Pemanfaatan Kulit Buah Pisang untuk Produksi Enzim Selulase oleh Trichoderma viride, Aspergilus niger dan Asperhilus Oryzae
PEMANFAATAN KULIT BUAH PlSANG
UNTUK PRODUKSI ENZlM SELULASE
OLEH
Trichoderma viride, Aspergillus niger den Aspergillus oryzae
Oleh
HERY MURPHI
F 26.
1008
19 9 4
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
B O G O R
HERY MURPHI. F 26.1008. Pemanfaatan kulit buah pisang untuk produksi enzim
selulase oleh Trichoderma viride, Aspergillus niger, dan Aspergillus oryzae. Di bawah
bimbingan H. Abdul Aziz Darwis dan Sunarmani.
Kulit pisang mempunyai kandungan selulosa dan karbohidrat yang cukup tinggi
sehingga berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai substrat (media) pertumbuhan bag;
mikroorganisme yang memproduksi enzim selulase. Enzim selulase merupakan enzim
yang mampu menghidrolisis selulosa menjadi glukosa.
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan substrat kulit buah pisang dan jenis
lcapang terbaik serta waktu fermentasi optimal dalam memproduksi enzim selulase
dengan metode fermentasi padat.
Metodologi penelitian yang dilakukan meliputi pembuatan substrar kulit pisang,
persiapan medium, inokulasi dan inkubasi serta ekstraksi filtrat enzim kasar. Pengujian
yang dilakukan meliputi pengukuran aktivitas enzim (CMC-ase, FP-ase, dan P-glukosidase), penentuan gula pereduksi dan pengukuran kandungan protein terlarut. Pengujian
aktivitas enzim selulase dimaksudkan untuk mengetahui aktivitas tertinggi dengan waktu
optimal serta pengaruh perlakuan jenis kapang (Al:A.niger, A2:A.oryzae, A3:T. viride),
waktu fermentasi (B1:hari ke-I, B2:hari ke-3, B3:hari ke-6, B4:hari ke-9, B5:hari ke12) dan jenis substrat (C1:kulit pisang nangka, C2:kp. kepok, C3:kp. raja), uji statistik
yang digunakan adalah uji sidik ragam acak blok faktorjal.
Hasil yang diperoleh membuktikan bahwa aktivitas enzim selulase tertinggi dari
CMC-ase adalah sebesar 4.4506 (IU/ml) dan FP-ase sebesar 1.4943 (IU/ml), ltedua
aktivitas tersebut dihasilkan oleh enzim dari Trichoderm viride dengan substrat kulit
pisang nangka pada hari ke-12 (A3B5Cl). Sedangkan aktivitas P-glukosidase tertinggi
adalah sebesar 3.0187 (IUIml) yang dihasilkan oleh enzim dari Aspergillus niger dengan
substrat kulit pisang nangkapada hari ke-9 (AlB4C1).
PEMANFAATAN KULIT BUAH PISANG
UNTUK PRODUKSI ENZIM SELULASE
OLEH Trichoderma viride, Aspergillus niger dun Aspergillus oryzae
Oleh
H E W MURPHI
F 26.1008
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Industri Pertanian,
Fakultas TeIinoIogi Pertanian,
Institut Pertanian Bogor
1994
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKhTOLOGIPERTAhJIAhJ
PEMANFAATAN KULIT BUAH PISANG
UNTUK PRODUKSI ENZIM SELULASE
viride, Aspergillus ~zigerdan Aspel
OLEH T~iclzoderi~za
SKREPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memp
SARJAiiA TEmTOLOGIPERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Iiidustri Pertanian,
Faliultas Tehiologi Pertan'
I~istitutPerta~iianBogo
Dilafiirkall di Jaliarta pada tanggal 12 April 1970
Taiiggal lulus : 23 Agustus 1994
Ir. S u n a r ~ n a n i , m
Pembimbing I1
e
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT karena berkat rahmat dan
hidayah-Nya jualah maka skripsi ini dapat diselesaikan.
Skripsi ini disusun berdbarkan hasil penelitian yang dilakukan sejak bulan
September 1993 sampai bulan Maret 1994 di Laboratorium Teknologi Industri Pertanian
dan Laboratorium Rekayasa Bioproses-PAU Bioteknologi, IPB.
Dalam kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih kepada :
Bapak Dr. lr. H. Abdul Aziz Darwis, MSc dan Ibu Ir. Sunarmani, MS, selaku dosen
Pernbimbing I dan dosen Pembimbing I1 yang telah membimbing penulis selama penelitian maupun dalam penulisan skripsi serta Bapak Dr. R. Muljono Judoamidjojo yang
turut menguji hasil skripsi ini.
Teman-teman seangkatan (AgriTenth) dan sahabat-sahabatku di Wisnia ICiicy
(Taufik. Andrizal, dan Ihsan) serta Said F, I ~ a nF, Nahhu dan Purwono atas segala
dukungan morilnya juga Ibu Rini, Mbak Kas, Mas Edi dan Mas Sugi (Laboran Lab.
TIN, Fateta IPB) atas segala bantuannya.
Penulis menyadari skripsi ini masih jauh dari sernpurna (Tak ada gading yang
tak retak), saran dan kritik untuk perbaikan dan kesempurnaan skripsi ini sangat
diharapkan. Semoga skripsi ini bermanfaat bagi yang memerlukan.
Bogor,
Agr~stus 1994
DAFTAR IS1
Halaman
KATAPENGANTAR
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . iii
...............................
