Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Air dan Ekstrak Etanol Hidrilla (Hydrilla verticillata (L.f.) Royle)

  Lampiran 1. Surat hasil identifikasi tumbuhan

  Lampiran 2. Gambar tumbuhan Hydrilla verticillata (L.f.) Royle

  Gambar tumbuhan segar Hydrilla verticillata (L.f.) Royle Keterangan: 1. Daun

  2. Batang

  3. Akar

  2

  3

  1

  Lampiran 2. (Lanjutan)

  Gambar simplisia Hydrilla verticillata (L.f.) Royle Keterangan: 1. Daun

  2. Batang

  3. Akar

  1

  2

  3

  Lampiran 3. Hasil mikroskopik Hydrilla verticillata (L.f.) Royle

  1

  2 Gambar irisan membujur akar segar Hydrilla verticillata (L.f.) Royle Keterangan: 1. Jaringan gabus

  2. Rambut akar

  1

  2

  3 Gambar irisan melintang batang segar Hydrilla verticillata (L.f.) Royle Keterangan: 1. Jaringan gabus

  2. Berkas pembuluh

  3. Aerenkim

  Lampiran 3. (Lanjutan)

  1

  3

  2

  1

  4

  3

  2

  4. Plastid

  Gambar daun segar Hydrilla verticillata (L.f.) Royle Keterangan: 1. Plastid

  3. Serat libriform

  2. Trikoma uniselular

  1. Kristal kalsium oksalat bentuk drusse

  4. Trikoma multiselular Gambar serbuk simplisia Hydrilla verticillata (L.f.) Royle Keterangan:

  3. Trikoma uniselular

  2. Tulang daun

  4

  Simplisia kering 0,9 kg

• Makroskopik -

• Alkaloid -

• Penetapan kadar:
• Saponin -
• air
• sari larut etanol
• sari larut air
• abu total
• Glikosida -
• Steroid/ triterpenoida

  DPPH Serbuk simplisia

  Uji aktivitas antioksidan dengan metode

  Ekstrak etanol

  Hidrilla 18 kg

  Mikroskopik

  Glikosida antrakuinon

  Karakterisasi simplisia:

  Tanin

  Flavonoid

  Skrining fitokimia:

  Ekstrak air

  Dicuci hingga bersih Ditiriskan hingga tidak ada lagi air Dilakukan pemeriksaan makroskopik Ditimbang sebagai berat basah Dikeringkan di lemari pengering Dihaluskan

  Lampiran 4. Bagan kerja penelitian

  Diekstraksi

  Lampiran 5. Bagan ekstraksi simplisia Hydrilla verticillata (L.f.) Royle

  secara maserasi 1.

Pembuatan Ekstrak Air Hidrilla (EAH)

  Serbuk Simplisia 300 g Dimasukkan ke dalam bejana kaca Dituangi dengan 2250 ml akuades Ditutup Dibiarkan selama 5 hari di dalam lemari pendingin sambil sering diaduk Diserkai dan diperas

  Dipindahkan ke dalam bejana tertutup Dibiarkan di dalam lemari pendingin selama 2 hari Dienaptuang Dipekatkan dengan alat sand bath Dikeringkan dengan freeze dryer Ditimbang beratnya

  Dicuci dengan akuades secukupnya Ekstrak Air

  62,76 g Maserat Ampas

  Maserat 3000 ml

  Lampiran 5. (Lanjutan) 2.

Pembuatan Ekstrak Etanol Hidrilla (EEH)

  Serbuk Simplisia 300 g Dimasukkan ke dalam bejana kaca Dituangi dengan 2250 ml etanol 96% Ditutup Dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk Diserkai dan diperas

  Dipindahkan ke dalam bejana tertutup Dibiarkan di tempat sejuk terlindung dari cahaya selama 2 hari Dienaptuang Dipekatkan dengan alat rotary evaporator Dikeringkan dengan freeze dryer Ditimbang beratnya

  Dicuci dengan etanol 96% secukupnya Ekstrak Etanol

  14,09 g Maserat Ampas

  Maserat 3000 ml

  Lampiran 6. Perhitungan karakteristik serbuk simplisia Hydrilla verticillata

  (L.f.) Royle 1. Perhitungan kadar air.

  Volume air (ml)

  %Kadar air = ×100%

  Berat sampel (g) a.

  Berat sampel = 5,000 g Volume air = 0,4 ml

  0,4 ml

  % Kadar air = 100%

  × 5,000 g

  = 8% b.

