Production and Utilization of Cellulase Enzymes from Trichoderma viride to Improve Rice Straw Silage Quality
PROOUKSI DAN P E W A A T A N EN= SELULASE ASAL KAPANG
I*ricMerma viridt?UNTUK P~~
XlritTTIJ IWTRISX
SXLASE JERAM PAXlI
PROGRAM:PASCASARlAMA
IMS'IITUT PERTAMAN BOGOR
2002
RAHlWT HIDAYAT. Production and U$&&m of CAuhse Enzymes from
TricWrmo virid~to Improve Rice Straw Silage QualitytYUnder the direction of
SURYAHADI and KOMANG GEDE WIRYAWAN.
Toovemrnethe s o ~ o s of p i c n l f w inthe dryswon, i t d t a
dwelope an approprkte teChn01ogy of forage such as &ago. A good q d t y of
silage is Ilt,tained by d~xreaghgthe fiber c m h f s ( N d Detergent Fiber, Acid
Detergent Fiber and Qnm).
The research was wnducted in twa stages: 1)- hdmtion and activity test
of mde emynm from TricWerma virilie d 2). (3nn@wn test us& crude:
e x a p e s h m TricWrma w'ride strain QM 9414 (CETV) a d wU&
c o m m d enzyme (Ceilulase "Onozu2ra R-IO",h i d d k @on rice straw silage.
The Treatments were arranged as fofiows : PO-UnIreaW rice straw silage,
P1-Treated by c e l h h x commmiat mqm ;it 10 IX3
P2- Tmded by CETV
at 3.8 IU
P3=Tmted by CETV at 7.6 TU kp" and P4= Treated by C E W at
11,4 ilJ kg" of fresh r i a &raw. All matmmts w m enriched with 5% m o w .
The result of the remar~hindicated that: 1). The
of cnrde w e s
h m Trickoderma viride strain QM 9414 (CETV) was 1,52 I U ~ ' 2).
, The
addition of both V e s did nut &rewe dry ma#w of rice straw silage,
however, organic matter s i g d b n d y d w x a d by &&ion of wilutasr: cometchl
e n q m e 3). The: amlian of btfi eKgxa deed mx contents (ADF and
NDF), furthemom increased in sacco d&&Wty of dry matter and organic
ma#w of rice straw silage.
kg",
PRODUKSl DAN PEMANFAATAN ENUM SELULASE ASAL KAPANG
I*richodemavr'ridel,JWUK PERBAKAN MUTU NUTMS1:
SILASE f E M M PAIII
Ad&
k mexupaican h a d karya saya sendiri dan b h u n pnmh
dipubbikan oleh orang lain. Semua ~mba
data dan infummi y m g d i p d m
telah dinyatalcan scam j e k dan dapat d i p d b kcbenamnya
PRODUKSI DAN PEMANFAATAN ENZlM SELULASE ASAL KBPANG
T r i c M m a viri& UNTUK PERBAMAN M U W NU1E*EUSX
SILASE J E W PAD1
Pananfaatan Enzim Sehhse A d Kapang
Trjchoderma vzride untuk Pert,ahn M W N&ki Silase:
Jwami Pa&
3udul Tesis
: M u k s i dan
Nama
: Rahmatfidayat
WRP
:m
Program Studi
: PlmuTemak
Dr. Irk
S ~ a M DEA
L
Kern
Ketua b g r n m Stud h u Ternak
Dr.Ir, K m a q M
e
:
Wikyman
WQQ
Pmulis &hidm & Sumdmg path tanggal 19 Ft*
1%9 8ebagai an&
ketujuh dari p a a q p US. Nat;mriharufja dan Eri R u b t i Pendidikm @am
dikmpuh di Fmgmm Sbdi
TF a t a s P o t a d a n Unkmit9s
Padjadjaran Bandung ldw pBda tahm 1994. Pada M
u
n 1999, pen& d h r h a
d Program Shrdj. Ihnu T d pada Rugam Pawsarjanrt IPB. Pendk
memmleh M w a padidikan pascawjam dari BPPS
Departemen
fendidikan Nasional.
Pen& W q i a sebagai Staf Fagajar di Program Studi Ilmu P S b i dan
h4akanan Tern& Fakultas P e m h Universitas Padjadjaran Bandung
S e h a me&ti
program 52, p& menjadi asisten mats kzdiah h u
N W Pabandmgm pada &Irun 2001/2002di b g a m Pacawjam IPB.
PRAKATA
Puji dan syukw pnufis pmjatkan kepada Allah SWT atas sepia karunia-Nya
sehingga @a iimiah ini brhasit diselesaikan. Tema ymg dipilih dalam
penelitian yang dildaanakan sej& bulm Agustus 2UUl ini ialah silase, dengan
judut Produksi dm Pernanfaatan Enzirn Selulase asal Kapang Trichodermu viride
untuk Perbaikan Mutu Nutrisi Silase Jemi Padi.
Terima kasih penulis uciPkan kepada Bapak Dr. Ir. H.Suryahadi, DEA dan
Bapak Dr. fr. Kommg Gede Wiryawan selaiEu pmbimbing, serta Bapak Dr. Ir.
Toto Toharmat, MSc. setaku penguji luar komisi yang telah bmyak nlemkri
saran. Dismping itu, penghargaan dm terima kasih juga pnulis sampaikan
kepada Ibu Ir. Suci Wulandari, MSi. (Tante Dari), atas segala banruan d a i ~
kerjasamrtnya. Selain itu juga terilna kasih penulis sampaikan kepada Bapak Lalu
Sukarna, BSc, bewrta staf dari Batitbio Tanaman Pangan Cimanggu Bogor, serta
Mbak Yani, Mbak Dim, Pak Opik, Pak Adi dan Dik Nining dari Fakultas
Peterntkan LPB serta semua pihak yang tclah banyak mernbantu di lapangan.
Ungkapan terima kasih yang mendalarn juga pnulis mrnpaikan kepada Xstri dan
anak-anakku, Ibu serta seluruh keluarga, atas %galapngertian, dorongan ~nateriaf
maupun doa dm kasih sayangnya.
Semaga karya ilnziah ini hermanfaat.
3 d Padi .............................
....................................
S b .........................,.............................................
P m g a d P m b a h a n Emim tertaadap K u a b s Sikw ...............
b p a g T r i c M m a viride ..............................
.
.
............
E & S e ~ ~ d a n S e ...................
l ~
,
.
.
.....................
TekrtiirInSacco ............................................................
MATERI DAN METUDE ........................................................
W
h dan Tempat P m e l i h
...........................................
Materi P m e.m ............................................................
Me*
Pmehhn ....................................
. . . .
.
*
4
S
16
17
18
21
24
24
24
25
Pmduki dan Uji A M v h Crude Enzymes dari
Trichuderma viride ................................................ 26
Uji BanPmgmmn Crude E w e s dari Trickoderma
viride (CETV) dengan E d Selufase Kcmasid pa&
She J
d Pa& ................................................. 28
HASL DAN PEMBAHASAN
prod^ d;rm U#
viride
AhiVi-
36
Er~ayme~ T ~ i ~ h i k r n t a
........................
. .
.
.
.....a*......+...
.
.
Uji Banding Pmggman Crude Enaymes dari Trr'chxikrrnaviride
(CETV)(Bayqan E d s l u l m K
d pada S h e J
d Pa&
P m g a d P e r M m t d d a p Kualim F a S h J m d
Pa& .......................
.
.
............
Pengar& PerZakuan, - K m K i r H i a S b 3 d
Padi ................................~.......................
K-BhKedanElahanQrganik
.................
36
37
37
.
.
.
KESMULAN DAN S A R A N
.................................................
39
49
53
IMamm
I. Mehisme
~~SeIulosa s e x a EmimAs .................... . ..
*.
2. S k a hdd&C d Enzymes S e I k dari T r i c M r m a w'ridk ...,,
19
26
maman
1. Komposisi h a t a n ~ S a I i c y i i acid
c (DNS) .............................
.
.,,. .
60
62
4 Data had penttitian .................................tian....
.
,
,
1*1*Latar B e l a k g
~
~
~
&
h
produks;i h m h y a addah ti&
rn&&i#a
-
~
~
p
e
t
t
r
t a d h y a b a b plum ~jauan
y a n g ~ d a l a m ~ ~ c u k u b , ~ t a tPadam&
u m .
k m u m h r i gufit dipcrofth dm lwrpqa m d d
tidak
e
pane-
SdAihyq pada muaim hujm produkgi hijam
W
~ ~ t i d s r k d i t # W ~ o E e i r ~ % c : ~ t e t j a d i .
pem-
Ud-MMd-pe-m~ b ~ ~ b a h m p r a k a n ~ ~ t c n x c e d i s ~ ~ w a k t
PargawetanM~adacfuamaczlmy&~~w~iraing(hay)d;in
pmgmetan
basah ( s h e ) , Pqgamtan hij-
mapmyai
dmgan carit
b ~ h ~ ~ m y a k u a l i t a s h i j a u a n f e ~ d a p g t ~ d a n
w a h p demikian prom p n b u a m daw d manpllnyai
tahm his
k e ~ y * ~ ~ ~ ~ t a s e t l a h a n k E s i n g d ; a n h ~ ~ e r a t
h t e s a p ~
Jdpdlmm@af£limbah@yrmg~patenrriaX8e~
d
U
I
l
p
k
a
~
~
a
n
g
~
d
i
d
h
&
~
~
~
h u m Oleh kama ifu petennak l a m e d h h&mn
~
h
u
~
e
~
h
P
b r cf r dZa l uh s i &
m ~
~
~
pahat tern& pada
@P ~ m e n r y i m p s r n j ~ p z a d i z m t t l k ~ ~ n n r s i m
k*dimansrpmctuirrri~aunnreMtak
r
1.3. Manfaat Penelitian
1, M
m
m s m b q p pmihm dalam usaha mnqwbaiki mum nut&
-
kecemwn dan ~ y h q m a jerami
n
pad.
