KARAKTERISASI SUCROSE-PHOSPHATE SYNTHASE (SPS1)DARI TEBU PADA Escherichia coli STRAIN BL21
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
KARAKTERISASI SUCROSE-PHOSPHATE SYNTHASE (SPS1)
DARI TEBU PADA Escherichia coli STRAIN BL21
SKRIPSI
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
Oleh
Ahmad Fudhaili
NIM 071810401069
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
/
/
/
/
UNIVERSITAS
JEMBER
c.id
c.id
c.id
c.id
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
ne
ne
ne
2012 lib.une
lib.u
lib.u
lib.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
j.ac
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
j.ac
.id/
ac
nej.
.u
.u
.u
://
http
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
http
://d
http
://d
http
://d
http
gilib
i
d
/
/
:
igi
igi
igi
igi
://d
http
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
/
/
/
KARAKTERISASI
SUCROSE-PHOSPHATE
(SPS1)
.id/
.id
c.id
cSYNTHASE
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
DARI TEBU
une STRAIN BL21 lib.une
.coli
.une PADA Escherichia
b
b
i
i
l
l
i
i
digi
dig
dig
/
/
/
/
/
/
://
:
:
:
p
p
p
http
htt
htt
htt
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.id/
ac
nej.
.
gilib
i
d
/
/
:
.u
ac
nej.
://
http
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
ac
nej.
.id/
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
.id/
.id/
.u
.u
://d
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
.id/
Ahmad Fudhaili nej.ac
.u
NIM 071810401069
igilib
http
://
http
http
d/
ac.i
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
Oleh
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
d/
ac.i
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
untuk menyelesaikan Program Studi Biologi (S1)
dan mencapai
gelar Sarjana Sains .id/
.id/
d/
ac.i
nej.
gilib
i
d
/
/
:
SKRIPSI
.id/
.id/
ac
nej.
guna melengkapi tugas
ttp syarat
ttp
httpakhir dan memenuhi salah hsatu
hdiajukan
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
u
u
.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
JURUSAN
http
http
http BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
/
/
/
/
d
i
UNIVERSITAS
JEMBER
c.id
c.id
c.id
c.
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
ne
ne
ne
2012 lib.une
lib.u
lib.u
lib.u
http
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
.id/
ii
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://d
http
://d
http
://d
http
ac
nej.
igi
igi
igi
igi
://d
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
/
c.id
c.idPERSEMBAHAN j.ac.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Skripsi ini saya persembahkan untuk:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
/
Aminah tersayang,ckuucapkan
terima kasih
d/
.id/
.id/1. Ayahanda Babun dan
c.id
c.iIbunda
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.unedoa yang senantiasa diberikan
.uneatas segala kasih sayang
sebesar-besarnya
dan
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
ig
://
://di
://di
://dini;
p
p
p
t
t
t
selama
t
t
t
http
h
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
semangat dan dorongan
untuk menempuh
/
/2. keluarga yang telah memberi
d/
d/
i
i
.
.
c.id
c
c
a
a
a
.
.
.
j
j
j
kuliah;
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
dig
3. guru-guru
ilmunya;
://
://di
://menberikan
://di yang telah mendidiktdan
p
p
p
t
t
t
t
t
http
h
h
h
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
4. Almamater Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas
d/
ac.i
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
http
iii
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
Jember.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
.id/
.id/
MOTTO
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
Wahai
orang-orang yang beriman!
Bersabarlah kamu dan kuatkanlah
kesabaranmu
d/
d/
d/
d/ tetaplah bersiap-siaga (dic.perbatasan
i
i
i
.
.
c
c
dan
negerimu)
dan
bertawakalah
kepada Allah j.ac.i
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
.une
agar kamu beruntung.
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
(terjemahan Surat
//dig ayat 200) *)
://
://di
:Al-Imron
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
/
/
c.id
c.id
c.id
c*).id
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
Departemen Agama.uRepublik
Indonesia. 2009. Al-Qur’an
ne
.une
.une dan Terjemahan.iJakarta
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
Timur: CV. Pustaka
g
g
g Al-Kautsar.
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
.id/
iv
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
/
/
.id/PERNYATAAN
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.u
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Saya yang bertanda tangan dibawah ini:
a
nej.
g
://di
.id/
.id/
nama : Ahmad
d/
c.iFudhaili
u
NIM
ilib. : 071810401069
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
tp
menyatakan
skripsi yang berjudul:
http Karakterisasi
http dengan sesungguhnyahtbahwa
Sucrose-Phosphate
Synthase (SPS1)
/ coli strain BL21
/ dari Tebu pada Escherichia
/
http
/
c.id
c.id
c.id
c.id
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
adalah benar-benar hasil
karya sendiri, kecuali jika
dalam pengutipan substansi
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
ig instansi manapun, serta://bukan
dig karya
disebutkan :sumbernya,
dan belum diajukan
//dig
://
://dpada
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
jiplakan. Penelitian ini dibiayai oleh program Hibah Kompetensi (HIKOM) Jurusan
d/ nama Prof. Dr. Ir. c.id/
id/ Ilmu Pengetahuan Alam
.id/ Fakultas Matematika
c.iatas
c.dan
cBiologi
a
a
a
a
.
.
.
j
j
j
nej.
ne
ne
ne
u
u
u
u
.
.
.
.
b
b
b
b
li
li
li M.Agr. Sc. Saya bertanggung
li
Bambang Sugiharto,
jawab atas keabsahan
digi dan
digi
digi
digi
/
/
/
/
/
/
/
/
://
:
:
:
:
p
p
p
p
t
tt
http
htt isisnya sesuai dengan sikaphtilmiah
htt
kebenaran
yang harus dijunjung htinggi.
tanpa
ada tekanan dan
/
/
d/ buat dengan sebenarnya,
.id/ Demikian pernyataan.ainic.isaya
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
j
paksaan dari pihakbmana
.une
.une saksi akademik jika iternyata
.unepun serta bersedia mendapat
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
g
g
/digpernyataan ini tidak benar.
://
://di
://di
:/hari
dikemudian
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
v
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
http
.id/
ac
nej.
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
.id/
ac
nej.
.u
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.
Ahmad
j.ac Fudhaili
e
n
u
ilib. NIM 071810401069
g
://di
http
http
.id/
id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
/
c.id
c.i
a
a
.
.
j
j
ne menyatakan,
.une
.uYang
b
b
i
i
l
l
i
i
g
g
://
://di
://di
p
p
t
t
t
t
http
h
h
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
Jember, 12dJuni
/ 2012
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ttp
hSKRIPSI
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
KARAKTERISASI
SUCROSE-PHOSPHATE
SYNTHASE
(SPS1)
/
/
d/
d/
d
i
i
i
.
.
.
c.id
c
c
c
a
a
a
a
.
.
.
.
DARI
TEBU
PADA
Escherichia
coli
STRAIN
BL21
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
gi
://di
://
http
.id/
.id/
ac
nej.
: Dr. rer. nat Kartika
S. Si, M. Si.
.u
libSenjarini,
gi
://di
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
tp
tp
tp
http
.u
http
.id/
ac
nej.
Dosen Pembimbing
.u
libUtama
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
Pembimbing
.id/
ac
nej.
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
ac
nej.
://
http
http
http
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
Oleh
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
.id/
.id/
ac
nej.
.u
lib.u
i
g
i
/d
Ahmad
ttp:/Fudhaili
h
NIM 071810401069
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
t
ht Sc.
ht Ir. Bambang Sugiharto, M.Agr.
Dosen h
Pembimbing
Anggota : Prof. Dr.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
http
vi
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
/
/
.id/PENGESAHAN
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.u
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Skripsi berjudul Karakterisasi Sucrose-Phosphate Synthase (SPS1) dari Tebu pada
.id/
.u
http
ac
nej.
Escherichia
coli strain BL21 ctelah
Matematika dan c.id/
.id/
.id/ diuji dan disahkan oleh
.id/
cFakultas
a
a
a
.
.
j
j
e
nej.
ne pada:
nJurusan
u
u
u
.
.
.
