IDENTIFIKASI BAKTERI Salmonella sp. DAN Escherichia coli PADA BUMBU GADO-GADO, SIOMAY, DAN CILOK DI SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO - repository perpustakaan
IDENTIFIKASI BAKTERI Salmonella sp. DAN Escherichia coli
PADA BUMBU GADO-GADO, SIOMAY, DAN CILOK
DI SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH
PURWOKERTO
SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana Strata Satu (S-1)
Oleh:
ANA FITRIYANI
1001070001
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI
FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
2014 ii
iii iv
MOTTO
Tugas kita bukanlah untuk berhasil. Tugas kita adalah untuk mencoba karena di dalam mencoba itulah kita menemukan dan belajar membangun kesempatan untuk berhasil (Mario Teguh) Selesai (dari suatu urusan) kerjakanlah dengan sungguh-sungguh urusan yang lain (QS. Al-Insyirah : 6-7) Kesalahan dan kegagalan adalah pemberitahuan agar kita memperbaiki diri dan cara-cara kita yang akan kita temui dalam upaya mewujudkan kelas-kelas kepemimpinan yang lebih tinggi pada diri kita. Kesalahan dan kegagalan sama sekali bukanlah tanda untuk berhenti (Mario Teguh) Tuntutlah ilmu, sesungguhnya menuntut ilmu adalah pendekatan diri kepada Allah Azza wajalla, dan mengajarkannya kepada orang yang tidak mengetahuinya adalah sodaqoh. Sesungguhnya ilmu pengetahuan menempatkan orangnya, dalam kedudukan terhormat dan mulia (tinggi). Ilmu pengetahuan adalah keindahan bagi ahlinya di dunia dan di akhirat. (HR. Ar-Rabii') v
PERSEMBAHAN Skripsi ini penulis persembahkan kepada:
1. Bapak dan Ibu tercinta, yang senantiasa tak henti-hentinya memberikan kasih sayang yang tulus dan sempurna, doa, motivasi, perhatian serta materi yang tak terhingga sehingga saya dapat menyelesaikan skripsi ini.
2. Kakakku (Aris Mudzakir & Ida Nurul Khotijah) yang selalu memberikan semangat, sehingga membuatku yakin akan kemampuanku menyelesaikan skripsi ini.
3. Teman-teman yang senantiasa menemani dalam suka maupun duka. vi
IDENTIFIKASI BAKTERI Salmonella sp. DAN Escherichia coli
PADA BUMBU GADO-GADO, SIOMAY, DAN CILOK
DI SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH
PURWOKERTO
Oleh:
ANA FITRIYANI1001070001
ABSTRAK
Penelitian yang berjudul Identifikasi bakteri Salmonella sp. dan
Escherichia coli pada bumbu gado-gado, siomay dan cilok disekitar kampus
Universitas Muhammadiyah Purwokerto bertujuan untuk mengetahui adanya bakteri Salmonella sp. dan Escherichia coli yang terdapat pada bumbu gado-gado, siomay, dan cilok yang disediakan pedagang kaki lima disekitar kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Januari-Maret 2014 di Laboratorium Mikrobiologi Progam Studi Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Metode yang digunakan yaitu metode survey, kemudian data yang diperoleh dianalisis secara deskriptif. Sampel diambil di pedagang kaki lima di sekitar kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto, dan pengambilan sampel dilakukan sebanyak 3 kali dengan rentang waktu satu bulan. Sampel yang digunakan adalah bumbu dari gado-gado, siomay dan cilok. Uji Escherichia coli dilakukan dengan 3 tahap yaitu uji penduga, uji penguat, dan uji pelengkap. Sedangkan uji Salmonella meliputi pre-enrichment, enrichment, penanaman pada medium selektif dan tahap konfirmasi. Hasil uji tersebut akan diidentifikasi dengan melihat karakteristik makroskopis dan mikroskopis serta serangkaian uji biokimia dari sel bakteri tersebut. Hasil identifikasi dicocokkan dengan buku identifikasi bakteri Bergey‟s of Determinative Bakteriology (Holt, et al., 1994). Hasil diperoleh 10 isolat dan setelah diidentifikasi diperoleh 2 genus yaitu Escherichia coli dan Aerobacter yang semuanya bakteri Gram negatif dan dalam penelitian ini tidak ditemukan bakteri Salmonella sp.