DAFTAR GAMBAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
DAFTARTABEL
DAFTAR LAMPIRAN
I.
I1.
PENDAHULUAN
...
virr
x
...............................
1
........................
1
A.
LATARBELAKANG
B.
TUJUAN
................................
2
...........................
3
A.
KOMPOSISI KIMIAWI KULIT PISANG . . . . . . . . . . . .
3
B.
MIKROORGANISME PENGHASIL SELULASE . . . . . . .
4
C.
ENZIM SELULASE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6
1.
Aktivitas Total Selulase . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
12
2.
Aktivitas Endoglukanase
..................
14
3.
Aktivitas Selobiohidrolase . . . . . . . . . . . . . . . . .
15
4.
Aktivitas P-Glukosidase
..................
16
PRODUKSI ENZIM SELULASE . . . . . . . . . . . . . . . . .
17
..........................
26
TINJAUAN PUSTAKA
D.
III .
............................
vii
BAHANDANMETODE
A.
BAHANDANALAT
........................
1.
Substrat dall Bahan Kirnia
2.
Mikroorganisme
3.
Peralatan
.................
.......................
...........................
26
26
26
27
B.
C.
27
1.
Pembuatan substrat
27
2.
Persiapan medium
3.
Inokulasi dan Inkubasi
4.
Ekstraksi enzim
...................
28
28
.......................
29
ANALISIS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
30
.................
30
..............
30
1.
Penentuan gula pereduksi
2.
Pengukuran aktivitas CMC-ase
3.
Pengukuran aktivitas P-glukosidase
............
31
4.
Pengukuran aktivitas total selulase
............
31
5.
Pengukuran kadar protein terlarut
............
32
..................
33
.......................
34.
A.
KOMPOSISI KIMIAWI KULIT PISANG . . . . . . . . . . . .
34
B.
PENENTUAN WAKTU FERMENTASI OPTIMAL ENZIM
36
D.
IV .
..................
.....................
......................
METODOLOGI PENELITIAN
RANCANGAN PERCOBAAN
HASIL DAN PEMBAHASAN
1.
Kadar glukosa enzim
....................
36
2.
Protein terlarut enzim
....................
41
3.
pH filtrat enzim
.......................
45
4.
Aktivitas CMC-ase selama fermentasi . . . . . . . . . .
48
5.
Aktivitas FP-ase selama fermentasi . . . . . . . . . . . .
52
6.
Aktivitas P-glukosidase selama
fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
56-
Halaman
V.
KESIMPULAN DAN SARAN
A.
KESIMPULAN
B.
SARAN
.......................
.............................
.................................
DAFTARPUSTAKA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
LAMPIRAN
..................................
62
62
62
63
66
Tabel 1.
Tabel 2.
Tabel 3.
.................. ...
Hidrolisis berbagai substrat oleh enzim selulolitik . . . . . . . .
11
Metode yang digunakan untuk menentukan
aktivitas enzim selulase . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
..
12
.. . . . . ... . .
17
Komposisi kimia kulit pisang
Aktivitas 0-glukosidase dari tiga mutan
oleh kapang T. reesei . . . . . . . . . . . . . .
Komposisi kimia substrat kulit pisang
. . . . . . . . . . . . . . . 34
Kadar gula pereduksi (mglml) enzim selulase
dari ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . . .
37
Kadar protein terlarut (mglml) enzim selulase
dari ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . .
.
41'
............
46
pH enzim selulase dari ketiga kapang
selama waktu fermentasi . . . . . . . . . .
Aktivitas enzim CMC-ase (IUIml) dari ketiga
kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . .
Tabel 10.
3'
.. . . . ... . ..
Aktivitas enzim FP-ase (IU/ml) dari ketiga
kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . .
Aktivitas enzim 0-glukosidase (IUIml) dari
ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . .
vii
49
..
53
....
57
DAFTAR GAMBAR
Gambar
1. Pengelompokan enzim selulase berdasarkan spesifitas
substrat (Enari, 1983)
.......................
6
Gambar 2. Mekanisme hidrolisa selulosa secara enzimatis
(Reese el al., 1950) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
.
9
Gambar 3. Skema tahap-tahap hidrolisis selulosa secara enzimatis
(Montenecourt dan Eveleigh, 1979) . . . . . . . . . . . . . . . .
.
10
Gambar 4. Model regulasi biosintesa selulase (Gong dan Tsao, 1979) . . .
21
Gambar 5. Diagram alir pembuatan substrat kulit pisang
Gambar 6. Diagram alir pembuatan enzim selulase
. . . . . . . . . . . 27
. . . . . . . . . . . . . . 29
Gambar 7. Kadar gula pereduksi enzim oleh Aspergillus niger
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
Gambar 8. Kadar gula pereduksi enzim oleh Aspergillus oryzae
. .... . . ... . ... . . ...
selama fermentasi
.. .....
39
Gambar 9. Kadar gula pereduksi enzim oleh Trichoderma viride
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40
Gambar 10. Protein terlarut enzim oleh Aspergillus niger
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . .
... .. .... ..
Gambar 11. Protein terlarut enzim oleh Aspergillus oryzae
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Gambar 12. Protein terlarut enzim oleh Trichoderma viride
selaina fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . .
42
.. ..
43
. . ... . .. . .
44
Gainbar 13. pH filtrat enzim oleh Aspergillus niger selama fermentasi
. . . 47
Gambar 14. pH filtrat enzim dari Aspergillus oryzae selama fermentasi . .
.
