Uji Bioaktivitas Ekstrak Teripang Pasir (Holthuria atra) terhadap Jamur Candida albicans
SEMINAR NASIONAL
BIOTEKNOLOGI KELAUTAN dan PERIKANAN TAHUNAN Ke-1
Penguatan Kapasitas Riset Bioteknologi untuk Mendukung Industrialisasi Kelautan dan
Perikanan
© Universitas Diponegoro 2013
Hak Cip ta d il indu ngi o leh Undang -un dang
Editor:
Tri Winarni Agustini, Ekowati Chasanah, Fronthea Swastawati, Agus Trianto, M.Nursid, Su bag i y o
Penyunting:
Marku s Pr ima, R is ki Ika Dewi, N.A. Ra tnan ingt yas
Perpus takaan Nas io nal RI : Katal og Da lam Terb itan ( KDT)
Vol. 1
ISBN. 978 — 602 — 17885 — 0 — 9
Diterbitkan oleh:
FP I K, U n iv er s ita s Di p one g or o
JI. Pro f.S oedar to, SH, Semaran g - 50275
Dilarang memperbanyak sebagian atau seluruh isi buku ini tanpa ijin dari penerbit
UJI BIOAKTIVITAS EKSTRAK TERIPANG PASIR (Holothuria scabra)
TERHADAP JAMUR Candida albicans
Eu n i ke N ovia na Pr an oto, W id od o Far id Ma'r u f, De li ani s Pr in gg en i es
Juru san Perikanan , Fakul tas Perikanan dan I lmu Kelau tan, Uni versi tas Dip oneg oro
ABSTRAK
Te r ipang dapa t dite muka n di per a ir a n Indone sia . Te ripa ng dike ta hui me miliki za t ya ng
salah satunya berfungsi sebagai antijamur. Penyakit infeksi pada manusia yang
disebabkan ole h jamur Candida albicans di Indonesia masih rela tif tinggi dan oba t
an tijamur rela tif leb ih sedi ki t dibandi ngka n dengan an tibakteri. Peng obatan terhadap C.
albicans secara kimia dapat menimbulkan resistensi dan efek samping. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui pengaruh penggunaan pelarut dan konsentrasi yang
berbeda dari ekstrak Holothuria
scabra terhadap C. albicans serta mengetahui
k a n d u n g a n s e n y a w a b i o a k t i f d a l a m H . s c a b r a . H a s i l p e n e l i t i a n d i da p a t k a n b a h wa p e l a r u t
terbaik untuk mengisolasi senyawa antijamur H. scabra adalah me tanol. Konse ntrasi
e kstra k 5 mg/ml, 6 mg/m1,7 mg/ml me ngha silka n zona ha mba t ber turut - tur ut se be sar 5,1
+ 0, 5 6 mm; 8, 4 2 + 0, 71 m m; 10 ,1 + 0 ,5 9 mm . Ha sil u ji ka ndunga n bi oa k tif me mpe r li ha t kan
bahwa ekstrak
H.
scabra
mengandung
senyawa alkaloid, saponin, steroid dan
triterpenoid. Ada indikasi potensi antijamur pada ekstrak H. scabra.
Kata kunci : H. scabra, antijamur, C. albicans, bioaktif
PENDAHULUAN
Teripang merupa kan salah sa tu angg ota hewan berkulit dur i (Echinodermata ).
Menurut Dahuri (2005), Depar temen Kelautan dan Perikanan menjadikan bi ote knologi
kelautan sebagai program unggulan sejak tahun 2002. Bioteknologi kelautan yang
ber ke mba ng pe sa t ber tu jua n mema nfaa tka n bi ota lau t, d enga n e kstra ksi sen ya wa
bi oaktif sebagai obat- obatan.
Terip ang pa sir (Hol ot huria scab ra) berp ote nsi me njadi su mber b i ofarma baru
m e la lu i pr o s e s pe m i sa ha n se n y a wa a k t if a t a u e k s t r a k s i . B or db a r e t a l . ( 2 0 1 1 ) m e l a p or ka n
ba hwa e kstra k dar i Holothuria
scabra
di Asia me nunjukkan a ktivita s antimikr oba,
an tibakteri, dan an tijamur.
Ca ndi da ada lah f l ora n or mal p ada sal ura n pen cernaa n, se lap u t mu kosa , sa luran
pernafasan, vagina, ure tra, kuli t, dan di bawah kuku. C. albi cans dapa t menjadi pa togen
d a n m e n y e b a b k a n i n f e k s i s e p e r t i s e p t i k e m i a , e n d o k a r d i t i s , a t a u m e n i n g i t i s ( S i m a t u p a n g,
2008). Penya kit infe ksi pada manusia ya ng disebabkan ole h jamur di Indonesia ma sih
re la tif ti ngg i dan oba t an tija mur re la tif l ebi h sedi ki t d ib an di ng kan de ngan a n tiba kter i, ole h
karena itu perlu dilakukan pengembangan. Pengobatan terhadap
C. albicans dapat
menggunakan anti jamur berbahan kimia. Namun dapa t meni mbul kan resistensi dan efek
samping, kare na itu per lu dila kukan pe nelitia n mengena i a ntijamur berba han ala mi da n
te r ipa ng pa sir .
Antijamur
alami
dapat
ditemukan
dalam
tubuh
teripang.
Ekstrak
teripang
mengandung senyawa triterpen glikosida baru, bersama dengan 2 glikosida yang telah
dikenal yaitu holothurin A dan holohurin B telah diidentifikasi dari fraksi n butanol.
Senyawa holothurin B menunjukkan aktivitas antijamur yang lebih balk melawan 20 is olat
jamur secara in vitro. Holothu ria scab ra secara spesifik mengandung sapogenin stero id,
triterpen glikosida, dan holostan yang berfungsi sebagai antibakteri, antimikroba, dan
an tijam ur (Bordbar et a l., 2011).
Penelitian
dikembangkan bila
mengenai
teripang
sebagai
bioaktif
di
Indonesia
masih
perlu
dibandingkan dengan penelitian mancanegara. Penelitian khasiat
te r ipa ng di Indone sia a ntara la in seba ga i pe na mbah vita lita s (Nur ja na h et al., 2007'.
antibakteri
(Aryantina
2002),
mengobati
rematik
dan
osteoarthtritis,
antiinflamasi.
p e n ye mb u ha n l u ka se tel ah op era si (Ma ja la h Demer sa l , 2007). Ka r e na i tu pe r lu l e b i h lag
dilakukan penelitian -penelitian mengenai khasiat lainnya dar i ter ipang, misalnya sebaga
a n tija m ur a la mi .
Kemudahan memperoleh ekstrak dari
H. scabra menjadi salah satu faktor
pe ndukung dalam pe ne litia n ini. Na sution (2010) me nye butka n bahwa ha nya tiga ge nus
ya ng ditemukan di perairan pantai Indonesia . Ketiga genus tersebut adalah Holothuria,
Mulle ria, Stichopus. Dar i ke tiga ge nus te r sebut ditemukan se ba nya k 23 spe sie s, sa lah
sa tunya adalah H. scabra. Arl yza (2009) menuli s, teripang yang di temukan d i Indone sia
dapa t dika ta kan je nis a sli te ripa ng Indone sia, se dikitnya a da 26 je nis te rma suk orde
Aspidochir otida a ta u De ndr ochir otida . Bor dbar et al. , (2011) me namba hka n, H. s c abs z
a ta u yang me mi li ki na ma la in s an df is h ter sebar di Afr ika, La u t Merah , Lau t Ch in a Se la ta Samudera Pasifik bagian Selatan, Asia Tenggara, dan Samudera Hindia.
P en e li ti an i ni ber tu jua n un tu k men g ka ji i sol a si da n ka n du ng an b i oa kti f H . s cabr a
de nga n pelar ut ya ng berbe da, ser ta me nge tahui a ktivitas a ntijamur e kstra k H . sca bra
dengan pelarut dan konsentr asi yang ber beda ter hadap jamur C. albicans.
