PEMBERIAN EKSTRAK BIJI FENUGREEK (TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA TIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA GALUR WISTAR MENOPAUSE.
1
TESIS
PEMBERIAN EKSTRAK BIJI FENUGREEK
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL
MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA
TIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA
GALUR WISTAR MENOPAUSE
MARTA SETIABUDY
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
2
DENPASAR
2016
TESIS
PEMBERIAN EKSTRAK BIJI FENUGREEK
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL
MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA
TIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA
GALUR WISTAR MENOPAUSE
MARTA SETIABUDY
NIM. 1490761081
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2016
Lembar Pengesahan
TESIS INI TELAH DISETUJUI
TANGGAL : 19 OKTOBER 2016
Pembimbing I,
Pembimbing II,
Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And,
Prof. Dr. dr. I G M Aman, Sp.FK
FAACS
NIP.194606191976021001
NIP. 196412131971071001
Mengetahui,
Ketua Program Magister Ilmu Biomedik
Direktur
Program Pascasarjana,
Program Pascasarjana Universitas
Universitas Udayana,
Udayana,
Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc
Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S.(K)
NIP. 1958052119850312002
NIP. 195902151985102001
iii
TESIS
PEMBERIAN EKSTRAK BIJI FENUGREEK
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL
MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA
TIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA
GALUR WISTAR MENOPAUSE
Tesis ini untuk memperoleh Gelar Magister
Pada Program Magister, Program Studi Ilmu Biomedik pada
Program Pascasarjana Universitas Udayana
MARTA SETIABUDY
NIM. 1490761081
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2016
ii
Lembar Pengesahan
TESIS INI TELAH DISETUJUI
TANGGAL : 19 OKTOBER 2016
Pembimbing I,
Pembimbing II,
Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And,
Prof. Dr. dr. I G M Aman, Sp.FK
FAACS
NIP.194606191976021001
NIP. 196412131971071001
Mengetahui,
Ketua Program Magister Ilmu Biomedik
Direktur
Program Pascasarjana,
Program Pascasarjana Universitas
Universitas Udayana,
Udayana,
Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc
Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S.(K)
NIP. 1958052119850312002
NIP. 195902151985102001
iii
Tesis Ini Telah Diuji Pada
Tanggal 19 Oktober 2016
Penguji Tesis berdasarkan SK Rektor Universitas Udayana,
Nomor : ______________________
Tanggal ______________________
Tim Penguji
Penguji I : Prof. Dr. dr. Wimpie I Pangkahila, Sp.And, FAACS
Penguji II : Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK
Penguji III : Prof. Dr. dr. J Alex Pangkahila, M.Sc., Sp.And
Penguji IV : Dr. dr. Ida Sri Iswari, Sp.MK., M.Kes.
Penguji V : Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc
iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan di bawah ini :
Nama
: Marta Setiabudy
NIM
: 1490761081
Program Studi
: Magister Ilmu Biomedik Kekhususan Anti Aging
Medicine
Judul Tesis
: PEMBERIAN EKSTRAK BIJI KLABET
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL
MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA TIKUS PUTIH
(RATTUS NORVEGICUS) BETINA GALUR WISTAR
MENOPAUSE
Dengan ini menyatakan bahwa karya ilmiah Tesis/Disertasi* ini bebas plagiat.
Apabila di kemudian hari terbukti plagiat dalam karya ilmiah ini, maka saya bersedia
menerima sanksi sesuai peraturan Mendiknas RI No. 17 Tahun 2010 dan Peraturan
Perundang-undangan yang berlaku.
Denpasar, 19 Oktober 2016
Yang membuat pernyataan,
(Marta Setiabudy)
* Coret yang tidak perlu
v
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena atas
rahmat-Nya penelitian dan penyusunan tesis yang berjudul “Pemberian Ekstrak Biji
Klabet (Trigonella foenum-graecum) Secara Oral Meningkatkan Kadar
Estrogen pada Tikus Putih (Rattus norvegicus) Betina Galur Wistar Menopause
dapat diselesaikan.
Tesis ini disusun dalam rangka memenuhi persyaratan tugas akhir studi untuk
meraih gelar Magister pada Program Magister Program Studi Ilmu Kedokteran
Biomedik, Kekhususan Anti Aging Medicine, Program Pasca Sarjana Universitas
Udayana.
Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis mengucapkan terimakasih yang
sebesar besarnya kepada Prof. Dr. dr. Wimpie pangkahila, Sp.And, FAACS, selaku
pembimbing I dan Prof. Dr. dr. I G M Aman, Sp.FK selaku pembimbing II sekaligus
sebagai pembimbing akademik atas bimbingan, perhatian, dorongan, serta semangat
yang telah diberikan selama mengikuti program studi magister, khususnya dalam
penyelesaian tesis ini. Ucapan yang sama juga ditujukan kepada:
Rektor Universitas Udayana Prof. Dr. dr Ketut Suastika, Sp.PD-KEMD, atas
kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan
menyelesaikan program magister di Universitas Udayana. Direktur Program
Pascasarjana Universitas Udayana.