47
Gambar 15. pH filtrat enziln dari Trichodejma vijide selama fermentasi
.
48
...
Vlll
.
PEMANFAATAN KULIT BUAH PlSANG
UNTUK PRODUKSI ENZlM SELULASE
OLEH
Trichoderma viride, Aspergillus niger den Aspergillus oryzae
Oleh
HERY MURPHI
F 26.
1008
19 9 4
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
B O G O R
HERY MURPHI. F 26.1008. Pemanfaatan kulit buah pisang untuk produksi enzim
selulase oleh Trichoderma viride, Aspergillus niger, dan Aspergillus oryzae. Di bawah
bimbingan H. Abdul Aziz Darwis dan Sunarmani.
Kulit pisang mempunyai kandungan selulosa dan karbohidrat yang cukup tinggi
sehingga berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai substrat (media) pertumbuhan bag;
mikroorganisme yang memproduksi enzim selulase. Enzim selulase merupakan enzim
yang mampu menghidrolisis selulosa menjadi glukosa.
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan substrat kulit buah pisang dan jenis
lcapang terbaik serta waktu fermentasi optimal dalam memproduksi enzim selulase
dengan metode fermentasi padat.
Metodologi penelitian yang dilakukan meliputi pembuatan substrar kulit pisang,
persiapan medium, inokulasi dan inkubasi serta ekstraksi filtrat enzim kasar. Pengujian
yang dilakukan meliputi pengukuran aktivitas enzim (CMC-ase, FP-ase, dan P-glukosidase), penentuan gula pereduksi dan pengukuran kandungan protein terlarut. Pengujian
aktivitas enzim selulase dimaksudkan untuk mengetahui aktivitas tertinggi dengan waktu
optimal serta pengaruh perlakuan jenis kapang (Al:A.niger, A2:A.oryzae, A3:T. viride),
waktu fermentasi (B1:hari ke-I, B2:hari ke-3, B3:hari ke-6, B4:hari ke-9, B5:hari ke12) dan jenis substrat (C1:kulit pisang nangka, C2:kp. kepok, C3:kp. raja), uji statistik
yang digunakan adalah uji sidik ragam acak blok faktorjal.
Hasil yang diperoleh membuktikan bahwa aktivitas enzim selulase tertinggi dari
CMC-ase adalah sebesar 4.4506 (IU/ml) dan FP-ase sebesar 1.4943 (IU/ml), ltedua
aktivitas tersebut dihasilkan oleh enzim dari Trichoderm viride dengan substrat kulit
pisang nangka pada hari ke-12 (A3B5Cl). Sedangkan aktivitas P-glukosidase tertinggi
adalah sebesar 3.0187 (IUIml) yang dihasilkan oleh enzim dari Aspergillus niger dengan
substrat kulit pisang nangkapada hari ke-9 (AlB4C1).
PEMANFAATAN KULIT BUAH PISANG
UNTUK PRODUKSI ENZIM SELULASE
OLEH Trichoderma viride, Aspergillus niger dun Aspergillus oryzae
Oleh
H E W MURPHI
F 26.1008
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Industri Pertanian,
Fakultas TeIinoIogi Pertanian,
Institut Pertanian Bogor
1994
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKhTOLOGIPERTAhJIAhJ
PEMANFAATAN KULIT BUAH PISANG
UNTUK PRODUKSI ENZIM SELULASE
viride, Aspergillus ~zigerdan Aspel
OLEH T~iclzoderi~za
SKREPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memp
SARJAiiA TEmTOLOGIPERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Iiidustri Pertanian,
Faliultas Tehiologi Pertan'
I~istitutPerta~iianBogo
Dilafiirkall di Jaliarta pada tanggal 12 April 1970
Taiiggal lulus : 23 Agustus 1994
Ir. S u n a r ~ n a n i , m
Pembimbing I1
e
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT karena berkat rahmat dan
hidayah-Nya jualah maka skripsi ini dapat diselesaikan.
Skripsi ini disusun berdbarkan hasil penelitian yang dilakukan sejak bulan
September 1993 sampai bulan Maret 1994 di Laboratorium Teknologi Industri Pertanian
dan Laboratorium Rekayasa Bioproses-PAU Bioteknologi, IPB.
Dalam kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih kepada :
Bapak Dr. lr. H. Abdul Aziz Darwis, MSc dan Ibu Ir. Sunarmani, MS, selaku dosen
Pernbimbing I dan dosen Pembimbing I1 yang telah membimbing penulis selama penelitian maupun dalam penulisan skripsi serta Bapak Dr. R. Muljono Judoamidjojo yang
turut menguji hasil skripsi ini.
Teman-teman seangkatan (AgriTenth) dan sahabat-sahabatku di Wisnia ICiicy
(Taufik. Andrizal, dan Ihsan) serta Said F, I ~ a nF, Nahhu dan Purwono atas segala
dukungan morilnya juga Ibu Rini, Mbak Kas, Mas Edi dan Mas Sugi (Laboran Lab.
TIN, Fateta IPB) atas segala bantuannya.
Penulis menyadari skripsi ini masih jauh dari sernpurna (Tak ada gading yang
tak retak), saran dan kritik untuk perbaikan dan kesempurnaan skripsi ini sangat
diharapkan. Semoga skripsi ini bermanfaat bagi yang memerlukan.
Bogor,
Agr~stus 1994
DAFTAR IS1
Halaman
KATAPENGANTAR
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . iii
...............................
DAFTAR GAMBAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
DAFTARTABEL
DAFTAR LAMPIRAN
I.