324
Prosiding Seminar Nasional Bi ote knolog i Ke lautan dan Perikanan 2012
M ET OD E PE NE L IT I AN
Ma ter ia l:
Jamur u ji yang diguna kan dalam peneli tian ini adalah kul tur murni jamur Ca ndida
albicans
yang diperoleh dari Balai Laboratorium Kesehatan Semarang. Media yang
diguna ka n untuk isola si, pe r tumbuhan ja mur , da n pe ngujia n a ktivita s a ntija mur adalah
S D A ( d e k s tr o s a , p e p t o n ca s e in , a g a r ba kt e r i ol o g i s ) da n PD B ( k e n t a ng , g lu k o s a ) . S e la in i t u ,
d i gu na ka n j ug a me tan ol , e til a s e ta t, dan n h e ks a n se ba ga i kon tr ol n eg a tif . Bah a n u n tu k
pengujian kandungan bioaktif adalah Pereaksi
Dragendorf, Pereaksi
Mayer, CHCI 3,
Le mpe ng Mg , A myl al c oh ol , HC I p e ka t, aqu ad e st.
A l a t ya n g d ig u na kan da la m pe ne l i ti an in i ad al ah Sol a r D rye r, Lab u Erle nm e ye r,
Gela s ukur , Rotary e vaporator, Labu Round bottom Flask, Timba ngan analitik, Pipe t te te s,
Mi kr opipet, In kuba tor, Jaru m ose, Pisau, Vial , Cor ong, Pengadu k, Tabu ng reaksi , Pisau ,
Re friger ator , P in se t, Cawa n Pe tr i, Jang ka sorong .
Me tode
Metode
penelitian
yang
digunakan
pada
penelitian
ini
adalah
metode
e x pe r im e nt a l l ab o r a to r i e s. Pe ne l i t ia n ya ng d i la k u k a n d ib a g i me n ja d i du a t a h a p . P e ne l i t ia n
tahap I, mengekstrak senyawa bioaktif Holothuria scabra, dan mengidentifikasi pelarut
terbaik untuk mengisolasi senyawa antijamur. Tahapan dari proses ekstraksi adalah
mer endam H. scabra dalam air tawar selama 1 har i, mencuci dan member sihkan isi per ut
H. scabra , me motong motong da gin g H. scab ra kemudi an di ker in g kan me ngg unakan sola r
-
d r y e r . H. s c ab r a k e r in g di ma s e r a s i de ng a n 3 p e la r u t y a ng b e r b e d a ( me t a n o l , e t il a s e ta t , n
heksan) masing-masing dengan per bandingan 1:4 selama 48 jam. Filtrat kemudian
d ie vap ora si me ngg una kan rota ry e vaporat or de ngan suh u 40 °C. Uji a kti vi ta s a n ti ja mur
me ng gu na ka n me tod e d i sc d i ffusion aga r de ng an kon sen tra si e kstra k 3 mg /ml , 6 mg /ml ,
dan 9 mg/ml menggunakan pelarut yang berbeda dan dilakukan secara triplo. Uji kon trol
n ega ti f men ggu na kan p elar ut me tan ol, eti l a se ta t, n he ksan . I n kuba si dil aku kan sela ma 48
jam, zona ha mba t d i se ki tar p ape rd isc d iu kur me ngg una ka n jang ka sor ong se tiap 24 jam.
Peneli tian tahap II, mengu ji a ktivi tas anti jamur dari e kstrak H. scab ra dari pelaru t
dan konsentrasi terbaik yaitu metanol 6 mg/ml, maka dibuat 3 konsentrasi dengan
interva l yang Iebih kecil yaitu 5 mg/ml, 6 mg /ml, dan 7 mg /ml dalam pelarut metanol.
Inkubasi dilakukan selama 48 jam, zona hambat diukur menggunakan jangka sorong
Prosiding I Se minar Na sional Bi ote kn olog i Ke lautan dan Perikanan 2012
325
setiap 24 jam. Uji kandungan bioaktif mengacu pada metode skrining fitokimia yait u
menguji keberadaan senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, steroid, dan triterpen.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi Sampel
Teripang pasir ( H o l o t h u r i a
s c a b r a ) diper oleh dari pe raira n utara Panta i Jawa
berbentuk bula t panjang dengan corak abu -abu kecokla tan dan memiliki gura t-gurat
be r wa r na hita m di bagia n punggungnya . Ba gia n pe r ut ber war na putih da n di se lur uh
permukaan tubuhnya terdapat bintik-bintik kasar, bila disentuh terasa seperti pasir_
Se tela h disia ngi, diper oleh bera t H . s c a b r a ber sih ada lah 3.200 gram ya ng kemudian
dipotong -potong kecil dan dike ringka n. P r ose s penger ingan be rlangsung se lama 5 had_
B e r a t H . s c a b r a k e r in g 5 6 0 g r a m , b e r a r t i r e n d e m e n n y a s e be s a r 1 7 , 5 % . K e n a m p a k a n f i s i k
te r ipa n g p as i r ya ng su da h ke ri ng ya i tu ke ra s, ka ku , ke c okla ta n , se d i ki t b erb a u a mi s, dan
se dikit me nga ndung lapisa n kapur pa da per muka an tubuhnya.
Pelarut
N heksan
Etil
ase tat
Me tanol
T a b e l 1 . Ha s i l Pr o se s E k s t r a k s i H . s c a b r a
Be ra t e kstra k
V o l u me fi l t r a t
Bentuk
Warna
(gr)
(ml)
Bau
2240
2240
1,096
0,832
Cair
Pasta
Cokla t aga k tua
Cokla t tua
Amis
Amis
2240
2,786
Pasta
Cokla t tua
Amis
H . s c a b r a yang diekstrak dengan berbagai pelarut akan menghasilkan senyawa
sesuai dengan tingkat kepolarannya. Pada pelarut metanol akan mengambil senyawa
yang bersifat polar, etil asetat akan mengambil senyawa yang bersifat semi polar dan
he ksan a ka n me nga mbil se nya wa ya ng be r sifa t non polar da ri sa mpel. Pe nggunaa n
pe lar ut dia ta s dipilih untuk me ndapa tka n tar ge t senyawa ya ng te pa t se bagai a ntija mu Seperti yang di sebutkan Ernawati (2007), bahwa metode ekstra ksi tergantung
pada
pol a ri tas sen ya wa yan g a ka n d ie kstr a k. S ua tu se n ya wa me nu n ju kka n ke la ru ta n y an g
b e r b e d a p a da p e l a r u t y a n g b e r b e da k e po l a r a n n y a . P e la r u t s e m i p o l a r m i s a l n y a e t i l a s e t a - t
dapat menarik senyawa fenol dan terpenoid, sedangkan pelarut polar seperti metanol
dapat menarik senyawa alkaloid kuartener, komponen fenolik, karotenoid, dan tannin
R i gu era da la m Ern aw a ti (2007) me n amba h ka n , se n ya wa yan g d apa t ter i ka t pa da pe la ru t
me tanol adalah sap onin , alkal oid, p ol yhidroksisteroid .
326
P r osi d in g I Se min ar Na si on a l Bi ote kn ol ogi Ke la u tan da n Per i kan an 2012
F i l t r a t h a s i l m a s e r a s i H. s c a b r a d e n g a n k e t i g a p e l a r u t d i e v a p o r a s i d e n g a n r o t a r y
ev aporat or. Pr insip rot ary ev aporat or ya itu menguapka n pe la rut de ngan mer ota sika n
atau memutar labu sebagai wadah filtrat untuk memperoleh endapan ekstrak. Suhu yang
digunakan dalam penguapan ini ad alah 40°C agar senyawa bioaktif tidak rusak. Sesuai
dengan pernyataan Harbourne (1987), bahwa penggunaan r otavapor vakum untuk
memekatkan lar utan hasil ekstr aksi dengan volume yang kecil, sebaiknya menggunakan
s uhu 30- 4 0 ° C.
Uji Aktivitas Antijamur
Ha sil pe ng u kura n zona h amba t u n tu k kon tr ol neg a tif p e lar u t me ta n ol , e ti l a se tat,
dan n he ksa n ter ha da p C. albic ans, ter liha t ba hwa dia me ter zona ha mba t ber nila i 0 cm,
ya ng berarti bahwa ketiga pelarut ter sebut tida k memiliki senyawa antijamur se hingga
t ida k da pa t me ngha mba t pe r t umbuha n C. a lb ic ans.