  Berat sampel = 5,010 g Volume air = 0,5 ml

  0,5 ml

  % Kadar air = × 100%

  5,010 g

  = 9,98% c.

  Berat sampel = 5,000 g Volume air = 0,4 ml

  0,4 ml

  % Kadar air = × 100%

  5,000 g

  = 8%

  8%+9,98%+8,66%

  % Kadar air rata-rata =

  3

  = 8,66%

  Lampiran 6. (Lanjutan) 2.

  Perhitungan kadar sari yang larut dalam air

  Berat sari (g) 100

  % Kadar sari larut dalam air = × ×100%

  Berat simplisia (g)

  20 a.

  Berat simplisia = 5,0172 g Berat sari = 0,1561 g

  0,1561 g 100

  % Kadar sari larut dalam air = × 100%

  ×

5,0172 g

  20

  = 15,56% b.

  Berat simplisia = 5,0150 g Berat sari = 0,1480 g

  0,1480 g 100

  % Kadar sari larut dalam air = × × 100%

  

5,0150 g

  20

  = 14,76% c.

  Berat simplisia = 5,0101 g Berat sari = 0,1480 g

  0,1480 g 100

  × 100% % Kadar sari larut dalam air = ×

  

5,0101 g

  20

  = 14,77%

  15,56%+14,76%+14,77%

  % Kadar sari larut dalam air rata-rata =

  3

  = 15,03%

  Lampiran 6. (Lanjutan) 3.

  Perhitungan kadar sari yang larut dalam etanol

  Berat sari (g) 100

  ×100% % Kadar sari larut dalam etanol = ×

  Berat simplisia (g)

  20

  a. = 5,0040 g Berat simplisia

  Berat sari = 0,0821 g

  0,0821 g 100

  % Kadar sari larut dalam etanol = × × 100%

  5,0040 g

  20

  = 8,20%

  b. = 5,0120 g Berat simplisia

  Berat sari = 0,0845 g

  0,0845 g 100

  % Kadar sari larut dalam etanol = × × 100%

  5,0120 g

  20

  = 8,43%

  c. = 5,0002 g Berat simplisia

  Berat sari = 0,0821 g

  0,0821 g 100

  % Kadar sari larut dalam etanol = × 100%

  × 5,0002 g

  20

  = 8,21%

  8,20+8,43%+8,21%

  % Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =

  3

  8,28%

  =

  Lampiran 6. (Lanjutan) 4.

  Perhitungan kadar abu total a.

  Berat simplisia = 2,0001 g Berat abu = 0,3684 g % Kadar abu total =

  0,3684 g 2,0001 g

  × 100% = 18,42% b.

  Berat simplisia = 2,0004 g Berat abu = 0,3687 g % Kadar abu total =

  0,3687 g 2,0004 g

  × 100% = 18,43% c.

  Berat simplisia = 2,0002 g Berat abu = 0,3682 g % Kadar abu total =

  0,3682 g 2,0002 g

  × 100% = 18,41%

  % Kadar abu total rata-rata =

  18,42%+18,43%+18,41%

  3

  = 18,42% % Kadar abu total =

  

Berat abu (g)

Berat simplisia (g)

× 100%

  Lampiran 6. (Lanjutan) 5.

  Perhitungan kadar abu yang tidak larut dalam asam a.

  Berat simplisia = 2,0001 g Berat abu = 0,0588 g % Kadar abu tidak larut asam =

  0,0588 g 2,0001 g

  × 100% = 2,79% b.

  Berat simplisia = 2,0004 g Berat abu = 0,0562 g % Kadar abu tidak larut asam =

  0,0562 g 2,0004 g

  × 100% = 2,81% d.

  Berat simplisia = 2,0002 g Berat abu = 0,0566 g % Kadar abu tidak larut asam =

  0,0566 g 2,0002 g

  × 100% = 2,83 %

  % Kadar abu tidak larut asam rata-rata =

  2,79%+2,82%+2,83%

  3

  = 2,81% % Kadar abu tidak larut asam =

  Berat abu (g) Berat simplisia (g) × 100%

  Lampiran 7. Gambar seperangkat alat spektrofotometer UV/Vis (Shimadzu

  1800)

  Lampiran 8. Hasil uji aktivitas antioksidan 1.

  Data penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan ekstrak air Hydrilla

  verticillata (L.f.) Royle

  I II

  III 0 (blanko) 1,1460 1,1448 1,1448

40 1,1325 1,1310 1,1308

60 1,1246 1,1231 1,1227

80 1,1189 1,1175 1,1166

100 1,1098 1,1079 1,1076

konsentrasi sampel (ppm )

  Absorbansi 2.