I1.
PENDAHULUAN
...
virr
x
...............................
1
........................
1
A.
LATARBELAKANG
B.
TUJUAN
................................
2
...........................
3
A.
KOMPOSISI KIMIAWI KULIT PISANG . . . . . . . . . . . .
3
B.
MIKROORGANISME PENGHASIL SELULASE . . . . . . .
4
C.
ENZIM SELULASE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6
1.
Aktivitas Total Selulase . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
12
2.
Aktivitas Endoglukanase
..................
14
3.
Aktivitas Selobiohidrolase . . . . . . . . . . . . . . . . .
15
4.
Aktivitas P-Glukosidase
..................
16
PRODUKSI ENZIM SELULASE . . . . . . . . . . . . . . . . .
17
..........................
26
TINJAUAN PUSTAKA
D.
III .
............................
vii
BAHANDANMETODE
A.
BAHANDANALAT
........................
1.
Substrat dall Bahan Kirnia
2.
Mikroorganisme
3.
Peralatan
.................
.......................
...........................
26
26
26
27
B.
C.
27
1.
Pembuatan substrat
27
2.
Persiapan medium
3.
Inokulasi dan Inkubasi
4.
Ekstraksi enzim
...................
28
28
.......................
29
ANALISIS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
30
.................
30
..............
30
1.
Penentuan gula pereduksi
2.
Pengukuran aktivitas CMC-ase
3.
Pengukuran aktivitas P-glukosidase
............
31
4.
Pengukuran aktivitas total selulase
............
31
5.
Pengukuran kadar protein terlarut
............
32
..................
33
.......................
34.
A.
KOMPOSISI KIMIAWI KULIT PISANG . . . . . . . . . . . .
34
B.
PENENTUAN WAKTU FERMENTASI OPTIMAL ENZIM
36
D.
IV .
..................
.....................
......................
METODOLOGI PENELITIAN
RANCANGAN PERCOBAAN
HASIL DAN PEMBAHASAN
1.
Kadar glukosa enzim
....................
36
2.
Protein terlarut enzim
....................
41
3.
pH filtrat enzim
.......................
45
4.
Aktivitas CMC-ase selama fermentasi . . . . . . . . . .
48
5.
Aktivitas FP-ase selama fermentasi . . . . . . . . . . . .
52
6.
Aktivitas P-glukosidase selama
fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
56-
Halaman
V.
KESIMPULAN DAN SARAN
A.
KESIMPULAN
B.
SARAN
.......................
.............................
.................................
DAFTARPUSTAKA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
LAMPIRAN
..................................
62
62
62
63
66
Tabel 1.
Tabel 2.
Tabel 3.
.................. ...
Hidrolisis berbagai substrat oleh enzim selulolitik . . . . . . . .
11
Metode yang digunakan untuk menentukan
aktivitas enzim selulase . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
..
12
.. . . . . ... . .
17
Komposisi kimia kulit pisang
Aktivitas 0-glukosidase dari tiga mutan
oleh kapang T. reesei . . . . . . . . . . . . . .
Komposisi kimia substrat kulit pisang
. . . . . . . . . . . . . . . 34
Kadar gula pereduksi (mglml) enzim selulase
dari ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . . .
37
Kadar protein terlarut (mglml) enzim selulase
dari ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . .
.
41'
............
46
pH enzim selulase dari ketiga kapang
selama waktu fermentasi . . . . . . . . . .
Aktivitas enzim CMC-ase (IUIml) dari ketiga
kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . .
Tabel 10.
3'
.. . . . ... . ..
Aktivitas enzim FP-ase (IU/ml) dari ketiga
kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . .
Aktivitas enzim 0-glukosidase (IUIml) dari
ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . .
vii
49
..
53
....
57
DAFTAR GAMBAR
Gambar
1. Pengelompokan enzim selulase berdasarkan spesifitas
substrat (Enari, 1983)
.......................
6
Gambar 2. Mekanisme hidrolisa selulosa secara enzimatis
(Reese el al., 1950) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
.
9
Gambar 3. Skema tahap-tahap hidrolisis selulosa secara enzimatis
(Montenecourt dan Eveleigh, 1979) . . . . . . . . . . . . . . . .
.
10
Gambar 4. Model regulasi biosintesa selulase (Gong dan Tsao, 1979) . . .
21
Gambar 5. Diagram alir pembuatan substrat kulit pisang
Gambar 6. Diagram alir pembuatan enzim selulase
. . . . . . . . . . . 27
. . . . . . . . . . . . . . 29
Gambar 7. Kadar gula pereduksi enzim oleh Aspergillus niger
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
Gambar 8. Kadar gula pereduksi enzim oleh Aspergillus oryzae
. .... . . ... . ... . . ...
selama fermentasi
.. .....
39
Gambar 9. Kadar gula pereduksi enzim oleh Trichoderma viride
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40
Gambar 10. Protein terlarut enzim oleh Aspergillus niger
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . .
... .. .... ..
Gambar 11. Protein terlarut enzim oleh Aspergillus oryzae
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Gambar 12. Protein terlarut enzim oleh Trichoderma viride
selaina fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . .
42
.. ..
43
. . ... . .. . .
44
Gainbar 13. pH filtrat enzim oleh Aspergillus niger selama fermentasi
. . . 47
Gambar 14. pH filtrat enzim dari Aspergillus oryzae selama fermentasi . .
.
47
Gambar 15. pH filtrat enziln dari Trichodejma vijide selama fermentasi
.