Ta be l 2 . Ha s il uj i ta ha p I
Pelarut
N heksan
E til a se ta t
Me tanol
I nkuba si
Zona ha mba t (mm)
3 mg/mI
6 mg/ml
24 jam
0
0
9 mg/m I
0
48 jam
0
0
0
24 jam
2,74 + 1,11
1,85 + 0,28
2,37 + 0,45
48 jam
2,54 + 1,20
0,93 + 0,15
2,47 + 0,51
24 jam
3,43 + 0,38
10,23+ 0,64
5,23 + 1,08
48 jam
1,07 + 0,72
7,03 + 1,25
3,55 + 0,53
Keterangan:
Da ta tersebu t sudah d ikurangi diame ter pa p er disc sebesar 0, 60 cm
Data merupakan hasil rata -rata dari tiga kali ulangan ± standar deviasi
B e r d a s a r k a n h a s i l p e n e l i t i a n t a h a p I , e k s t r a k n h e k s a n H. s c a b r a t i d a k m e m b e n t u k
zona hambat, hal in i dapat di sebabkan karena sifat n heksan hidrof obi k sehingga zat akt if
ya ng dapa t ditariknya juga bersifa t hidrof obik. Senyawa yang bersifat hidrof obik tida k
dapat berdifusi ke media agar karena penyusun media agar itu adalah air. Dalam
pembua tan media SDA , bubu k SDA dilaru tkan dalam aquadest. Menuru t Ernawa ti (2007),
sen ya wa yang dapa t d i tari k ole h pe laru t n on p olar mi sa ln ya h eksa na ada lah hidrokarb on ,
a sam l ema k, a se tog en i n , d a n te rp en .
Prosiding I Seminar Nasional Bioteknologi Kelautan dan Perikanan 2012
Sen yawa an ti jamur pada teripang diduga ber sifat p olar karena laru t dalam pelaru t
metanol, terbukti dari kemampuan ekstrak tersebut dalam menghambat petumbuhan
ja mur d i med ia S DA , se per ti d al am pe ne l i tia n Ab ra ha m (2002) ya ng me ng g un a ka n p el ar ut
polar untuk menguji aktivitas antijamur dan antibakteri dari Holothuria, begitu juga
dengan Thanh (2006) yang mengisolasi senyawa triterpen dari teripang pasir di Vietna
menggunakan pelarut polar dan terbukti berfungsi sebagai antijamur, antibakteri, da
a ge n sitotoksik.
Dari ke tiga pe larut yang diguna kan pada uji tahap I dapat d iliha t bahwa pelarut
te rbaik untuk me nge kstr a k za t a ntijamur adalah me tanol de nga n konsentra si 6 mg/mI
ka re na men gh a si l kan zon a ha mba t te rbe sar , ba l k i n kuba si 24 ma up u n 48 ja m. S e h in gg a
p e n e l i t i a n t a h a p I I m e n g g u n a k a n p e l a r u t m e t a n o l d e n g a n k o n s e n t r a s i 5 mg/ml, 7
mg /ml da n ha sil n ya te r sa ji p ada Tab el 3 .
Ta bel 3. Hasil u ji ta hap II de nga n pel aru t me tan ol
Zona hambat (mm)
Inkubasi
5 mg/mI
6 mg/mI
24 jam
5,1 + 0,56
8 , 42 + 0 ,7 1
48 jam
3,5 + 0,52
7 , 71 + 0 ,5 3
7 mg/mI
10,1 + 0,59
8,9 + 0,60
Terjadi penurunan zona hambat antara jam ke -24 dan jam ke-48, yang bera
ekstrak H. scabra bersifat fungistatik atau menghambat pertumbuhan jamur. Hal i
se sua i ha sil penelitia n Ka swa ndi et al. (2000) ya ng membuktika n e kstra k mur ni ter ipa
dapat menghambat pertumbuhan mikroba. Rahmah dan Aditya (2010) menambahkan
sen ya wa yan g be rsifa t fu ngi sta tik misal n ya se n yawa fen ol i k dapa t men dena tura si pr otei
ya i tu ke ru sa ka n str u ktur te r sier p r ote in se h i ng ga p r ote i n ke h il an ga n si fa t - si fa t a sl i n ya _
Ter denatur asinya pr otein dinding C. albicans akan menyebabkan ker apuhan pada din ding
se l te r se but se hingga muda h dite mbus za t a ktif Ia innya ya ng be r sifa t f ungista tik. Jika
pr o tein yang ter denatur asi adalah pr o tein enzi m ma ka enz im tida k dapat bek er ja yang
menyeba bkan me tabolisme da n pr oses pe nyerapan nutr isi ter ganggu.
Rata -rata zona hambat yang terbentuk d ari konsentrasi 5, 6, dan 7 mg/ml b e r k i s a a n t a r a 5 — 1 0 mm , me n un j u k k a n e k s tr a k H . s c ab r a b e r p o t e n si s e da n g da la m me n gh a m ba t
pertumbuhan jamur, sesuai dengan penggolongan Ernawati (2007), kekuatan antibio
a ta u a n tiba kter i j i ka z ona ha mba tn ya l ebih dar i 20 c m berar ti a kti vi tasn ya sa nga t kua t, 10 2 0
mm memili ki akti vi tas kuat, 5 - 10 mm memil iki a ktivita s sedang, zona hambat di bawah 5
mm atau kurang berarti aktivitas antijamurnya lemah.
328
Prosiding I Seminar Nasional Bioteknologi Kelautan dan Perikanan 2012
•
Uji Kandungan Bioaktif
Uji kandungan bioaktif adalah uji secara kualitatif untuk mengetahui senyawa
ya n g ter kan d un g da la m e kstra k H. sc abr a. Uji ka nd un ga n b i oa kti f men ga cu p a da me tode
skrin ing fi tokimia . Hasil u ji kand ungan bioaktif tersaji pada Tabel 4.
Tabel
4.
Hasil
Uji
Bioaktif
Kandungan
No.
1.
Uji
Alkaloid
Metanol
+
2.
3.
Saponin
Flavonoid
+
4.
Steroid
5.
Tr ite rpenoid
Etil asetat
Ekstrak
H.scabra
Keter an gan
Ekstrak methanol terdapat e nda pa n
pu tih
+
-
t e r be ntu k busa
+
+
Tidak terbentuk warna biru
+
+
b e r wa r na m e r a h
Tidak berwarna merah a ta u pu n
o r a n ge
Senyawa yang terkandung dan diduga berperan sebagai antijamur dalam H.
s c abra a da la h alka loid, saponin da n tr iterpen se pe r ti ya ng a da pada e kstrak me ta nol.
Ekstrak etil
antijamurnya
asetat hanya
lebih
kecil
mengandung
daripada
saponin dan triterpen sehingga aktivitas
ekstrak
metanol.
Kemampuan
saponin
sebagai
a nti jam ur di per kua t ol eh C owa n (1999) yan g me n ya ta kan ba hwa sap on in berkon tr ibu si
se ba ga i a ntija mur denga n me kanisme me nurunkan te ga nga n per muka an me mbra n ster ol
d a r i d i n d i n g s e l C. a l b i c a n s , s e h i n g g a p e r m e a b i l i t a s n y a m e n i n g k a t . H a r d i n i n g t y a s ( 2 0 0 9 )
menambahkan, saponin merupakan golongan senyawa
yang dapat menghambat atau
membunuh mikroba dengan cara berinteraksi dengan membran sterol. Efek utama
saponin terhadap bakteri adalah adanya pelepasan protein dan enzim dari dalam sel.
Saponin dihasilkan sebagai s alah satu bentuk mekanisme per tahanan dir i secar a
kimiawi ba g i ter ipa ng d i a la m. Selain d id uga se bag ai per ta ha na n d ir i da ri pre dator , jug a
diyakini memiliki efek biologis, termasuk diantaranya sebagai anti jamur, sitotoksi k
melawan sel tumor, hemolisis, akti vitas kekebalan tubuh, dan anti kanker (Zha ng et al.,
2006). Bordbar et a l. (2011) me laporkan , saponin teridentifika si dari timun lau t. Stru ktur
kimian ya cu kup dapat dibandi ngkan dengan bi oaktif gan oderma, ginse ng, dan oba t herbal
lainnya. Saponin menunjukka n spe ktrum ya ng lua s sebaga i he molisis, sitosta tik, da n
antikanker.
