Teknologi Pangan Fakultas Teknologi Pertanian.
Institut Pertanian Bogor, Indonesia.
Ramaniya dan Kirana. 2008. Pengaruh Pemberian teh hijau terhadap kerusakan
struktur histologis alveolus paru mencit yang dipapar asap rokok. Jurusan
Fakultas
Kedokteran
Universitas
Sebelas
Maret
Surakarta.
Jurnal
Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta Vol. 5 No.12 : 144 – 169
Sari dan Novita. 2009. Efek Pemberian Virgin Coconut Oil (VCO) terhadap Profil
Imunohistokimia Antioksidan Superoxide Dismutase (SOD) pada Jaringan
Ginjal Tikus Diabetes Mellitus. Naskah Publikasi Fakultas Kedokteran
Hewan Institut Pertanian Bogor, Indonesia.
Krestiani, V. 2013. Uji aktivitas ekstrak daun sambiloto sebagai penangkap radikal
bebas. Fakultas Kedokteran Jurusan Farmasi Universitas Muria Kudus.
Jurnal Kedokteran Vol. 1 No.6 : 3 – 11
Wardhani, M, dan E. Teti. 2014. Pengaruh Seduhan Bubuk Kakao Lindak terhadap
Stres Oksidatif Tikus Wistar Jantan Akibat Pemberian Minyak Jelantah.
Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung. Jurnal Pangan dan Agroindustri
Vol.2 No.2 p.43-49.
Wardatun, S. 2011. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Akar, Kulit, Batang
dan Daun Tanaman Sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) dengan
metode Linoleat – Tiosinat. Program Studi Farmasi, FMIPA, Universitas
Pakuan. Fitofarmaka, Vol. 1 No.2 , Pebruari 2011: 9-13
xvii
Widyawati. 2010. Aspek Farmakologi Sambiloto (Andrographis paniculata Nees).
Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas
Sumatera Utara
Widigdo. 2014. Pengaruh Pemberian Dosis Bertingkat Madu terhadap Gambaran
Mikroskopis Hepar pada Mencit (Strain Balb/c) Jantan yang Diberi Paparan
Asap
Rokok.
Publikasi
Ilmiah
Fakultas
Kedokteran,
Universitas
Diponegoro.
Widjajanto, M., E. Karyono dan Setyawati. 2010. Pengaruh Pemberian Ekstrak Biji
Jinten Hitam (Nigella sativa) terhadap Kadar GSH, MDA, Jumlah serta
Fungsi Sel Makrofag Alveolar Paru Tikus Wistar yang Dipapar Asap Rokok
Kronis. Jurnal Kedokteran Brawijaya, Vol. XXI, No.3, Desember 2010.
Winarsi, H. 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Potensi dan Aplikasinya
dalam Kesehatan. Kanisius. Yogyakarta. 11-23, 77-82.
Yanbaeva, D.G., Dentener, M.A., Creutzberg, E.C., Wesseling. G.,& Wouters, E.F.
2007. Systemic Effect of Smoking. Chest, 131(5), 1557-1566.
xviii
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Merokok merupakan suatu kebiasaan pada sebagian besar masyarakat di Indonesia.
Perilaku merokok penduduk Indonesia cenderung meningkat dari 34,2% pada tahun 2008
menjadi 36,3% pada tahun 2013 (WHO, 2013). Laporan GAPPRI (Gabungan Perserikatan
Pabrik Rokok Indonesia) menunjukkan pangsa pasar rokok kretek mendominasi sebanyak
88% dan 12% rokok putih. Rokok mengandung ribuan komponen kimia termasuk oksidan
dan radikal bebas yang dapat menginisiasi kerusakan oksidatif (Kusumastuty, Falahia dan
Adi, 2014).