48
...
Vlll
.
UNTUK PRODUKSI ENZlM SELULASE
OLEH
Trichoderma viride, Aspergillus niger den Aspergillus oryzae
Oleh
HERY MURPHI
F 26.
1008
19 9 4
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
B O G O R
HERY MURPHI. F 26.1008. Pemanfaatan kulit buah pisang untuk produksi enzim
selulase oleh Trichoderma viride, Aspergillus niger, dan Aspergillus oryzae. Di bawah
bimbingan H. Abdul Aziz Darwis dan Sunarmani.
Kulit pisang mempunyai kandungan selulosa dan karbohidrat yang cukup tinggi
sehingga berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai substrat (media) pertumbuhan bag;
mikroorganisme yang memproduksi enzim selulase. Enzim selulase merupakan enzim
yang mampu menghidrolisis selulosa menjadi glukosa.
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan substrat kulit buah pisang dan jenis
lcapang terbaik serta waktu fermentasi optimal dalam memproduksi enzim selulase
dengan metode fermentasi padat.
Metodologi penelitian yang dilakukan meliputi pembuatan substrar kulit pisang,
persiapan medium, inokulasi dan inkubasi serta ekstraksi filtrat enzim kasar. Pengujian
yang dilakukan meliputi pengukuran aktivitas enzim (CMC-ase, FP-ase, dan P-glukosidase), penentuan gula pereduksi dan pengukuran kandungan protein terlarut. Pengujian
aktivitas enzim selulase dimaksudkan untuk mengetahui aktivitas tertinggi dengan waktu
optimal serta pengaruh perlakuan jenis kapang (Al:A.niger, A2:A.oryzae, A3:T. viride),
waktu fermentasi (B1:hari ke-I, B2:hari ke-3, B3:hari ke-6, B4:hari ke-9, B5:hari ke12) dan jenis substrat (C1:kulit pisang nangka, C2:kp. kepok, C3:kp. raja), uji statistik
yang digunakan adalah uji sidik ragam acak blok faktorjal.
Hasil yang diperoleh membuktikan bahwa aktivitas enzim selulase tertinggi dari
CMC-ase adalah sebesar 4.4506 (IU/ml) dan FP-ase sebesar 1.4943 (IU/ml), ltedua
aktivitas tersebut dihasilkan oleh enzim dari Trichoderm viride dengan substrat kulit
pisang nangka pada hari ke-12 (A3B5Cl). Sedangkan aktivitas P-glukosidase tertinggi
adalah sebesar 3.0187 (IUIml) yang dihasilkan oleh enzim dari Aspergillus niger dengan
substrat kulit pisang nangkapada hari ke-9 (AlB4C1).
PEMANFAATAN KULIT BUAH PISANG
UNTUK PRODUKSI ENZIM SELULASE
OLEH Trichoderma viride, Aspergillus niger dun Aspergillus oryzae
Oleh
H E W MURPHI
F 26.1008
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Industri Pertanian,
Fakultas TeIinoIogi Pertanian,
Institut Pertanian Bogor
1994
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKhTOLOGIPERTAhJIAhJ
PEMANFAATAN KULIT BUAH PISANG
UNTUK PRODUKSI ENZIM SELULASE
viride, Aspergillus ~zigerdan Aspel
OLEH T~iclzoderi~za
SKREPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memp
SARJAiiA TEmTOLOGIPERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Iiidustri Pertanian,
Faliultas Tehiologi Pertan'
I~istitutPerta~iianBogo
Dilafiirkall di Jaliarta pada tanggal 12 April 1970
Taiiggal lulus : 23 Agustus 1994
Ir. S u n a r ~ n a n i , m
Pembimbing I1
e
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT karena berkat rahmat dan
hidayah-Nya jualah maka skripsi ini dapat diselesaikan.
Skripsi ini disusun berdbarkan hasil penelitian yang dilakukan sejak bulan
September 1993 sampai bulan Maret 1994 di Laboratorium Teknologi Industri Pertanian
dan Laboratorium Rekayasa Bioproses-PAU Bioteknologi, IPB.
Dalam kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih kepada :
Bapak Dr. lr. H. Abdul Aziz Darwis, MSc dan Ibu Ir. Sunarmani, MS, selaku dosen
Pernbimbing I dan dosen Pembimbing I1 yang telah membimbing penulis selama penelitian maupun dalam penulisan skripsi serta Bapak Dr. R. Muljono Judoamidjojo yang
turut menguji hasil skripsi ini.
Teman-teman seangkatan (AgriTenth) dan sahabat-sahabatku di Wisnia ICiicy
(Taufik. Andrizal, dan Ihsan) serta Said F, I ~ a nF, Nahhu dan Purwono atas segala
dukungan morilnya juga Ibu Rini, Mbak Kas, Mas Edi dan Mas Sugi (Laboran Lab.
TIN, Fateta IPB) atas segala bantuannya.
Penulis menyadari skripsi ini masih jauh dari sernpurna (Tak ada gading yang
tak retak), saran dan kritik untuk perbaikan dan kesempurnaan skripsi ini sangat
diharapkan. Semoga skripsi ini bermanfaat bagi yang memerlukan.
Bogor,
Agr~stus 1994
DAFTAR IS1
Halaman
KATAPENGANTAR
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . iii
...............................
DAFTAR GAMBAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
DAFTARTABEL
DAFTAR LAMPIRAN
I.
I1.
PENDAHULUAN
...
virr
x
...............................
1
........................