2. Mmingk&h pmmfaat;tn jeramj padi me*
penYwa-Yang
xmxi&
patingkratan mutu dm lama
1.4. EIiptesls
1. Paambahan enzim ddase baik km&
kapang Trr'cWernta viride akan men-
mupun cruBe emymes as&
kadar swat dan hdak h
m m b a k bahan kmhg marq,un b a h mgmk silaslc jerami padi y m g
potmsd sebagai s u m k en@
2. P
m
f
i
e ternair.
b enziti s t : l h baik kormrkl m a ~ p l lcrude
~ ~ enzjlmes asat
kqmg Trr'chodermaviride alran m d n g k a t b kecernaafi
jerami padi,
2*1, J e m i PadI
Jerami pa& addah hijauan dxi tanamafi pa& (Orizu sativa Linn) setelah
biji mu b u l k y dipeEik mEuk kepentingan manu& dan teIah dipkhkan dari
& m y a (Lubk, 1963).
sangat
Jerami m m p d m dab satu limbah p r t a r h y q
ptensial sebagai SUM^ en@
nmkuh.
yang &pat d h d a a t k a n deh t e d
Kebmdaan jerami padi mtxhgkat stking dmgm mthgkatnya
proBuksi padi. Menurut B h Pusat: Stat&& (2001), lw areal tanaman pa& di
Indonesia pada tahun 2000 dipmkidm maxcapai 11,413,784 trek& dmgm
produksi padi sebanyak 50.080.787 ton dan 1-
M u Jawa yaitu 5.659.751 heW.
h p aj
d padi d
areal tanman t e r b a r addah di
EM itli @at rnmglwdkm proauk h t a n
q asW (13-15) stebanyak 50.030.787-250,$03.934 tun
setiap tahumya. P m g p m m jm&
pa& seb@ p k a n tmmk rumhamb telah
m u m di2akubra3x di d a d trap& dm subkopk (Jackson, 19771, terutama pada
musim k m w a u .
Pmanfmtm jmami padi unhk p a h temak di hdanesin
b & k i ~ antara 31-399! ~ebagian besar dibakar
itb~
d
i k ~ b d hkc~ t i d ~
*bag& pupuk (36-62%h dm & m y a mtara 7-16% digunakan untuk k@uan
h d u h (K-'I
1984).
J e r h pa& mengandung W !
bahan oq@k yang smwa potemid dapnt
d i ~ o l e h . ~ i t u j ~ @ m ~ ~ e n @ y a f l g b e s a s b s r g i
tetnak: mmhmk, tetapi keny-ya
fianya 45-5U% (b&,
1%3
yang dapat d i w m
OMtemak. rumkmh
dan Jadamq 1977), F&m-faktor
pmggum jefami pa& shgzti
yynnlr, rnmghmba
b m k mnhmb y m g ur~rma adalah
Tabell. ~ N ~ J e M t r n i P a d i d i P u I a u J a w a d a n ~
t h
;Cd(%dafitrafaankering)
Rot& Knsar
4,51
Lanak b a r
1,51
Swat Ka#r
28,78
Abu
19,W
Z
a
Sumber :LebdwakadjO (1982)
Mat-
Doyle et ai. (19%6), k m p k jmrami padi q
t hmnki,
hnl
~ ~ d o m W ~ ~ 1 9 8 6 ) ~ ~ b a h W a ~ b a w l i h ~ p a
~ a i l i l i h a i k ~ ( i n v i ~ ) ~ ~ ~ ~ & a t , k r r r w t
t
m
g
g
i
n
y
a
~
~
~
~
Kumr (1984) m m g e m b h MWB
-k
d e p d a i jaanrd padi di
d a l a m ~ ~ ~ l ~ l z a n b a t ~ ~ n r m p u t , h a
i n i d i & a b b & ~ ~ ~ & - ~ p r o t t i n y a n g ~
Kaccpatan-~
berguoaw@--nrmen.
eanCtat----(ffmjtrmXBhpakanm
SGnralcincepat~pafran,mai;a~mudahtnrnak
dik-
~ l a I I j d r m j t m t t a h ~ y a n g d i i r d ~ b m b a r x y aUntukttidup
k.
p
o
k
u
k
~
~
m
~
l
r
a
h
a
n
~
5 t r - S S % d a n ~ p F o t e i n ~ l j l ~ ~ E I O ~ ~ k ~ ~
hanya 35-37% dmgm kmbgmprotein 34% (Djajmqgm, 19833,
T J p a y a ~ k u ; d i t a s r ~ p a d i d a p a t ~ ~ ~
kirnia, bidugi atau k m W dimmmya.
P*
maw
fia
-a
-m-Fw--d=vFww=
P
a
d
t
z
j
a
t
d
u
*
~
l
~
w
~
d
StfkitF &ce~18
m
a
m
;
r
l
t
~
a
p
W
~
~
~
~
~
~dank^
u
a
t
d
i
~
~
~
~
rrtwr @iik:~10 et d-,1986).
prc#rea
--wd+-@w-b
pmduhati kapitng p a d a m ( 5 m k , 1983).
P e r l r r t n r a n ~ l a c a r a = ~ ~ ~ n a m u a h a s i l y a n g
~
t
i
c
h
k
~
~
c
n
e
r
g
i
d
s
m
~ P
*y
a
n
g
~
@
2.2. S i h
Sibadaupakantennakm-m*proatsfhijam den@pin hdmgm air i i q g L
b i b e dabh pmamya, imhgkm
terapat pmbwtamya dinamah sits ( B a b dm S a p k q 1993)Twjuaa. p d w m sif;ise lxltmlm Susqo et a].(1977) addah abm4if
wtuk m~~
hijguan agar &tap &hi
kesLdslan segw h g a n tetttp
m-a15"nrrtrienyq&-m*wW
~
b
;
h
r
h
a
a
l
n
y
k
~
(I3:t@aBanMtmdfe,1972).
a
h
i
i
j
l
a
r
g
l
p
a
a
i
,
u
~
~
~
~
d
~
a
~
n
p
~
m
~
Q
~
c
a
~ b & u y m g ~ ~ p z n b u a & m ~
B i t a ~ ~ I m r a n g ~
hanrsqaikadarw%erltyy25-35%
2 S S Q , m ; d c a ~ y a a 1 z ~ a k s m ~ ~ d a a b e r a i r ~ s r i r ~
~
d
a
~~~
r
i
~
~
~
~
~
~
r
t
r
m
a
n
~ k a d a r t r a t h a n ~ I t t r i h , d d 3 5 % ~
y
o
~
-~pHhw--
y g n g - m - m
p%umhhm'b9irtwi m a m b w@ E n f e r ~ r i u w wB0cf'JJi1
,
ChtrirJia dan
P a m pH jqga Am meninglradran kcwpatm ikhlbb mara
&&ria-
~ b e b w a p a ~ d a , ~ ~ ~ y a t t g p f a d r r g i l i r a r m y a a k a n
mexflxnmkaa h d w q p lriaat kam hijauan yang dibuat s i k e
K
e
W p d w t m shtw b w l i -m
~~
-ut,
nuttiext yang dqat
S h e yrang bailr. dipxoleh
menelm be&@
enzimaaia~~ymgtidakrtik&d&i,nnikroba~(sepertiy~
biasa terdapat &dam hijam) laerta mendorong berkmkngnya b a k t i p q h d
k @ ~o h e r a p s f ~ b w ~ ~ y a n g ~ b ~ d i k d ~ ~
padi,jeramigandwn,batangIrayu,~~dan~teh.
Kcmqmki W sehlosra bxdki d;ari mtai
Imb 1,4 -43-
giuDr@~yangm~dung~~dan~vanDerw~(Orpin,
2,6, Teknik In Sacco
MekPde h h n g d m adalah penempidm h@m kc: daftrm, lcantung yarrg
~daxibaiunxymgtidalr~tdi~~rrrtOn,dacrm,ataumtera
wxaa lnxrlgsung kr: daIam rumen (in v-1
rmtuk mem-
-k
(Martea, 1981).