Prof. Dr. dr. AA. Raka Sudewi, Sp.S(K) atas kesempatan yang diberikan
kepada penulis untuk menjadi mahasiswa program magister pada Program
Pascasarjana Universitas Udayana.
vi
Ketua Program Studi Ilmu Biomedik Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila,
Sp.And., FAACS dan Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc atas kesempatan
yang diberikan kepada penulis untuk menjadi mahasiswa Program Magister ilmu
biomedik kekhususan Anti Aging Medicine, Universitas Udayana, yang juga telah
memberikan semangat, masukan dan bimbingan untuk segera menyelesaikan tesis ini.
Para dosen pengajar Program Studi Ilmu Biomedik Program Pascasarjana
Universitas Udayana, teman teman sependidikan dan seperjuangan (mahasiswa S2
antiaging medicine angkatan ke-X (tenAgers)), seluruh staf bagian ilmu biomedik
(mbak Amie, mbak Gek Wah, pak Edy, mbak Gek Eny), laboratorium pangan,
Laboratory Animal Unit bagian Farmakologi (pak Gede), laboratorium biomedik
terpadu (dr. Ayu Dewi, bu Amy) serta semua pihak yang telah membantu selama
pendidikan, penelitian, dan penulisan tesis yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Keluarga terkasih, orang tua dan mertua, suami saya dr. Samuel Budi Pranoto
atas semua usaha dan dukungannya dan anakku tercinta Sean Nehemiah Pranoto,
saudara saudari serta sahabat-sahabat tersayang dengan dukungan serta pengertian
yang luar biasa memberikan kesempatan untuk lebih berkonsentrasi menyelesaikan
tesis ini.
Kiranya Tuhan Yesus Kristus/ Yang Maha Esa selalu melimpahkan rahmatNya kepada semua pihak yang telah membantu pelaksanaan dan penyelesaian tesis
ini.
Denpasar, 9 Oktober 2016
Penulis
vii
ABSTRAK
PEMBERIAN EKSTRAK BIJI KLABET (TRIGONELLA FOENUMGRAECUM) SECARA ORAL MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN
PADATIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA
GALUR WISTAR MENOPAUSE
Dalam proses penuaan, manusia mengalami perubahan dalam dirinya yang
dipengaruhi oleh hormon. Hormon estrogen adalah salah satu hormon yang memiliki
pengaruh besar pada proses penuaan terutama wanita. Ketika wanita memasuki masa
menopause, level estrogen akan rendah dalam tubuh. Dalam kondisi tertentu, terapi
sulih hormone terutama dengan estrogen diberikan untuk mempertahankan kualitas
hidup. Fitoestrogen adalah alternatif pengganti hormon estrogen yang bersumber dari
tanaman yang memiliki kemiripan efek dengan 17, ß estradiol dan berikatan dengan
reseptor estradiol. Fenugreek dikenal sebagai salah satu sumber fitoestrogen.
Fenugreek mengandung saponin steroid seperti diosgenin yang dipercaya sebagai
salah satu prekursor hormon seks dan fitoestrogen lain seperti isoflavon. Tujuan
penelitian ini untuk membuktikan pemberian ekstrak biji Fenugreek secara oral
meningkatkan kadar estrogen pada tikus betina menopause.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan pre
test and post test control group design, yang dilaksanakan di Laboratory Animal Unit
bagian farmakologi dan laboratorium Biomedik Universitas Udayana. Penelitian ini
menggunakan 21 ekor tikus betina galur Wistar menopause (usia 18-18.5 bulan) yang
dibagi menjadi tiga kelompok, yaitu kelompok kontrol (P0) yang diberi plasebo,
kelompok perlakuan 1 (P1) yang diberi ekstrak biji fenugreek dosis 120 mg/100
gramBB dan kelompok perlakuan 2 (P2) diberi ekstrak biji fenugreek dosis 240
mg/100 gramBB. Perlakuan terhadap ketiga kelompok ini dilakukan selama 21 hari.
Kadar estrogen masing-masing kelompok di akhir penelitian dikomparasi
dengan one way anova dan menunjukkan nilai yang berbeda secara signifikan
terutama antara kelompok P0 dan P1. Uji perbandingan rerata kadar estrogen sebelum
dan setelah perlakuan dilakukan dengan paired t-test yang menunjukkan adanya
kenaikan kadar estrogen secara bermakna pada kelompok P1 yaitu sebesar 48%
sedangkan pada kelompok P2 tidak terdapat perbedaan bermakna sebelum dan
sesudah perlakuan.
Simpulan penelitian ini adalah pemberian ekstrak biji fenugreek dosis 120
mg/200 gramBB meningkatkan kadar estrogen secara bermakna pada tikus betina
menopause sedangkan pemberian ekstrak biji fenugreek dosis 240 mg/200gramBB
tidak meningkatkan kadar estrogen secara bermakna. Pemberian dosis yang lebih
tinggi tidak mempengaruhi kadar estrogen lebih banyak. Penelitian ini diharapkan
dapat dipakai sebagai dasar penelitian lebih lanjut untuk mengetahui dosis efektif
ekstrak biji fenugreek pada manusia sebagai peningkat kadar estrogen dan penurun
gejala menopause.