Ilmu PengetahuanilAlam
Biologi
Universitas
Jember
b
b
b
i
ili
ili
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
http
hari
tanggal
/
:/
http
:/
http
://
http
:
/
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
tempat
: Fakultas
MIPA Universitas Jember. ne
.une
.u
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://
://di
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
/dig
/dig
g
://d:i
p
t
t
h
http
Tim Penguji
d/
ac.i
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
Prof. Dr. Ir. Bambang
/ Sugiharto, M.Agr, Sc. .id/
c.id
ac
a
.
j
NIP
195510221982121001
nej.
ne
gilib
i
d
/
/
:
.u
Penguji II,
.id/
d/
ac.i
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
://
http
http
d/
ac.i
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
.u
httpAnggota
Penguji I,
d/
ac.i
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
Dr.
/ M. Si.
/ nat Kartika Senjarini, S..iSi,
.idrer.
c d
a
.
j
NIP 197509132000032001
ne
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
d/
.iSekretaris,
d/
ac.i
Ketua,
Esti Utarti, S.P, M. Si.
Sattya Arimurti, S.P, M. Si.
/
/
/
/
NIPa197403311999032001
c.id
c.id
c.id
c.id NIP 197003031999032001
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
Mengesahkan
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h Dekan,
h
h
gilib
i
d
/
/
:
NIP
/ 196101081986021001
/
.id
j.ac
.id
j.ac
une
une
.
gilib
i
d
/
/
:
.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
.id/
http
vii
.u
.u
://
http
http
.u
.id/
.id/
ac
nej.
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
httpKusno, DEA. Ph.D.
Prof. Drs.
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
http
://
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
.u
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
RINGKASAN
Karakterisasi Sucrose-Phosphate Synthase (SPS1) dari Tebu pada Escherichia
coli strain BL21; Ahmad Fudhaili, 071810401069; 2012, 31 halaman; Jurusan
Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Jember
Sukrosa merupakan produk akhir dari poses fotosintesis yang terjadi di daun.
Pada sebagian besar tanaman sukrosa dibentuk di sitosol dan ditransportasikan
melalui floem dari jaringan pembentuk ke jaringan penyimpan. Metabolisme sukrosa
pada tanaman dipengaruhi oleh beberapa enzim yaitu Invertase, Sucrose Synthase,
dan Sucrose-Phosphate Synthase. Sucrose-Phosphate Synthase (SPS; E.C. 2. 4.1.14)
adalah enzim yang mempunyai peranan penting dalam proses biosintesis sukrosa
pada tanaman. Karakterisasi enzim SPS pada tanaman tebu dalam bentuk murni
belum pernah dilakukan karena keberadaan enzim ini sangat rendah dan mudah
mengalami degradasi selama purifikasi. Saat ini tersedia cDNA SoSPS1 yang
dikontruksi pada vektor plasmid pTrc99A, maka karakterisasi enzim yang dikode
SPS1 dapat dikarakterisasi. Karakterisasi gen dapat dilakukan dengan sel biologi
misalnya E. coli. E. coli sering digunakan sebagai inang vektor dikarenakan dapat
tumbuh pada medium sederhana, pertumbuhannya cepat, pengetahuan tentang
informasi genetik dan sifat biokimianya sudah banyak dipelajari
Penelitian ini bertujuan untuk mentransformasi dan mengetahui kondisi optimal
ekspresi serta karakterisasi gen pengkode SPS1 dari tanaman tebu yang telah
disisipkan pada vektor ekspresi pTrc99A dalam E. coli strain BL21. Penelitian ini
akan dilakukan transformasi, konfirmasi keberadaan gen pengkode SPS1, dan
pengaruh suhu terhadap ekspresinya serta karakterisasi protein yang dihasilkan oleh
E. coli. Transformasi plasmid pTrc99A-SoSPS1 ke dalam E. coli dilakukan dengan
perlakuan CaCl2 dan Heat-shock. Konfirmasi keberadaan gen pengkode SPS1 dengan
penambahan antibiotik pada media dan analisis enzim restriksi. Pengujian ekspresi
dilakukan dengan menumbuhkan E. coli dalam media dengan pelakuan suhu.
viii
://
http
Karakterisasi enzim dilakukan dengan substrat SPS1 yaitu Uridine Diphosphoglucose
(UDPGlc) dan Fructose-6-Phosphate (Fru6P).
Hasil penelitian menunjukkan bahwa E. coli BL21 tertransformasi dan
mengandung plasmid pTrc99A-SoSPS1. Penambahan antibiotik dan analisis enzim
restriksi telah dilakukan untuk konfirmasi keberadaannya. E. coli mampu
mengekspresikan gen pengkode SPS1 dan menghasilkan aktivitas enzim optimal
pada suhu induksi 22 oC. Analisis dengan Western Blot menunjukkan bahwa protein
SPS1 dari E. coli transforman berhasil dideteksi. Nilai Km dan Vmaks enzim SPS1
dengan substrat UDPGlc adalah 16,69 mM dan 3,06 µg sukrosa/ menit/µg protein.
Sedangkan nilai Km dan Vmaks enzim SPS menggunakan substrat Fruc6p sebesar
0,927 mM dan 1,20 µg sukrosa/ menit/µg protein.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
j.ac
://
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
.u
http
ix
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
http
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
/
/
.id/ PRAKATA
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.u
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Puji syukur atas kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan hidayah-Nya
ac
nej.
/
/
sehingga
penulis dapat meyelesaikan
.id/
c.idKarakterisasi Sucrosec.id skripsi ini yang berjudul
ac
nej.
a
nej.
a
nej.
/dig
/dig
/dig
:/
:/
tp:/ memenuhi salah satu syarat
disusunhtuntuk
httpstrata satu (S1)
http menyelesaikan pendidikan
pada/ jurusan Biologi Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan
/ Alam Universitas
/
http
.id
.id
.id
acJember.
.
j
e
n
.id/
ac
nej.
ac
nej.
ac
nej.
://
http
lib.u
lib.u
lib.u
i
i
i
g
g
g
i
i
i
Penyusunan
dari
://d karena itu
://d bantuan berbagai pihak,ttpoleh
://d skripsi ini tidak lepas
h
http
http
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
u
u
u
Phosphate Synthase
coli strain BL21 skripsi
ilib. ini
ilib.
ilib.(SPS1) dari Tebu pada Escherichia
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
http
://
http
penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada:
/
/
/
/
pembimbing utama dan j.ac.id
c.id
c.id S. Si, M. Si., selaku dosen
c1..id Dr. rer. nat Kartika Senjarini,
a
a
a
.
.
.
j
j
j
ne
.une
.uSc.,
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
Prof.
Dr.
Ir.
Bambang
Sugiharto,
M.Agr.
selaku
dosen
pembimbing
i
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h dalam penulisan
h
h
anggota
yang dengan kesabaranhmemberi bimbingan dan saran
.u
gilib
i
d
/
/
:
2.
http
nej. 3.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
4.
ac
nej.
ac
nej.
ac
nej.
Esti Utarti, S.P,
M.Si., dan Sattya Arimurti,
S.P, M.Si., selaku dosen penguji
lib.u
lib.u
lib.u
i
i
i
g
g
g
i
i
i
d
//d
://d yang membangun tdalam
yang
masukan danttpkritikan
tp:// penulisan
ttp:memberikan
skripsi ini;
://
http
h
h
h
d/
ac.i
.id/
.id/
.id/
.id/ skripsi ini;
ac
nej.
.id/
.id/
.id/
ac
ac
ac
Drs. Sutoyo M.Si.,
nej.
nej. Akademik yang telah
nej. selaku Dosen Pembimbing
ib.u
ib.u
gil
gil
memberikan
://di menjadi Mahasiswa;
://di dukungan dan saran selama
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
Purnama Oktaviandari M.Si., selaku teknisi Laboratorium Biologi Dasar terima
/
/
/
.id/ kasih atas bantuan dan.amasukannya;
c.id
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
j
.une
.une Jurusan Biologi Fakultas
.une Hibah Kompetensi i(HIKOM)
b
b
b
5. Pengelola gProgram
i
i
i
l
l
l
i
i
g
g
://
://di ini;
://di yang telah membiayaittpenelitian
://di dan Ilmu Pengetahuan
p
p
p
t
t
t
t
Matematika
Alam
http
h
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
6. / rekan kerja; Ryza Aditya Priatama
S. Si., Hilda Safitri /S. Si., Bernet Agung
/
d/
i
.
c.id
c.id
c
a
a
a
.