Adanya
memungkinkan
satu
atau
lebih
kemampuan
senyawa
antijamur
bioaktif
semakin
dalam
besar.
tubuh
Hannifa
teripang
et
al.
juga
(2010),
menambahkan, interaksi dari senyawa sap onin dan al kaloid did uga me nimbul kan efek
antijamur, walaupun me kanismenya masih memerlukan penelitian lebih lanjut. Riguera
(1997) dalam Nur janah, et al.
(2011), men yata kan komponen p olar yang terdapat pad
inver tebra ta la ut didomina si ole h ga ram - gar am a lka loid, a sa m a mino, polihidr oste r oid
dan
saponin.
Menurut
Gholib
(2009),
alkaloid
merupakan
senyawa
yang
bersifat
antimi kroba , ya itu menghamba t esterase dan DNA serta RNA p ol ymerase, menghamba t
respirasi set. Alkaloid merupakan aktivator kuat bagi set imun yang menghancurkan
ba k te r i, vir u s, j a mur , da n se t ka nke r .
Beberapa
hasil
penelitian
menunjukkan
senyawa
terpenoid
memiliki
aktivit
se ba ga i antimikr oba ya itu monoterpenoid lina lool, dite rpe noid ( - ) hardwicklic
acid,
phyt ol, tri terpenoid saponin dan tri terpenoid g ti kosida (G unawan, 2008). Thanh (2006)
juga telah berhasil mengisotasi triterpen gtikosida dari teripang pasir yang terbukti
m a m p u m e n j a d i a g e n a n t i j a m u r , a n t i b a k t e r i , d a n s i t ot o k s i k . W e i H u a e t a l . ( 2 0 0 8 ) d a l a m
Mokh l e si e t a l. (2011) me n e l i ti b a hw a tr i ter pe n g ti kosid a ya ng d i i sol a si d ar i H. a xi l og a
mampu me lawan ja mur C. albicans, Cryptococcus ne oformans dan Aspe rgillus fumigate s.
Triterpen gtikosida dapat dimurnikan menjadi holothurin yang ber sifat toksik se hingga
mamp u digunakan sebaga i antijamur.
C oll dan Sammarco (1983) dalam Hardining tyas (2009) menambahkan senyawa
terpen dapat digunakan dalam bidang farmasi sebagai antibiotika, anti jamur, dan
senya wa anti tumor . Demikian pula dika ta ka n Bordbar et al. (2011), ba hwa timun ta ut
ka ya akan g ti kosida teru tama tri terpen gti kosida yang terbukti memi li ki akti vi tas an tijamur
dan antitumor. Triterpen gtikosida dan gtikosida lainya seperti holothurin A dan B,
ter iden tif i kasi dari fra ksi n -bu ta nol . Holoth uri n B me n u nju kkan a kti vi ta s an tijamu r in vi tr o
yang lebih balk melawan 20 jenis jamur.
Sen yawa anti jamur alami dari teripang dan hewan laut lain nya men jadi salah sa tu
sumber oba t antija mur bar u yang dapat dikembangka n kare na pote nsinya yang be sar,
se pe r ti d i la p or ka n Mur n ia sih (2005) b a h w a ti ng ka t ker aga ma n ya ng ti n gg i da n ke u n i ka n
se nyawa baru yang di temu kan dalam organi sme laut merupa kan pengaruh dari tinggi nya
b i odi ver sitas orga ni sme lau t. Pen garu h l in g kun gan la u t seper ti kada r garam, re ndah n ya
intensitas
cahaya,
a da n y a
menghasilkan
metabolit
organisme
darat.
berasal
di
dari
Ada
organi sme
arus,
m a up un
sekunder
kompetisi
yang
struktur
kecenderungan
laut
di
yang
bahwa
daerah
kuat
mendorong
kimianya
relatif
sumber
terbesar
tr opi k,
khususn ya
organisme
I
berbeda
den
substansi
bioa
Indo -Pasifi k.
KESIMPULAN
Berda sar ka n ha sil dan pemba ha san ma ka dapa t diambil ke simpulan bahwa me tanol
a da la h pe la r ut te r ba i k u n tu k me ng is o la s i se ny a wa a n t ija mur da r i H o l o t hur i a s c a b ra y a i tu
sen ya wa
a l kal oi d,
sap on in ,
ster oid,
dan
tr i terpe n.
Penggunaan
kon se n trasi
terba i k
e kstra k H . sca bra u ntu k u ji akti vi tas antijam ur adalah 7 mg/m l da lam pelaru t metan ol.
DAFTAR PUSTAKA
Arlyza, IS. 2009. Teripang dan Bahan Aktifnya. Oseana Vol XXXIV No 4 tahun 2009.
Ja ka r ta .
Aryantina, P L. 2002. Ekstraksi Komponen Antibakteri dari Teripang dan Pengujian
A ktivi ta sn ya seba gai A n tiba kte ria . (S kr ip si ). In sti tu t Per ta nia n Bog or , Bog or.
Bordbar, S., Farooq Anwar, and Nazamid Saari. 2011. High -Value Components and
Bioactives from Sea Cucumbers for Functional Foods—A Review.
www.mdp i.com/iourna l/mar inedrugs (28 Janua ri 2012)
Dahuri R . 2005. Me ngga li Bahan Ba ku Oba t di da lam Laut. De par teme n Per i kana n dan
Kelautan.
D.
2 0 09 .
Uj i
Da ya
Ha mba t
Da un
Se ngga ni
Te r ha da p
T ry c hop hyt o n
m e nta g ro p hyte s dan Candida albicans. Be rita Biologi 9 (5).
Har b or ne , J . B. 1987. Me tod e Fi toki mi a . In sti tu t Te kn ol og i Ban d un g , Ba n du ng .
Ha r dini ngt ya s , S .D. 2 00 9. A kti vi ta s An tiba k te r i Ek str a k Ka r a ng L una k Sa r c op hy t on sp. ya ng
Gh olib,
Difragmentasi dan Tidak Difragmentasi di Perairan Pulau Pramuka, Kepulauan
Seribu . (S krip si ) Insti tu t Pertanian Bog or, Bogor .
Jawahar, A.T.; Nagarajan, J.; Shanmugam, S.A. Antimicr obial Substance s of Potential
Bi om ed i ca l I m p or tan ce fr om H ol oth ur ian S pe ci e s. I n di an J . M ar . Sc i . 2002, 31,
1 6 1 164.
Ka swa nd i MA, Lian HH, N ur za kiah S, R idzwan BH, Uja ng S, Sa msud in S, Ja sniza t S, All
AM.
M urn ia si h, T . 2005. S ub stan si Ki mia Un tu k Per ta hana n Diri dar i Hewa n La u t tak Ber tu lan g
Be la ka ng. Osea na V olume XXX No 2,2005: 19 -27
Nasution, RD. 2010. lsolasi dan Identifikasi Senyawa Sapogenin. Universitas Sumatera
Utara
N urja nah S , E Gu mbira -Sa 'id , Kha sw ar S ya msu, Su pri ha tin , d an Etty Ria ni . 2007. Pe ngar uh
Tepung Teripa ng Pa sir ( H o l o t h u r i a s c a b r a ) Ter ha dap Per ila ku Seksua l Dan Kadar
Te stosteron Darah Mencit. IPB, Bogor.
Nur janah, Laili Izzati, dan Asadatun Abdullah. 201 1. Akti vitas Anti oksidan dan Komponen
Bioaktif Kerang Pisau ( S o l e n
spp). Jurnal Ilmu Kelautan IPB Bogor September
2011. Vol. 16 (3) 119-124
Rahmah, N . dan Adi tya R. K. 2010. Uji Fungi sta ti k Ekstrak Daun Sirih Terhadap Candica
Ib icans. Bi oscien tiae vol 7 no 2, Ju li 2010.
Si matupang MM. 2008. Candida A lbicans. Departemen Mi krob iol ogi fa kul tas Ked oktera^
Univer sitas Suma tera Utara.