T
W ini digumkm
yang k a d a dab Irantong rtihm
-1
wktb~ke:dafam~wpadaperiode-ynng-
( M i ~ h a I e t - bdan Odd-B& 1992),
B
~
inswG0;tdafah.:
f
~
y
a
s
t
g
m
~
~
~
p
a
d
a
p
a Powitas Kantong
P
O
r
-e
d
a
s
~
~
~
r
n
Yang m
-
~
petruzan
j
l
m
t
t
cialam
pen%
a
f
r
d
v
penanam di dalam htmg m-ta m e m ~ j u m f a sampe:I
h
yang keluar dari
kantmg dm ymg tidak dicema m k w p n h e m e n (Michalet-Dmau dm
UM-Bah, 1992). Pl;ryxae et al. (1978) rnayahkan bahwa @
h
i
htong
m m m t u h pula b m y a aliran ma& dqpta rumen dm kt&xbWm k
b
~~yacaitanlllm
p aa d a h t a g
~~men ke dalam h b n g a
Penekasi
apabila pmwitas k a n a
~k
3 pm atau
tern k
Damu dan Ould-Bah, 1992). Jumtah ~~e
lebih
S a H d
h sangat terhambat
d dmi 3 p (Michaletnrmm di dalam htmg
di luar kanmg. Pviakin kecil prositas h t a x g , m d a
*da
makin 88dikit lllikmo-0
llmm di daIam
htow
JJusnlah b&ai yang
ditemukan di dalam kantmg d q p porositas 10 gm hanya g
total jumXah b%
di dabin nunen pa&
prositas
b
lU% dasi
kanbng 53 pm (Michaiet-
MMU
dart Odd-Bah, 1992).
3wd&
gampt:I.
ymg keluar dari kantong dan tidak d i m uleh
inkubasi b i q p t m g aaxl pencucian
m e n dapat *adi
~~e
lcantung setelah masa idcub&.
Jwhhnya a h menix@& dengm makin
harnyif parosh kantong dan maIcin k*;d
ukrrran palike4 sampel
(Michalet-hreau dan Ould-B&, 1982),
b. Pasisi K m t q Miion di DarIam Rumen darn Pencucian
Kantmghanrs~danbebas~~terjadiperarkaran~
dafi dan ke
k
a
n
w
Pmcwbn
a hhbsi
&kuh
untuk
a
n
~
EX. M A T W DAN METODE
3.1. Waktu dm Ternpat Penelitian
Penelih dilaicslanaicnn slams ~~ b h mdai dari 1 Agustus 2001
%ampai dmgm tanggal 30 A@
L s r ~ r i z u x Mjkmhiologi
l
2002.
Pm*
ini dilalcsanakan di
Mubigi Mmat&m Nutrisi T&
b dan B ih h W ~PAIJ IPf3 dan
P e k m k q mmatorium ~
L
a
b
a
r
a
w
x
r
m Biokimia dm Fmhatjk Balai P & t h
DpammmP-
C
PmA, Fakultas
Tanman Pangan,
m Bogw.
3.2. Materi Penelltian
Bahan pacobam &xdiridari J
d pdi q a r c u l k IR 64 yang didapat
d a i Damqp Bogor, m u h a , 6 s e h h c k m m d "Ono-
R-10" dari
Trickodermo w'ride d a g m W t a s 1,O Ufmg, prortuksi SERVA E l e c t r o p h i s
GmbH D-69115 Heidelkg Cad-Benz-Str.7. m b a ymg
~~adahh
kapmg Trichierrna viride strain QM 9414 ym.g &&pat dari LatWratorium
~
~
l
odang Tekna1ogi
i
Biaptrtrsea J l ~ l r s a nT e a Kirrtia m3. Media unEuk
~ ~ ~ d a r i d u a ~ y a i t u M e d i a c a i r I , d a n M ~ & r f l [ .
Media cair I b d m @ untuk rncmgaman dan l m m p m p t pmmbuhan
a Ddam 1 ~ M & c a i r X ~ d m g : ~ N ~ S g K C t U , 5FeSQ
g,
.m20
401 &
b@04.7f.120
45 & cl&O4.m20
0,001 & eke&&
1 g dan
1998)- Sedmgkan M&
cair 1J, yang
peptan 6 g d q p pH 5,45. (M&
~ ~ ~ 1 E u k : ~ e n z i r n , d d m s a t u ~ m ~ d u n g ~ W O ~ 5 g
45g
F
~
.m20
O ~401g
h@04.7Zf@
0,s g, C U S O ~ 4~
001
~ ~g
~ ek9trak.
O
mgi 1 g d a n ~ s a t u ~ a s u m b c r k r l r b o n ~ j ~ p a d i f S g
(Munksqrit, 1998).
kompoePisi n-
Slain itu jugn mmggmdm bahan kimia 4adisis
s h e yang dhdkm.
Unhrk: uji Irecaman (in sacco)
d@dm Kerbnu ymjj nrmennya &Mi dS&da
Semiqgu w b 1 m &wakm
mjliir
F h h Petenn;lkan IPB.
sampai, berakfiir p m d w n , kerbau
dikmdbih d+ngan pemberian palan nrmput w
jah 40 kgjhari dan d d a k padi
lima
w.%bat
bndan k d a u -t- 300 kg.
P ~ y ~ d i i y n a k a n u f l E u l r ~ ~ ~ ~ : A u b c
Xamirrar, jasum ose, tab-
r e h i , cawan petri, gelas a h m y w 250 mt, thkw
inkubator, h u l mtt, MI*,
dm llemari m. PUat yang d & m h
~uksidan~~ant;oralain:~1~(Silomini),~Ea1,syringe,
p M & mq @qpdan thhngm.
Peralatan lltltuk anadisa kin&
ssdalah : wen, pH m a , cawan masir, pomp
gehs u b r , bnw,
~~~ h ~ o n nilan,
g
kt:Iemg, tali p
WE,splaophotometri
W dm l m w i asam.
3.3.1. Pronrrkgidan 'CJJII Aw*
C dE
m dad M
*
T2lkilpan pekdaan mtuk memproduirsi crsrcie
e v e s
*
dari kapang
T r i c M r m W'ride mmwut Mantaqd (t998), sexam jek c@ed&atkan dalam
Gmbar 2,
d@hbhhIte~25~taErungreaksi~marsing~~e~ak3d
danditutup-kapitsstail.
~~ ke
Satu lup kapang TricMerma viride
wyangm---mbuhI.
..
Kapang-but-
empat hari pa& suhu kamar dmgm goy*
dalam t
a
m
(shaker), set&&
wama
tumM k
m h
ditmder kc whmnqw 240 ml ymg r n ~ t i m gMadia T d u h Dt s b d
sc:b;tnyak 150 ml.
l3kdcum w
goymgm. S e b &ba4
h 14 h a i pada suhu Irammr denjpn
q x b h wadi perhmbuhm kqmg atau tidak
*titi
dan &IeM q h h ads k o n t d m s i dmi bakmi Media yang dhnbrrhi kapng
TricWrrna viride t m l W b a h g dan, tumbuh rnklium h a m a putih,
=fW+
Y a w ~erkm
tam&$ b&
qgm &bung agar ti&
t e d h t keruh. Media yang terkontamkwi
mm&m r;uninasiyaarg lain.
Pada ha5 ke-14 c k h k m pmmman, patla umur tersebut
Trickodema viride dab mmprahbi
(Mantmqrit, 1998).
crude
Supematan sebagai cm&
kqmg
errymes s e l h swam o p W
envmes
dipmleh dmgm
crtra
mtrihgmi pada kecepatan 4.000 rpm &ama 30 menit pada suhu 4°C.
AkWas
d
endm diktappkan dengan car% mengukur j d a h
i d;ari seMafla
~
(km
~ saring) d a i cnzb -but
@uk:08a
yang
pads p H 4,8. Kadar
gldw yang hhtmtuk d i t e t q h dengan proecgdtn: Mandeb et ai. (1976)dmgm
teknik, g~:ktr#fotarnesid f q p
~~ pamaan xnmgpmh
Acid (DNS) dm didcur pada panjang gelambang 550 nm.
d @ d m &bh
: h i a n lX&nx&*c
-*
Re-
y
q
Acid P N S ) (Lampiran 11, 0,05
M
Gula ymg dipdub dai
~~ sampel dktapkm mtlahri
pgulman itbdms@a dm sehjutqa dibuat
mg
a
(mmbu y) hwan 1%
&an&,
kern&
ml CETV (surnbu x), kemudk &ambar
Jika g a 1 k t i d & m e t l w r p i a i I e v e f 2 m g ~ m a , ~ d i u l a r r g ~
tmmpdWilarutaatrtauk-~a,
Saiuml%iebm&g&ngmZ
Pdlimlgm untuk men-
-
mgam c k u i v s t a r ~ Q , 1 8 5d m l .
ddvim tataI ~ h s CETV
b
d r i
fp mot $&ma = 418 mg dm 1 ur6t & i v b FP-aw (5bx ppw-m)ad&
m
ptat
Xp
o y m g d i~h i h n pmmiI
~
Apabila
~
ifhbasi dilakukan selama aatu
mtU#pduntulr mengetahui :
a. Manfaat ~b~
palakuan k m L
~~
dm CETV jib dh-
b. P q g d a pqgmamCETV drhdingkm dmgm
c. Bentuk respan
~~CETV, a@&
k
d
.
M a t h i m atau hdraW?
Peubah &ik yang diamati adaiah warn, bay tekstw, keberadaan jamur
dan cairafi yang kelw dari k.Pqpmatm dilakuafcarr wars v i s d padn
silmeumur3Q&(W~b)+
b. Kualitas KIrnia Silase:
Pabah khnb yang di-
a
W:
~~ Toluene, d a h k m d m j p m e W
diXakuican
dmgm m d e
We&.