Kata Kunci: Bumbu gado-gado, Cilok, Escherichia coli, Identifikasi, Salmonella sp., Siomay.
vii Assalamu‟alaikum wr.wb
Alhamdulillahirobil „alamin
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT karena rahmat, taufik dan hidayahnya yang senantiasa tercurah kepada segenap hamba-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini. Selama penulisan skripsi ini, penulis banyak mendapat dukungan, dorongan, serta bimbingan dari berbagai pihak.
Maka dari itu, pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih kepada Bapak Drs. Heri Maryanto, M.Si dan Ibu Dini Siswani Mulia, M.Si selaku pembimbing skripsi ini.
Selain itu penulis menyampaikan terimakasih kepada :
1. Drs. Akhmad, M.Si selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M.Si. selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Kurniawan, S.Si selaku laboran Mikrobiologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto
4. Bapak dan Ibu tercinta yang senantiasa memberikan doa dan curahan kasih sayang kepada penulis sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan baik. Aku bangga memiliki orang tua seperti kalian.
5. Kakak tersayang yang selalu memberikan doa dan semangat. viii
6. Teman seperjuangan (Ani & Citra), terimakasih atas bimbingannya.
7. Teman- teman Pendidikan Biologi angkatan ‟10 (Advi, Fadli, Dika, Lili, Febri, Nurul, Nengsih, Dina, Dini, Mey dan Fatimah), terimakasih atas bantuan dan arahan kepada penulis dalam melaksanakan penelitian. Semoga kebaikan kalian dilipatgandakan oleh Alloh SWT.
8. Teman-teman Pelangi 3 tercinta (Isna, Vita, Anteng, Ana, Lisa). Bagiku kalian adalah saudaraku.
9. Semua pihak yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu yang telah membantu dalam penyusunan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang bersifat membangun demi perbaikan di masa yang akan datang, penulis berharap skripsi ini bermanfaat bagi semua pihak yang membutuhkan.
Semoga Alloh SWT memberikan balasn yang setimpal atas kebaikan dan bantuan yang telah penulis terima.
Purwokerto, Agustus 2014 Penulis ix
DAFTAR ISI Halaman UCAPAN TERIMA KASIH ..................................................................... viii DAFTAR ISI .............................................................................................. x
Xiii DAFTAR TABEL .....................................................................................
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. xiv DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. Xv BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Masalah ................................................................
1 1.2 Rumusan Masalah ........................................................................................
4 1.3 Tujuan Penelitian .........................................................................................
4 1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................................
4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Makanan Jajanan ..........................................................................................
5 2.2 Keamanan Pangan ........................................................................................
6
2.3 Bakteri Dalam Makanan ................................................................ 8 2.4 Bakteri Salmonella sp ...................................................................................
12 2.5 Bakteri Escherchia coli ................................................................................
15 2.6 Identifikasi ................................................................................................
18 BAB III METODE PENELITIAN 3.1 Lokasi dan Tempat .......................................................................................
20 3.2 Alat dan Bahan .............................................................................................
20 3.3 Metode Penelitian .........................................................................................
21 x
3.4 Cara Kerja ................................................................................................
21 3.4.1 Pengambilan Sampel ................................................................
21 3.4.2 Pembuatan Medium ................................................................
21 3.4.2.1 Medium Uji lactose broth (LB) ................................
21 3.4.2.2 Medium Uji Escherichia coli broth (ECB) .............................
22 3.4.2.3 Medium Uji eosin methylen blue (EMBA) .............................
22 3.4.2.4 Medium Uji selenite cystein broth (SCB) ...............................
22 3.4.2.5 Medium Uji Salmonella shigella agar (SSA) .........................