.
.
j
j
j
Saputra S.P., Septyan
.une
.uneFarlisa., Anandang., Mutik.,
.une Christanto S.P., Triliani
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
gilib
gilib
i
i
i
d
d
d
/
/
/
/
/
/
Adit.,
2007., terima kasih
atas
: dukungan
:
:Aji., Yunianzi., MahasiswattpAngkatan
http
h
http
://
http
dan bantuan kalian. Kalian adalah rekan kerja sekaligus teman belajar, bermain
/
/
/
/
c.id
c.idyang sulit dilupakan; j.ac.id
c.id dan bergurau setiap waktu
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
.id/
x
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
d/
.id/ dalam keadaan suka .ac.id/
cbaik
c.imemotivasi
c7..id Nina Oktaria yang selalu
dan
menemani
a
a
a
.
.
.
j
j
j
nej
ne
ne
ne
u
u
u
u
.
.
.
.
b
b
b
b
li
li
li
maupun/dduka;
igili
digi
digi
digi
/
/
/
/
/
/
/
:
:
:
:
p
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
htt
8. semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
/
/
/
.id/ Penulis telah berusaha
c.iddalam menyelesaikan j.ac.id
c.iddengan sungguh-sungguh
a
a
.
.
j
j
e pembaca, namun demikian
ne manfaat yang bisa diambil
.une
.unoleh
.uada
penelitian ini. Semoga
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
ig
dig
://
://di untuk
://dyang
p
p
t
t
tp://
penulishtmengharapkan
adanya masukan
membangun
dari
pembaca
t
t
http
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
kesempurnaan
laporan penelitian ini.
/
/
une
.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id
.id
j.ac
.id/
.id/
.id/
.id/
c
c
c
cJember,
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
12 Juni 2012 ne
Penulis ne
.une
.u
.une
b
b
b
i
i
i
lib.u
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
i
i
i
i
://
://d
://d
://d
://d
http
http
http
http
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
http
xi
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
/
/
.id/ DAFTAR ISI
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
b
b
i
i
l
l
i
i
g
g
://
://di
://di
p
p
t
t
t
t
http
h Halaman
h
http
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
HALAMAN
JUDUL ..........................................................................................
i
/
/
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
HALAMAN PERSEMBAHAN........................................................................
ii une
.une
.une
b
b
i
i
l
l
ilib.
i
i
giii
g
g
i
i
i
d
d
d
/
/
/
HALAMAN
MOTTO
........................................................................................
/
/
/
://
:
:
:
http
http
http
http
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
HALAMAN PERNYATAAN........................................................................... iv
/
/
/
.id/
c.id
c.id
c.id
cHALAMAN
PEMBIMBING............................................................................
v
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une HALAMAN PENGESAHAN
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
...........................................................................
vi
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
RINGKASAN......................................................................................................
vii
.id/
PRAKATA...........................................................................................................
ix
.id/
.id/
.id/
DAFTAR ISI .......................................................................................................
xiib.u
lib.u
lib.u
il
i
i
g
g
g
i
i
i
d xiii
d
d
/
/
/
/
/
/
:
:
:
DAFTAR
GRAFIK
............................................................................................
p
p
p
htt
htt
htt
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
ac
nej.
ac
nej.
http
://
http
DAFTAR GAMBAR.......................................................................................... xiv
/
/
/
.id/
c.id
c.id
c.id
cDAFTAR
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
LAMPIRAN......................................................................................
xv
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
DAFTAR SINGKATAN....................................................................................
://
://di xvi
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
BAB 1. PENDAHULUAN
/
/
/
.id/ 1.1 Latar Belakang....................................................................................
1
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une ..............................................................................
b
b
b
1.2 Rumusan
Masalah
2
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://
://di
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
1.3
3
http
h
h
h Tujuan dan Manfaat ..........................................................................
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
/
c.id
c.i
c.i
a
a
a
.
.
.
j
j
j
1.3.2 Manfaat
3 .une
.une
.une ..................................................................................
b
b
i
i
l
l
i
i
gilib
g
g
i
i
i
d
d
d
/
/
/
/
/
/
://
:
:
:
BAB 2. TINJAUAN
PUSTAKA
http
http
http
http
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
1.3.1 Tujuan ....................................................................................
3
d/
d/
2.1 Sucrose-Phosphate Synthase (SPS) pada Tanaman....................... 4
/
/
/
/
c.id
c.id
c.id E. coli .........................................................
c.id 2.2 Ekspresi Gen SPS
a
a
a
a
pada
6
.
.
.
.
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g7
g
g
g
2.3 Karakterisasi
Enzim...........................................................................
/
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
ttp:/
t
t
t
t
h
h
h
h
h
BAB 3. METODE PENELITIAN
/
/
.........................................................
10
id/
.id/ 3.1 Tempat dan Waktu
c.id
c.id
c.Penelitian
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une .................................................................................
3.2 Bahan Penelitian
10
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://
://di
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
.id/
xii
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
/
.id/ 3.3 Transformasi Plasmid
c.id
c.idE. coli strain
c.idpTrc99A-SoSPS1 kedalam
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
BL21......................................................................................................
g11
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
3.4 Konfirmasi Keberadaan Konstruk Plasmid pTrc99A-SoSPS1
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
g
g
dig
://di dengan enzim restriksittp://di
://3.4.2
p
p
t
t
Pemotongan
DNA
Plasmid
t
t
h
h
h
http
/
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
a
nej.
a
nej.
u
u
3.4.1ilIsolasi
11
ib.u DNA Plasmid.............................................................
ilib.
ilib.
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
/
/
pada E. coli...........................................................................................
11
c.id
c.id
http
://
http
HindIII ...................................................................................
12
/
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
3.4.3 Gel Agarose
Elektroforesis...................................................
12
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
dig
3.5 Uji://Ekspresi
SoSPS1 pada E. coli.....................................................
://
://di 13
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
3.6 Ekstraksi Protein Rekombinan dari E. coli.................................... 13
/
/
/
/
Protein
13
c.id
c.id
c.id dari E. coli ............................................
c.id 3.7 Presipitasi Parsial
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
.une
.une
.une dengan PEG 6000il...............................................
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
3.7.1
Presipitasi
13
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h % ... 14
h
h
3.7.2 Presipitasi denganhAmonium Sulfat 30-80 saturation
Enzim
SPS1 .................................................
14
/
/
/
.id/ 3.8 Pengukuran Aktivitas
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
3.9 KarakteribEnzim
15b.une
.une
.une SPS1.......................................................................
b
i
i
l
l
ili
i
i
ig
dig17
dTerlarut......................................
dig
/
/
/
/
/
/
://
:
:
:
3.10
Penentuan
Kandungan
Protein
p
p
p
http
htt
htt
htt
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
3.11 SDS-PAGE dan Western Blot.......................................................... 17
/
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
.
BAB
4.
HASIL
DAN
PEMBAHASAN
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
4.1 Transformasi
pTrc99A-SoSPS1
dig E. coli .................................
/
://di 18
://pada
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
ttp:/
t
t
t
t
h
h
h
h
h
4.2 Konfirmasi Keberadaan Konstruk pTrc99A-SoSPS1 pada
d/
ac.i
.id/
ac
nej.
ac
nej.
nej.
nej.
u
.u
.u
4.3 Uji Ekspresi
ilib.
g20
gilib
gilib SoSPS1 pada E. coli.....................................................
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
d/
d/
E. coli Transforman............................................................................
19
ac.i
ac.i
://di
://di
://di
://
http
p
4.4
Enzim SPS1 ........................................................................
23
http
http
httKarakter
http
BAB
d/
d/ 5. KESIMPULAN DAN SARAN
.i
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
/
/
c.id
c.id
c.i
a
a
a
.