Hal ini disebabkan oleh ke&rbtam perahtan.
analisa
Pmcdur a d i m y a
adalah set>@ b d :
Tdebih dahuS.u cawan pmeIin diir-
dalam oven 105'~: sesudah
itu didingifikan dalam ekshtor, M u dihbang (x). Sampel ditimbang sebanyak
p d a sufiu 1 0 5 ' ~s e h 24 jam, k m d a n didhgkkan dab eks-or,
&&bang sampai dipemleh berat yang konstztn (z),
Kadar air
-
(x + y -2) x IOU%
Y
Mu
13ahan~(~PlroiraimatWecnde,lrn)
Cawan pmeliu d i k h g k d d m wen lo*
datam &&tor
cawan
-Iin,
Mu ditimbmg (x)
g. %inpel %
e : b
ekdator 6 e b r satu jam, k
S*jUlnp
d dihbmg (z) g.
-
ty) g d h a s u k h kc dahn
kerndim ditam dengan suhu 600'~ m
simp1 sudnh h a r n a putih &udmp.
k m u d b dkbghkm
b dektpan jam atau
didinginttdm
MIF (Anatisis Van S&
S1-
k-
dm Wm, 1%7 )
udara y m g blah dirrifinP MUSditimbang =banyak 0,5 g
Neutral hkrgmt Solution @IDS). h u t a n -but
105k w enam jam
1 0 5 ' ~minim;j. m
s e h n %ttWjam,
dipmkm pa& hat plate
(33) g, h j u t n y a dddmkm ~en~aringan
dengan
b enam jam, wteiah itu
as^ ke d a m eksbtor
kmudian &&bang ( C )
ADF (Metade Van 3-2
dan Wme, 1%7 )
digmakm adalah larutan Acid h t q e n t Solution ( A D S ) .
C-B
%AUF =
x I0045
A
~
~
y
t
m
g
W
a
i
H a d p m d m a n ka-
f
s 1ecm.~
+
disaring dmpl banaran pompa Mkum,
banhmn uwn 1 0 5 ' ~ m k h d elma 6 jam, wlmjubya didbgidm ke dahm
ekdmtm wlama 1 jam ctaa, ditimbang seb@
5 5 0 ' ~ sdama 3 jam, kern*
" A m ==
D-E
A
ID) &
Dibakar dl dalam tanw
didinginkan di dalam ekdam dm &bang
x lrn
1:XO
mu
1:20, W
uk sax@
m t a dart
disraring mmggmkm kata sasing
Sampef diin&k&m ke W H P L C , meqggmabcdumC18
dm -&if.
r&n dibaca d q p panjmg gehbang 254 qrn dan pada f-
fanrtan 405 M
menggunakan
Ha& yang dipmuleh dibacii dari print
HzS04.
crut y
q
LmdkaIl,
PH
P~plMmerxggunakanBcxknnrm@#pHmeter~~,
c. Ke~ernam
Pengukuran k w a m m d U a h h&dq k e w m m bahan kering dan
bahan organik d q p m e n g g m a b t e l d kantong dm (in s m ) .
S h e diEr&gh
dan d @ b g
dam agar 1eWi mbuEra
sampi
hahzs unmk m m d smkm
Cantoh s w e k a h g mbanyak -i- 1 g dan kelemg
sebagai pmberat d i m d b n ke &lam kantang &on d q p ukurnn 140 x 90
mm, dengafi sudut-mdut kantmg ctibuat m e l m k : - 6
dimas*
ke dalam f ~ ~ t u kntrmm k d a n Kanimg -but
panjang tali p g t k a t yanh~ mas& ke daiam m e n 30 em.
d i p d a n tdah
& o f l a
~b~
m&uj
d j h t dmgm
Kext,;ur yang
pakaauxya s e h a satu mingy d e q p d i i pakan
nuxxput gajah sebarryak 40 kg dm dedak pa& lima kg/han.
ditmmkm
smpl
pexcobaan pendahdq
d d m rumen k&u
wlama
mendapaikan pala d e g d a i dase j
Waktu kkubasi
s h e jmd parfi kmml
4 12, 24, 36, dan
48 jam.
Untuk
d padi digwmkm nrmw Orskov dan
McDonald (1979): Pt = a -I-b (1 - e4). Dari pwwbaan pdahuluan W a s i
d a m U, 12, 24, 36, dan 48 jam di&pa&an k c c e m a WWI k*
masing-
4.1.
PxocOW dm Uji WvItas Cm& E-
d d mrtlfemrrr
Had pigamtan mmunjukkm bahwa prhdmhm jamw pada fm
perbanyakan mulai tmlW pada hari kedua y q d h d a i dengan adanya
gumpalan miseEum di permukaan media. Setetah dihmsfer ke dalam ge:h
e r l m e y e r ~ ~ j a r n u F p a d a f a s e ~ ~ m u l a i ~ ~ M
k e d u a y a n g ~ d a i < S e n g a n ~ ~ d ~ ~ m
hari ke-14
Pada
~~ miseIium whh
mabin4 dan
dilaZrukan
~~ Daxi 25 gelas erfemnqer dipanen sebanyak 21 dm d m y a dibuang
karma t&
km-i
atau priumbuhan ka-
s u p m a t a n sebagai crude e v e s
~~h
ti&
~~.
Komposit
dmgm cara mbifujysi pa&
k e c q a b n 4.000 rpm s e h a 30 menit pada s&u 4 k ,
Crude enzymes yang dipoIeh diukw ahhitas se1ubmya d a q p
;~t-
prosedur Mm&h ef a!. (1976).
spektrofotnmtter.
M t a s &lase
c&
enqmes stsaI kqmg TricWerma
viride (CETV) y w didapat adalaiz 1,52 W/ml C
yang sama hasil ini Ieb&
Alat ymg digunakafi a*
~
enzymes.
B
Dengan p m d w
dari hasil p e n e h Mantes& (1998) yang
nmyatakm bahwa & W i t s CMC-aw dani T,w'ride dmgm fama fimnentaai 14
hari &sar
0,673 W/mL Ha$
diseMIran karma p b & m T.
digunakanWpadapercobaanini-T.virideeQM9414.
ymg
4.2.
TPhap P e n e m : Ujf Banding Pengguarran Ow& Edsri
;IlriEkolJaraa &idk (CETV) dengan Emim M u b Komersssf pada
SiIase Jw~uniMi,
s e : ~ f ~ d a p a t ~ ~ p e a u b a b a u w a r Suhuyangtinfyri
r x a ~ ,
~ ~ ~ ~ ~ ~ a f e h ~ a d a r r y l i u d a r a d i d a l a m s i t
=b@
nkibat lnuang smpmmya d a h pmad&m atnu plrtupm d o .
Menurut B o b dm S a w (19931, W ae;rob yaag ~~j~
menyebabh amtbuhnya ragi atau
alran
dsrtam h g W ymg hg@. Panas y m g
. .
d b d m ml;lrrri p s a m p k i a h mmi@dm suhu pada b h n ymg
d i i b.Fibs mhu dabs 42 -
C
alcan bedibat tcrjadinya
rc;akari
~ ~ * y a n g ~ a m g c o k D
Ma t r m d U * h t l s a m
~ o ~ ~ a k . s u Z m e m ~ ~ ~ ~ a ~ ~ i r a i 6 1 e b a g a i m
~ a a r a m ( A D F ) ~ ~ t i d a k ~ d a l a m ~ a s a m ( A D ~ .
Men-
Swtyu (1977) bahwa se1-d kjauan yang maaih hidup tema rnelahb
~ s p i r a s iselama terseQia a-
datam d o dan rna@Akm COz, EPzO dan
pan%.
Silase kmmi, s h e p d d m n 6 k o m d mupun CETV
-m
ymg bmbau harum q a r dan
tFm&&lr
remah.
Hal hi
menwjukkan W w a blah wadi fammbsi h g a n t e r b t d m y a asam
M~nunrtPelczer dm Chan (1986) L. p b & m termas& dalam k e h m p k baht$
!ipe homofemrenbfif, yitu rnaghadkm dua mol atam
faBEtat untuk s&p md
@ ~ ~ ~ i t d a n f i u k t o sTa . i d a k m ~ ~ ~ ~ a s a m b u t i r a t d a n ~
ymg tidak &&end&
dalzun p m b u a h da%e*L pImrim4m Sebqgi ptxqgha1
asam M a t dian @at
mempmqat pmag pcnmman pH ailerc. Rendahnya p H
akan clapat m-iikan
pahmbuh balcteri ammb y m g tidak d i k e h a
qxrti E=nterchst~riacane,Bacilli, Clariridia dm LisbriacI Oleh karena ity
S o h dm Saphm (19931, Enferobacterl~~~eue,
~ o p o r aChtridiaI dan Chtridia
~~Clostridia s q a ? jnrang @a&
pada
hijam dengafi h h n g m air
---u*m@~axlgnze2ndapatkan-
enzim (PI, E& P3 dan P4-24,5%) tidak k l d a mxra ny&a c b g m kadar bahan
kmkg siiasr: jerami prsdi kmtrol@0=24,3%). bngm d d b n ~ b a k a n
6baik endm kom&
sflase-@.
mapun CETV tidak mengucangi kahr b a h ker@
DemikianpuZa~aapabifadibdk&m~bh
d m baik y w &hi
balm ker&
ke&g j e r d pztdi wgar (JPS=23,%X
~ e n r i m k d m a u p m C E ' W t i d a k ~ p eZfastiIhi
n ~
* ~ w ~ ~ * ~ s e p e r t r : p d a p t S o e S l i i f i r r r t o
(1997) yang menyakkm M
a f-tgsi
jeranti, pa& dmgan
Trichdema
viri& nmythbkaxl dqpadwi bahan kmhgjerami @ wbatryak 8,4796.
