LAMPIRAN EFEK SITOTOKSIK DAN KINETIKA PROLIFERASI FRAKSI KLOROFORM EKSTRAK ETANOLIK TANAMAN CEPLUKAN (Physalis angulata L.) TERHADAP SEL MYELOMA.
43
LAMPIRAN
Lampiran 1
Data Uji Sitotoksik Fraksi Kloroform Ekstrak Etanolik Tanaman Ceplukan ( Physalis
angulata L.) terhadap Sel Myeloma metode MTT
Kontrol Sel
Replikasi
Absorbansi
1
0,989
2
0,982
3
0,924
Rata - rata
0,965
Kontrol Media
Replikasi
Absorbansi
1
0,233
2
0,227
3
0,229
Rata - rata
0,2297
Perlakuan
Konsentrasi
Abs. Rata-rata
Sampel
% Sel Hidup
0,7257
0,6910
0,5987
0,4460
0,3290
67,45
62,74
50,18
29,42
13,5
( µg/ml )
31,25
62,5
125
250
500
44
Lampiran 2
Kurva Hubungan Log Konsentrasi dengan Nilai Probit Akibat Pemberian Fraksi
Kloroform Ekstrak Etanolik dengan Metode MTT.
Log Konsentrasi
% Hidup
1,495
67,45
1,796
62,74
2,097
50,18
2,398
29,42
2,699
13,5
Probit
3,895
4,457
5,004
5,322
5,449
FRAKSI CHCL3
y = -1.3199x + 7.5931
R2 = 0.946
6
PROBIT
5
4
FRAKSI CHCL3
3
Linear (FRAKSI
CHCL3)
2
1
0
0
1
2
LOG KONSENTRASI
3
45
Lampiran 3
Perhitungan IC50 Fraksi Kloroform Ekstrak Etanolik P angulata L.
Y = -1,3199X + 7,5931
5 = -1,3199X + 7,5931
X = (5-7,5931)/ -1,3199
X = 1,9646
IC50 = Antilog X
IC50 = Antilog 1,9646
IC50 = 92,176 µg/ml
Lampiran 4
Data Absorbansi Pelarut DMSO dan Kontrol Sel
Konsentrasi
(µg/ml)
Absorbansi
DMSO
Absorbansi Kontrol Sel
31,25
0,975
0,965
62,50
1,007
0,965
125
0,938
0,965
250
0,867
0,965
500
0,890
0,965
46
Lampiran 5
Data Absorbansi pada Uji Doubling Time Fraksi Kloroform Ekstrak Etanolik
Tanaman Ceplukan (Physalis angulata L.) Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml
terhadap Sel Myeloma
Jam
Kontrol
DMSO
Perlakuan 25
µg/ml
Perlakuan 50
µg/ml
24
0,4880
0,4307
0,2263
0,1530
48
0,7260
0,6543
0,2113
0,1623
72
0,8833
0,8183
0,2260
0,1727
Lampiran 6
Kurva Doubling Time Hubungan Waktu Inkubasi dengan Absorbansi dari Kontrol,
DMSO, dan Akibat Perlakuan dengan Fraksi Kloroform Ekstrak Etanolik P.
angulata L. Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml pada jam ke-24, 48, dan 72.
doubling time
absorbansi
1
0,8
kontrol
DMSO
konsentrasi 25
konsentrasi 50
0,6
0,4
0,2
0
0
20
40
60
waktu (jam)
80
47
Lampiran 7
Data Uji t Doubling Time Sel Myeloma Akibat Perlakuan dengan Fraksi Kloroform
Ekstrak Etanolik P. angulata L. Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml pada jam ke-24
T – Test
Paired Samples Statistics
Pair 1
Pair 2
Pair 3
N
Std. Error
Mean
.001856
kontrol24
Mean
.70567
3
Std. Deviation
.003215
DMSO24
.64833
3
.022030
.012719
kontrol24
.70567
3
.003215
.001856
perlakuan25
.44400
3
.010440
.006028
kontrol24
.70567
3
.003215
.001856
perlakuan50
.38400
3
.014731
.008505
Paired Samples Correlations
Pair 1
kontrol24 & DMSO24
N
3
Correlation
-.951
Sig.