.
.
j
j
j
5.1 Kesimpulan
26 .une
ne
.une
.u..........................................................................................
b
b
i
i
l
l
i
i
gilib
g
g
i
i
i
d
d
d
/
/
/
/
/
/
5.2 tSaran.....................................................................................................
26
://
:
:
:
http
http
http
ht p
DAFTAR PUSTAKA
.id/
cLAMPIRAN
a
.
j
ne
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.u
.id/
.id/
.id/
xiii
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
/
c.id
c.idDAFTAR GRAFIK j.ac.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
/dig
://
:/Halaman
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
Grafik
V
enzim SPS1 pada substrat
/
/
/ 3.1 Penentuan nilai Km.idan
d/ maks kurva Lineweaver-Burk
c.id
c.id .................16
c
UDPGlc denganj.menggunakan
a
a
a
.
.
j
j
e substrat
ne Km dan Vmaks enzim SPS1
.une
.unpada
.unilai
.une Grafik 3.2 Penentuan
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
Fruc6P
kurva
://
://di
://di Lineweaver-Burk....................16
://di dengan menggunakan
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h UDPGlc terhadap aktivitas
h
Grafikh4.1 Pengaruh konsentrasi substrat
spesifik enzim SPS1 ...........................................................................23
/
/
/
d/ 4.2 Pengaruh konsentrasi
i
.
c.id
c.id
c.idsubstrat Fruc6P terhadap
c
Grafik
aktivitas
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
e
ne
ne
ne
spesifiklienzim
b.un SPS1 ...........................................................................25
lib.u
lib.u
lib.u
.id
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.u
.id/
.id/
.id/
xiv
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
.u
://
http
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
http
://d
http
://d
http
://d
http
gilib
i
d
/
/
:
igi
igi
igi
igi
://d
http
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
d/
c.id
c.id
c.iDAFTAR
GAMBAR
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
ig
://dHalaman
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Gambar 2.1 Model skematis regulasi enzim SPS oleh protein fosforilasi
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
dan pengaruh efektor/ Glc6P dan Pi...............................................5
/
/
d/
i
.
c.id
c.idreaksi
c.id substrat terdahap kecepatan
c
Gambar
2.2
Pengaruh konsentrasi
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
e
.une
.une
.unenzim..............................................................................8
.une
dari isuatu
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
g
g
g
dig persamaan Lineaweaver-Burk
Gambar 2.3
://
://di
://di ...............................................9
://Plot
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h 3.1 Peta konstruk plasmid pTrc99a-SoSPS1.......................................10
h
Gambar
Gambar
4.1 E. coli ditumbuhkan /pada media LB yang mengandung
/
/
/
c.id
c.id
c.id
ampisilin..........................................................................................18
a
a
a
.
.
.
j
j
j
DNA plasmid pTrc99a-SoSPS1
dengan
.une
.une
.une
.une Gambar 4.2 Hasililipemotongan
b
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
dig pada gel agarose 1 p%:/........................................................20
/dig
://
://di
://HindIII
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h 4.3 Hasil perlakuan suhu induksi
h
Gambar
gen SoSPS1 pada E. coli...............21
Gambar 4.4 Purifikasi Parsial Sucrose-Phosphate Synthase dengan
/
/
id/
.id/
presipitasi Amonium
c.id
c.id Sulfat saturation 30-80j.a%c.dan
c
a
a
a
.
.
.
j
j
j
e 6000 .....................................................................22
Polietilen
glikol
.une
.une
.un
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
Gambar 4.5
Western Blot SPS1 :hasil
dig
//digpresipitasi dengan Amonium
://
://di
://Analisis
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h protein 5 µg/lane 1. Suhu induksi
h
h
Sulfat dengan kandungan
22 oC 2. Suhu induksi 37 oC ..........................................................23
.id
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
http
xv
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
une
http
/dig
ttp:/
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.u
.id/
.id/
.id/
xvi
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
ac
nej.
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
h
.id/
.u
j.a
.une
ilib
/dig
ttp:/
h
.id/
ac
nej.
http
j.a
.une
ilib
ilib
/dig
ttp:/
c.id
c.id
c.id
j.a
.une
h
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
Lampiran
1. Data Aktivitas dan Absorbansi
Pengaruh uridine diphos/
/
/
d/
dSucros-Phosphate
i
.
c.id
c.i(SPS1)
c
phoglucose dengan
Synthase
............32
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.unefructose.une dan Absorbansi Pengaruh
Lampiran 2. DatailiAktivitas
b
b
b
i
i
l
l
i
i
g
g
dig
dengan Sucros-Phosphate
Synthase (SPS1)............32
://
://di
://di
://6-phosphate
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h 3. Kurva Standart Sukrosah................................................................33
Lampiran
Lampiran
4. Kurva Standart Bovine
/
/
/ Serum Albumine (BSA) .........................33
/
h
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
/
/
.id/
c.id
c.id
cDAFTAR
LAMPIRAN
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
Halaman
://
://di
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
ilib
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
http
c.id
j.a
.une
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id
j.ac
.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
/dig
ttp:/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
.id/
c.id
c.id
cDAFTAR
SINGKATAN
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
//dig
//dig
://
://di
:Sucrose-Phosphate
p
p
t
t
SoSPS1http: : Saccharum officianarum
Synthase
t
t
http
h
h
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
cDNA
/
: Complementary Deoxyribosenucleic
acid
/
EDTA
: Ethylenediaminetetraacetic acid
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
TPT
: Total uProtein
.une
.une
. ne Terlarut
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
DTT
://
://di
://di
://d:i Dithiotheritol
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
nej.
u
.
gilib
i
d
/
/
:
.id
: Ethyleneglycoltetraacetic
acid
j.ac
.une
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
lib
:ig
3 i(N-Morpolino)
propanol
MOPS
.id/
.id/
/
.id/
acEGTA
gilib
i
d
/
/
:
d
://
tp:// : Phenilmethilsulvinil hfluoride
ttp
http
http
/
/
/
E. C/
: Enzyme Commission
c.id
c.id
c.id
c.id
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
: rotation
per minute
.une
.une
.une
.une rpm
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://d:i Iso Propyl Thio-β-D-Galactoside
://di
IPTG
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
http
PMSF ht
: Bromo-Cloro-Indol-Phosfate
BCIP
.ac
: Nitroblue
nejTetrazolium
nej. NBT
.u
gilib
i
d
/
/
:
TBS
http
BSA
ib.u
l
i
g
i
://d: Tris Bufer Saline
http
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
://di
http
: Tris EDTA
ac.i
.
j
e
n
: Luria.uBertani
lib
i
g
i
//d
.u
CaCl2 ttp:
h
http
: Calcium Chloride
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
.id/
.id/
xvii
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
http
://
http
http
.id/
.u
http
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
http
.id/
ac
nej.
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
.id/
ac
nej.
://
http
http
: Phenol: Kloroform:
d/ Isoamil
PCI/
c.id
a
.
j
ne LB
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
http
nej.
u
:g
tris-borat-EDTA
ilib.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
: Polyethylene
acglycol
TBE
TE
ac
nej.
: Bovine Serum Albumine
.id/
PEG
j.ac
.id/
.id/
.id/
d/
ac.i
.id/
j.ac
.id/
j.ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
KARAKTERISASI SUCROSE-PHOSPHATE SYNTHASE (SPS1)
DARI TEBU PADA Escherichia coli STRAIN BL21
SKRIPSI
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
Oleh
Ahmad Fudhaili
NIM 071810401069
JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
/
/
/
/
UNIVERSITAS
JEMBER
c.id
c.id
c.id
c.id
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
ne
ne
ne
2012 lib.une
lib.u
lib.u
lib.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
j.ac
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
j.ac
.id/
ac
nej.
