Ruang Lingkup Penelitian Jenis Penelitian Variabel Penelitian Data yang Dikumpulkan Alur Penelitian

54

BAB III METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Ruang Lingkup Penelitian

1. Ruang lingkup keilmuan Ruang lingkup keilmuan penelitian ini meliputi farmakologi. 2. Ruang lingkup waktu Penelitian dan pengumpulan data berlangsung selama kurang lebih dua minggu. 3. Ruang lingkup tempat Pemeliharaan, perlakuan dan pengamatan terhadap hewan coba dilakukan di Laboratorium Farmakologi dan Terapi Fakultas Kedokteran Diponegoro Semarang.

3.2 Jenis Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratorik dengan desain yang dipakai adalah Post Test-Only Controled Group Design . 3.3 Populasi Dan Sampel 3.3.1 Populasi Populasi penelitian ini adalah mencit strain Balbc jantan umur 2 – 3 bulan dengan berat badan lebih kurang 25 - 35 gram, yang diperoleh dari Unit Pemeliharaan Hewan Percobaan UPHP Yogyakarta. 55

3.3.2 Sampel

Penentuan besar sampel menurut ketentuan WHO, yakni dengan jumlah sampel minimal 5 untuk setiap kelompok. Penelitian ini menggunakan 30 ekor mencit Balbc yang dibagi menjadi 5 kelompok dengan randomisasi sederhana, yaitu 4 kelompok perlakuan dan 1 kelompok kontrol negatif, sehingga dalam satu kelompok terdiri dari 6 ekor mencit Balbc.

3.3.3 Kriteria Inklusi

a. Mencit strain Balbc b. Jenis kelamin jantan c. Berat badan 25-35 gram d. Umur 2-3 bulan e. Tingkah laku dan aktivitas tikus normal f. Tidak ada kelainan anatomi yang tampak

3.3.4 Kriteria Eksklusi

a. Mencit tampak sakit b. Terdapat abnormalitas anatomi c. Mencit mati

3.4 Variabel Penelitian

1. Variabel bebas Variabel bebas dalam penelitian ini adalah pemberian ekstrak akar Va leriana officina lis skala ratio per oral. 56 2. Variabel tergantung Variabel tergantung pada penelitian ini adalah jumlah hewan coba uang mati. 3.5 Alat Dan Bahan Penelitian 3.5.1 Alat Penelitian Bahan – bahan yang diperlukan dalam penelitian ini adalah: a. Ekstrak alkohol 70 akar valerian Valeriana officina lis. b. Mencit jantan strain Balbc. c. Makanan dan minuman mencit.

3.5.2 Bahan Penelitian

Alat – alat yang diperlukan dalam penelitian ini adalah: a. Kandang mencit b. Mikro pipet kepekaan 0,001 ml c. Timbangan digital kepekaan 0,1 g d. Sonde lambung e. Kapas f. Tabung erlenmeyer

3.6 Data yang Dikumpulkan

Data yang dikumpulkan dalam penelitian ini adalah data primer dari hasil pengamatan hewan coba, baik kelompok kontrol maupun kelompok perlakuan. Data yang diperoleh berupa data kuantitatif dan kaulitatif. Data kuantitif yang akan diperoleh yaitu jumlah hewan coba yang mati, sedangkan data 57 kualitatif yang akan diperoleh berupa gejala efek toksik suatu senyawa ekstrak valerian terhadap beberapa fungsi vital hewan coba. 3.7 Cara Kerja 3.7.1 Aklimatisasi Sebelum mendapat perlakuan, 30 ekor mencit Balbc jantan sehat, berusia 2 – 3 bulan dengan berat badan 25 – 35 gram, mengalami masa adaptasi dan diberi ransum pakan standard dan minum selama 7 hari secara ad libitum. Proses aklimatisasi dilakukan di Laboratorium Farmakologi dan Terapi Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang.

3.7.2 Randomisasi

Pada penelitian ini, 30 ekor mencit Balbc dibagi dalam 5 kelompok perlakuan yang masing – masing terdiri dari 6 ekor mencit yang ditentukan secara acak. Lima kelompok perlakuan tersebut adalah : a. Kelompok kontrol K : tidak diberi perlakuan ekstrak, hanya diberi aquadest per oral selama 7 hari. b. Kelompok Perlakuan 1 P1 : diberi dosis 1 ekstrak valerian 5 mg kgBB c. Kelompok Perlakuan 2 P2 : diberi dosis 2 ekstrak valerian 50 mg kgBB 58 d. Kelompok Perlakuan 3 P3 : diberi dosis 3 ekstrak valerian 500 mg kgBB e. Kelompok Perlakuan 4 P4 : diberi dosis 4 ekstrak valerian 2000 mg kgBB Pemberian ekstrak valerian Va leriana officina lis pada mencit Balbc dilakukan melalui sonde lambung dan hanya diberikan satu kali, yaitu pada hari ke- 1. Selanjutnya untuk hari ke- 2 hingga hari ke- 7, tetap diberi pakan standar. 59

3.8 Alur Penelitian

Mencit Balbc jantan, umur 2-3 bulan, berat badan 25-35 gram, fisik sehat, tidak ada kelainan anatomi Aklimatisasi Randomisasi jumlah hewan coba yang mati Penentuan LD 50 Kontrol KN 6 ekor Perlakuan 1 P1 6 ekor Perlakuan2 P1 6 ekor Perlakuan3 P2 6 ekor Perlakuan4 P3 6 ekor 1 minggu Hari ke – 8 Hari ke –14 60 Keterangan : K : kontrol negatif mencit Balbc + aquadest , terus selama 7 hari P1 : mencit Balbc + ekstrak valerian dengan dosis 5 mgkgBB P2 : mencit Balbc + ekstrak valerian dengan dosis 50 mgkgBB P3 : mencit Balbc + ekstrak valerian dengan dosis 500 mgkgBB P4 : mencit Balbc + ekstrak valerian dengan dosis 2000 mgkgBB

3.9 Prosedur Pengamatan