1
A.
LATARBELAKANG
B.
TUJUAN
................................
2
...........................
3
A.
KOMPOSISI KIMIAWI KULIT PISANG . . . . . . . . . . . .
3
B.
MIKROORGANISME PENGHASIL SELULASE . . . . . . .
4
C.
ENZIM SELULASE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6
1.
Aktivitas Total Selulase . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
12
2.
Aktivitas Endoglukanase
..................
14
3.
Aktivitas Selobiohidrolase . . . . . . . . . . . . . . . . .
15
4.
Aktivitas P-Glukosidase
..................
16
PRODUKSI ENZIM SELULASE . . . . . . . . . . . . . . . . .
17
..........................
26
TINJAUAN PUSTAKA
D.
III .
............................
vii
BAHANDANMETODE
A.
BAHANDANALAT
........................
1.
Substrat dall Bahan Kirnia
2.
Mikroorganisme
3.
Peralatan
.................
.......................
...........................
26
26
26
27
B.
C.
27
1.
Pembuatan substrat
27
2.
Persiapan medium
3.
Inokulasi dan Inkubasi
4.
Ekstraksi enzim
...................
28
28
.......................
29
ANALISIS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
30
.................
30
..............
30
1.
Penentuan gula pereduksi
2.
Pengukuran aktivitas CMC-ase
3.
Pengukuran aktivitas P-glukosidase
............
31
4.
Pengukuran aktivitas total selulase
............
31
5.
Pengukuran kadar protein terlarut
............
32
..................
33
.......................
34.
A.
KOMPOSISI KIMIAWI KULIT PISANG . . . . . . . . . . . .
34
B.
PENENTUAN WAKTU FERMENTASI OPTIMAL ENZIM
36
D.
IV .
..................
.....................
......................
METODOLOGI PENELITIAN
RANCANGAN PERCOBAAN
HASIL DAN PEMBAHASAN
1.
Kadar glukosa enzim
....................
36
2.
Protein terlarut enzim
....................
41
3.
pH filtrat enzim
.......................
45
4.
Aktivitas CMC-ase selama fermentasi . . . . . . . . . .
48
5.
Aktivitas FP-ase selama fermentasi . . . . . . . . . . . .
52
6.
Aktivitas P-glukosidase selama
fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
56-
Halaman
V.
KESIMPULAN DAN SARAN
A.
KESIMPULAN
B.
SARAN
.......................
.............................
.................................
DAFTARPUSTAKA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
LAMPIRAN
..................................
62
62
62
63
66
Tabel 1.
Tabel 2.
Tabel 3.
.................. ...
Hidrolisis berbagai substrat oleh enzim selulolitik . . . . . . . .
11
Metode yang digunakan untuk menentukan
aktivitas enzim selulase . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
..
12
.. . . . . ... . .
17
Komposisi kimia kulit pisang
Aktivitas 0-glukosidase dari tiga mutan
oleh kapang T. reesei . . . . . . . . . . . . . .
Komposisi kimia substrat kulit pisang
. . . . . . . . . . . . . . . 34
Kadar gula pereduksi (mglml) enzim selulase
dari ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . . .
37
Kadar protein terlarut (mglml) enzim selulase
dari ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . .
.
41'
............
46
pH enzim selulase dari ketiga kapang
selama waktu fermentasi . . . . . . . . . .
Aktivitas enzim CMC-ase (IUIml) dari ketiga
kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . .
Tabel 10.
3'
.. . . . ... . ..
Aktivitas enzim FP-ase (IU/ml) dari ketiga
kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . .
Aktivitas enzim 0-glukosidase (IUIml) dari
ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . .
vii
49
..
53
....
57
DAFTAR GAMBAR
Gambar
1. Pengelompokan enzim selulase berdasarkan spesifitas
substrat (Enari, 1983)
.......................
6
Gambar 2. Mekanisme hidrolisa selulosa secara enzimatis
(Reese el al., 1950) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
.
9
Gambar 3. Skema tahap-tahap hidrolisis selulosa secara enzimatis
(Montenecourt dan Eveleigh, 1979) . . . . . . . . . . . . . . . .
.
10
Gambar 4. Model regulasi biosintesa selulase (Gong dan Tsao, 1979) . . .
21
Gambar 5. Diagram alir pembuatan substrat kulit pisang
Gambar 6. Diagram alir pembuatan enzim selulase
. . . . . . . . . . . 27
. . . . . . . . . . . . . . 29
Gambar 7. Kadar gula pereduksi enzim oleh Aspergillus niger
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
Gambar 8. Kadar gula pereduksi enzim oleh Aspergillus oryzae
. .... . . ... . ... . . ...
selama fermentasi
.. .....
39
Gambar 9. Kadar gula pereduksi enzim oleh Trichoderma viride
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40
Gambar 10. Protein terlarut enzim oleh Aspergillus niger
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . .
... .. .... ..
Gambar 11. Protein terlarut enzim oleh Aspergillus oryzae
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Gambar 12. Protein terlarut enzim oleh Trichoderma viride
selaina fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . .
42
.. ..
43
. . ... . .. . .
44
Gainbar 13. pH filtrat enzim oleh Aspergillus niger selama fermentasi
. . . 47
Gambar 14. pH filtrat enzim dari Aspergillus oryzae selama fermentasi . .
.
47
Gambar 15. pH filtrat enziln dari Trichodejma vijide selama fermentasi
.
48
...
Vlll
.