.u
.u
.u
://
http
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
http
://d
http
://d
http
://d
http
gilib
i
d
/
/
:
igi
igi
igi
igi
://d
http
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
/
/
/
KARAKTERISASI
SUCROSE-PHOSPHATE
(SPS1)
.id/
.id
c.id
cSYNTHASE
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
DARI TEBU
une STRAIN BL21 lib.une
.coli
.une PADA Escherichia
b
b
i
i
l
l
i
i
digi
dig
dig
/
/
/
/
/
/
://
:
:
:
p
p
p
http
htt
htt
htt
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.id/
ac
nej.
.
gilib
i
d
/
/
:
.u
ac
nej.
://
http
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
ac
nej.
.id/
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
.id/
.id/
.u
.u
://d
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
.id/
Ahmad Fudhaili nej.ac
.u
NIM 071810401069
igilib
http
://
http
http
d/
ac.i
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
Oleh
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
d/
ac.i
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
untuk menyelesaikan Program Studi Biologi (S1)
dan mencapai
gelar Sarjana Sains .id/
.id/
d/
ac.i
nej.
gilib
i
d
/
/
:
SKRIPSI
.id/
.id/
ac
nej.
guna melengkapi tugas
ttp syarat
ttp
httpakhir dan memenuhi salah hsatu
hdiajukan
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
u
u
.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
JURUSAN
http
http
http BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
/
/
/
/
d
i
UNIVERSITAS
JEMBER
c.id
c.id
c.id
c.
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
ne
ne
ne
2012 lib.une
lib.u
lib.u
lib.u
http
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
.id/
ii
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://d
http
://d
http
://d
http
ac
nej.
igi
igi
igi
igi
://d
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
/
c.id
c.idPERSEMBAHAN j.ac.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Skripsi ini saya persembahkan untuk:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
/
Aminah tersayang,ckuucapkan
terima kasih
d/
.id/
.id/1. Ayahanda Babun dan
c.id
c.iIbunda
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.unedoa yang senantiasa diberikan
.uneatas segala kasih sayang
sebesar-besarnya
dan
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
ig
://
://di
://di
://dini;
p
p
p
t
t
t
selama
t
t
t
http
h
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
semangat dan dorongan
untuk menempuh
/
/2. keluarga yang telah memberi
d/
d/
i
i
.
.
c.id
c
c
a
a
a
.
.
.
j
j
j
kuliah;
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
dig
3. guru-guru
ilmunya;
://
://di
://menberikan
://di yang telah mendidiktdan
p
p
p
t
t
t
t
t
http
h
h
h
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
4. Almamater Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas
d/
ac.i
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
http
iii
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
Jember.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
.id/
.id/
MOTTO
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
Wahai
orang-orang yang beriman!
Bersabarlah kamu dan kuatkanlah
kesabaranmu
d/
d/
d/
d/ tetaplah bersiap-siaga (dic.perbatasan
i
i
i
.
.
c
c
dan
negerimu)
dan
bertawakalah
kepada Allah j.ac.i
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
.une
agar kamu beruntung.
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
(terjemahan Surat
//dig ayat 200) *)
://
://di
:Al-Imron
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
/
/
c.id
c.id
c.id
c*).id
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
Departemen Agama.uRepublik
Indonesia. 2009. Al-Qur’an
ne
.une
.une dan Terjemahan.iJakarta
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
Timur: CV. Pustaka
g
g
g Al-Kautsar.
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
.id/
iv
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
/
/
.id/PERNYATAAN
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.u
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Saya yang bertanda tangan dibawah ini:
a
nej.
g
://di
.id/
.id/
nama : Ahmad
d/
c.iFudhaili
u
NIM
ilib. : 071810401069
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
tp
menyatakan
skripsi yang berjudul:
http Karakterisasi
http dengan sesungguhnyahtbahwa
Sucrose-Phosphate
Synthase (SPS1)
/ coli strain BL21
/ dari Tebu pada Escherichia
/
http
/
c.id
c.id
c.id
c.id
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
adalah benar-benar hasil
karya sendiri, kecuali jika
dalam pengutipan substansi
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
ig instansi manapun, serta://bukan
dig karya
disebutkan :sumbernya,
dan belum diajukan
//dig
://
://dpada
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
jiplakan. Penelitian ini dibiayai oleh program Hibah Kompetensi (HIKOM) Jurusan
d/ nama Prof. Dr. Ir. c.id/
id/ Ilmu Pengetahuan Alam
.id/ Fakultas Matematika
c.iatas
c.dan
cBiologi
a
a
a
a
.
.
.
j
j
j
nej.
ne
ne
ne
u
u
u
u
.
.
.
.
b
b
b
b
li
li
li M.Agr. Sc. Saya bertanggung
li
Bambang Sugiharto,
jawab atas keabsahan
digi dan
digi
digi
digi
/
/
/
/
/
/
/
/
://
:
:
:
:
p
p
p
p
t
tt
http
htt isisnya sesuai dengan sikaphtilmiah
htt
kebenaran
yang harus dijunjung htinggi.
tanpa
ada tekanan dan
/
/
d/ buat dengan sebenarnya,
.id/ Demikian pernyataan.ainic.isaya
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
j
paksaan dari pihakbmana
.une
.une saksi akademik jika iternyata
.unepun serta bersedia mendapat
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
g
g
/digpernyataan ini tidak benar.
://
://di
://di
:/hari
dikemudian
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
v
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
http
.id/
ac
nej.
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
.id/
ac
nej.
.u
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.
Ahmad
j.ac Fudhaili
e
n
u
ilib. NIM 071810401069
g
://di
http
http
.id/
id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
/
c.id
c.i
a
a
.
.
j
j
ne menyatakan,
.une
.uYang
b
b
i
i
l
l
i
i
g
g
://
://di
://di
p
p
t
t
t
t
http
h
h
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
Jember, 12dJuni
/ 2012
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ttp
hSKRIPSI
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
KARAKTERISASI
SUCROSE-PHOSPHATE
SYNTHASE
(SPS1)
/
/
d/
d/
d
i
i
i
.
.
.
c.id
c
c
c
a
a
a
a
.
.
.
.
DARI
TEBU
PADA
Escherichia
coli
STRAIN
BL21
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
gi
://di
://
http
.id/
.id/
ac
nej.
: Dr. rer. nat Kartika
S. Si, M. Si.
.u
libSenjarini,
gi
://di
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
tp
tp
tp
http
.u
http
.id/
ac
nej.
Dosen Pembimbing
.u
libUtama
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
Pembimbing
.id/
ac
nej.
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
ac
nej.
://
http
http
http
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
Oleh
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
.id/
.id/
ac
nej.
.u
lib.u
i
g
i
/d
Ahmad
ttp:/Fudhaili
h
NIM 071810401069
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
t
ht Sc.
ht Ir. Bambang Sugiharto, M.Agr.
Dosen h
Pembimbing
Anggota : Prof. Dr.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
http
vi
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
/
/
.id/PENGESAHAN
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.u
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Skripsi berjudul Karakterisasi Sucrose-Phosphate Synthase (SPS1) dari Tebu pada
.id/
.u
http
ac
nej.
Escherichia
coli strain BL21 ctelah
Matematika dan c.id/
.id/
.id/ diuji dan disahkan oleh
.id/
cFakultas
a
a
a
.
.
j
j
e
nej.
ne pada:
nJurusan
u
u
u
.
.
.
Ilmu PengetahuanilAlam
Biologi
Universitas
Jember
b
b
b
i
ili
ili
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
http
hari
tanggal
/
:/
http
:/
http
://
http
:
/
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
tempat
: Fakultas
MIPA Universitas Jember. ne
.une
.u
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://
://di
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
/dig
/dig
g
://d:i
p
t
t
h
http
Tim Penguji
d/
ac.i
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
Prof. Dr. Ir. Bambang
/ Sugiharto, M.Agr, Sc. .id/
c.id
ac
a
.
j
NIP
195510221982121001
nej.
ne
gilib
i
d
/
/
:
.u
Penguji II,
.id/
d/
ac.i
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
://
http
http
d/
ac.i
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
.u
httpAnggota
Penguji I,
d/
ac.i
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
Dr.
/ M. Si.
/ nat Kartika Senjarini, S..iSi,
.idrer.
c d
a
.
j
NIP 197509132000032001
ne
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
d/
.iSekretaris,
d/
ac.i
Ketua,
Esti Utarti, S.P, M. Si.