Narnun demikian, krlihat p e r b d m yang nyata @
I*ricMerma viridt?UNTUK P~~
XlritTTIJ IWTRISX
SXLASE JERAM PAXlI
PROGRAM:PASCASARlAMA
IMS'IITUT PERTAMAN BOGOR
2002
RAHlWT HIDAYAT. Production and U$&&m of CAuhse Enzymes from
TricWrmo virid~to Improve Rice Straw Silage QualitytYUnder the direction of
SURYAHADI and KOMANG GEDE WIRYAWAN.
Toovemrnethe s o ~ o s of p i c n l f w inthe dryswon, i t d t a
dwelope an approprkte teChn01ogy of forage such as &ago. A good q d t y of
silage is Ilt,tained by d~xreaghgthe fiber c m h f s ( N d Detergent Fiber, Acid
Detergent Fiber and Qnm).
The research was wnducted in twa stages: 1)- hdmtion and activity test
of mde emynm from TricWerma virilie d 2). (3nn@wn test us& crude:
e x a p e s h m TricWrma w'ride strain QM 9414 (CETV) a d wU&
c o m m d enzyme (Ceilulase "Onozu2ra R-IO",h i d d k @on rice straw silage.
The Treatments were arranged as fofiows : PO-UnIreaW rice straw silage,
P1-Treated by c e l h h x commmiat mqm ;it 10 IX3
P2- Tmded by CETV
at 3.8 IU
P3=Tmted by CETV at 7.6 TU kp" and P4= Treated by C E W at
11,4 ilJ kg" of fresh r i a &raw. All matmmts w m enriched with 5% m o w .
The result of the remar~hindicated that: 1). The
of cnrde w e s
h m Trickoderma viride strain QM 9414 (CETV) was 1,52 I U ~ ' 2).
, The
addition of both V e s did nut &rewe dry ma#w of rice straw silage,
however, organic matter s i g d b n d y d w x a d by &&ion of wilutasr: cometchl
e n q m e 3). The: amlian of btfi eKgxa deed mx contents (ADF and
NDF), furthemom increased in sacco d&&Wty of dry matter and organic
ma#w of rice straw silage.
kg",
PRODUKSl DAN PEMANFAATAN ENUM SELULASE ASAL KAPANG
I*richodemavr'ridel,JWUK PERBAKAN MUTU NUTMS1:
SILASE f E M M PAIII
Ad&
k mexupaican h a d karya saya sendiri dan b h u n pnmh
dipubbikan oleh orang lain. Semua ~mba
data dan infummi y m g d i p d m
telah dinyatalcan scam j e k dan dapat d i p d b kcbenamnya
PRODUKSI DAN PEMANFAATAN ENZlM SELULASE ASAL KBPANG
T r i c M m a viri& UNTUK PERBAMAN M U W NU1E*EUSX
SILASE J E W PAD1
Pananfaatan Enzim Sehhse A d Kapang
Trjchoderma vzride untuk Pert,ahn M W N&ki Silase:
Jwami Pa&
3udul Tesis
: M u k s i dan
Nama
: Rahmatfidayat
WRP
:m
Program Studi
: PlmuTemak
Dr. Irk
S ~ a M DEA
L
Kern
Ketua b g r n m Stud h u Ternak
Dr.Ir, K m a q M
e
:
Wikyman
WQQ
Pmulis &hidm & Sumdmg path tanggal 19 Ft*
1%9 8ebagai an&
ketujuh dari p a a q p US. Nat;mriharufja dan Eri R u b t i Pendidikm @am
dikmpuh di Fmgmm Sbdi
TF a t a s P o t a d a n Unkmit9s
Padjadjaran Bandung ldw pBda tahm 1994. Pada M
u
n 1999, pen& d h r h a
d Program Shrdj. Ihnu T d pada Rugam Pawsarjanrt IPB. Pendk
memmleh M w a padidikan pascawjam dari BPPS
Departemen
fendidikan Nasional.
Pen& W q i a sebagai Staf Fagajar di Program Studi Ilmu P S b i dan
h4akanan Tern& Fakultas P e m h Universitas Padjadjaran Bandung
S e h a me&ti
program 52, p& menjadi asisten mats kzdiah h u
N W Pabandmgm pada &Irun 2001/2002di b g a m Pacawjam IPB.
PRAKATA
Puji dan syukw pnufis pmjatkan kepada Allah SWT atas sepia karunia-Nya
sehingga @a iimiah ini brhasit diselesaikan. Tema ymg dipilih dalam
penelitian yang dildaanakan sej& bulm Agustus 2UUl ini ialah silase, dengan
judut Produksi dm Pernanfaatan Enzirn Selulase asal Kapang Trichodermu viride
untuk Perbaikan Mutu Nutrisi Silase Jemi Padi.
Terima kasih penulis uciPkan kepada Bapak Dr. Ir. H.Suryahadi, DEA dan
Bapak Dr. fr. Kommg Gede Wiryawan selaiEu pmbimbing, serta Bapak Dr. Ir.
Toto Toharmat, MSc. setaku penguji luar komisi yang telah bmyak nlemkri
saran. Dismping itu, penghargaan dm terima kasih juga pnulis sampaikan
kepada Ibu Ir. Suci Wulandari, MSi. (Tante Dari), atas segala banruan d a i ~
kerjasamrtnya. Selain itu juga terilna kasih penulis sampaikan kepada Bapak Lalu
Sukarna, BSc, bewrta staf dari Batitbio Tanaman Pangan Cimanggu Bogor, serta
Mbak Yani, Mbak Dim, Pak Opik, Pak Adi dan Dik Nining dari Fakultas
Peterntkan LPB serta semua pihak yang tclah banyak mernbantu di lapangan.
Ungkapan terima kasih yang mendalarn juga pnulis mrnpaikan kepada Xstri dan
anak-anakku, Ibu serta seluruh keluarga, atas %galapngertian, dorongan ~nateriaf
maupun doa dm kasih sayangnya.
Semaga karya ilnziah ini hermanfaat.
3 d Padi .............................
....................................
S b .........................,.............................................
P m g a d P m b a h a n Emim tertaadap K u a b s Sikw ...............
b p a g T r i c M m a viride ..............................
.
.
............
E & S e ~ ~ d a n S e ...................
l ~
,
.
.
.....................
TekrtiirInSacco ............................................................
MATERI DAN METUDE ........................................................
W
h dan Tempat P m e l i h
...........................................
Materi P m e.m ............................................................
Me*
Pmehhn ....................................
. . . .
.
*
4
S
16
17
18
21
24
24
24
25
Pmduki dan Uji A M v h Crude Enzymes dari
Trichuderma viride ................................................ 26
Uji BanPmgmmn Crude E w e s dari Trickoderma
viride (CETV) dengan E d Selufase Kcmasid pa&
She J
d Pa& ................................................. 28
HASL DAN PEMBAHASAN
prod^ d;rm U#
viride
AhiVi-
36
Er~ayme~ T ~ i ~ h i k r n t a
........................
. .
.
.
.....a*......+...
.
.
Uji Banding Pmggman Crude Enaymes dari Trr'chxikrrnaviride
(CETV)(Bayqan E d s l u l m K
d pada S h e J
d Pa&
P m g a d P e r M m t d d a p Kualim F a S h J m d
Pa& .......................
.
.
............
Pengar& PerZakuan, - K m K i r H i a S b 3 d
Padi ................................~.......................
K-BhKedanElahanQrganik
.................
36
37
37
.
.
.
KESMULAN DAN S A R A N
.................................................
39
49
53
IMamm
I. Mehisme
~~SeIulosa s e x a EmimAs .................... . ..
*.
2. S k a hdd&C d Enzymes S e I k dari T r i c M r m a w'ridk ...,,
19
26
maman
1. Komposisi h a t a n ~ S a I i c y i i acid
c (DNS) .............................
.
.,,. .
60
62
4 Data had penttitian .................................tian....
.
,
,
1*1*Latar B e l a k g
~
~
~
&
h
produks;i h m h y a addah ti&
rn&&i#a
-
~
~
p
e
t
t
r
t a d h y a b a b plum ~jauan
y a n g ~ d a l a m ~ ~ c u k u b , ~ t a tPadam&
u m .
k m u m h r i gufit dipcrofth dm lwrpqa m d d
tidak
e
pane-
SdAihyq pada muaim hujm produkgi hijam
W
~ ~ t i d s r k d i t # W ~ o E e i r ~ % c : ~ t e t j a d i .
pem-
Ud-MMd-pe-m~ b ~ ~ b a h m p r a k a n ~ ~ t c n x c e d i s ~ ~ w a k t
PargawetanM~adacfuamaczlmy&~~w~iraing(hay)d;in
pmgmetan
basah ( s h e ) , Pqgamtan hij-
mapmyai
dmgan carit
b ~ h ~ ~ m y a k u a l i t a s h i j a u a n f e ~ d a p g t ~ d a n
w a h p demikian prom p n b u a m daw d manpllnyai
tahm his
k e ~ y * ~ ~ ~ ~ t a s e t l a h a n k E s i n g d ; a n h ~ ~ e r a t
h t e s a p ~
Jdpdlmm@af£limbah@yrmg~patenrriaX8e~
d
U
I
l
p
k
a
~
~
a
n
g
~
d
i
d
h
&
~
~
~
h u m Oleh kama ifu petennak l a m e d h h&mn
~
h
u
~
e
~
h
P
b r cf r dZa l uh s i &
m ~
~
~
pahat tern& pada
@P ~ m e n r y i m p s r n j ~ p z a d i z m t t l k ~ ~ n n r s i m
k*dimansrpmctuirrri~aunnreMtak
r
1.3. Manfaat Penelitian
1, M
m
m s m b q p pmihm dalam usaha mnqwbaiki mum nut&
-
kecemwn dan ~ y h q m a jerami
n
pad.