Kata kunci : Fenugreek, Estrogen , Menopause
viii
ABSTRACT
ADMINISTRATION OF ORAL FENUGREEK SEED EXTRACT
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) INCREASED LEVEL OF
ESTROGEN IN MENOPAUSE FEMALE WISTAR ALBINO RATS
(RATTUS NORVEGICUS)
In aging process, human experiences changes and some of those changes
are related to hormone level. Estrogen is one of the crucial hormones for women and
it has a lot of functions and works in many organs. By age, women go through
menopause phase which is a normal biologic process even though it signifies the end
of fertile phase and decreasing of estrogen level. Hormone replacement therapy,
particularly using estrogen hormone is needed for certain conditions to maintain the
quality of life. Phytoestrogens are plant compounds that are structurally and
functionally similar to 17, ß estradiol and bind to estradiol receptors. Fenugreek is
known as one of phytoestrogens source. Fenugreek contains saponin steroid such as
diosgenin which is precursor of sex hormones and also contains other phytoestrogen
such as isoflavon. The purpose of this study is to prove that giving fenugreek seed
extract orally increases estrogen level of menopausal female rats.
This research is an experimental study which applied randomized Pre test and
Post test Control Group design. Research conducted at Laboratory Animal Unit of
Pharmacology department and Biomedic laboratory, Udayana University. This
research was done on 21 menopause female Wistar strain rats (age 18-18.5 months
old), they were divided into three research groups. The first group was the control
group (P0) which was administrated with placebo. The next group was the treatment
group 1 (P1) which was administrated with fenugreek seed extract dose of 120
mg/200 gram body weight. While the last group was the treatment group 2 (P2) and
was administrated with fenugreek seed extract dose of 240 mg/200 gram body
weight. The treatment of the three groups was conducted for 21 days.
Estrogen level between groups at the end of treatment was compared using
one way anova and it was significantly different, specifically between group P0 and
P1. Comparison test of mean estrogen level before and after the treatment was done
with paired t-test and showed a 48% increased of the estrogen level significantly in
group P1. There was no significant difference of estrogen level before and after
treatment in group P2.
It can be concluded from this study that fenugreek seed extract dose of 120
mg / 200 gram body weight increased estrogen level of the menopause female rat
while giving fenugreek seed extract dose of 240 mg / 200gram body weight did not
increase estrogen level significantly. Giving higher dose did not affect level of
estrogen more. This study is expected to be used as the basis for further research to
determine the effective dose of fenugreek seed extract in humans as enhancing the
level of estrogen and lowering the symptoms of menopause.
Keywords: Fenugreek, Estrogen, Menopause
ix
DAFTAR ISI
Halaman
SAMPUL DALAM
i
PRASYARAT GELAR
ii
LEMBAR PENGESAHAN
iii
PENETAPAN PANITIA PENGUJI
iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
v
UCAPAN TERIMAKASIH
vi
ABSTRAK
viii
ABSTRACT
ix
DAFTAR ISI
x
DAFTAR GAMBAR
xiv
DAFTAR TABEL
xv
DAFTAR SINGKATAN
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
xviii
BAB I PENDAHULUAN
1
1.1 Latar Belakang
1
1.2 Rumusan Masalah
7
1.3 Tujuan Penelitian
7
1.4 Manfaat Penelitian
7
1.4.1 Manfaat Teoritis
7
x
1.4.2 Manfaat praktis
7
BAB II KAJIAN PUSTAKA
9
2.1 Fase-fase Penuaan
9
2.2 Hormon yang Mempengaruhi Proses Penuaan
12
2.3 Hormon Estrogen padaWanita
14
2.4 Menopause pada Wanita dan Perubahannya
20
2.5 Terapi Sulih Hormon
23
2.5.1 Estrogen sebagai Terapi Sulih Hormon
25
2.5.2 Fitoestrogen sebagai Alternatif Terapi Sulih Hormon
27
2.6 Pemanfaatan Biji Fenugreek Sebagai Terapi Sulih Hormon
32
2.6.1 Potensi Isoflavon, Lignan dan Koumestrol dalam Biji Fenugreek sebagai
Fitoestrogen
33
2.6.2 Potensi Saponin Steroid dalam Biji Fenugreek sebagai Fitoestrogen
35
BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS
44
3.1 Kerangka Berpikir
44
3.2 Konsep Penelitian
46
3.3 Hipotesis Penelitian
46
BAB IV METODE PENELITIAN
47
4.1 Rancangan Penelitian
47
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian
48
4.3 Populasi dan Sampel
49
xi
4.3.1 Subyek Penelitian
49
4.3.2 Kriteria Subyek
49
4.3.3 Besaran Sampel
49