Sattya Arimurti, S.P, M. Si.
/
/
/
/
NIPa197403311999032001
c.id
c.id
c.id
c.id NIP 197003031999032001
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
Mengesahkan
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h Dekan,
h
h
gilib
i
d
/
/
:
NIP
/ 196101081986021001
/
.id
j.ac
.id
j.ac
une
une
.
gilib
i
d
/
/
:
.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
.id/
http
vii
.u
.u
://
http
http
.u
.id/
.id/
ac
nej.
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
httpKusno, DEA. Ph.D.
Prof. Drs.
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
http
://
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
.u
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
RINGKASAN
Karakterisasi Sucrose-Phosphate Synthase (SPS1) dari Tebu pada Escherichia
coli strain BL21; Ahmad Fudhaili, 071810401069; 2012, 31 halaman; Jurusan
Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Jember
Sukrosa merupakan produk akhir dari poses fotosintesis yang terjadi di daun.
Pada sebagian besar tanaman sukrosa dibentuk di sitosol dan ditransportasikan
melalui floem dari jaringan pembentuk ke jaringan penyimpan. Metabolisme sukrosa
pada tanaman dipengaruhi oleh beberapa enzim yaitu Invertase, Sucrose Synthase,
dan Sucrose-Phosphate Synthase. Sucrose-Phosphate Synthase (SPS; E.C. 2. 4.1.14)
adalah enzim yang mempunyai peranan penting dalam proses biosintesis sukrosa
pada tanaman. Karakterisasi enzim SPS pada tanaman tebu dalam bentuk murni
belum pernah dilakukan karena keberadaan enzim ini sangat rendah dan mudah
mengalami degradasi selama purifikasi. Saat ini tersedia cDNA SoSPS1 yang
dikontruksi pada vektor plasmid pTrc99A, maka karakterisasi enzim yang dikode
SPS1 dapat dikarakterisasi. Karakterisasi gen dapat dilakukan dengan sel biologi
misalnya E. coli. E. coli sering digunakan sebagai inang vektor dikarenakan dapat
tumbuh pada medium sederhana, pertumbuhannya cepat, pengetahuan tentang
informasi genetik dan sifat biokimianya sudah banyak dipelajari
Penelitian ini bertujuan untuk mentransformasi dan mengetahui kondisi optimal
ekspresi serta karakterisasi gen pengkode SPS1 dari tanaman tebu yang telah
disisipkan pada vektor ekspresi pTrc99A dalam E. coli strain BL21. Penelitian ini
akan dilakukan transformasi, konfirmasi keberadaan gen pengkode SPS1, dan
pengaruh suhu terhadap ekspresinya serta karakterisasi protein yang dihasilkan oleh
E. coli. Transformasi plasmid pTrc99A-SoSPS1 ke dalam E. coli dilakukan dengan
perlakuan CaCl2 dan Heat-shock. Konfirmasi keberadaan gen pengkode SPS1 dengan
penambahan antibiotik pada media dan analisis enzim restriksi. Pengujian ekspresi
dilakukan dengan menumbuhkan E. coli dalam media dengan pelakuan suhu.
viii
://
http
Karakterisasi enzim dilakukan dengan substrat SPS1 yaitu Uridine Diphosphoglucose
(UDPGlc) dan Fructose-6-Phosphate (Fru6P).
Hasil penelitian menunjukkan bahwa E. coli BL21 tertransformasi dan
mengandung plasmid pTrc99A-SoSPS1. Penambahan antibiotik dan analisis enzim
restriksi telah dilakukan untuk konfirmasi keberadaannya. E. coli mampu
mengekspresikan gen pengkode SPS1 dan menghasilkan aktivitas enzim optimal
pada suhu induksi 22 oC. Analisis dengan Western Blot menunjukkan bahwa protein
SPS1 dari E. coli transforman berhasil dideteksi. Nilai Km dan Vmaks enzim SPS1
dengan substrat UDPGlc adalah 16,69 mM dan 3,06 µg sukrosa/ menit/µg protein.
Sedangkan nilai Km dan Vmaks enzim SPS menggunakan substrat Fruc6p sebesar
0,927 mM dan 1,20 µg sukrosa/ menit/µg protein.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
j.ac
://
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
.u
http
ix
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
http
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
/
/
.id/ PRAKATA
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.u
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Puji syukur atas kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan hidayah-Nya
ac
nej.
/
/
sehingga
penulis dapat meyelesaikan
.id/
c.idKarakterisasi Sucrosec.id skripsi ini yang berjudul
ac
nej.
a
nej.
a
nej.
/dig
/dig
/dig
:/
:/
tp:/ memenuhi salah satu syarat
disusunhtuntuk
httpstrata satu (S1)
http menyelesaikan pendidikan
pada/ jurusan Biologi Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan
/ Alam Universitas
/
http
.id
.id
.id
acJember.
.
j
e
n
.id/
ac
nej.
ac
nej.
ac
nej.
://
http
lib.u
lib.u
lib.u
i
i
i
g
g
g
i
i
i
Penyusunan
dari
://d karena itu
://d bantuan berbagai pihak,ttpoleh
://d skripsi ini tidak lepas
h
http
http
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
u
u
u
Phosphate Synthase
coli strain BL21 skripsi
ilib. ini
ilib.
ilib.(SPS1) dari Tebu pada Escherichia
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
http
://
http
penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada:
/
/
/
/
pembimbing utama dan j.ac.id
c.id
c.id S. Si, M. Si., selaku dosen
c1..id Dr. rer. nat Kartika Senjarini,
a
a
a
.
.
.
j
j
j
ne
.une
.uSc.,
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
Prof.
Dr.
Ir.
Bambang
Sugiharto,
M.Agr.
selaku
dosen
pembimbing
i
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h dalam penulisan
h
h
anggota
yang dengan kesabaranhmemberi bimbingan dan saran
.u
gilib
i
d
/
/
:
2.
http
nej. 3.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
4.
ac
nej.
ac
nej.
ac
nej.
Esti Utarti, S.P,
M.Si., dan Sattya Arimurti,
S.P, M.Si., selaku dosen penguji
lib.u
lib.u
lib.u
i
i
i
g
g
g
i
i
i
d
//d
://d yang membangun tdalam
yang
masukan danttpkritikan
tp:// penulisan
ttp:memberikan
skripsi ini;
://
http
h
h
h
d/
ac.i
.id/
.id/
.id/
.id/ skripsi ini;
ac
nej.
.id/
.id/
.id/
ac
ac
ac
Drs. Sutoyo M.Si.,
nej.
nej. Akademik yang telah
nej. selaku Dosen Pembimbing
ib.u
ib.u
gil
gil
memberikan
://di menjadi Mahasiswa;
://di dukungan dan saran selama
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
Purnama Oktaviandari M.Si., selaku teknisi Laboratorium Biologi Dasar terima
/
/
/
.id/ kasih atas bantuan dan.amasukannya;
c.id
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
j
.une
.une Jurusan Biologi Fakultas
.une Hibah Kompetensi i(HIKOM)
b
b
b
5. Pengelola gProgram
i
i
i
l
l
l
i
i
g
g
://
://di ini;
://di yang telah membiayaittpenelitian
://di dan Ilmu Pengetahuan
p
p
p
t
t
t
t
Matematika
Alam
http
h
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
6. / rekan kerja; Ryza Aditya Priatama
S. Si., Hilda Safitri /S. Si., Bernet Agung
/
d/
i
.
c.id
c.id
c
a
a
a
.
.
.
j
j
j
Saputra S.P., Septyan
.une
.uneFarlisa., Anandang., Mutik.,
.une Christanto S.P., Triliani
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
gilib
gilib
i
i
i
d
d
d
/
/
/
/
/
/
Adit.,
2007., terima kasih
atas
: dukungan
:
:Aji., Yunianzi., MahasiswattpAngkatan
http
h
http
://
http
dan bantuan kalian. Kalian adalah rekan kerja sekaligus teman belajar, bermain
/
/
/
/
c.id
c.idyang sulit dilupakan; j.ac.id
c.id dan bergurau setiap waktu
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
.id/
x
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
d/
.id/ dalam keadaan suka .ac.id/
cbaik
c.imemotivasi
c7..id Nina Oktaria yang selalu
dan
menemani
a
a
a
.