332
Pr osiding I Seminar Nasional Bioteknologi Kelautan dan Per ikanan 201 2
BIOTEKNOLOGI KELAUTAN dan PERIKANAN TAHUNAN Ke-1
Penguatan Kapasitas Riset Bioteknologi untuk Mendukung Industrialisasi Kelautan dan
Perikanan
© Universitas Diponegoro 2013
Hak Cip ta d il indu ngi o leh Undang -un dang
Editor:
Tri Winarni Agustini, Ekowati Chasanah, Fronthea Swastawati, Agus Trianto, M.Nursid, Su bag i y o
Penyunting:
Marku s Pr ima, R is ki Ika Dewi, N.A. Ra tnan ingt yas
Perpus takaan Nas io nal RI : Katal og Da lam Terb itan ( KDT)
Vol. 1
ISBN. 978 — 602 — 17885 — 0 — 9
Diterbitkan oleh:
FP I K, U n iv er s ita s Di p one g or o
JI. Pro f.S oedar to, SH, Semaran g - 50275
Dilarang memperbanyak sebagian atau seluruh isi buku ini tanpa ijin dari penerbit
UJI BIOAKTIVITAS EKSTRAK TERIPANG PASIR (Holothuria scabra)
TERHADAP JAMUR Candida albicans
Eu n i ke N ovia na Pr an oto, W id od o Far id Ma'r u f, De li ani s Pr in gg en i es
Juru san Perikanan , Fakul tas Perikanan dan I lmu Kelau tan, Uni versi tas Dip oneg oro
ABSTRAK
Te r ipang dapa t dite muka n di per a ir a n Indone sia . Te ripa ng dike ta hui me miliki za t ya ng
salah satunya berfungsi sebagai antijamur. Penyakit infeksi pada manusia yang
disebabkan ole h jamur Candida albicans di Indonesia masih rela tif tinggi dan oba t
an tijamur rela tif leb ih sedi ki t dibandi ngka n dengan an tibakteri. Peng obatan terhadap C.
albicans secara kimia dapat menimbulkan resistensi dan efek samping. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui pengaruh penggunaan pelarut dan konsentrasi yang
berbeda dari ekstrak Holothuria
scabra terhadap C. albicans serta mengetahui
k a n d u n g a n s e n y a w a b i o a k t i f d a l a m H . s c a b r a . H a s i l p e n e l i t i a n d i da p a t k a n b a h wa p e l a r u t
terbaik untuk mengisolasi senyawa antijamur H. scabra adalah me tanol. Konse ntrasi
e kstra k 5 mg/ml, 6 mg/m1,7 mg/ml me ngha silka n zona ha mba t ber turut - tur ut se be sar 5,1
+ 0, 5 6 mm; 8, 4 2 + 0, 71 m m; 10 ,1 + 0 ,5 9 mm . Ha sil u ji ka ndunga n bi oa k tif me mpe r li ha t kan
bahwa ekstrak
H.
scabra
mengandung
senyawa alkaloid, saponin, steroid dan
triterpenoid. Ada indikasi potensi antijamur pada ekstrak H. scabra.
Kata kunci : H. scabra, antijamur, C. albicans, bioaktif
PENDAHULUAN
Teripang merupa kan salah sa tu angg ota hewan berkulit dur i (Echinodermata ).
Menurut Dahuri (2005), Depar temen Kelautan dan Perikanan menjadikan bi ote knologi
kelautan sebagai program unggulan sejak tahun 2002. Bioteknologi kelautan yang
ber ke mba ng pe sa t ber tu jua n mema nfaa tka n bi ota lau t, d enga n e kstra ksi sen ya wa
bi oaktif sebagai obat- obatan.
Terip ang pa sir (Hol ot huria scab ra) berp ote nsi me njadi su mber b i ofarma baru
m e la lu i pr o s e s pe m i sa ha n se n y a wa a k t if a t a u e k s t r a k s i . B or db a r e t a l . ( 2 0 1 1 ) m e l a p or ka n
ba hwa e kstra k dar i Holothuria
scabra
di Asia me nunjukkan a ktivita s antimikr oba,
an tibakteri, dan an tijamur.
Ca ndi da ada lah f l ora n or mal p ada sal ura n pen cernaa n, se lap u t mu kosa , sa luran
pernafasan, vagina, ure tra, kuli t, dan di bawah kuku. C. albi cans dapa t menjadi pa togen
d a n m e n y e b a b k a n i n f e k s i s e p e r t i s e p t i k e m i a , e n d o k a r d i t i s , a t a u m e n i n g i t i s ( S i m a t u p a n g,
2008). Penya kit infe ksi pada manusia ya ng disebabkan ole h jamur di Indonesia ma sih
re la tif ti ngg i dan oba t an tija mur re la tif l ebi h sedi ki t d ib an di ng kan de ngan a n tiba kter i, ole h
karena itu perlu dilakukan pengembangan. Pengobatan terhadap
C. albicans dapat
menggunakan anti jamur berbahan kimia. Namun dapa t meni mbul kan resistensi dan efek
samping, kare na itu per lu dila kukan pe nelitia n mengena i a ntijamur berba han ala mi da n
te r ipa ng pa sir .
Antijamur
alami
dapat
ditemukan
dalam
tubuh
teripang.
Ekstrak
teripang
mengandung senyawa triterpen glikosida baru, bersama dengan 2 glikosida yang telah
dikenal yaitu holothurin A dan holohurin B telah diidentifikasi dari fraksi n butanol.
Senyawa holothurin B menunjukkan aktivitas antijamur yang lebih balk melawan 20 is olat
jamur secara in vitro. Holothu ria scab ra secara spesifik mengandung sapogenin stero id,
triterpen glikosida, dan holostan yang berfungsi sebagai antibakteri, antimikroba, dan
an tijam ur (Bordbar et a l., 2011).
Penelitian
dikembangkan bila
mengenai
teripang
sebagai
bioaktif
di
Indonesia
masih
perlu
dibandingkan dengan penelitian mancanegara. Penelitian khasiat
te r ipa ng di Indone sia a ntara la in seba ga i pe na mbah vita lita s (Nur ja na h et al., 2007'.
antibakteri
(Aryantina
2002),
mengobati
rematik
dan
osteoarthtritis,
antiinflamasi.
p e n ye mb u ha n l u ka se tel ah op era si (Ma ja la h Demer sa l , 2007). Ka r e na i tu pe r lu l e b i h lag
dilakukan penelitian -penelitian mengenai khasiat lainnya dar i ter ipang, misalnya sebaga
a n tija m ur a la mi .
Kemudahan memperoleh ekstrak dari
H. scabra menjadi salah satu faktor
pe ndukung dalam pe ne litia n ini. Na sution (2010) me nye butka n bahwa ha nya tiga ge nus
ya ng ditemukan di perairan pantai Indonesia . Ketiga genus tersebut adalah Holothuria,
Mulle ria, Stichopus. Dar i ke tiga ge nus te r sebut ditemukan se ba nya k 23 spe sie s, sa lah
sa tunya adalah H. scabra. Arl yza (2009) menuli s, teripang yang di temukan d i Indone sia
dapa t dika ta kan je nis a sli te ripa ng Indone sia, se dikitnya a da 26 je nis te rma suk orde
Aspidochir otida a ta u De ndr ochir otida . Bor dbar et al. , (2011) me namba hka n, H. s c abs z
a ta u yang me mi li ki na ma la in s an df is h ter sebar di Afr ika, La u t Merah , Lau t Ch in a Se la ta Samudera Pasifik bagian Selatan, Asia Tenggara, dan Samudera Hindia.
P en e li ti an i ni ber tu jua n un tu k men g ka ji i sol a si da n ka n du ng an b i oa kti f H . s cabr a
de nga n pelar ut ya ng berbe da, ser ta me nge tahui a ktivitas a ntijamur e kstra k H . sca bra
dengan pelarut dan konsentr asi yang ber beda ter hadap jamur C. albicans.