4.3.4 Teknik Penentuan Sampel
51
4.4 Variabel
51
4.4.1 Klasifikasi Variabel
51
4.4.2 Definisi Operasional Variabel
52
4.5 Bahan dan Instrumen Penelitian
52
4.5.1 Bahan Penelitian
52
4.5.2 Instrumen Penelitian
53
4.6 Prosedur Penelitian
54
4.6.1 Pemberian Perlakuan
54
4.6.2 Proses Ekstraksi dan Analisis Kandungan Biji Fenugreek
55
4.6.3 Perhitungan Dosis Ekstrak Biji Fenugreek Untuk Subyek Penelitian
55
4.6.4 Alur Penelitian
56
4.6.5 Teknik Pengambilan Sampel
57
4.6.6 Mekanisme Kerja Penelitian
57
4.7 Analisis Statistik
58
BAB V HASIL PENELITIAN
60
5.1 Analisis Deskriptif dan Normalitas Data
60
5.2. Uji Homogenitas Varians Kadar Estrogen Antar Kelompok Sebelum dan
xii
Sesudah Perlakuan
62
5.3. Kadar Estrogen
62
5.3.1. Uji Komparabilitas Kadar Estrogen Sebelum Penelitian
62
5.3.2. Uji Komparabilitas Kadar Estrogen Sesudah Penelitian
63
5.3.3. Analisis Kadar Estrogen Sebelum dan Sesudah Perlakuan
64
BAB VI PEMBAHASAN HASIL PENELITIAN
66
6.1. Subjek Penelitian
66
6.2 Distribusi dan Homogenitas Data Hasil Penelitian
67
6.3 Kadar Estrogen Sebelum Perlakuan
67
6.4 Kadar Estrogen Sesudah Perlakuan
67
6.5 Pengaruh Pemberian Ekstrak biji fenugreek
68
BAB VII SIMPULAN dan SARAN
71
7.1 Simpulan
71
7.2 Saran
71
DAFTAR PUSTAKA
72
LAMPIRAN
79
xiii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Peran Hormon dalam Siklus Menstruasi (Rahmayanti, 2016)
16
Gambar 2.2 Fungsi Hormon Estrogen pada Wanita (Anomin, 2016)
18
Gambar 2.3 Bagan Klasifikasi Fitoestrogen (Sim, 2010)
28
Gambar 2.4 Pengaruh Fitoestrogen Bagi Tubuh (Mense et al., 2008)
31
Gambar 2.5 Tanaman, Daun dan Biji Fenugreek
33
Gambar 2.6 Mekanisme Kerja Isoflavon (Daidzein) sebagai Fitoestrogen
(Mueller, 2004)
35
Gambar 2.7 The Marker Degradation merupakan Gambaran Proses Diosgenin
sebagai Prekursor dari Hormon Sex (Dach, 2013)
Gambar 2.8 Bagan Kandungan Saponin Steroid dalam Fenugreek
39
40
Gambar 2.9 Bagan Metabolisme Testosteron dan Hubungannya dengan
Estrogen(Griffin dan Wilson, 2013)
42
Gambar 3.1 Bagan Konsep Penelitian
46
Gambar 4.1 Rancangan Penelitian
47
Gambar 4.2 Alur Penelitian
56
Gambar 5.1 Perbedaan Rerata Kadar Estrogen pada Kelompok Kontrol, Kelompok
Perlakuan 1 dan Kelompok Perlakuan 2
xiv
65
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Kandungan Fitoestrogen dalam Biji Fenugreek (Mital dan Sirimavo, 2014)
33
Tabel 2.2 Hasil Penapisan Fitokimia Fenugreek (Aisyah S., 2008)
35
Tabel 2.3 Perbandingan Konsentrasi Fenugreek dalam Ekstrak Metanol dan
Fraksi-fraksinya (Aisyah S., 2008)
36
Tabel 5.1. Hasil Analisis Deskriptif
61
Tabel 5.2. Hasil Uji Normalitas Kadar Estrogen
61
Tabel 5.3. Hasil Uji Homogenitas Kadar Estrogen
62
Tabel 5.4. Perbedaan Rerata Kadar Estrogen antar Kelompok Sebelum Diberi
Perlakuan
63
Tabel 5.5 Perbedaan Rerata Kadar Estrogen antar Kelompok Sesudah Diberi
Perlakuan
63
Tabel 5.6 Uji Least Significant Difference antara Masing-masing Kelompok
64
Tabel 5.7 Perbedaan Rerata Kadar Estrogen antar Kelompok Sebelum dan
Sesudah Diberikan Esktrak Biji Fenugreek
xv
64
DAFTAR SINGKATAN
GH: Growth Hormone
DHEA: Dehydroepiandrosterone
HRT: Hormone Replacement Therapy
VTE: Venous Thrombo Embolism
ASI: Air Susu Ibu
PMS: Premenstrual Syndrome
TPH: Terapi Pengganti Hormon
TSH: Terapi Sulih Hormon
ERT: Estrogen Replacement Therapy
IGF-I: Insulin Like Growth Factor 1
ER: Estrogen Receptor
LDL: Low Density Lipoprotein
HDL: High Density Lipoprotein
PJK: Penyakit Jantung Koroner
LH: Luteinizing Hormone
GnRH: Gonadothropin Releasing Hormone
FSH: Follicle Stimulating Hormone
HPLC: High Performance Liquid Chromatography
ELISA: Enzyme Linked Immunosorbent Assay
AF: Activation Factor
xvi
EDTA: Ethylen Tetra Diamine
PCOS: Polycystic Ovarian Syndrome
CMC 0.5%: Carboxymethyl Cellulose Natrium 0.5% (salt)
BB: Berat Badan
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Analisis kandungan Bahan
79
Lampiran 2 Ethical Clearance
83
Lampiran 3 Aktivitas Penelitian
84
Lampiran 4 Hasil Perhitungan kadar Estrogen Tikus dalam pg/ml
87
Lampiran 5 Analisis Statistik
88
xix
TESIS
PEMBERIAN EKSTRAK BIJI FENUGREEK
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL
MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA
TIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA
GALUR WISTAR MENOPAUSE
MARTA SETIABUDY
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
2
DENPASAR
2016
TESIS
PEMBERIAN EKSTRAK BIJI FENUGREEK
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL
MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA
TIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA
GALUR WISTAR MENOPAUSE
MARTA SETIABUDY
NIM. 1490761081
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2016
Lembar Pengesahan
TESIS INI TELAH DISETUJUI
TANGGAL : 19 OKTOBER 2016
Pembimbing I,
Pembimbing II,
Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And,
Prof. Dr. dr. I G M Aman, Sp.FK
FAACS
NIP.194606191976021001
NIP. 196412131971071001
Mengetahui,
Ketua Program Magister Ilmu Biomedik
Direktur
Program Pascasarjana,
Program Pascasarjana Universitas
Universitas Udayana,
Udayana,
Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc
Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S.(K)
NIP. 1958052119850312002
NIP. 195902151985102001
iii
TESIS
PEMBERIAN EKSTRAK BIJI FENUGREEK
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL
MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA
TIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA
GALUR WISTAR MENOPAUSE
Tesis ini untuk memperoleh Gelar Magister
Pada Program Magister, Program Studi Ilmu Biomedik pada
Program Pascasarjana Universitas Udayana
MARTA SETIABUDY
NIM. 1490761081
PROGRAM MAGISTER
PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK
PROGRAM PASCASARJANA
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2016
ii
Lembar Pengesahan
TESIS INI TELAH DISETUJUI
TANGGAL : 19 OKTOBER 2016
Pembimbing I,
Pembimbing II,
Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila, Sp.And,
Prof. Dr. dr. I G M Aman, Sp.FK
FAACS
NIP.194606191976021001
NIP. 196412131971071001
Mengetahui,
Ketua Program Magister Ilmu Biomedik
Direktur
Program Pascasarjana,
Program Pascasarjana Universitas
Universitas Udayana,
Udayana,
Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc
Prof. Dr. dr. A.A. Raka Sudewi, Sp.S.(K)
NIP. 1958052119850312002
NIP. 195902151985102001
iii
Tesis Ini Telah Diuji Pada
Tanggal 19 Oktober 2016
Penguji Tesis berdasarkan SK Rektor Universitas Udayana,
Nomor : ______________________
Tanggal ______________________
Tim Penguji
Penguji I : Prof. Dr. dr. Wimpie I Pangkahila, Sp.And, FAACS
Penguji II : Prof. dr. I Gusti Made Aman, Sp.FK
Penguji III : Prof. Dr. dr. J Alex Pangkahila, M.Sc., Sp.And
Penguji IV : Dr. dr. Ida Sri Iswari, Sp.MK., M.Kes.
Penguji V : Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc
iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
Saya yang bertanda tangan di bawah ini :
Nama
: Marta Setiabudy
NIM
: 1490761081
Program Studi
: Magister Ilmu Biomedik Kekhususan Anti Aging
Medicine
Judul Tesis
: PEMBERIAN EKSTRAK BIJI KLABET
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) SECARA ORAL
MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN PADA TIKUS PUTIH
(RATTUS NORVEGICUS) BETINA GALUR WISTAR
MENOPAUSE
Dengan ini menyatakan bahwa karya ilmiah Tesis/Disertasi* ini bebas plagiat.
Apabila di kemudian hari terbukti plagiat dalam karya ilmiah ini, maka saya bersedia
menerima sanksi sesuai peraturan Mendiknas RI No. 17 Tahun 2010 dan Peraturan
Perundang-undangan yang berlaku.
Denpasar, 19 Oktober 2016
Yang membuat pernyataan,
(Marta Setiabudy)
* Coret yang tidak perlu
v
UCAPAN TERIMA KASIH
Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa, karena atas
rahmat-Nya penelitian dan penyusunan tesis yang berjudul “Pemberian Ekstrak Biji
Klabet (Trigonella foenum-graecum) Secara Oral Meningkatkan Kadar
Estrogen pada Tikus Putih (Rattus norvegicus) Betina Galur Wistar Menopause
dapat diselesaikan.
Tesis ini disusun dalam rangka memenuhi persyaratan tugas akhir studi untuk
meraih gelar Magister pada Program Magister Program Studi Ilmu Kedokteran
Biomedik, Kekhususan Anti Aging Medicine, Program Pasca Sarjana Universitas
Udayana.
Pada kesempatan ini perkenankanlah penulis mengucapkan terimakasih yang
sebesar besarnya kepada Prof. Dr. dr. Wimpie pangkahila, Sp.And, FAACS, selaku
pembimbing I dan Prof. Dr. dr. I G M Aman, Sp.FK selaku pembimbing II sekaligus
sebagai pembimbing akademik atas bimbingan, perhatian, dorongan, serta semangat
yang telah diberikan selama mengikuti program studi magister, khususnya dalam
penyelesaian tesis ini. Ucapan yang sama juga ditujukan kepada:
Rektor Universitas Udayana Prof. Dr. dr Ketut Suastika, Sp.PD-KEMD, atas
kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan
menyelesaikan program magister di Universitas Udayana. Direktur Program
Pascasarjana Universitas Udayana.