2. Mmingk&h pmmfaat;tn jeramj padi me*
penYwa-Yang
xmxi&
patingkratan mutu dm lama
1.4. EIiptesls
1. Paambahan enzim ddase baik km&
kapang Trr'cWernta viride akan men-
mupun cruBe emymes as&
kadar swat dan hdak h
m m b a k bahan kmhg marq,un b a h mgmk silaslc jerami padi y m g
potmsd sebagai s u m k en@
2. P
m
f
i
e ternair.
b enziti s t : l h baik kormrkl m a ~ p l lcrude
~ ~ enzjlmes asat
kqmg Trr'chodermaviride alran m d n g k a t b kecernaafi
jerami padi,
2*1, J e m i PadI
Jerami pa& addah hijauan dxi tanamafi pa& (Orizu sativa Linn) setelah
biji mu b u l k y dipeEik mEuk kepentingan manu& dan teIah dipkhkan dari
& m y a (Lubk, 1963).
sangat
Jerami m m p d m dab satu limbah p r t a r h y q
ptensial sebagai SUM^ en@
nmkuh.
yang &pat d h d a a t k a n deh t e d
Kebmdaan jerami padi mtxhgkat stking dmgm mthgkatnya
proBuksi padi. Menurut B h Pusat: Stat&& (2001), lw areal tanaman pa& di
Indonesia pada tahun 2000 dipmkidm maxcapai 11,413,784 trek& dmgm
produksi padi sebanyak 50.080.787 ton dan 1-
M u Jawa yaitu 5.659.751 heW.
h p aj
d padi d
areal tanman t e r b a r addah di
EM itli @at rnmglwdkm proauk h t a n
q asW (13-15) stebanyak 50.030.787-250,$03.934 tun
setiap tahumya. P m g p m m jm&
pa& seb@ p k a n tmmk rumhamb telah
m u m di2akubra3x di d a d trap& dm subkopk (Jackson, 19771, terutama pada
musim k m w a u .
Pmanfmtm jmami padi unhk p a h temak di hdanesin
b & k i ~ antara 31-399! ~ebagian besar dibakar
itb~
d
i k ~ b d hkc~ t i d ~
*bag& pupuk (36-62%h dm & m y a mtara 7-16% digunakan untuk k@uan
h d u h (K-'I
1984).
J e r h pa& mengandung W !
bahan oq@k yang smwa potemid dapnt
d i ~ o l e h . ~ i t u j ~ @ m ~ ~ e n @ y a f l g b e s a s b s r g i
tetnak: mmhmk, tetapi keny-ya
fianya 45-5U% (b&,
1%3
yang dapat d i w m
OMtemak. rumkmh
dan Jadamq 1977), F&m-faktor
pmggum jefami pa& shgzti
yynnlr, rnmghmba
b m k mnhmb y m g ur~rma adalah
Tabell. ~ N ~ J e M t r n i P a d i d i P u I a u J a w a d a n ~
t h
;Cd(%dafitrafaankering)
Rot& Knsar
4,51
Lanak b a r
1,51
Swat Ka#r
28,78
Abu
19,W
Z
a
Sumber :LebdwakadjO (1982)
Mat-
Doyle et ai. (19%6), k m p k jmrami padi q
t hmnki,
hnl
~ ~ d o m W ~ ~ 1 9 8 6 ) ~ ~ b a h W a ~ b a w l i h ~ p a
~ a i l i l i h a i k ~ ( i n v i ~ ) ~ ~ ~ ~ & a t , k r r r w t
t
m
g
g
i
n
y
a
~
~
~
~
Kumr (1984) m m g e m b h MWB
-k
d e p d a i jaanrd padi di
d a l a m ~ ~ ~ l ~ l z a n b a t ~ ~ n r m p u t , h a
i n i d i & a b b & ~ ~ ~ & - ~ p r o t t i n y a n g ~
Kaccpatan-~
berguoaw@--nrmen.
eanCtat----(ffmjtrmXBhpakanm
SGnralcincepat~pafran,mai;a~mudahtnrnak
dik-
~ l a I I j d r m j t m t t a h ~ y a n g d i i r d ~ b m b a r x y aUntukttidup
k.
p
o
k
u
k
~
~
m
~
l
r
a
h
a
n
~
5 t r - S S % d a n ~ p F o t e i n ~ l j l ~ ~ E I O ~ ~ k ~ ~
hanya 35-37% dmgm kmbgmprotein 34% (Djajmqgm, 19833,
T J p a y a ~ k u ; d i t a s r ~ p a d i d a p a t ~ ~ ~
kirnia, bidugi atau k m W dimmmya.
P*
maw
fia
-a
-m-Fw--d=vFww=
P
a
d
t
z
j
a
t
d
u
*
~
l
~
w
~
d
StfkitF &ce~18
m
a
m
;
r
l
t
~
a
p
W
~
~
~
~
~
~dank^
u
a
t
d
i
~
~
~
~
rrtwr @iik:~10 et d-,1986).
prc#rea
--wd+-@w-b
pmduhati kapitng p a d a m ( 5 m k , 1983).
P e r l r r t n r a n ~ l a c a r a = ~ ~ ~ n a m u a h a s i l y a n g
~
t
i
c
h
k
~
~
c
n
e
r
g
i
d
s
m
~ P
*y
a
n
g
~
@
2.2. S i h
Sibadaupakantennakm-m*proatsfhijam den@pin hdmgm air i i q g L
b i b e dabh pmamya, imhgkm
terapat pmbwtamya dinamah sits ( B a b dm S a p k q 1993)Twjuaa. p d w m sif;ise lxltmlm Susqo et a].(1977) addah abm4if
wtuk m~~
hijguan agar &tap &hi
kesLdslan segw h g a n tetttp
m-a15"nrrtrienyq&-m*wW
~
b
;
h
r
h
a
a
l
n
y
k
~
(I3:t@aBanMtmdfe,1972).
a
h
i
i
j
l
a
r
g
l
p
a
a
i
,
u
~
~
~
~
d
~
a
~
n
p
~
m
~
Q
~
c
a
~ b & u y m g ~ ~ p z n b u a & m ~
B i t a ~ ~ I m r a n g ~
hanrsqaikadarw%erltyy25-35%
2 S S Q , m ; d c a ~ y a a 1 z ~ a k s m ~ ~ d a a b e r a i r ~ s r i r ~
~
d
a
~~~
r
i
~
~
~
~
~
~
r
t
r
m
a
n
~ k a d a r t r a t h a n ~ I t t r i h , d d 3 5 % ~
y
o
~
-~pHhw--
y g n g - m - m
p%umhhm'b9irtwi m a m b w@ E n f e r ~ r i u w wB0cf'JJi1
,
ChtrirJia dan
P a m pH jqga Am meninglradran kcwpatm ikhlbb mara
&&ria-
~ b e b w a p a ~ d a , ~ ~ ~ y a t t g p f a d r r g i l i r a r m y a a k a n
mexflxnmkaa h d w q p lriaat kam hijauan yang dibuat s i k e
K
e
W p d w t m shtw b w l i -m
~~
-ut,
nuttiext yang dqat
S h e yrang bailr. dipxoleh
menelm be&@
enzimaaia~~ymgtidakrtik&d&i,nnikroba~(sepertiy~
biasa terdapat &dam hijam) laerta mendorong berkmkngnya b a k t i p q h d
k @ ~o h e r a p s f ~ b w ~ ~ y a n g ~ b ~ d i k d ~ ~
padi,jeramigandwn,batangIrayu,~~dan~teh.
Kcmqmki W sehlosra bxdki d;ari mtai
Imb 1,4 -43-
giuDr@~yangm~dung~~dan~vanDerw~(Orpin,
2,6, Teknik In Sacco
MekPde h h n g d m adalah penempidm h@m kc: daftrm, lcantung yarrg
~daxibaiunxymgtidalr~tdi~~rrrtOn,dacrm,ataumtera
wxaa lnxrlgsung kr: daIam rumen (in v-1
rmtuk mem-
-k
(Martea, 1981).
T
W ini digumkm
yang k a d a dab Irantong rtihm
-1
wktb~ke:dafam~wpadaperiode-ynng-
( M i ~ h a I e t - bdan Odd-B& 1992),
B
~
inswG0;tdafah.:
f
~
y
a
s
t
g
m
~
~
~
p
a
d
a
p
a Powitas Kantong
P
O
r
-e
d
a
s
~
~
~
r
n
Yang m
-
~
petruzan
j
l
m
t
t
cialam
pen%
a
f
r
d
v
penanam di dalam htmg m-ta m e m ~ j u m f a sampe:I
h
yang keluar dari
kantmg dm ymg tidak dicema m k w p n h e m e n (Michalet-Dmau dm
UM-Bah, 1992). Pl;ryxae et al. (1978) rnayahkan bahwa @
h
i
htong
m m m t u h pula b m y a aliran ma& dqpta rumen dm kt&xbWm k
b
~~yacaitanlllm
p aa d a h t a g
~~men ke dalam h b n g a
Penekasi
apabila pmwitas k a n a
~k
3 pm atau
tern k
Damu dan Ould-Bah, 1992). Jumtah ~~e
lebih
S a H d
h sangat terhambat
d dmi 3 p (Michaletnrmm di dalam htmg
di luar kanmg. Pviakin kecil prositas h t a x g , m d a
*da
makin 88dikit lllikmo-0
llmm di daIam
htow
JJusnlah b&ai yang
ditemukan di dalam kantmg d q p porositas 10 gm hanya g
total jumXah b%
di dabin nunen pa&
prositas
b
lU% dasi
kanbng 53 pm (Michaiet-
MMU
dart Odd-Bah, 1992).