324
Prosiding Seminar Nasional Bi ote knolog i Ke lautan dan Perikanan 2012
M ET OD E PE NE L IT I AN
Ma ter ia l:
Jamur u ji yang diguna kan dalam peneli tian ini adalah kul tur murni jamur Ca ndida
albicans
yang diperoleh dari Balai Laboratorium Kesehatan Semarang. Media yang
diguna ka n untuk isola si, pe r tumbuhan ja mur , da n pe ngujia n a ktivita s a ntija mur adalah
S D A ( d e k s tr o s a , p e p t o n ca s e in , a g a r ba kt e r i ol o g i s ) da n PD B ( k e n t a ng , g lu k o s a ) . S e la in i t u ,
d i gu na ka n j ug a me tan ol , e til a s e ta t, dan n h e ks a n se ba ga i kon tr ol n eg a tif . Bah a n u n tu k
pengujian kandungan bioaktif adalah Pereaksi
Dragendorf, Pereaksi
Mayer, CHCI 3,
Le mpe ng Mg , A myl al c oh ol , HC I p e ka t, aqu ad e st.
A l a t ya n g d ig u na kan da la m pe ne l i ti an in i ad al ah Sol a r D rye r, Lab u Erle nm e ye r,
Gela s ukur , Rotary e vaporator, Labu Round bottom Flask, Timba ngan analitik, Pipe t te te s,
Mi kr opipet, In kuba tor, Jaru m ose, Pisau, Vial , Cor ong, Pengadu k, Tabu ng reaksi , Pisau ,
Re friger ator , P in se t, Cawa n Pe tr i, Jang ka sorong .
Me tode
Metode
penelitian
yang
digunakan
pada
penelitian
ini
adalah
metode
e x pe r im e nt a l l ab o r a to r i e s. Pe ne l i t ia n ya ng d i la k u k a n d ib a g i me n ja d i du a t a h a p . P e ne l i t ia n
tahap I, mengekstrak senyawa bioaktif Holothuria scabra, dan mengidentifikasi pelarut
terbaik untuk mengisolasi senyawa antijamur. Tahapan dari proses ekstraksi adalah
mer endam H. scabra dalam air tawar selama 1 har i, mencuci dan member sihkan isi per ut
H. scabra , me motong motong da gin g H. scab ra kemudi an di ker in g kan me ngg unakan sola r
-
d r y e r . H. s c ab r a k e r in g di ma s e r a s i de ng a n 3 p e la r u t y a ng b e r b e d a ( me t a n o l , e t il a s e ta t , n
heksan) masing-masing dengan per bandingan 1:4 selama 48 jam. Filtrat kemudian
d ie vap ora si me ngg una kan rota ry e vaporat or de ngan suh u 40 °C. Uji a kti vi ta s a n ti ja mur
me ng gu na ka n me tod e d i sc d i ffusion aga r de ng an kon sen tra si e kstra k 3 mg /ml , 6 mg /ml ,
dan 9 mg/ml menggunakan pelarut yang berbeda dan dilakukan secara triplo. Uji kon trol
n ega ti f men ggu na kan p elar ut me tan ol, eti l a se ta t, n he ksan . I n kuba si dil aku kan sela ma 48
jam, zona ha mba t d i se ki tar p ape rd isc d iu kur me ngg una ka n jang ka sor ong se tiap 24 jam.
Peneli tian tahap II, mengu ji a ktivi tas anti jamur dari e kstrak H. scab ra dari pelaru t
dan konsentrasi terbaik yaitu metanol 6 mg/ml, maka dibuat 3 konsentrasi dengan
interva l yang Iebih kecil yaitu 5 mg/ml, 6 mg /ml, dan 7 mg /ml dalam pelarut metanol.
Inkubasi dilakukan selama 48 jam, zona hambat diukur menggunakan jangka sorong
Prosiding I Se minar Na sional Bi ote kn olog i Ke lautan dan Perikanan 2012
325
setiap 24 jam. Uji kandungan bioaktif mengacu pada metode skrining fitokimia yait u
menguji keberadaan senyawa alkaloid, flavonoid, saponin, steroid, dan triterpen.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi Sampel
Teripang pasir ( H o l o t h u r i a
s c a b r a ) diper oleh dari pe raira n utara Panta i Jawa
berbentuk bula t panjang dengan corak abu -abu kecokla tan dan memiliki gura t-gurat
be r wa r na hita m di bagia n punggungnya . Ba gia n pe r ut ber war na putih da n di se lur uh
permukaan tubuhnya terdapat bintik-bintik kasar, bila disentuh terasa seperti pasir_
Se tela h disia ngi, diper oleh bera t H . s c a b r a ber sih ada lah 3.200 gram ya ng kemudian
dipotong -potong kecil dan dike ringka n. P r ose s penger ingan be rlangsung se lama 5 had_
B e r a t H . s c a b r a k e r in g 5 6 0 g r a m , b e r a r t i r e n d e m e n n y a s e be s a r 1 7 , 5 % . K e n a m p a k a n f i s i k
te r ipa n g p as i r ya ng su da h ke ri ng ya i tu ke ra s, ka ku , ke c okla ta n , se d i ki t b erb a u a mi s, dan
se dikit me nga ndung lapisa n kapur pa da per muka an tubuhnya.
Pelarut
N heksan
Etil
ase tat
Me tanol
T a b e l 1 . Ha s i l Pr o se s E k s t r a k s i H . s c a b r a
Be ra t e kstra k
V o l u me fi l t r a t
Bentuk
Warna
(gr)
(ml)
Bau
2240
2240
1,096
0,832
Cair
Pasta
Cokla t aga k tua
Cokla t tua
Amis
Amis
2240
2,786
Pasta
Cokla t tua
Amis
H . s c a b r a yang diekstrak dengan berbagai pelarut akan menghasilkan senyawa
sesuai dengan tingkat kepolarannya. Pada pelarut metanol akan mengambil senyawa
yang bersifat polar, etil asetat akan mengambil senyawa yang bersifat semi polar dan
he ksan a ka n me nga mbil se nya wa ya ng be r sifa t non polar da ri sa mpel. Pe nggunaa n
pe lar ut dia ta s dipilih untuk me ndapa tka n tar ge t senyawa ya ng te pa t se bagai a ntija mu Seperti yang di sebutkan Ernawati (2007), bahwa metode ekstra ksi tergantung
pada
pol a ri tas sen ya wa yan g a ka n d ie kstr a k. S ua tu se n ya wa me nu n ju kka n ke la ru ta n y an g
b e r b e d a p a da p e l a r u t y a n g b e r b e da k e po l a r a n n y a . P e la r u t s e m i p o l a r m i s a l n y a e t i l a s e t a - t
dapat menarik senyawa fenol dan terpenoid, sedangkan pelarut polar seperti metanol
dapat menarik senyawa alkaloid kuartener, komponen fenolik, karotenoid, dan tannin
R i gu era da la m Ern aw a ti (2007) me n amba h ka n , se n ya wa yan g d apa t ter i ka t pa da pe la ru t
me tanol adalah sap onin , alkal oid, p ol yhidroksisteroid .
326
P r osi d in g I Se min ar Na si on a l Bi ote kn ol ogi Ke la u tan da n Per i kan an 2012
F i l t r a t h a s i l m a s e r a s i H. s c a b r a d e n g a n k e t i g a p e l a r u t d i e v a p o r a s i d e n g a n r o t a r y
ev aporat or. Pr insip rot ary ev aporat or ya itu menguapka n pe la rut de ngan mer ota sika n
atau memutar labu sebagai wadah filtrat untuk memperoleh endapan ekstrak. Suhu yang
digunakan dalam penguapan ini ad alah 40°C agar senyawa bioaktif tidak rusak. Sesuai
dengan pernyataan Harbourne (1987), bahwa penggunaan r otavapor vakum untuk
memekatkan lar utan hasil ekstr aksi dengan volume yang kecil, sebaiknya menggunakan
s uhu 30- 4 0 ° C.
Uji Aktivitas Antijamur
Ha sil pe ng u kura n zona h amba t u n tu k kon tr ol neg a tif p e lar u t me ta n ol , e ti l a se tat,
dan n he ksa n ter ha da p C. albic ans, ter liha t ba hwa dia me ter zona ha mba t ber nila i 0 cm,
ya ng berarti bahwa ketiga pelarut ter sebut tida k memiliki senyawa antijamur se hingga
t ida k da pa t me ngha mba t pe r t umbuha n C. a lb ic ans.