PEMANFAATAN KULIT BUAH PlSANG
UNTUK PRODUKSI ENZlM SELULASE
OLEH
Trichoderma viride, Aspergillus niger den Aspergillus oryzae
Oleh
HERY MURPHI
F 26.
1008
19 9 4
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
B O G O R
HERY MURPHI. F 26.1008. Pemanfaatan kulit buah pisang untuk produksi enzim
selulase oleh Trichoderma viride, Aspergillus niger, dan Aspergillus oryzae. Di bawah
bimbingan H. Abdul Aziz Darwis dan Sunarmani.
Kulit pisang mempunyai kandungan selulosa dan karbohidrat yang cukup tinggi
sehingga berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai substrat (media) pertumbuhan bag;
mikroorganisme yang memproduksi enzim selulase. Enzim selulase merupakan enzim
yang mampu menghidrolisis selulosa menjadi glukosa.
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan substrat kulit buah pisang dan jenis
lcapang terbaik serta waktu fermentasi optimal dalam memproduksi enzim selulase
dengan metode fermentasi padat.
Metodologi penelitian yang dilakukan meliputi pembuatan substrar kulit pisang,
persiapan medium, inokulasi dan inkubasi serta ekstraksi filtrat enzim kasar. Pengujian
yang dilakukan meliputi pengukuran aktivitas enzim (CMC-ase, FP-ase, dan P-glukosidase), penentuan gula pereduksi dan pengukuran kandungan protein terlarut. Pengujian
aktivitas enzim selulase dimaksudkan untuk mengetahui aktivitas tertinggi dengan waktu
optimal serta pengaruh perlakuan jenis kapang (Al:A.niger, A2:A.oryzae, A3:T. viride),
waktu fermentasi (B1:hari ke-I, B2:hari ke-3, B3:hari ke-6, B4:hari ke-9, B5:hari ke12) dan jenis substrat (C1:kulit pisang nangka, C2:kp. kepok, C3:kp. raja), uji statistik
yang digunakan adalah uji sidik ragam acak blok faktorjal.
Hasil yang diperoleh membuktikan bahwa aktivitas enzim selulase tertinggi dari
CMC-ase adalah sebesar 4.4506 (IU/ml) dan FP-ase sebesar 1.4943 (IU/ml), ltedua
aktivitas tersebut dihasilkan oleh enzim dari Trichoderm viride dengan substrat kulit
pisang nangka pada hari ke-12 (A3B5Cl). Sedangkan aktivitas P-glukosidase tertinggi
adalah sebesar 3.0187 (IUIml) yang dihasilkan oleh enzim dari Aspergillus niger dengan
substrat kulit pisang nangkapada hari ke-9 (AlB4C1).
PEMANFAATAN KULIT BUAH PISANG
UNTUK PRODUKSI ENZIM SELULASE
OLEH Trichoderma viride, Aspergillus niger dun Aspergillus oryzae
Oleh
H E W MURPHI
F 26.1008
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Industri Pertanian,
Fakultas TeIinoIogi Pertanian,
Institut Pertanian Bogor
1994
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKhTOLOGIPERTAhJIAhJ
PEMANFAATAN KULIT BUAH PISANG
UNTUK PRODUKSI ENZIM SELULASE
viride, Aspergillus ~zigerdan Aspel
OLEH T~iclzoderi~za
SKREPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memp
SARJAiiA TEmTOLOGIPERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Iiidustri Pertanian,
Faliultas Tehiologi Pertan'
I~istitutPerta~iianBogo
Dilafiirkall di Jaliarta pada tanggal 12 April 1970
Taiiggal lulus : 23 Agustus 1994
Ir. S u n a r ~ n a n i , m
Pembimbing I1
e
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT karena berkat rahmat dan
hidayah-Nya jualah maka skripsi ini dapat diselesaikan.
Skripsi ini disusun berdbarkan hasil penelitian yang dilakukan sejak bulan
September 1993 sampai bulan Maret 1994 di Laboratorium Teknologi Industri Pertanian
dan Laboratorium Rekayasa Bioproses-PAU Bioteknologi, IPB.
Dalam kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih kepada :
Bapak Dr. lr. H. Abdul Aziz Darwis, MSc dan Ibu Ir. Sunarmani, MS, selaku dosen
Pernbimbing I dan dosen Pembimbing I1 yang telah membimbing penulis selama penelitian maupun dalam penulisan skripsi serta Bapak Dr. R. Muljono Judoamidjojo yang
turut menguji hasil skripsi ini.
Teman-teman seangkatan (AgriTenth) dan sahabat-sahabatku di Wisnia ICiicy
(Taufik. Andrizal, dan Ihsan) serta Said F, I ~ a nF, Nahhu dan Purwono atas segala
dukungan morilnya juga Ibu Rini, Mbak Kas, Mas Edi dan Mas Sugi (Laboran Lab.
TIN, Fateta IPB) atas segala bantuannya.
Penulis menyadari skripsi ini masih jauh dari sernpurna (Tak ada gading yang
tak retak), saran dan kritik untuk perbaikan dan kesempurnaan skripsi ini sangat
diharapkan. Semoga skripsi ini bermanfaat bagi yang memerlukan.
Bogor,
Agr~stus 1994
DAFTAR IS1
Halaman
KATAPENGANTAR
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . iii
...............................
DAFTAR GAMBAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
DAFTARTABEL
DAFTAR LAMPIRAN
I.
I1.
PENDAHULUAN
...
virr
x
...............................
1
........................
1
A.
LATARBELAKANG
B.