Prof. Dr. dr. AA. Raka Sudewi, Sp.S(K) atas kesempatan yang diberikan
kepada penulis untuk menjadi mahasiswa program magister pada Program
Pascasarjana Universitas Udayana.
vi
Ketua Program Studi Ilmu Biomedik Prof. Dr. dr. Wimpie Pangkahila,
Sp.And., FAACS dan Dr. dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc atas kesempatan
yang diberikan kepada penulis untuk menjadi mahasiswa Program Magister ilmu
biomedik kekhususan Anti Aging Medicine, Universitas Udayana, yang juga telah
memberikan semangat, masukan dan bimbingan untuk segera menyelesaikan tesis ini.
Para dosen pengajar Program Studi Ilmu Biomedik Program Pascasarjana
Universitas Udayana, teman teman sependidikan dan seperjuangan (mahasiswa S2
antiaging medicine angkatan ke-X (tenAgers)), seluruh staf bagian ilmu biomedik
(mbak Amie, mbak Gek Wah, pak Edy, mbak Gek Eny), laboratorium pangan,
Laboratory Animal Unit bagian Farmakologi (pak Gede), laboratorium biomedik
terpadu (dr. Ayu Dewi, bu Amy) serta semua pihak yang telah membantu selama
pendidikan, penelitian, dan penulisan tesis yang tidak dapat disebutkan satu persatu.
Keluarga terkasih, orang tua dan mertua, suami saya dr. Samuel Budi Pranoto
atas semua usaha dan dukungannya dan anakku tercinta Sean Nehemiah Pranoto,
saudara saudari serta sahabat-sahabat tersayang dengan dukungan serta pengertian
yang luar biasa memberikan kesempatan untuk lebih berkonsentrasi menyelesaikan
tesis ini.
Kiranya Tuhan Yesus Kristus/ Yang Maha Esa selalu melimpahkan rahmatNya kepada semua pihak yang telah membantu pelaksanaan dan penyelesaian tesis
ini.
Denpasar, 9 Oktober 2016
Penulis
vii
ABSTRAK
PEMBERIAN EKSTRAK BIJI KLABET (TRIGONELLA FOENUMGRAECUM) SECARA ORAL MENINGKATKAN KADAR ESTROGEN
PADATIKUS PUTIH (RATTUS NORVEGICUS) BETINA
GALUR WISTAR MENOPAUSE
Dalam proses penuaan, manusia mengalami perubahan dalam dirinya yang
dipengaruhi oleh hormon. Hormon estrogen adalah salah satu hormon yang memiliki
pengaruh besar pada proses penuaan terutama wanita. Ketika wanita memasuki masa
menopause, level estrogen akan rendah dalam tubuh. Dalam kondisi tertentu, terapi
sulih hormone terutama dengan estrogen diberikan untuk mempertahankan kualitas
hidup. Fitoestrogen adalah alternatif pengganti hormon estrogen yang bersumber dari
tanaman yang memiliki kemiripan efek dengan 17, ß estradiol dan berikatan dengan
reseptor estradiol. Fenugreek dikenal sebagai salah satu sumber fitoestrogen.
Fenugreek mengandung saponin steroid seperti diosgenin yang dipercaya sebagai
salah satu prekursor hormon seks dan fitoestrogen lain seperti isoflavon. Tujuan
penelitian ini untuk membuktikan pemberian ekstrak biji Fenugreek secara oral
meningkatkan kadar estrogen pada tikus betina menopause.
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan pre
test and post test control group design, yang dilaksanakan di Laboratory Animal Unit
bagian farmakologi dan laboratorium Biomedik Universitas Udayana. Penelitian ini
menggunakan 21 ekor tikus betina galur Wistar menopause (usia 18-18.5 bulan) yang
dibagi menjadi tiga kelompok, yaitu kelompok kontrol (P0) yang diberi plasebo,
kelompok perlakuan 1 (P1) yang diberi ekstrak biji fenugreek dosis 120 mg/100
gramBB dan kelompok perlakuan 2 (P2) diberi ekstrak biji fenugreek dosis 240
mg/100 gramBB. Perlakuan terhadap ketiga kelompok ini dilakukan selama 21 hari.
Kadar estrogen masing-masing kelompok di akhir penelitian dikomparasi
dengan one way anova dan menunjukkan nilai yang berbeda secara signifikan
terutama antara kelompok P0 dan P1. Uji perbandingan rerata kadar estrogen sebelum
dan setelah perlakuan dilakukan dengan paired t-test yang menunjukkan adanya
kenaikan kadar estrogen secara bermakna pada kelompok P1 yaitu sebesar 48%
sedangkan pada kelompok P2 tidak terdapat perbedaan bermakna sebelum dan
sesudah perlakuan.
Simpulan penelitian ini adalah pemberian ekstrak biji fenugreek dosis 120
mg/200 gramBB meningkatkan kadar estrogen secara bermakna pada tikus betina
menopause sedangkan pemberian ekstrak biji fenugreek dosis 240 mg/200gramBB
tidak meningkatkan kadar estrogen secara bermakna. Pemberian dosis yang lebih
tinggi tidak mempengaruhi kadar estrogen lebih banyak. Penelitian ini diharapkan
dapat dipakai sebagai dasar penelitian lebih lanjut untuk mengetahui dosis efektif
ekstrak biji fenugreek pada manusia sebagai peningkat kadar estrogen dan penurun
gejala menopause.