  Aktivitas antioksidan (% peredaman) ekstrak air Hydrilla verticillata (L.f.) Royle

  I II

  III 0 (blanko) 0% 0% 0% 0% 40 1,18% 1,21% 1,22% 1,20% 60 1,87% 1,90% 1,93% 1,90% 80 2,36% 2,38% 2,46% 2,40% 100 3,16% 3,22% 3,25% 3,21% konsentrasi sampel (ppm)

  % Peredaman % Peredaman rata-rata 3.

  Data penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan ekstrak etanol Hydrilla

  verticillata (L.f.) Royle

  I II

  III 0 (blanko) 1,1579 1,1565 1,1534

40 1,1342 1,1324 1,1289

60 1,1168 1,1125 1,1079

80 1,0934 1,0839 1,0774

100 1,0632 1,0609 1,0576

konsentrasi sampel (ppm )

  Absorbansi

  Lampiran 8. (Lanjutan) 4.

  Aktivitas antioksidan (% peredaman) ekstrak etanol Hydrilla verticillata (L.f.) Royle

  I II

  III 0 (blanko) 0% 0% 0% 0% 40 2,05% 2,08% 2,05% 2,08% 60 3,55% 3,80% 3,94% 3,77% 80 5,57% 6,28% 6,59% 6,15% 100 8,18% 8,27% 8,31% 8,25% konsentrasi sampel (ppm)

  % Peredaman % Peredaman rata-rata 5.

Data penurunan absorbansi DPPH dengan penambahan vitamin C

  I II

  III DPPH (0 ppm) 0,9833 0,9881 0,9901

2 ppm 0,7581 0,7582 0,7584

4 ppm 0,5309 0,5305 0,5307

6 ppm 0,1894 0,1895 0,1897

8 ppm 0,0975 0,0971 0,0970

konsentrasi sampel

  Absorbansi 6.

Aktivitas antioksidan (% peredaman) vitamin C

  I II

  III DPPH (0 ppm) 0% 0% 0% 0% 2 ppm 22,90% 23,27% 23,40% 23,19% 4 ppm 46,01% 46,31% 46,40% 46,24% 6 ppm 80,74% 80,82% 80,84% 80,80% 8 ppm 90,08% 90,17% 90,20% 90,15% konsentrasi sampel

  % Peredaman % Peredaman rata-rata

  Lampiran 8. (Lanjutan)

  Contoh perhitungan:

  A kontrol−A sampel

  % peredaman = x 100%

  A kontrol

  Ekstrak air: Percobaan I

• Konsentrasi 40 ppm

  1,1460−1,1325

  % peredaman = x 100% 1,18%

  = 1,1460

• Konsentrasi 60 ppm

  1,1460−1,1246

  % peredaman = x 100% = 1,87%

  1,1460

• Konsentrasi 80 ppm

  1,1460−1,189

  % peredaman = x 100% = 2,36%

  1,1460

• Konsentrasi 100 ppm

  1,1460−1,1098

  % peredaman = x 100% = 3,16%

  1,1460

  Lampiran 9. Perhitungan nilai IC

  50

  

  50 Persamaan regresi linear dan nilai IC

Sampel Uji Persamaan regresi Nilai IC50 (ppm)

  Ekstrak air Y = 0,0316X – 0,0292 1581,78 Ekstrak etanol Y = 0,0832X – 0,6078 608,45

   Contoh perhitungan :

  Nilai IC

  50 sari ekstrak air Hydrilla verticillata (L.f.) Royle

  2 X Y

  XY

  X

  40 1,2 48 1600 60 1,9 114 3600 80 2,4 192 6400 100 3,21 321 10000

  2

  =21600 ∑ = 280 ∑ = 8,71 ∑ = 675 ∑

  Keterangan : X = konsentrasi (ppm)

  Y = % peredaman

  ( ∑ XY)−(∑ X)(∑ Y)/n

  a =

  2

  2 ( ) / ∑ X −(∑ X) n

  ( 675)−(280)(8,71)/5 187,24

  = = = 0,0316

  2 ( /

  21600)−(280) 5 5920

  b = Y � − aX�

  1,742 =

  − (0,0316)(56) =

  − 0,0292

• – 0,0292 Maka persamaan regresinya adalah Y = 0,0490X

  Nilai IC – 0,0292 50 50 = 0,0316X

  X = 1581,78 Maka IC

  50 ekstrak air Hydrilla verticillata (L.f.) Royle = 1581,78 ppm