TUJUAN
................................
2
...........................
3
A.
KOMPOSISI KIMIAWI KULIT PISANG . . . . . . . . . . . .
3
B.
MIKROORGANISME PENGHASIL SELULASE . . . . . . .
4
C.
ENZIM SELULASE . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6
1.
Aktivitas Total Selulase . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
12
2.
Aktivitas Endoglukanase
..................
14
3.
Aktivitas Selobiohidrolase . . . . . . . . . . . . . . . . .
15
4.
Aktivitas P-Glukosidase
..................
16
PRODUKSI ENZIM SELULASE . . . . . . . . . . . . . . . . .
17
..........................
26
TINJAUAN PUSTAKA
D.
III .
............................
vii
BAHANDANMETODE
A.
BAHANDANALAT
........................
1.
Substrat dall Bahan Kirnia
2.
Mikroorganisme
3.
Peralatan
.................
.......................
...........................
26
26
26
27
B.
C.
27
1.
Pembuatan substrat
27
2.
Persiapan medium
3.
Inokulasi dan Inkubasi
4.
Ekstraksi enzim
...................
28
28
.......................
29
ANALISIS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
30
.................
30
..............
30
1.
Penentuan gula pereduksi
2.
Pengukuran aktivitas CMC-ase
3.
Pengukuran aktivitas P-glukosidase
............
31
4.
Pengukuran aktivitas total selulase
............
31
5.
Pengukuran kadar protein terlarut
............
32
..................
33
.......................
34.
A.
KOMPOSISI KIMIAWI KULIT PISANG . . . . . . . . . . . .
34
B.
PENENTUAN WAKTU FERMENTASI OPTIMAL ENZIM
36
D.
IV .
..................
.....................
......................
METODOLOGI PENELITIAN
RANCANGAN PERCOBAAN
HASIL DAN PEMBAHASAN
1.
Kadar glukosa enzim
....................
36
2.
Protein terlarut enzim
....................
41
3.
pH filtrat enzim
.......................
45
4.
Aktivitas CMC-ase selama fermentasi . . . . . . . . . .
48
5.
Aktivitas FP-ase selama fermentasi . . . . . . . . . . . .
52
6.
Aktivitas P-glukosidase selama
fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
56-
Halaman
V.
KESIMPULAN DAN SARAN
A.
KESIMPULAN
B.
SARAN
.......................
.............................
.................................
DAFTARPUSTAKA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
LAMPIRAN
..................................
62
62
62
63
66
Tabel 1.
Tabel 2.
Tabel 3.
.................. ...
Hidrolisis berbagai substrat oleh enzim selulolitik . . . . . . . .
11
Metode yang digunakan untuk menentukan
aktivitas enzim selulase . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
..
12
.. . . . . ... . .
17
Komposisi kimia kulit pisang
Aktivitas 0-glukosidase dari tiga mutan
oleh kapang T. reesei . . . . . . . . . . . . . .
Komposisi kimia substrat kulit pisang
. . . . . . . . . . . . . . . 34
Kadar gula pereduksi (mglml) enzim selulase
dari ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . . .
37
Kadar protein terlarut (mglml) enzim selulase
dari ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . .
.
41'
............
46
pH enzim selulase dari ketiga kapang
selama waktu fermentasi . . . . . . . . . .
Aktivitas enzim CMC-ase (IUIml) dari ketiga
kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . .
Tabel 10.
3'
.. . . . ... . ..
Aktivitas enzim FP-ase (IU/ml) dari ketiga
kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . .
Aktivitas enzim 0-glukosidase (IUIml) dari
ketiga kapang selama waktu fermentasi . . . . . . . . . . .
vii
49
..
53
....
57
DAFTAR GAMBAR
Gambar
1. Pengelompokan enzim selulase berdasarkan spesifitas
substrat (Enari, 1983)
.......................
6
Gambar 2. Mekanisme hidrolisa selulosa secara enzimatis
(Reese el al., 1950) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
.
9
Gambar 3. Skema tahap-tahap hidrolisis selulosa secara enzimatis
(Montenecourt dan Eveleigh, 1979) . . . . . . . . . . . . . . . .
.
10
Gambar 4. Model regulasi biosintesa selulase (Gong dan Tsao, 1979) . . .
21
Gambar 5. Diagram alir pembuatan substrat kulit pisang
Gambar 6. Diagram alir pembuatan enzim selulase
. . . . . . . . . . . 27
. . . . . . . . . . . . . . 29
Gambar 7. Kadar gula pereduksi enzim oleh Aspergillus niger
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38
Gambar 8. Kadar gula pereduksi enzim oleh Aspergillus oryzae
. .... . . ... . ... . . ...
selama fermentasi
.. .....
39
Gambar 9. Kadar gula pereduksi enzim oleh Trichoderma viride
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40
Gambar 10. Protein terlarut enzim oleh Aspergillus niger
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . .
... .. .... ..
Gambar 11. Protein terlarut enzim oleh Aspergillus oryzae
selama fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Gambar 12. Protein terlarut enzim oleh Trichoderma viride
selaina fermentasi . . . . . . . . . . . . . . . . . .
42
.. ..
43
. . ... . .. . .
44
Gainbar 13. pH filtrat enzim oleh Aspergillus niger selama fermentasi
. . . 47
Gambar 14. pH filtrat enzim dari Aspergillus oryzae selama fermentasi . .
.
47
Gambar 15. pH filtrat enziln dari Trichodejma vijide selama fermentasi
.
48
...
Vlll
.