Cara kerja pembenihan bakteri docx
A. Menanamkan mikroorganisme dari media cair ke media padat
(lempeng agar) secara streaking/goresan
1. Lempeng dasar luar dari agar nutrient yang akan ditanami dibagi menjadi
3 bagian yaitu: A, B, C dan ditandai dengan spidol
Gambar :
2. Dengan menggunakan pipet yang steril diteteskan suatu biakan campuran
nutrient broth atau sampel air yang akan diamati (air got dan air sumur),
pada tepi lempeng agar di bagian A.
3. Dengan ose steril dilakukan streaking yang rapat dari tetesan inokulum
pada bagian A. (lebij kurang 1/3 bagian dari selururh lempeng agar)
4. Sterilkan ose di atas api Bunsen, kemudian dinginkan ose tersebut
sebentar di udara atau dengan cara memasukkan ose pada tepi lempeng
agar yang belum ditanami mikroorganisme.
5. Ose yang dingin tasi goreskan satu kali lagi melewati bagian A, kemudian
buat goresan pada bagian B.
6. Ose disterilkan di atas lampu bunsen dan setelah itu dinginkan seperti
pada no 5, goreskan lagi satu kali melewati biakan di bagian B, dan
selanjutnya dibuat streaking pada bagian C dengan proses yang tidak
begitu rapat, sehingga kuman yang ditanami akan tumbuh terpisah pada
bagian C.
Gambar :
B. Menanam mikroorganisme dari media padat lempeng agar ke media
semisolid
Tujuan : Untuk mengetahui cara menanam mikroorganisme dari media padat
lempeng agar ke media semisolid dan untuk mengetahui ada tidaknya
pergerakan mikroorganisme yang ditanam. Dalam hal ini mikroorganisme
yang akan kita gunakan adalah proteus.
Cara kerja :
1. Dengan menggunakan
jarum
lurus
(nedlee)
yang
terlebih
dahulu
disterilkan di atas lampu bunsen dan sudah didinginkan, ambil satu koloni
biakan mikroorganisme proteus yang disediakan.
2. Nedlee dengan inokulum ini selanjutnya ditusukkan tegak lurus pada
media yang semisolid yang tersedia sampai lebih kurang 1 cm di bawah
permukaan medium, kemudian nedlle tersebut ditarik keluar melalui arah
penusukan semula dengan hati-hati tanpa merusak medium (lihat gambar
1)
C. Menanam mikroorganisme dari media padat lempeng agar ke media
agar miring
Tujuan : Menanam mikroorganisme dari media padat lempeng agar ke media
agar miring
Cara kerja :
1. Dengan ose steril ambil satu koloni dari biakan mikroba, yang tumbuh
pada agar lempeng nutrient
2. Inokulumkan tersebut digoreskan pada permukaan medium nutrient agar
slan yang tersedia, sperti gambar :
D. Menanam Mikroorganisme dari media lempeng agar ke media cair
Tujuan : Untuk mengetahui cara menanam mikroorganisme dari media
lempeng agar ke media cair
Alat dan bahan :
1. Ose
2.
3.
4.
5.
6.
Lampu Bunsen
Tabung reaksi
Inkubator
Nutrient cair
Mikroorganisme proteus
Cara kerja :
1. Dengan ose yang sudah disterilkan dan didinginkan, ambil satu koloni dari
biakan mikroorganisme proteus yang disediakan
2. Buatlah sedikit demi sedikit pada dinding tabung medium cair (nutrient
broth)
suatu
suspense
mikroorganisme
yang
halus
dengan
jalan
mencampurkan inokulum dengan media cair tersebut.
3. Kocoklah tabung biakan dengan hati-hati agar suspense kuman dapat
bercampur dengan seluruh medium cair tersebut.
Catatan tanbahan :
Ada beberapa cara streaking lain selain yang telah dijelaskan di atas.
Cara tersebut adalah sebagai berikut :
a. Kuadran Streak method
1. Goreskan sebagian mikroorganisme pada sebagian kecil tepi lempeng
agar dengan ose (bagian 1).
2. Sterilkan ose dengan cara dipanaskan di atas lampu bunsen dan
dinginkan sebentar selama lebih kurang 5 menit.
3. Buatlah 5 atau 6 goresan dari bagian 1 ke bagian 2 di tepi lempeng
4.
5.
6.
7.
agar.
Ose dipanaskan kembali dan kemudian dinginkan.
Buatlah 6 atau 7 goresan dari bagian 2 ke bagian 3.
Ose dipanaskan kembali dan kemudian dinginkan.
Buatlah beberapa goresan dari 3 ke bagian 4 sampai memenuhi sisa
medium yang ada.
8. Ose dipanaskan lagi sebelum diletakkan/disimpan.
Gambar :
b. Radian streak method
1. Goreskan suspense mikroorganisme pada sebagian kecil dari tepi
lempeng agar dengan ose ( bagian 1).
2. Ose panaskan dan dinginkan
3. Buatlah 7-8 goresan dari bagian 1 hingga memenuhi sisa medium
(bagian 2)
4. Ose panaskan kembali dan dinginkan
5. Buatlah goresan melintang (cross streak) melewati goresan pada
bagian 2.