.201
Pair 2
kontrol24 & perlakuan25
3
.268
.827
Pair 3
kontrol24 & perlakuan50
3
-.993
.078
Paired Samples Test
Mean
Pair
1
Pair
2
Pair
3
kontrol24 DMSO24
kontrol24 perlakuan25
kontrol24 perlakuan50
Paired Differences
Std.
95% Confidence
Error
Interval of the
Std.
Deviation
Mean
Difference
Lower
Upper
t
df
Sig.
(2taile
d)
.057333
.025106
.014495
-.005035
.119701
3.955
2
.058
.261667
.010066
.005812
.236660
.286673
45.023
2
.000
.321667
.017926
.010349
.277137
.366197
31.081
2
.001
48
Lampiran 8
Data Uji t Doubling Time Sel Myeloma Akibat Perlakuan dengan Fraksi Kloroform
Ekstrak Etanolik P. angulata L. Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml pada jam ke-48
T – Test
Paired Samples Statistics
Pair 1
Pair 2
Pair 3
N
Std. Error
Mean
.005696
kontrol48
Mean
.92933
3
Std. Deviation
.009866
DMSO48
.85767
3
.038109
.022003
kontrol48
.92933
3
.009866
.005696
perlakuan25
.41467
3
.012220
.007055
kontrol48
.92933
3
.009866
.005696
perlakuan50
.36833
3
.008505
.004910
Paired Samples Correlations
N
Pair 1
kontrol48 & DMSO48
Pair 2
kontrol48 & perlakuan25
Pair 3
kontrol48 & perlakuan50
3
Correlation
.026
Sig.
.984
3
.288
.814
3
.564
.618
Paired Samples Test
Mean
Pair
1
Pair
2
Pair
3
kontrol48 DMSO48
kontrol48 perlakuan25
kontrol48 perlakuan50
Paired Differences
Std.
95% Confidence
Std.
Error
Interval of the
Mean
Difference
Deviation
Lower
Upper
t
df
Sig.
(2taile
d)
.071667
.039119
.022586
-.025511
.168845
3.173
2
.087
.514667
.013317
.007688
.481586
.547747
66.941
2
.000
.561000
.008660
.005000
.539487
.582513
112.200
2
.000
49
Lampiran 9
Data Uji t Doubling Time Sel Myeloma Akibat Perlakuan dengan Fraksi Kloroform
Ekstrak Etanolik P. angulata L. Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml pada jam ke-72
T – Test
Paired Samples Statistics
Pair 1
Pair 2
kontrol72
3
Std. Deviation
.033292
DMSO72
1.01467
3
.051598
.029790
kontrol72
1.07967
3
.033292
.019221
.42933
3
.009609
.005548
1.07967
3
.033292
.019221
.36033
3
.010214
.005897
perlakuan25
Pair 3
kontrol72
perlakuan50
N
Std. Error
Mean
.019221
Mean
1.07967
Paired Samples Correlations
N
Pair 1
kontrol72 & DMSO72
Pair 2
kontrol72 & perlakuan25
Pair 3
kontrol72 & perlakuan50
3
Correlation
-.384
Sig.
.749
3
-.956
.189
3
-.297
.808
Paired Samples Test
Mean
Pair
1
Pair
2
Pair
3
kontrol72 DMSO72
kontrol72 perlakuan25
kontrol72 perlakuan50
Paired Differences
Std.
95% Confidence
Error
Interval of the
Std.
Deviation
Mean
Difference
Lower
Upper
t
df
Sig.
(2taile
d)
.065000
.071337
.041187
-.112211
.242211
1.578
2
.255
.650333
.042572
.024579
.544580
.756087
26.459
2
.001
.719333
.037608
.021713
.625911
.812756
33.130
2
.001
50
Lampiran 10. Foto Tanaman Physalis angulata L.
Foto Tanaman P. angulata L.