3wd&
gampt:I.
ymg keluar dari kantong dan tidak d i m uleh
inkubasi b i q p t m g aaxl pencucian
m e n dapat *adi
~~e
lcantung setelah masa idcub&.
Jwhhnya a h menix@& dengm makin
harnyif parosh kantong dan maIcin k*;d
ukrrran palike4 sampel
(Michalet-hreau dan Ould-B&, 1982),
b. Pasisi K m t q Miion di DarIam Rumen darn Pencucian
Kantmghanrs~danbebas~~terjadiperarkaran~
dafi dan ke
k
a
n
w
Pmcwbn
a hhbsi
&kuh
untuk
a
n
~
EX. M A T W DAN METODE
3.1. Waktu dm Ternpat Penelitian
Penelih dilaicslanaicnn slams ~~ b h mdai dari 1 Agustus 2001
%ampai dmgm tanggal 30 A@
L s r ~ r i z u x Mjkmhiologi
l
2002.
Pm*
ini dilalcsanakan di
Mubigi Mmat&m Nutrisi T&
b dan B ih h W ~PAIJ IPf3 dan
P e k m k q mmatorium ~
L
a
b
a
r
a
w
x
r
m Biokimia dm Fmhatjk Balai P & t h
DpammmP-
C
PmA, Fakultas
Tanman Pangan,
m Bogw.
3.2. Materi Penelltian
Bahan pacobam &xdiridari J
d pdi q a r c u l k IR 64 yang didapat
d a i Damqp Bogor, m u h a , 6 s e h h c k m m d "Ono-
R-10" dari
Trickodermo w'ride d a g m W t a s 1,O Ufmg, prortuksi SERVA E l e c t r o p h i s
GmbH D-69115 Heidelkg Cad-Benz-Str.7. m b a ymg
~~adahh
kapmg Trichierrna viride strain QM 9414 ym.g &&pat dari LatWratorium
~
~
l
odang Tekna1ogi
i
Biaptrtrsea J l ~ l r s a nT e a Kirrtia m3. Media unEuk
~ ~ ~ d a r i d u a ~ y a i t u M e d i a c a i r I , d a n M ~ & r f l [ .
Media cair I b d m @ untuk rncmgaman dan l m m p m p t pmmbuhan
a Ddam 1 ~ M & c a i r X ~ d m g : ~ N ~ S g K C t U , 5FeSQ
g,
.m20
401 &
b@04.7f.120
45 & cl&O4.m20
0,001 & eke&&
1 g dan
1998)- Sedmgkan M&
cair 1J, yang
peptan 6 g d q p pH 5,45. (M&
~ ~ ~ 1 E u k : ~ e n z i r n , d d m s a t u ~ m ~ d u n g ~ W O ~ 5 g
45g
F
~
.m20
O ~401g
h@04.7Zf@
0,s g, C U S O ~ 4~
001
~ ~g
~ ek9trak.
O
mgi 1 g d a n ~ s a t u ~ a s u m b c r k r l r b o n ~ j ~ p a d i f S g
(Munksqrit, 1998).
kompoePisi n-
Slain itu jugn mmggmdm bahan kimia 4adisis
s h e yang dhdkm.
Unhrk: uji Irecaman (in sacco)
d@dm Kerbnu ymjj nrmennya &Mi dS&da
Semiqgu w b 1 m &wakm
mjliir
F h h Petenn;lkan IPB.
sampai, berakfiir p m d w n , kerbau
dikmdbih d+ngan pemberian palan nrmput w
jah 40 kgjhari dan d d a k padi
lima
w.%bat
bndan k d a u -t- 300 kg.
P ~ y ~ d i i y n a k a n u f l E u l r ~ ~ ~ ~ : A u b c
Xamirrar, jasum ose, tab-
r e h i , cawan petri, gelas a h m y w 250 mt, thkw
inkubator, h u l mtt, MI*,
dm llemari m. PUat yang d & m h
~uksidan~~ant;oralain:~1~(Silomini),~Ea1,syringe,
p M & mq @qpdan thhngm.
Peralatan lltltuk anadisa kin&
ssdalah : wen, pH m a , cawan masir, pomp
gehs u b r , bnw,
~~~ h ~ o n nilan,
g
kt:Iemg, tali p
WE,splaophotometri
W dm l m w i asam.
3.3.1. Pronrrkgidan 'CJJII Aw*
C dE
m dad M
*
T2lkilpan pekdaan mtuk memproduirsi crsrcie
e v e s
*
dari kapang
T r i c M r m W'ride mmwut Mantaqd (t998), sexam jek c@ed&atkan dalam
Gmbar 2,
d@hbhhIte~25~taErungreaksi~marsing~~e~ak3d
danditutup-kapitsstail.
~~ ke
Satu lup kapang TricMerma viride
wyangm---mbuhI.
..
Kapang-but-
empat hari pa& suhu kamar dmgm goy*
dalam t
a
m
(shaker), set&&
wama
tumM k
m h
ditmder kc whmnqw 240 ml ymg r n ~ t i m gMadia T d u h Dt s b d
sc:b;tnyak 150 ml.
l3kdcum w
goymgm. S e b &ba4
h 14 h a i pada suhu Irammr denjpn
q x b h wadi perhmbuhm kqmg atau tidak
*titi
dan &IeM q h h ads k o n t d m s i dmi bakmi Media yang dhnbrrhi kapng
TricWrrna viride t m l W b a h g dan, tumbuh rnklium h a m a putih,
=fW+
Y a w ~erkm
tam&$ b&
qgm &bung agar ti&
t e d h t keruh. Media yang terkontamkwi
mm&m r;uninasiyaarg lain.
Pada ha5 ke-14 c k h k m pmmman, patla umur tersebut
Trickodema viride dab mmprahbi
(Mantmqrit, 1998).
crude
Supematan sebagai cm&
kqmg
errymes s e l h swam o p W
envmes
dipmleh dmgm
crtra
mtrihgmi pada kecepatan 4.000 rpm &ama 30 menit pada suhu 4°C.
AkWas
d
endm diktappkan dengan car% mengukur j d a h
i d;ari seMafla
~
(km
~ saring) d a i cnzb -but
@uk:08a
yang
pads p H 4,8. Kadar
gldw yang hhtmtuk d i t e t q h dengan proecgdtn: Mandeb et ai. (1976)dmgm
teknik, g~:ktr#fotarnesid f q p
~~ pamaan xnmgpmh
Acid (DNS) dm didcur pada panjang gelambang 550 nm.
d @ d m &bh
: h i a n lX&nx&*c
-*
Re-
y
q
Acid P N S ) (Lampiran 11, 0,05
M
Gula ymg dipdub dai
~~ sampel dktapkm mtlahri
pgulman itbdms@a dm sehjutqa dibuat
mg
a
(mmbu y) hwan 1%
&an&,
kern&
ml CETV (surnbu x), kemudk &ambar
Jika g a 1 k t i d & m e t l w r p i a i I e v e f 2 m g ~ m a , ~ d i u l a r r g ~
tmmpdWilarutaatrtauk-~a,
Saiuml%iebm&g&ngmZ
Pdlimlgm untuk men-
-
mgam c k u i v s t a r ~ Q , 1 8 5d m l .
ddvim tataI ~ h s CETV
b
d r i
fp mot $&ma = 418 mg dm 1 ur6t & i v b FP-aw (5bx ppw-m)ad&
m
ptat
Xp
o y m g d i~h i h n pmmiI
~
Apabila
~
ifhbasi dilakukan selama aatu
mtU#pduntulr mengetahui :
a. Manfaat ~b~
palakuan k m L
~~
dm CETV jib dh-
b. P q g d a pqgmamCETV drhdingkm dmgm
c. Bentuk respan
~~CETV, a@&
k
d
.
M a t h i m atau hdraW?
Peubah &ik yang diamati adaiah warn, bay tekstw, keberadaan jamur
dan cairafi yang kelw dari k.Pqpmatm dilakuafcarr wars v i s d padn
silmeumur3Q&(W~b)+
b. Kualitas KIrnia Silase:
Pabah khnb yang di-
a
W:
~~ Toluene, d a h k m d m j p m e W
diXakuican
dmgm m d e
We&.
Hal ini disebabkan oleh ke&rbtam perahtan.
analisa
Pmcdur a d i m y a
adalah set>@ b d :
Tdebih dahuS.u cawan pmeIin diir-
dalam oven 105'~: sesudah
itu didingifikan dalam ekshtor, M u dihbang (x). Sampel ditimbang sebanyak
p d a sufiu 1 0 5 ' ~s e h 24 jam, k m d a n didhgkkan dab eks-or,
&&bang sampai dipemleh berat yang konstztn (z),
Kadar air
-
(x + y -2) x IOU%
Y
Mu
13ahan~(~PlroiraimatWecnde,lrn)
Cawan pmeliu d i k h g k d d m wen lo*
datam &&tor
cawan
-Iin,
Mu ditimbmg (x)
g. %inpel %
e : b
ekdator 6 e b r satu jam, k
S*jUlnp
d dihbmg (z) g.