6. Ose dipanaskan kembali sebelum diletakan/disimpan
Gambar :
(lempeng agar) secara streaking/goresan
1. Lempeng dasar luar dari agar nutrient yang akan ditanami dibagi menjadi
3 bagian yaitu: A, B, C dan ditandai dengan spidol
Gambar :
2. Dengan menggunakan pipet yang steril diteteskan suatu biakan campuran
nutrient broth atau sampel air yang akan diamati (air got dan air sumur),
pada tepi lempeng agar di bagian A.
3. Dengan ose steril dilakukan streaking yang rapat dari tetesan inokulum
pada bagian A. (lebij kurang 1/3 bagian dari selururh lempeng agar)
4. Sterilkan ose di atas api Bunsen, kemudian dinginkan ose tersebut
sebentar di udara atau dengan cara memasukkan ose pada tepi lempeng
agar yang belum ditanami mikroorganisme.
5. Ose yang dingin tasi goreskan satu kali lagi melewati bagian A, kemudian
buat goresan pada bagian B.
6. Ose disterilkan di atas lampu bunsen dan setelah itu dinginkan seperti
pada no 5, goreskan lagi satu kali melewati biakan di bagian B, dan
selanjutnya dibuat streaking pada bagian C dengan proses yang tidak
begitu rapat, sehingga kuman yang ditanami akan tumbuh terpisah pada
bagian C.
Gambar :
B. Menanam mikroorganisme dari media padat lempeng agar ke media
semisolid
Tujuan : Untuk mengetahui cara menanam mikroorganisme dari media padat
lempeng agar ke media semisolid dan untuk mengetahui ada tidaknya
pergerakan mikroorganisme yang ditanam. Dalam hal ini mikroorganisme
yang akan kita gunakan adalah proteus.
Cara kerja :
1. Dengan menggunakan
jarum
lurus
(nedlee)
yang
terlebih
dahulu
disterilkan di atas lampu bunsen dan sudah didinginkan, ambil satu koloni
biakan mikroorganisme proteus yang disediakan.
2. Nedlee dengan inokulum ini selanjutnya ditusukkan tegak lurus pada
media yang semisolid yang tersedia sampai lebih kurang 1 cm di bawah
permukaan medium, kemudian nedlle tersebut ditarik keluar melalui arah
penusukan semula dengan hati-hati tanpa merusak medium (lihat gambar
1)
C. Menanam mikroorganisme dari media padat lempeng agar ke media
agar miring
Tujuan : Menanam mikroorganisme dari media padat lempeng agar ke media
agar miring
Cara kerja :
1. Dengan ose steril ambil satu koloni dari biakan mikroba, yang tumbuh
pada agar lempeng nutrient
2. Inokulumkan tersebut digoreskan pada permukaan medium nutrient agar
slan yang tersedia, sperti gambar :
D. Menanam Mikroorganisme dari media lempeng agar ke media cair
Tujuan : Untuk mengetahui cara menanam mikroorganisme dari media
lempeng agar ke media cair
Alat dan bahan :
1. Ose
2.
3.
4.
5.
6.
Lampu Bunsen
Tabung reaksi
Inkubator
Nutrient cair
Mikroorganisme proteus
Cara kerja :
1. Dengan ose yang sudah disterilkan dan didinginkan, ambil satu koloni dari
biakan mikroorganisme proteus yang disediakan
2. Buatlah sedikit demi sedikit pada dinding tabung medium cair (nutrient
broth)
suatu
suspense
mikroorganisme
yang
halus
dengan
jalan
mencampurkan inokulum dengan media cair tersebut.
3. Kocoklah tabung biakan dengan hati-hati agar suspense kuman dapat
bercampur dengan seluruh medium cair tersebut.
Catatan tanbahan :
Ada beberapa cara streaking lain selain yang telah dijelaskan di atas.
Cara tersebut adalah sebagai berikut :
a. Kuadran Streak method
1. Goreskan sebagian mikroorganisme pada sebagian kecil tepi lempeng
agar dengan ose (bagian 1).
2. Sterilkan ose dengan cara dipanaskan di atas lampu bunsen dan
dinginkan sebentar selama lebih kurang 5 menit.
3. Buatlah 5 atau 6 goresan dari bagian 1 ke bagian 2 di tepi lempeng
4.
5.
6.
7.
agar.
Ose dipanaskan kembali dan kemudian dinginkan.
Buatlah 6 atau 7 goresan dari bagian 2 ke bagian 3.
Ose dipanaskan kembali dan kemudian dinginkan.
Buatlah beberapa goresan dari 3 ke bagian 4 sampai memenuhi sisa
medium yang ada.
8. Ose dipanaskan lagi sebelum diletakkan/disimpan.
Gambar :
b. Radian streak method
1. Goreskan suspense mikroorganisme pada sebagian kecil dari tepi
lempeng agar dengan ose ( bagian 1).
2. Ose panaskan dan dinginkan
3. Buatlah 7-8 goresan dari bagian 1 hingga memenuhi sisa medium
(bagian 2)
4. Ose panaskan kembali dan dinginkan
5. Buatlah goresan melintang (cross streak) melewati goresan pada
bagian 2.
6. Ose dipanaskan kembali sebelum diletakan/disimpan
Gambar :