Kata kunci : Fenugreek, Estrogen , Menopause
viii
ABSTRACT
ADMINISTRATION OF ORAL FENUGREEK SEED EXTRACT
(TRIGONELLA FOENUM-GRAECUM) INCREASED LEVEL OF
ESTROGEN IN MENOPAUSE FEMALE WISTAR ALBINO RATS
(RATTUS NORVEGICUS)
In aging process, human experiences changes and some of those changes
are related to hormone level. Estrogen is one of the crucial hormones for women and
it has a lot of functions and works in many organs. By age, women go through
menopause phase which is a normal biologic process even though it signifies the end
of fertile phase and decreasing of estrogen level. Hormone replacement therapy,
particularly using estrogen hormone is needed for certain conditions to maintain the
quality of life. Phytoestrogens are plant compounds that are structurally and
functionally similar to 17, ß estradiol and bind to estradiol receptors. Fenugreek is
known as one of phytoestrogens source. Fenugreek contains saponin steroid such as
diosgenin which is precursor of sex hormones and also contains other phytoestrogen
such as isoflavon. The purpose of this study is to prove that giving fenugreek seed
extract orally increases estrogen level of menopausal female rats.
This research is an experimental study which applied randomized Pre test and
Post test Control Group design. Research conducted at Laboratory Animal Unit of
Pharmacology department and Biomedic laboratory, Udayana University. This
research was done on 21 menopause female Wistar strain rats (age 18-18.5 months
old), they were divided into three research groups. The first group was the control
group (P0) which was administrated with placebo. The next group was the treatment
group 1 (P1) which was administrated with fenugreek seed extract dose of 120
mg/200 gram body weight. While the last group was the treatment group 2 (P2) and
was administrated with fenugreek seed extract dose of 240 mg/200 gram body
weight. The treatment of the three groups was conducted for 21 days.
Estrogen level between groups at the end of treatment was compared using
one way anova and it was significantly different, specifically between group P0 and
P1. Comparison test of mean estrogen level before and after the treatment was done
with paired t-test and showed a 48% increased of the estrogen level significantly in
group P1. There was no significant difference of estrogen level before and after
treatment in group P2.
It can be concluded from this study that fenugreek seed extract dose of 120
mg / 200 gram body weight increased estrogen level of the menopause female rat
while giving fenugreek seed extract dose of 240 mg / 200gram body weight did not
increase estrogen level significantly. Giving higher dose did not affect level of
estrogen more. This study is expected to be used as the basis for further research to
determine the effective dose of fenugreek seed extract in humans as enhancing the
level of estrogen and lowering the symptoms of menopause.
Keywords: Fenugreek, Estrogen, Menopause
ix
DAFTAR ISI
Halaman
SAMPUL DALAM
i
PRASYARAT GELAR
ii
LEMBAR PENGESAHAN
iii
PENETAPAN PANITIA PENGUJI
iv
SURAT PERNYATAAN BEBAS PLAGIAT
v
UCAPAN TERIMAKASIH
vi
ABSTRAK
viii
ABSTRACT
ix
DAFTAR ISI
x
DAFTAR GAMBAR
xiv
DAFTAR TABEL
xv
DAFTAR SINGKATAN
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
xviii
BAB I PENDAHULUAN
1
1.1 Latar Belakang
1
1.2 Rumusan Masalah
7
1.3 Tujuan Penelitian
7
1.4 Manfaat Penelitian
7
1.4.1 Manfaat Teoritis
7
x
1.4.2 Manfaat praktis
7
BAB II KAJIAN PUSTAKA
9
2.1 Fase-fase Penuaan
9
2.2 Hormon yang Mempengaruhi Proses Penuaan
12
2.3 Hormon Estrogen padaWanita
14
2.4 Menopause pada Wanita dan Perubahannya
20
2.5 Terapi Sulih Hormon
23
2.5.1 Estrogen sebagai Terapi Sulih Hormon
25
2.5.2 Fitoestrogen sebagai Alternatif Terapi Sulih Hormon
27
2.6 Pemanfaatan Biji Fenugreek Sebagai Terapi Sulih Hormon
32
2.6.1 Potensi Isoflavon, Lignan dan Koumestrol dalam Biji Fenugreek sebagai
Fitoestrogen
33
2.6.2 Potensi Saponin Steroid dalam Biji Fenugreek sebagai Fitoestrogen
35
BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS
44
3.1 Kerangka Berpikir
44
3.2 Konsep Penelitian
46
3.3 Hipotesis Penelitian
46
BAB IV METODE PENELITIAN
47
4.1 Rancangan Penelitian