.
.
j
j
j
nej
ne
ne
ne
u
u
u
u
.
.
.
.
b
b
b
b
li
li
li
maupun/dduka;
igili
digi
digi
digi
/
/
/
/
/
/
/
:
:
:
:
p
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
htt
8. semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
/
/
/
.id/ Penulis telah berusaha
c.iddalam menyelesaikan j.ac.id
c.iddengan sungguh-sungguh
a
a
.
.
j
j
e pembaca, namun demikian
ne manfaat yang bisa diambil
.une
.unoleh
.uada
penelitian ini. Semoga
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
ig
dig
://
://di untuk
://dyang
p
p
t
t
tp://
penulishtmengharapkan
adanya masukan
membangun
dari
pembaca
t
t
http
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
kesempurnaan
laporan penelitian ini.
/
/
une
.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id
.id
j.ac
.id/
.id/
.id/
.id/
c
c
c
cJember,
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
12 Juni 2012 ne
Penulis ne
.une
.u
.une
b
b
b
i
i
i
lib.u
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
i
i
i
i
://
://d
://d
://d
://d
http
http
http
http
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
http
xi
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
/
/
.id/ DAFTAR ISI
c.id
c.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
b
b
i
i
l
l
i
i
g
g
://
://di
://di
p
p
t
t
t
t
http
h Halaman
h
http
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
HALAMAN
JUDUL ..........................................................................................
i
/
/
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
HALAMAN PERSEMBAHAN........................................................................
ii une
.une
.une
b
b
i
i
l
l
ilib.
i
i
giii
g
g
i
i
i
d
d
d
/
/
/
HALAMAN
MOTTO
........................................................................................
/
/
/
://
:
:
:
http
http
http
http
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
HALAMAN PERNYATAAN........................................................................... iv
/
/
/
.id/
c.id
c.id
c.id
cHALAMAN
PEMBIMBING............................................................................
v
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une HALAMAN PENGESAHAN
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
...........................................................................
vi
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
RINGKASAN......................................................................................................
vii
.id/
PRAKATA...........................................................................................................
ix
.id/
.id/
.id/
DAFTAR ISI .......................................................................................................
xiib.u
lib.u
lib.u
il
i
i
g
g
g
i
i
i
d xiii
d
d
/
/
/
/
/
/
:
:
:
DAFTAR
GRAFIK
............................................................................................
p
p
p
htt
htt
htt
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
ac
nej.
ac
nej.
http
://
http
DAFTAR GAMBAR.......................................................................................... xiv
/
/
/
.id/
c.id
c.id
c.id
cDAFTAR
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
LAMPIRAN......................................................................................
xv
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
DAFTAR SINGKATAN....................................................................................
://
://di xvi
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
BAB 1. PENDAHULUAN
/
/
/
.id/ 1.1 Latar Belakang....................................................................................
1
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une ..............................................................................
b
b
b
1.2 Rumusan
Masalah
2
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://
://di
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
1.3
3
http
h
h
h Tujuan dan Manfaat ..........................................................................
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
/
c.id
c.i
c.i
a
a
a
.
.
.
j
j
j
1.3.2 Manfaat
3 .une
.une
.une ..................................................................................
b
b
i
i
l
l
i
i
gilib
g
g
i
i
i
d
d
d
/
/
/
/
/
/
://
:
:
:
BAB 2. TINJAUAN
PUSTAKA
http
http
http
http
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
1.3.1 Tujuan ....................................................................................
3
d/
d/
2.1 Sucrose-Phosphate Synthase (SPS) pada Tanaman....................... 4
/
/
/
/
c.id
c.id
c.id E. coli .........................................................
c.id 2.2 Ekspresi Gen SPS
a
a
a
a
pada
6
.
.
.
.
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g7
g
g
g
2.3 Karakterisasi
Enzim...........................................................................
/
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
ttp:/
t
t
t
t
h
h
h
h
h
BAB 3. METODE PENELITIAN
/
/
.........................................................
10
id/
.id/ 3.1 Tempat dan Waktu
c.id
c.id
c.Penelitian
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une .................................................................................
3.2 Bahan Penelitian
10
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
://
://di
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.id/
.id/
xii
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
/
.id/ 3.3 Transformasi Plasmid
c.id
c.idE. coli strain
c.idpTrc99A-SoSPS1 kedalam
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
BL21......................................................................................................
g11
g
g
://di
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
3.4 Konfirmasi Keberadaan Konstruk Plasmid pTrc99A-SoSPS1
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
g
g
dig
://di dengan enzim restriksittp://di
://3.4.2
p
p
t
t
Pemotongan
DNA
Plasmid
t
t
h
h
h
http
/
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
a
nej.
a
nej.
u
u
3.4.1ilIsolasi
11
ib.u DNA Plasmid.............................................................
ilib.
ilib.
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
/
/
pada E. coli...........................................................................................
11
c.id
c.id
http
://
http
HindIII ...................................................................................
12
/
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
3.4.3 Gel Agarose
Elektroforesis...................................................
12
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
dig
3.5 Uji://Ekspresi
SoSPS1 pada E. coli.....................................................
://
://di 13
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
3.6 Ekstraksi Protein Rekombinan dari E. coli.................................... 13
/
/
/
/
Protein
13
c.id
c.id
c.id dari E. coli ............................................
c.id 3.7 Presipitasi Parsial
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
.une
.une
.une dengan PEG 6000il...............................................
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
3.7.1
Presipitasi
13
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h % ... 14
h
h
3.7.2 Presipitasi denganhAmonium Sulfat 30-80 saturation
Enzim
SPS1 .................................................
14
/
/
/
.id/ 3.8 Pengukuran Aktivitas
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
3.9 KarakteribEnzim
15b.une
.une
.une SPS1.......................................................................
b
i
i
l
l
ili
i
i
ig
dig17
dTerlarut......................................
dig
/
/
/
/
/
/
://
:
:
:
3.10
Penentuan
Kandungan
Protein
p
p
p
http
htt
htt
htt
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
3.11 SDS-PAGE dan Western Blot.......................................................... 17
/
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
.
BAB
4.
HASIL
DAN
PEMBAHASAN
j
j
j
j
.une
.une
.une
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
4.1 Transformasi
pTrc99A-SoSPS1
dig E. coli .................................
/
://di 18
://pada
://di
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
ttp:/
t
t
t
t
h
h
h
h
h
4.2 Konfirmasi Keberadaan Konstruk pTrc99A-SoSPS1 pada
d/
ac.i
.id/
ac
nej.
ac
nej.
nej.
nej.
u
.u
.u
4.3 Uji Ekspresi
ilib.
g20
gilib
gilib SoSPS1 pada E. coli.....................................................
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
d/
d/
E. coli Transforman............................................................................
19
ac.i
ac.i
://di
://di
://di
://
http
p
4.4
Enzim SPS1 ........................................................................
23
http
http
httKarakter
http
BAB
d/
d/ 5. KESIMPULAN DAN SARAN
.i
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
/
/
c.id
c.id
c.i
a
a
a
.
.
.
j
j
j
5.1 Kesimpulan
26 .une
ne
.une
.u..........................................................................................
b
b
i
i
l
l
i
i
gilib
g
g
i
i
i
d
d
d
/
/
/
/
/
/
5.2 tSaran.....................................................................................................
26
://
:
:
:
http
http
http
ht p
DAFTAR PUSTAKA
.id/
cLAMPIRAN
a
.
j
ne
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.u
.id/
.id/
.id/
xiii
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
/
c.id
c.idDAFTAR GRAFIK j.ac.id
a
a
.
.
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
/dig
://
:/Halaman
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
Grafik
V
enzim SPS1 pada substrat
/
/
/ 3.1 Penentuan nilai Km.idan
d/ maks kurva Lineweaver-Burk
c.id
c.id .................16
c
UDPGlc denganj.menggunakan
a
a
a
.