51
Lampiran 11. Gambar Soxhlet
52
Lampiran 12. Daftar Nilai Probit
53
54
LAMPIRAN
Lampiran 1
Data Uji Sitotoksik Fraksi Kloroform Ekstrak Etanolik Tanaman Ceplukan ( Physalis
angulata L.) terhadap Sel Myeloma metode MTT
Kontrol Sel
Replikasi
Absorbansi
1
0,989
2
0,982
3
0,924
Rata - rata
0,965
Kontrol Media
Replikasi
Absorbansi
1
0,233
2
0,227
3
0,229
Rata - rata
0,2297
Perlakuan
Konsentrasi
Abs. Rata-rata
Sampel
% Sel Hidup
0,7257
0,6910
0,5987
0,4460
0,3290
67,45
62,74
50,18
29,42
13,5
( µg/ml )
31,25
62,5
125
250
500
44
Lampiran 2
Kurva Hubungan Log Konsentrasi dengan Nilai Probit Akibat Pemberian Fraksi
Kloroform Ekstrak Etanolik dengan Metode MTT.
Log Konsentrasi
% Hidup
1,495
67,45
1,796
62,74
2,097
50,18
2,398
29,42
2,699
13,5
Probit
3,895
4,457
5,004
5,322
5,449
FRAKSI CHCL3
y = -1.3199x + 7.5931
R2 = 0.946
6
PROBIT
5
4
FRAKSI CHCL3
3
Linear (FRAKSI
CHCL3)
2
1
0
0
1
2
LOG KONSENTRASI
3
45
Lampiran 3
Perhitungan IC50 Fraksi Kloroform Ekstrak Etanolik P angulata L.
Y = -1,3199X + 7,5931
5 = -1,3199X + 7,5931
X = (5-7,5931)/ -1,3199
X = 1,9646
IC50 = Antilog X
IC50 = Antilog 1,9646
IC50 = 92,176 µg/ml
Lampiran 4
Data Absorbansi Pelarut DMSO dan Kontrol Sel
Konsentrasi
(µg/ml)
Absorbansi
DMSO
Absorbansi Kontrol Sel
31,25
0,975
0,965
62,50
1,007
0,965
125
0,938
0,965
250
0,867
0,965
500
0,890
0,965
46
Lampiran 5
Data Absorbansi pada Uji Doubling Time Fraksi Kloroform Ekstrak Etanolik
Tanaman Ceplukan (Physalis angulata L.) Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml
terhadap Sel Myeloma
Jam
Kontrol
DMSO
Perlakuan 25
µg/ml
Perlakuan 50
µg/ml
24
0,4880
0,4307
0,2263
0,1530
48
0,7260
0,6543
0,2113
0,1623
72
0,8833
0,8183
0,2260
0,1727
Lampiran 6
Kurva Doubling Time Hubungan Waktu Inkubasi dengan Absorbansi dari Kontrol,
DMSO, dan Akibat Perlakuan dengan Fraksi Kloroform Ekstrak Etanolik P.
angulata L. Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml pada jam ke-24, 48, dan 72.
doubling time
absorbansi
1
0,8
kontrol
DMSO
konsentrasi 25
konsentrasi 50
0,6
0,4
0,2
0
0
20
40
60
waktu (jam)
80
47
Lampiran 7
Data Uji t Doubling Time Sel Myeloma Akibat Perlakuan dengan Fraksi Kloroform
Ekstrak Etanolik P. angulata L. Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml pada jam ke-24
T – Test
Paired Samples Statistics
Pair 1
Pair 2
Pair 3
N
Std. Error
Mean
.001856
kontrol24
Mean
.70567
3
Std. Deviation
.003215
DMSO24
.64833
3
.022030
.012719
kontrol24
.70567
3
.003215
.001856
perlakuan25
.44400
3
.010440
.006028
kontrol24
.70567
3
.003215
.001856
perlakuan50
.38400
3
.014731
.008505
Paired Samples Correlations
Pair 1
kontrol24 & DMSO24
N
3
Correlation
-.951
Sig.