47
4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian
48
4.3 Populasi dan Sampel
49
xi
4.3.1 Subyek Penelitian
49
4.3.2 Kriteria Subyek
49
4.3.3 Besaran Sampel
49
4.3.4 Teknik Penentuan Sampel
51
4.4 Variabel
51
4.4.1 Klasifikasi Variabel
51
4.4.2 Definisi Operasional Variabel
52
4.5 Bahan dan Instrumen Penelitian
52
4.5.1 Bahan Penelitian
52
4.5.2 Instrumen Penelitian
53
4.6 Prosedur Penelitian
54
4.6.1 Pemberian Perlakuan
54
4.6.2 Proses Ekstraksi dan Analisis Kandungan Biji Fenugreek
55
4.6.3 Perhitungan Dosis Ekstrak Biji Fenugreek Untuk Subyek Penelitian
55
4.6.4 Alur Penelitian
56
4.6.5 Teknik Pengambilan Sampel
57
4.6.6 Mekanisme Kerja Penelitian
57
4.7 Analisis Statistik
58
BAB V HASIL PENELITIAN
60
5.1 Analisis Deskriptif dan Normalitas Data
60
5.2. Uji Homogenitas Varians Kadar Estrogen Antar Kelompok Sebelum dan
xii
Sesudah Perlakuan
62
5.3. Kadar Estrogen
62
5.3.1. Uji Komparabilitas Kadar Estrogen Sebelum Penelitian
62
5.3.2. Uji Komparabilitas Kadar Estrogen Sesudah Penelitian
63
5.3.3. Analisis Kadar Estrogen Sebelum dan Sesudah Perlakuan
64
BAB VI PEMBAHASAN HASIL PENELITIAN
66
6.1. Subjek Penelitian
66
6.2 Distribusi dan Homogenitas Data Hasil Penelitian
67
6.3 Kadar Estrogen Sebelum Perlakuan
67
6.4 Kadar Estrogen Sesudah Perlakuan
67
6.5 Pengaruh Pemberian Ekstrak biji fenugreek
68
BAB VII SIMPULAN dan SARAN
71
7.1 Simpulan
71
7.2 Saran
71
DAFTAR PUSTAKA
72
LAMPIRAN
79
xiii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Peran Hormon dalam Siklus Menstruasi (Rahmayanti, 2016)
16
Gambar 2.2 Fungsi Hormon Estrogen pada Wanita (Anomin, 2016)
18
Gambar 2.3 Bagan Klasifikasi Fitoestrogen (Sim, 2010)
28
Gambar 2.4 Pengaruh Fitoestrogen Bagi Tubuh (Mense et al., 2008)
31
Gambar 2.5 Tanaman, Daun dan Biji Fenugreek
33
Gambar 2.6 Mekanisme Kerja Isoflavon (Daidzein) sebagai Fitoestrogen
(Mueller, 2004)
35
Gambar 2.7 The Marker Degradation merupakan Gambaran Proses Diosgenin
sebagai Prekursor dari Hormon Sex (Dach, 2013)
Gambar 2.8 Bagan Kandungan Saponin Steroid dalam Fenugreek
39
40
Gambar 2.9 Bagan Metabolisme Testosteron dan Hubungannya dengan
Estrogen(Griffin dan Wilson, 2013)
42
Gambar 3.1 Bagan Konsep Penelitian
46
Gambar 4.1 Rancangan Penelitian
47
Gambar 4.2 Alur Penelitian
56
Gambar 5.1 Perbedaan Rerata Kadar Estrogen pada Kelompok Kontrol, Kelompok
Perlakuan 1 dan Kelompok Perlakuan 2
xiv
65
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Kandungan Fitoestrogen dalam Biji Fenugreek (Mital dan Sirimavo, 2014)
33
Tabel 2.2 Hasil Penapisan Fitokimia Fenugreek (Aisyah S., 2008)
35
Tabel 2.3 Perbandingan Konsentrasi Fenugreek dalam Ekstrak Metanol dan
Fraksi-fraksinya (Aisyah S., 2008)
36
Tabel 5.1. Hasil Analisis Deskriptif
61
Tabel 5.2. Hasil Uji Normalitas Kadar Estrogen
61
Tabel 5.3. Hasil Uji Homogenitas Kadar Estrogen
62
Tabel 5.4. Perbedaan Rerata Kadar Estrogen antar Kelompok Sebelum Diberi
Perlakuan
63
Tabel 5.5 Perbedaan Rerata Kadar Estrogen antar Kelompok Sesudah Diberi
Perlakuan
63
Tabel 5.6 Uji Least Significant Difference antara Masing-masing Kelompok
64
Tabel 5.7 Perbedaan Rerata Kadar Estrogen antar Kelompok Sebelum dan
Sesudah Diberikan Esktrak Biji Fenugreek
xv
64
DAFTAR SINGKATAN
GH: Growth Hormone
DHEA: Dehydroepiandrosterone
HRT: Hormone Replacement Therapy
VTE: Venous Thrombo Embolism
ASI: Air Susu Ibu
PMS: Premenstrual Syndrome
TPH: Terapi Pengganti Hormon
TSH: Terapi Sulih Hormon
ERT: Estrogen Replacement Therapy
IGF-I: Insulin Like Growth Factor 1
ER: Estrogen Receptor
LDL: Low Density Lipoprotein
HDL: High Density Lipoprotein
PJK: Penyakit Jantung Koroner
LH: Luteinizing Hormone
GnRH: Gonadothropin Releasing Hormone
FSH: Follicle Stimulating Hormone
HPLC: High Performance Liquid Chromatography
ELISA: Enzyme Linked Immunosorbent Assay
AF: Activation Factor
xvi
EDTA: Ethylen Tetra Diamine
PCOS: Polycystic Ovarian Syndrome
CMC 0.5%: Carboxymethyl Cellulose Natrium 0.5% (salt)
BB: Berat Badan
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Analisis kandungan Bahan
79
Lampiran 2 Ethical Clearance
83
Lampiran 3 Aktivitas Penelitian
84
Lampiran 4 Hasil Perhitungan kadar Estrogen Tikus dalam pg/ml
87
Lampiran 5 Analisis Statistik
88
xix