Radikal bebas pada asap rokok diperkirakan dalam satu kali hisap sebanyak 1014
molekul radikal bebas yang masuk ke dalam tubuh antara lain nikotin, karbon monoksida, tar
dan eugenol (dalam rokok kretek). Asap rokok juga mengandung molekul oksidan seperti
superoksida, hidrogen peroksida, hidroksil dan peroksil dalam satu kali hisapan (Yanbaeva et
al., 2007). Paparan asap rokok dapat meningkatkan radikal superoksida dalam tubuh dan
menurunkan kadar Superoxide Dismutase (SOD) sehingga menyebabkan ketidakseimbangan
level antioksidan dari jumlah radikal bebas dalam tubuh. SOD merupakan salah satu
antioksidan endogen yang berfungsi mengkatalisis reaksi dismutasi radikal bebas anion
superoksida (O2-) menjadi hidrogen peroksida dan molekul oksigen (Wardhani dan Teti,
2014).
Enzim Superoxide Dismutase (SOD) merupakan enzim utama yang melindungi paru-paru
dari kerusakan akibat terbentuknya superoxide anion (O2) aktivasi reactive oxygen species
(ROS) (Ramaniya dan Kirana, 2008). Dengan kemajuan teknik imunositokimia, sel-sel
penghasil SOD telah dapat dideteksi pada jaringan tikus. Profil SOD juga telah dilaporkan
secara imuno-histokimia pada kondisi patofisiologis seperti stres oksidatif, diabetes mellitus
dan hiperkolesterolemia (Wresdiyati et al., 2012).
Bahan pangan alami yang mengandung antioksidan sebagai scavenger radikal bebas
dilaporkan Astuti dan Sussi (2008) dapat menekan proses oksidasi, peroksidasi lipid dan
kerusakan sel spermatozoa mencegah kondisi stres oksidatif dan meningkatkan status
antioksidan. Sambiloto adalah tanaman yang mempunyai efek antioksidan (Dian dan Yopi,
2008). Antioksidan alami yang berasal dari tumbuhan ini adalah senyawa flavonoid, fenol,
polifenol, kurkuminoid dan tanin. Daya antioksidan terbesar terdapat pada ekstrak akar
dengan konsentrasi sebesar 79,37% dan kandungan flavonoid total ekstrak etanol sambiloto
sebesar 46,322 g/kg (Wardatun, 2011). Pada daun, kadar senyawa andrographolid adalah
sebesar 2,5-4,8% dari berat keringnya (Dalimunthe, 2009).
Untuk itu dilakukan penelitian yang bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian
ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) terhadap kadar Superoxide Dismutase
(SOD) tikus Rattus novergicus strain Wistar yang dipapar asap rokok.
1.2 Rumusan Masalah
Apakah efek pemberian ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) dapat
meningkatkan kadar SOD plasma darah tikus putih (Rattus norvegicus strain wistar) yang
dipapar asap rokok?
1.3 Tujuan Penelitian
1.3.1 Tujuan Umum
Membuktikan bahwa efek pemberian ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata
Ness.) dapat meningkatkan kadar Superoxide Dismutase (SOD) plasma darah tikus
putih (Rattus norvegicus strain wistar) yang dipapar asap rokok
1.3.2 Tujuan Khusus
Mengetahui dosis efektif ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) dalam
meningkatan kadar Superoxide Dismutase (SOD) plasma darah tikus putih (Rattus
norvegicus strain wistar) yang dipapar asap rokok
1.4 Manfaat Penelitian
1.4.1 Manfaat Akademik
1.4.1.1 Dapat memberikan tambahan informasi antioksidan ekstrak sambiloto
(Andrographis paniculata Ness.) terhadap peningkatan kadar Superoxide
Dismutase (SOD) plasma darah tikus putih (Rattus norvegicus strain wistar)
yang dipapar asap rokok.
1.4.1.2 Dapat digunakan sebagai dasar bagi penelitian selanjutnya mengenai manfaat
ekstrak sambiloto (Andrographis paniculata Ness.) untuk pencegahan
terhadap perokok yang mengandung zat aktif radikal bebas dan oksidan.
1.4.2 Manfaat Klinis
1.4.2.1 Sebagai terapi pencegahan untuk melindungi tubuh dari radikal bebas yang
disebabkan oleh paparan asap rokok.
1.4.2.2 Merupakan
program
penunjang
pencegahan
terhadap
kardiovaskuler, degeneratif dan dapat di jangkau oleh masyarakat.
penyakit