.201
Pair 2
kontrol24 & perlakuan25
3
.268
.827
Pair 3
kontrol24 & perlakuan50
3
-.993
.078
Paired Samples Test
Mean
Pair
1
Pair
2
Pair
3
kontrol24 DMSO24
kontrol24 perlakuan25
kontrol24 perlakuan50
Paired Differences
Std.
95% Confidence
Error
Interval of the
Std.
Deviation
Mean
Difference
Lower
Upper
t
df
Sig.
(2taile
d)
.057333
.025106
.014495
-.005035
.119701
3.955
2
.058
.261667
.010066
.005812
.236660
.286673
45.023
2
.000
.321667
.017926
.010349
.277137
.366197
31.081
2
.001
48
Lampiran 8
Data Uji t Doubling Time Sel Myeloma Akibat Perlakuan dengan Fraksi Kloroform
Ekstrak Etanolik P. angulata L. Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml pada jam ke-48
T – Test
Paired Samples Statistics
Pair 1
Pair 2
Pair 3
N
Std. Error
Mean
.005696
kontrol48
Mean
.92933
3
Std. Deviation
.009866
DMSO48
.85767
3
.038109
.022003
kontrol48
.92933
3
.009866
.005696
perlakuan25
.41467
3
.012220
.007055
kontrol48
.92933
3
.009866
.005696
perlakuan50
.36833
3
.008505
.004910
Paired Samples Correlations
N
Pair 1
kontrol48 & DMSO48
Pair 2
kontrol48 & perlakuan25
Pair 3
kontrol48 & perlakuan50
3
Correlation
.026
Sig.
.984
3
.288
.814
3
.564
.618
Paired Samples Test
Mean
Pair
1
Pair
2
Pair
3
kontrol48 DMSO48
kontrol48 perlakuan25
kontrol48 perlakuan50
Paired Differences
Std.
95% Confidence
Std.
Error
Interval of the
Mean
Difference
Deviation
Lower
Upper
t
df
Sig.
(2taile
d)
.071667
.039119
.022586
-.025511
.168845
3.173
2
.087
.514667
.013317
.007688
.481586
.547747
66.941
2
.000
.561000
.008660
.005000
.539487
.582513
112.200
2
.000
49
Lampiran 9
Data Uji t Doubling Time Sel Myeloma Akibat Perlakuan dengan Fraksi Kloroform
Ekstrak Etanolik P. angulata L. Konsentrasi 25 µg/ml dan 50 µg/ml pada jam ke-72
T – Test
Paired Samples Statistics
Pair 1
Pair 2
kontrol72
3
Std. Deviation
.033292
DMSO72
1.01467
3
.051598
.029790
kontrol72
1.07967
3
.033292
.019221
.42933
3
.009609
.005548
1.07967
3
.033292
.019221
.36033
3
.010214
.005897
perlakuan25
Pair 3
kontrol72
perlakuan50
N
Std. Error
Mean
.019221
Mean
1.07967
Paired Samples Correlations
N
Pair 1
kontrol72 & DMSO72
Pair 2
kontrol72 & perlakuan25
Pair 3
kontrol72 & perlakuan50
3
Correlation
-.384
Sig.
.749
3
-.956
.189
3
-.297
.808
Paired Samples Test
Mean
Pair
1
Pair
2
Pair
3
kontrol72 DMSO72
kontrol72 perlakuan25
kontrol72 perlakuan50
Paired Differences
Std.
95% Confidence
Error
Interval of the
Std.
Deviation
Mean
Difference
Lower
Upper
t
df
Sig.
(2taile
d)
.065000
.071337
.041187
-.112211
.242211
1.578
2
.255
.650333
.042572
.024579
.544580
.756087
26.459
2
.001
.719333
.037608
.021713
.625911
.812756
33.130
2
.001
50
Lampiran 10. Foto Tanaman Physalis angulata L.
Foto Tanaman P. angulata L.
51
Lampiran 11. Gambar Soxhlet
52
Lampiran 12. Daftar Nilai Probit
53
54