-
ty) g d h a s u k h kc dahn
kerndim ditam dengan suhu 600'~ m
simp1 sudnh h a r n a putih &udmp.
k m u d b dkbghkm
b dektpan jam atau
didinginttdm
MIF (Anatisis Van S&
S1-
k-
dm Wm, 1%7 )
udara y m g blah dirrifinP MUSditimbang =banyak 0,5 g
Neutral hkrgmt Solution @IDS). h u t a n -but
105k w enam jam
1 0 5 ' ~minim;j. m
s e h n %ttWjam,
dipmkm pa& hat plate
(33) g, h j u t n y a dddmkm ~en~aringan
dengan
b enam jam, wteiah itu
as^ ke d a m eksbtor
kmudian &&bang ( C )
ADF (Metade Van 3-2
dan Wme, 1%7 )
digmakm adalah larutan Acid h t q e n t Solution ( A D S ) .
C-B
%AUF =
x I0045
A
~
~
y
t
m
g
W
a
i
H a d p m d m a n ka-
f
s 1ecm.~
+
disaring dmpl banaran pompa Mkum,
banhmn uwn 1 0 5 ' ~ m k h d elma 6 jam, wlmjubya didbgidm ke dahm
ekdmtm wlama 1 jam ctaa, ditimbang seb@
5 5 0 ' ~ sdama 3 jam, kern*
" A m ==
D-E
A
ID) &
Dibakar dl dalam tanw
didinginkan di dalam ekdam dm &bang
x lrn
1:XO
mu
1:20, W
uk sax@
m t a dart
disraring mmggmkm kata sasing
Sampef diin&k&m ke W H P L C , meqggmabcdumC18
dm -&if.
r&n dibaca d q p panjmg gehbang 254 qrn dan pada f-
fanrtan 405 M
menggunakan
Ha& yang dipmuleh dibacii dari print
HzS04.
crut y
q
LmdkaIl,
PH
P~plMmerxggunakanBcxknnrm@#pHmeter~~,
c. Ke~ernam
Pengukuran k w a m m d U a h h&dq k e w m m bahan kering dan
bahan organik d q p m e n g g m a b t e l d kantong dm (in s m ) .
S h e diEr&gh
dan d @ b g
dam agar 1eWi mbuEra
sampi
hahzs unmk m m d smkm
Cantoh s w e k a h g mbanyak -i- 1 g dan kelemg
sebagai pmberat d i m d b n ke &lam kantang &on d q p ukurnn 140 x 90
mm, dengafi sudut-mdut kantmg ctibuat m e l m k : - 6
dimas*
ke dalam f ~ ~ t u kntrmm k d a n Kanimg -but
panjang tali p g t k a t yanh~ mas& ke daiam m e n 30 em.
d i p d a n tdah
& o f l a
~b~
m&uj
d j h t dmgm
Kext,;ur yang
pakaauxya s e h a satu mingy d e q p d i i pakan
nuxxput gajah sebarryak 40 kg dm dedak pa& lima kg/han.
ditmmkm
smpl
pexcobaan pendahdq
d d m rumen k&u
wlama
mendapaikan pala d e g d a i dase j
Waktu kkubasi
s h e jmd parfi kmml
4 12, 24, 36, dan
48 jam.
Untuk
d padi digwmkm nrmw Orskov dan
McDonald (1979): Pt = a -I-b (1 - e4). Dari pwwbaan pdahuluan W a s i
d a m U, 12, 24, 36, dan 48 jam di&pa&an k c c e m a WWI k*
masing-
4.1.
PxocOW dm Uji WvItas Cm& E-
d d mrtlfemrrr
Had pigamtan mmunjukkm bahwa prhdmhm jamw pada fm
perbanyakan mulai tmlW pada hari kedua y q d h d a i dengan adanya
gumpalan miseEum di permukaan media. Setetah dihmsfer ke dalam ge:h
e r l m e y e r ~ ~ j a r n u F p a d a f a s e ~ ~ m u l a i ~ ~ M
k e d u a y a n g ~ d a i < S e n g a n ~ ~ d ~ ~ m
hari ke-14
Pada
~~ miseIium whh
mabin4 dan
dilaZrukan
~~ Daxi 25 gelas erfemnqer dipanen sebanyak 21 dm d m y a dibuang
karma t&
km-i
atau priumbuhan ka-
s u p m a t a n sebagai crude e v e s
~~h
ti&
~~.
Komposit
dmgm cara mbifujysi pa&
k e c q a b n 4.000 rpm s e h a 30 menit pada s&u 4 k ,
Crude enzymes yang dipoIeh diukw ahhitas se1ubmya d a q p
;~t-
prosedur Mm&h ef a!. (1976).
spektrofotnmtter.
M t a s &lase
c&
enqmes stsaI kqmg TricWerma
viride (CETV) y w didapat adalaiz 1,52 W/ml C
yang sama hasil ini Ieb&
Alat ymg digunakafi a*
~
enzymes.
B
Dengan p m d w
dari hasil p e n e h Mantes& (1998) yang
nmyatakm bahwa & W i t s CMC-aw dani T,w'ride dmgm fama fimnentaai 14
hari &sar
0,673 W/mL Ha$
diseMIran karma p b & m T.
digunakanWpadapercobaanini-T.virideeQM9414.
ymg
4.2.
TPhap P e n e m : Ujf Banding Pengguarran Ow& Edsri
;IlriEkolJaraa &idk (CETV) dengan Emim M u b Komersssf pada
SiIase Jw~uniMi,
s e : ~ f ~ d a p a t ~ ~ p e a u b a b a u w a r Suhuyangtinfyri
r x a ~ ,
~ ~ ~ ~ ~ ~ a f e h ~ a d a r r y l i u d a r a d i d a l a m s i t
=b@
nkibat lnuang smpmmya d a h pmad&m atnu plrtupm d o .
Menurut B o b dm S a w (19931, W ae;rob yaag ~~j~
menyebabh amtbuhnya ragi atau
alran
dsrtam h g W ymg hg@. Panas y m g
. .
d b d m ml;lrrri p s a m p k i a h mmi@dm suhu pada b h n ymg
d i i b.Fibs mhu dabs 42 -
C
alcan bedibat tcrjadinya
rc;akari
~ ~ * y a n g ~ a m g c o k D
Ma t r m d U * h t l s a m
~ o ~ ~ a k . s u Z m e m ~ ~ ~ ~ a ~ ~ i r a i 6 1 e b a g a i m
~ a a r a m ( A D F ) ~ ~ t i d a k ~ d a l a m ~ a s a m ( A D ~ .
Men-
Swtyu (1977) bahwa se1-d kjauan yang maaih hidup tema rnelahb
~ s p i r a s iselama terseQia a-
datam d o dan rna@Akm COz, EPzO dan
pan%.
Silase kmmi, s h e p d d m n 6 k o m d mupun CETV
-m
ymg bmbau harum q a r dan
tFm&&lr
remah.
Hal hi
menwjukkan W w a blah wadi fammbsi h g a n t e r b t d m y a asam
M~nunrtPelczer dm Chan (1986) L. p b & m termas& dalam k e h m p k baht$
!ipe homofemrenbfif, yitu rnaghadkm dua mol atam
faBEtat untuk s&p md
@ ~ ~ ~ i t d a n f i u k t o sTa . i d a k m ~ ~ ~ ~ a s a m b u t i r a t d a n ~
ymg tidak &&end&
dalzun p m b u a h da%e*L pImrim4m Sebqgi ptxqgha1
asam M a t dian @at
mempmqat pmag pcnmman pH ailerc. Rendahnya p H
akan clapat m-iikan
pahmbuh balcteri ammb y m g tidak d i k e h a
qxrti E=nterchst~riacane,Bacilli, Clariridia dm LisbriacI Oleh karena ity
S o h dm Saphm (19931, Enferobacterl~~~eue,
~ o p o r aChtridiaI dan Chtridia
~~Clostridia s q a ? jnrang @a&
pada
hijam dengafi h h n g m air
---u*m@~axlgnze2ndapatkan-
enzim (PI, E& P3 dan P4-24,5%) tidak k l d a mxra ny&a c b g m kadar bahan
kmkg siiasr: jerami prsdi kmtrol@0=24,3%). bngm d d b n ~ b a k a n
6baik endm kom&
sflase-@.
mapun CETV tidak mengucangi kahr b a h ker@
DemikianpuZa~aapabifadibdk&m~bh
d m baik y w &hi
balm ker&
ke&g j e r d pztdi wgar (JPS=23,%X
~ e n r i m k d m a u p m C E ' W t i d a k ~ p eZfastiIhi
n ~
* ~ w ~ ~ * ~ s e p e r t r : p d a p t S o e S l i i f i r r r t o
(1997) yang menyakkm M
a f-tgsi
jeranti, pa& dmgan
Trichdema
viri& nmythbkaxl dqpadwi bahan kmhgjerami @ wbatryak 8,4796.
Narnun demikian, krlihat p e r b d m yang nyata @