Ta be l 2 . Ha s il uj i ta ha p I
Pelarut
N heksan
E til a se ta t
Me tanol
I nkuba si
Zona ha mba t (mm)
3 mg/mI
6 mg/ml
24 jam
0
0
9 mg/m I
0
48 jam
0
0
0
24 jam
2,74 + 1,11
1,85 + 0,28
2,37 + 0,45
48 jam
2,54 + 1,20
0,93 + 0,15
2,47 + 0,51
24 jam
3,43 + 0,38
10,23+ 0,64
5,23 + 1,08
48 jam
1,07 + 0,72
7,03 + 1,25
3,55 + 0,53
Keterangan:
Da ta tersebu t sudah d ikurangi diame ter pa p er disc sebesar 0, 60 cm
Data merupakan hasil rata -rata dari tiga kali ulangan ± standar deviasi
B e r d a s a r k a n h a s i l p e n e l i t i a n t a h a p I , e k s t r a k n h e k s a n H. s c a b r a t i d a k m e m b e n t u k
zona hambat, hal in i dapat di sebabkan karena sifat n heksan hidrof obi k sehingga zat akt if
ya ng dapa t ditariknya juga bersifa t hidrof obik. Senyawa yang bersifat hidrof obik tida k
dapat berdifusi ke media agar karena penyusun media agar itu adalah air. Dalam
pembua tan media SDA , bubu k SDA dilaru tkan dalam aquadest. Menuru t Ernawa ti (2007),
sen ya wa yang dapa t d i tari k ole h pe laru t n on p olar mi sa ln ya h eksa na ada lah hidrokarb on ,
a sam l ema k, a se tog en i n , d a n te rp en .
Prosiding I Seminar Nasional Bioteknologi Kelautan dan Perikanan 2012
Sen yawa an ti jamur pada teripang diduga ber sifat p olar karena laru t dalam pelaru t
metanol, terbukti dari kemampuan ekstrak tersebut dalam menghambat petumbuhan
ja mur d i med ia S DA , se per ti d al am pe ne l i tia n Ab ra ha m (2002) ya ng me ng g un a ka n p el ar ut
polar untuk menguji aktivitas antijamur dan antibakteri dari Holothuria, begitu juga
dengan Thanh (2006) yang mengisolasi senyawa triterpen dari teripang pasir di Vietna
menggunakan pelarut polar dan terbukti berfungsi sebagai antijamur, antibakteri, da
a ge n sitotoksik.
Dari ke tiga pe larut yang diguna kan pada uji tahap I dapat d iliha t bahwa pelarut
te rbaik untuk me nge kstr a k za t a ntijamur adalah me tanol de nga n konsentra si 6 mg/mI
ka re na men gh a si l kan zon a ha mba t te rbe sar , ba l k i n kuba si 24 ma up u n 48 ja m. S e h in gg a
p e n e l i t i a n t a h a p I I m e n g g u n a k a n p e l a r u t m e t a n o l d e n g a n k o n s e n t r a s i 5 mg/ml, 7
mg /ml da n ha sil n ya te r sa ji p ada Tab el 3 .
Ta bel 3. Hasil u ji ta hap II de nga n pel aru t me tan ol
Zona hambat (mm)
Inkubasi
5 mg/mI
6 mg/mI
24 jam
5,1 + 0,56
8 , 42 + 0 ,7 1
48 jam
3,5 + 0,52
7 , 71 + 0 ,5 3
7 mg/mI
10,1 + 0,59
8,9 + 0,60
Terjadi penurunan zona hambat antara jam ke -24 dan jam ke-48, yang bera
ekstrak H. scabra bersifat fungistatik atau menghambat pertumbuhan jamur. Hal i
se sua i ha sil penelitia n Ka swa ndi et al. (2000) ya ng membuktika n e kstra k mur ni ter ipa
dapat menghambat pertumbuhan mikroba. Rahmah dan Aditya (2010) menambahkan
sen ya wa yan g be rsifa t fu ngi sta tik misal n ya se n yawa fen ol i k dapa t men dena tura si pr otei
ya i tu ke ru sa ka n str u ktur te r sier p r ote in se h i ng ga p r ote i n ke h il an ga n si fa t - si fa t a sl i n ya _
Ter denatur asinya pr otein dinding C. albicans akan menyebabkan ker apuhan pada din ding
se l te r se but se hingga muda h dite mbus za t a ktif Ia innya ya ng be r sifa t f ungista tik. Jika
pr o tein yang ter denatur asi adalah pr o tein enzi m ma ka enz im tida k dapat bek er ja yang
menyeba bkan me tabolisme da n pr oses pe nyerapan nutr isi ter ganggu.
Rata -rata zona hambat yang terbentuk d ari konsentrasi 5, 6, dan 7 mg/ml b e r k i s a a n t a r a 5 — 1 0 mm , me n un j u k k a n e k s tr a k H . s c ab r a b e r p o t e n si s e da n g da la m me n gh a m ba t
pertumbuhan jamur, sesuai dengan penggolongan Ernawati (2007), kekuatan antibio
a ta u a n tiba kter i j i ka z ona ha mba tn ya l ebih dar i 20 c m berar ti a kti vi tasn ya sa nga t kua t, 10 2 0
mm memili ki akti vi tas kuat, 5 - 10 mm memil iki a ktivita s sedang, zona hambat di bawah 5
mm atau kurang berarti aktivitas antijamurnya lemah.
328
Prosiding I Seminar Nasional Bioteknologi Kelautan dan Perikanan 2012
•
Uji Kandungan Bioaktif
Uji kandungan bioaktif adalah uji secara kualitatif untuk mengetahui senyawa
ya n g ter kan d un g da la m e kstra k H. sc abr a. Uji ka nd un ga n b i oa kti f men ga cu p a da me tode
skrin ing fi tokimia . Hasil u ji kand ungan bioaktif tersaji pada Tabel 4.
Tabel
4.
Hasil
Uji
Bioaktif
Kandungan
No.
1.
Uji
Alkaloid
Metanol
+
2.
3.
Saponin
Flavonoid
+
4.
Steroid
5.
Tr ite rpenoid
Etil asetat
Ekstrak
H.scabra
Keter an gan
Ekstrak methanol terdapat e nda pa n
pu tih
+
-
t e r be ntu k busa
+
+
Tidak terbentuk warna biru
+
+
b e r wa r na m e r a h
Tidak berwarna merah a ta u pu n
o r a n ge
Senyawa yang terkandung dan diduga berperan sebagai antijamur dalam H.
s c abra a da la h alka loid, saponin da n tr iterpen se pe r ti ya ng a da pada e kstrak me ta nol.
Ekstrak etil
antijamurnya
asetat hanya
lebih
kecil
mengandung
daripada
saponin dan triterpen sehingga aktivitas
ekstrak
metanol.
Kemampuan
saponin
sebagai
a nti jam ur di per kua t ol eh C owa n (1999) yan g me n ya ta kan ba hwa sap on in berkon tr ibu si
se ba ga i a ntija mur denga n me kanisme me nurunkan te ga nga n per muka an me mbra n ster ol
d a r i d i n d i n g s e l C. a l b i c a n s , s e h i n g g a p e r m e a b i l i t a s n y a m e n i n g k a t . H a r d i n i n g t y a s ( 2 0 0 9 )
menambahkan, saponin merupakan golongan senyawa
yang dapat menghambat atau
membunuh mikroba dengan cara berinteraksi dengan membran sterol. Efek utama
saponin terhadap bakteri adalah adanya pelepasan protein dan enzim dari dalam sel.
Saponin dihasilkan sebagai s alah satu bentuk mekanisme per tahanan dir i secar a
kimiawi ba g i ter ipa ng d i a la m. Selain d id uga se bag ai per ta ha na n d ir i da ri pre dator , jug a
diyakini memiliki efek biologis, termasuk diantaranya sebagai anti jamur, sitotoksi k
melawan sel tumor, hemolisis, akti vitas kekebalan tubuh, dan anti kanker (Zha ng et al.,
2006). Bordbar et a l. (2011) me laporkan , saponin teridentifika si dari timun lau t. Stru ktur
kimian ya cu kup dapat dibandi ngkan dengan bi oaktif gan oderma, ginse ng, dan oba t herbal
lainnya. Saponin menunjukka n spe ktrum ya ng lua s sebaga i he molisis, sitosta tik, da n
antikanker.