23 3.4.2.6 Medium Uji triple sugar iron agar (TSIA).............................
23 3.4.2.7 Medium nutrient agar (NA)....................................................
23 3.4.2.8 Medium Uji Sulfide indole motility (SIM) ..............................
24 3.4.2.9 Medium Uji protease (MR_VP) ................................
24 3.4.2.10 Medium Uji simon citrate agar................................
24 3.4.3 Analisa Mikrobiologi ................................................................
25 3.4.5.1 Preparasi Sampel ................................................................
25 3.4.5.2 Analisa Escherichia coli .........................................................
25 3.4.5.3 Analisa Salmonella sp .............................................................
26 3.4.4 Pemeliharaan .......................................................................................
28 3.4.5 Pengamatan Karakteristik Bakteri .......................................................
28 3.4.5.1 Pengamatan Karakteristik Makroskopis Bakteri .....................
28 3.4.5.2 Pengamatan karakteristik Makroskopis bakteri ......................
28 3.4.6 Identifikasi Bakteri ................................................................
33 3.4.7 Parameter yang Diamati ................................................................
33 3.4.8 Analisis Data .......................................................................................
33 xi
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian ............................................................................................
34 4.1.1 Hasi Isolasi Baktri ................................................................
34 4.1.2 Hasil Pengamatan Karakteristik Makroskopis Bakteri .......................
35 4.1.3 Hasil Pengamatan Karakteristik Mikroskopis Bakteri ........................
36 4.1.4 Hasil Uji Biokimia ................................................................
36 4.1.5 hasil Identifikasi ..................................................................................
41 4.1.5.1 Genus Escherichia coli ...........................................................
42 4.1.5.2 Genus Aerobacter................................................................
43 4.2 Pembahasan ................................................................................................
44 4.2.1 Hasil Analisa Mikrobiologi ................................................................
45 4.2.2 Hasil Analisa Escherichia coli ............................................................
45 4.2.3 Hasil Analisa Salmonella sp ................................................................
48 4.2.4 Hasil Pewarnaan Gram ................................................................
49 4.2.5 Hasil Uji Biokimia ................................................................
51 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
58 5.1 Kesimpulan ................................................................................................
58 5.2 Saran ................................................................................................
58 DAFTAR PUSTAKA .................................................................................
59 LAMPIRAN 62 – LAMPIRAN ..................................................................... xii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Kode isolat yang berhasil diisolasi dari bumbu gado-gado, siomay, dan cilok ......................................................................34 Tabel 4.2 Hasil pengamatan karakteristik mikroskopis isolate ................
36 Tabel 4.3 Hasil uji biokimia isolat-isolat yang diperoleh dari sampel bumbu gado-gado, siomay, dan cilok .......................................
36 Tabel 4.4 Hasil identifikasi genus Escherichia .........................................
42 Tabel 4.5 Hasil identifikasi genus Aerobacter ..........................................
44 Tabel 4.6 Tabel isolat bakteri hasil identifikasi ........................................
45 xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 4.9 (1) Persamaan reaksi fermentasi karbohidrat ..........................57
55
55
54
Gambar 4.10 (2) Reaksi (II) Fermentasi asam sitrat ...................................Gambar 4.9 (2) Persamaan reaksi perubahan warna pada medium uji VP Gambar 4.10 (1) Reaksi (1) Fermentasi asam sitrat ....................................53 Gambar 4.8 Persamaan reaksi hidrolisis glukosa .........................................
Halaman Gambar 4.1 Hasil pengamatan karakteristik mikroskopis bakteri ...............
41 Gambar 4.7 Reaksi penguraian tryptophan oleh enzim tryptophase ............
40 Gambar 4.6 Hasil uji sitrat ..........................................................................
39 Gambar 4.5 Hasil Voges proskauer ..............................................................
38 Gambar 4.4 Hasil uji methyl red ..................................................................
37 Gambar 4.3 Hasil uji indol ...........................................................................
35 Gambar 4.2 Hasil uji TSIA ..........................................................................
57 xiv