.
j
j
e substrat
ne Km dan Vmaks enzim SPS1
.une
.unpada
.unilai
.une Grafik 3.2 Penentuan
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
Fruc6P
kurva
://
://di
://di Lineweaver-Burk....................16
://di dengan menggunakan
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h UDPGlc terhadap aktivitas
h
Grafikh4.1 Pengaruh konsentrasi substrat
spesifik enzim SPS1 ...........................................................................23
/
/
/
d/ 4.2 Pengaruh konsentrasi
i
.
c.id
c.id
c.idsubstrat Fruc6P terhadap
c
Grafik
aktivitas
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
e
ne
ne
ne
spesifiklienzim
b.un SPS1 ...........................................................................25
lib.u
lib.u
lib.u
.id
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.u
.id/
.id/
.id/
xiv
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
.u
://
http
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
http
://d
http
://d
http
://d
http
gilib
i
d
/
/
:
igi
igi
igi
igi
://d
http
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
d/
c.id
c.id
c.iDAFTAR
GAMBAR
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
ig
://dHalaman
://di
://di
p
p
p
tp://
t
t
t
t
t
t
t
h
h
h
h
Gambar 2.1 Model skematis regulasi enzim SPS oleh protein fosforilasi
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
dan pengaruh efektor/ Glc6P dan Pi...............................................5
/
/
d/
i
.
c.id
c.idreaksi
c.id substrat terdahap kecepatan
c
Gambar
2.2
Pengaruh konsentrasi
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
e
.une
.une
.unenzim..............................................................................8
.une
dari isuatu
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
g
g
g
dig persamaan Lineaweaver-Burk
Gambar 2.3
://
://di
://di ...............................................9
://Plot
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h 3.1 Peta konstruk plasmid pTrc99a-SoSPS1.......................................10
h
Gambar
Gambar
4.1 E. coli ditumbuhkan /pada media LB yang mengandung
/
/
/
c.id
c.id
c.id
ampisilin..........................................................................................18
a
a
a
.
.
.
j
j
j
DNA plasmid pTrc99a-SoSPS1
dengan
.une
.une
.une
.une Gambar 4.2 Hasililipemotongan
b
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
dig pada gel agarose 1 p%:/........................................................20
/dig
://
://di
://HindIII
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h 4.3 Hasil perlakuan suhu induksi
h
Gambar
gen SoSPS1 pada E. coli...............21
Gambar 4.4 Purifikasi Parsial Sucrose-Phosphate Synthase dengan
/
/
id/
.id/
presipitasi Amonium
c.id
c.id Sulfat saturation 30-80j.a%c.dan
c
a
a
a
.
.
.
j
j
j
e 6000 .....................................................................22
Polietilen
glikol
.une
.une
.un
.une
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
Gambar 4.5
Western Blot SPS1 :hasil
dig
//digpresipitasi dengan Amonium
://
://di
://Analisis
://di
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h protein 5 µg/lane 1. Suhu induksi
h
h
Sulfat dengan kandungan
22 oC 2. Suhu induksi 37 oC ..........................................................23
.id
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
.id/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
.u
http
xv
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
une
http
/dig
ttp:/
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.u
.id/
.id/
.id/
xvi
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.u
http
.id/
.u
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
.u
http
://
http
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
.u
ac
nej.
.u
.u
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
ac
nej.
.id/
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
://
http
h
.id/
.u
j.a
.une
ilib
/dig
ttp:/
h
.id/
ac
nej.
http
j.a
.une
ilib
ilib
/dig
ttp:/
c.id
c.id
c.id
j.a
.une
h
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
Lampiran
1. Data Aktivitas dan Absorbansi
Pengaruh uridine diphos/
/
/
d/
dSucros-Phosphate
i
.
c.id
c.i(SPS1)
c
phoglucose dengan
Synthase
............32
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.unefructose.une dan Absorbansi Pengaruh
Lampiran 2. DatailiAktivitas
b
b
b
i
i
l
l
i
i
g
g
dig
dengan Sucros-Phosphate
Synthase (SPS1)............32
://
://di
://di
://6-phosphate
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h 3. Kurva Standart Sukrosah................................................................33
Lampiran
Lampiran
4. Kurva Standart Bovine
/
/
/ Serum Albumine (BSA) .........................33
/
h
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
/
/
.id/
c.id
c.id
cDAFTAR
LAMPIRAN
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
Halaman
://
://di
://di
://di
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
ilib
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
http
c.id
j.a
.une
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.id
j.ac
.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
/dig
ttp:/
gilib
i
d
/
/
:
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
j.ac
.id/
j.ac
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
.id/
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
.id/
.id/
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
http
http
ac
nej.
.u
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
.id/
.id/
ac
nej.
/
/
.id/
c.id
c.id
cDAFTAR
SINGKATAN
a
a
a
.
.
.
j
j
j
.une
.une
.une
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
//dig
//dig
://
://di
:Sucrose-Phosphate
p
p
t
t
SoSPS1http: : Saccharum officianarum
Synthase
t
t
http
h
h
.id/
ac
nej.
.u
gilib
i
d
/
/
:
http
cDNA
/
: Complementary Deoxyribosenucleic
acid
/
EDTA
: Ethylenediaminetetraacetic acid
/
/
c.id
c.id
c.id
a
a
a
.
.
.
j
j
j
TPT
: Total uProtein
.une
.une
. ne Terlarut
b
b
b
i
i
i
l
l
l
i
i
i
g
g
g
DTT
://
://di
://di
://d:i Dithiotheritol
p
p
p
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
.id
j.ac
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
nej.
u
.
gilib
i
d
/
/
:
.id
: Ethyleneglycoltetraacetic
acid
j.ac
.une
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
lib
:ig
3 i(N-Morpolino)
propanol
MOPS
.id/
.id/
/
.id/
acEGTA
gilib
i
d
/
/
:
d
://
tp:// : Phenilmethilsulvinil hfluoride
ttp
http
http
/
/
/
E. C/
: Enzyme Commission
c.id
c.id
c.id
c.id
a
a
a
a
.
.
.
.
j
j
j
j
: rotation
per minute
.une
.une
.une
.une rpm
b
b
b
b
i
i
i
i
l
l
l
l
i
i
i
i
g
g
g
g
://
://di
://di
://d:i Iso Propyl Thio-β-D-Galactoside
://di
IPTG
p
p
p
p
t
t
t
t
t
t
t
t
http
h
h
h
h
http
PMSF ht
: Bromo-Cloro-Indol-Phosfate
BCIP
.ac
: Nitroblue
nejTetrazolium
nej. NBT
.u
gilib
i
d
/
/
:
TBS
http
BSA
ib.u
l
i
g
i
://d: Tris Bufer Saline
http
une
.
gilib
i
d
/
/
:
http
://di
http
: Tris EDTA
ac.i
.
j
e
n
: Luria.uBertani
lib
i
g
i
//d
.u
CaCl2 ttp:
h
http
: Calcium Chloride
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
j.ac
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
://
http
.id/
.id/
xvii
ac
nej.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
://
http
http
http
j.ac
ac
nej.
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
://
http
.id/
ac
nej.
.u
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
http
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
http
.id/
ac
nej.
.id/
ac
nej.
.u
http
://
http
http
.id/
.u
http
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
http
.id/
ac
nej.
://
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
http
gilib
i
d
/
/
:
http
ac
nej.
gilib
i
d
/
/
:
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
.id/
ac
nej.
.id/
.id/
ac
nej.
://
http
http
: Phenol: Kloroform:
d/ Isoamil
PCI/
c.id
a
.
j
ne LB
gilib
i
d
/
/
:
gilib
i
d
/
/
:
http
nej.
u
:g
tris-borat-EDTA
ilib.
ac
nej.
.u
.u
gilib
i
d
/
/
:
.id/
: Polyethylene
acglycol
TBE
TE
ac
nej.
: Bovine Serum Albumine
.id/
PEG
j.ac
.id/
.id/
.id/
d/
ac.i
.id/
j.ac
.id/
j.ac