Adanya
memungkinkan
satu
atau
lebih
kemampuan
senyawa
antijamur
bioaktif
semakin
dalam
besar.
tubuh
Hannifa
teripang
et
al.
juga
(2010),
menambahkan, interaksi dari senyawa sap onin dan al kaloid did uga me nimbul kan efek
antijamur, walaupun me kanismenya masih memerlukan penelitian lebih lanjut. Riguera
(1997) dalam Nur janah, et al.
(2011), men yata kan komponen p olar yang terdapat pad
inver tebra ta la ut didomina si ole h ga ram - gar am a lka loid, a sa m a mino, polihidr oste r oid
dan
saponin.
Menurut
Gholib
(2009),
alkaloid
merupakan
senyawa
yang
bersifat
antimi kroba , ya itu menghamba t esterase dan DNA serta RNA p ol ymerase, menghamba t
respirasi set. Alkaloid merupakan aktivator kuat bagi set imun yang menghancurkan
ba k te r i, vir u s, j a mur , da n se t ka nke r .
Beberapa
hasil
penelitian
menunjukkan
senyawa
terpenoid
memiliki
aktivit
se ba ga i antimikr oba ya itu monoterpenoid lina lool, dite rpe noid ( - ) hardwicklic
acid,
phyt ol, tri terpenoid saponin dan tri terpenoid g ti kosida (G unawan, 2008). Thanh (2006)
juga telah berhasil mengisotasi triterpen gtikosida dari teripang pasir yang terbukti
m a m p u m e n j a d i a g e n a n t i j a m u r , a n t i b a k t e r i , d a n s i t ot o k s i k . W e i H u a e t a l . ( 2 0 0 8 ) d a l a m
Mokh l e si e t a l. (2011) me n e l i ti b a hw a tr i ter pe n g ti kosid a ya ng d i i sol a si d ar i H. a xi l og a
mampu me lawan ja mur C. albicans, Cryptococcus ne oformans dan Aspe rgillus fumigate s.
Triterpen gtikosida dapat dimurnikan menjadi holothurin yang ber sifat toksik se hingga
mamp u digunakan sebaga i antijamur.
C oll dan Sammarco (1983) dalam Hardining tyas (2009) menambahkan senyawa
terpen dapat digunakan dalam bidang farmasi sebagai antibiotika, anti jamur, dan
senya wa anti tumor . Demikian pula dika ta ka n Bordbar et al. (2011), ba hwa timun ta ut
ka ya akan g ti kosida teru tama tri terpen gti kosida yang terbukti memi li ki akti vi tas an tijamur
dan antitumor. Triterpen gtikosida dan gtikosida lainya seperti holothurin A dan B,
ter iden tif i kasi dari fra ksi n -bu ta nol . Holoth uri n B me n u nju kkan a kti vi ta s an tijamu r in vi tr o
yang lebih balk melawan 20 jenis jamur.
Sen yawa anti jamur alami dari teripang dan hewan laut lain nya men jadi salah sa tu
sumber oba t antija mur bar u yang dapat dikembangka n kare na pote nsinya yang be sar,
se pe r ti d i la p or ka n Mur n ia sih (2005) b a h w a ti ng ka t ker aga ma n ya ng ti n gg i da n ke u n i ka n
se nyawa baru yang di temu kan dalam organi sme laut merupa kan pengaruh dari tinggi nya
b i odi ver sitas orga ni sme lau t. Pen garu h l in g kun gan la u t seper ti kada r garam, re ndah n ya
intensitas
cahaya,
a da n y a
menghasilkan
metabolit
organisme
darat.
berasal
di
dari
Ada
organi sme
arus,
m a up un
sekunder
kompetisi
yang
struktur
kecenderungan
laut
di
yang
bahwa
daerah
kuat
mendorong
kimianya
relatif
sumber
terbesar
tr opi k,
khususn ya
organisme
I
berbeda
den
substansi
bioa
Indo -Pasifi k.
KESIMPULAN
Berda sar ka n ha sil dan pemba ha san ma ka dapa t diambil ke simpulan bahwa me tanol
a da la h pe la r ut te r ba i k u n tu k me ng is o la s i se ny a wa a n t ija mur da r i H o l o t hur i a s c a b ra y a i tu
sen ya wa
a l kal oi d,
sap on in ,
ster oid,
dan
tr i terpe n.
Penggunaan
kon se n trasi
terba i k
e kstra k H . sca bra u ntu k u ji akti vi tas antijam ur adalah 7 mg/m l da lam pelaru t metan ol.
DAFTAR PUSTAKA
Arlyza, IS. 2009. Teripang dan Bahan Aktifnya. Oseana Vol XXXIV No 4 tahun 2009.
Ja ka r ta .
Aryantina, P L. 2002. Ekstraksi Komponen Antibakteri dari Teripang dan Pengujian
A ktivi ta sn ya seba gai A n tiba kte ria . (S kr ip si ). In sti tu t Per ta nia n Bog or , Bog or.
Bordbar, S., Farooq Anwar, and Nazamid Saari. 2011. High -Value Components and
Bioactives from Sea Cucumbers for Functional Foods—A Review.
www.mdp i.com/iourna l/mar inedrugs (28 Janua ri 2012)
Dahuri R . 2005. Me ngga li Bahan Ba ku Oba t di da lam Laut. De par teme n Per i kana n dan
Kelautan.
D.
2 0 09 .
Uj i
Da ya
Ha mba t
Da un
Se ngga ni
Te r ha da p
T ry c hop hyt o n
m e nta g ro p hyte s dan Candida albicans. Be rita Biologi 9 (5).
Har b or ne , J . B. 1987. Me tod e Fi toki mi a . In sti tu t Te kn ol og i Ban d un g , Ba n du ng .
Ha r dini ngt ya s , S .D. 2 00 9. A kti vi ta s An tiba k te r i Ek str a k Ka r a ng L una k Sa r c op hy t on sp. ya ng
Gh olib,
Difragmentasi dan Tidak Difragmentasi di Perairan Pulau Pramuka, Kepulauan
Seribu . (S krip si ) Insti tu t Pertanian Bog or, Bogor .
Jawahar, A.T.; Nagarajan, J.; Shanmugam, S.A. Antimicr obial Substance s of Potential
Bi om ed i ca l I m p or tan ce fr om H ol oth ur ian S pe ci e s. I n di an J . M ar . Sc i . 2002, 31,
1 6 1 164.
Ka swa nd i MA, Lian HH, N ur za kiah S, R idzwan BH, Uja ng S, Sa msud in S, Ja sniza t S, All
AM.
M urn ia si h, T . 2005. S ub stan si Ki mia Un tu k Per ta hana n Diri dar i Hewa n La u t tak Ber tu lan g
Be la ka ng. Osea na V olume XXX No 2,2005: 19 -27
Nasution, RD. 2010. lsolasi dan Identifikasi Senyawa Sapogenin. Universitas Sumatera
Utara
N urja nah S , E Gu mbira -Sa 'id , Kha sw ar S ya msu, Su pri ha tin , d an Etty Ria ni . 2007. Pe ngar uh
Tepung Teripa ng Pa sir ( H o l o t h u r i a s c a b r a ) Ter ha dap Per ila ku Seksua l Dan Kadar
Te stosteron Darah Mencit. IPB, Bogor.
Nur janah, Laili Izzati, dan Asadatun Abdullah. 201 1. Akti vitas Anti oksidan dan Komponen
Bioaktif Kerang Pisau ( S o l e n
spp). Jurnal Ilmu Kelautan IPB Bogor September
2011. Vol. 16 (3) 119-124
Rahmah, N . dan Adi tya R. K. 2010. Uji Fungi sta ti k Ekstrak Daun Sirih Terhadap Candica
Ib icans. Bi oscien tiae vol 7 no 2, Ju li 2010.
Si matupang MM. 2008. Candida A lbicans. Departemen Mi krob iol ogi fa kul tas Ked oktera^
Univer sitas Suma tera Utara.
332
Pr osiding I Seminar Nasional Bioteknologi Kelautan dan Per ikanan 201 2