Ekstraksi Metanol dan Pengkisatan

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (3), 2016, 281-289

Tersedia online di: ht t p://ej ournal-balit bang.kkp.go.id/index.php/j ra

  

AKTIVITAS ANTIBAKTERI PENYEBAB VIBRIOSIS TERHADAP UDANG W INDU DARI

EKSTRAK HERBAL M ANGROVE Sonneratia alba DAN Bruguiera gymnorrhiza

#

M uliani , Bunga Rante Tampangallo, dan M uharijadi Atmomarsono

  

Balai Penelitian dan Pen gemb angan Bud idaya Air Payau

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak herbal mangrove Sonnerat ia

alba dan Bruguiera gymnorrhiza terhadap penyebab penyakit vibriosis pada udang windu . Daun mangrove

dan masing-masing diambil dari Kabupaten Maros dan Pangkep. Sampel daun dikering-

  S. alba

  B. gymnorrhiza

anginkan selama dua minggu, ditepungkan, diekstraksi dengan metanol 80%, dan dievaporasi. Rendemen

yang diperoleh dipartisi menggunakan dua jenis pelarut yaitu butanol dan dietileter. Uji bioassay dilakukan

baik se cara kualitatif maupun kuan titatif melalu i penentuan minimum inhibit ion concent r at ion (MIC) dan

minimum bact ericidal concent rat ion (MBC). Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas antibakteri ekstrak

mangrove dan lebih tinggi terhadap dibanding . Fraksi

  S. alba

  B. gymnorrhiza V. parahemolyt icus V. har veyi dietileter dan ekstrak metanol S. alba , serta fraksi butanol

  B. gymnorrhiza memiliki antibakteri yang tergolong

kuat. Ekstrak metanol S. alba bersifat toksik terhadap benur udang windu pada konsentrasi di atas 2.000

m g/L.

  KATA KUNCI: antibakteri; herbal mangrove; S. alba ;

  B. gymnorrhiza ; udang windu ABSTRACT: Activity of anti-bacteria cause of vibriosis on tiger shrimp from mangrove herbs Sonnerat ia alba and Bruguiera gymnorrhiza extract. By: M uliani, Bunga Rante Tampangallo, and M uharijadi At momarsono

  

The experiment was aimed t o examine t he activity of anti-bact erial of mangrove herbs Sonneratia alba and Bruguiera

gymnorrhiza ext ract on t iger shrimp. M angroves leaf of S. alba and B. gymnorrhiza were t aken from M aros and

Pangkep Regency. M angrove leaves dried aired approximat ely t wo weeks, made int o flour, ext ract ed using 80%

met anol, and evaporat ed. Yield were t hen part it ioned using t wo t ypes of solvent s are but anol and diet ilet er. Bioassay

t est bot h qualyt at ively and quantit at ively by det erminat ion of minimum inhibit ion concentrat ion (MIC) and minimum

bact ericidal concentrat ion (M BC). The result s showed t hat t he ant i-bact erial act ivit y mangrove ext ract of S. alba and

  B. gymnorrhiza higher in V. parahemolyticus compared against V. harveyi. Dietileter fraction and t he met anol ext ract

of S. alba and but hanol fract ion of B. gymnorrhiza have st rongly as ant i-bact erial. The met hanol ext ract of S. alba

will be t oxic t o black t iger shrimp fry at concent rat ions above of 2,000 mg/L.

  KEYW ORDS: anti-bacterial; mngrove herbs; S. alba; B. gymnorrhiza; Penaeus monodon

  

PENDAHULUAN s a at in i p e n yak it in i m a sih m e ru p a k an k e n d a la

budidaya udang t erut ama di pant i perbenihan.

  Penyakit vibrio sis at au penyakit udang berpendar merupakan salah satu jenis penyakit udang yang banyak Be r b a g a i u p a ya t e la h d ila k u k a n u n t u k menimbulkan kematian baik di t ambak maupun di panti m e n an ggu langi se rangan p e nyakit pad a b u d id aya perbenihan. Vibrio sis disebabkan o leh beberapa jenis u dan g, n am u n h ingga saat in i ke m at ian u dan g d i b a k t e r i vib r io s e p e r t i Vi br i o h a r veyi , Vi br i o t am b ak dan d i p an t i p e rb e n ih an akib at se ran gan

  parahaemolyt iucus Vibrio alginolyt icus Vibrio fischeri

  , , . Di penyakit masih saja t erus t erjadi. Penggunaan bahan ant ara b eberapa jenis vibrio yang paling berbahaya alam t ermasu k mangro ve dan t anaman aso siasinya

  V. har veyi et al

  adalah (Kannapiran ., 2009) dan sampai unt uk penanggulangan penyakit di bidang perikanan mu lai dirint is me skip un m asih t e rbat as pada skala # la b o r a t o r iu m d i a n t a r a n ya s e b a g a i a n t ib a k t e r i

  Ko r e sp o n d e nsi: Balai Pe n elit ian d an Pe n ge m b an g an Bu d id aya et al

  (Velmurugan & Cit arasu, 2010; Rajasekar ., 2011;

  Air Payau . Jl. Makmu r Dg . Sit akka No . 1 2 9 , Mar o s 9 0 51 2 , Rajeswari et al ., 2012). Su lawesi Se lat an , In d o n e sia. Te l. + (0 4 1 1 ) 3 7 1 5 4 4 mul i ani m@ yahoo.com

  E-m ail: Co p yrigh t @ 20 16, Jurnal Riset Akuakultur, p -ISSN 1 907-675 4, e -ISSN 250 2-65 34

  281 Co p yrig ht @ 20 16, Jurnal Riset Aku akultur, p -ISSN 1 907-675 4, e-ISSN 250 2-65 34 Aktivit as antibakt eri penyebab vibriosis terhadap udang windu ..... (M uliani)

  Beberapa jenis mangro ve telah dilaporkan berperan sebagai ant ibakt eri pada udang sepert i

  ,

  masing-masing adalah adalah 1 mg/L dan 0,1 mg/L. Berdasarkan hal t ersebut m aka d ilaku kan p e n e lit ian yan g b e rt u ju an u n t u k m e lih a t a k t ivit a s a n t ib a k t e r i

  V. parahaemolyt icus

  dan

  V. har veyi

  t erhadap

  S. alba

  ., 2011; Millo n et al ., 2012). Muliani et al . (2015) melapo rkan bahwa n ilai MIC ekst rak me t an o l

  et al

  (Haq

  V. mimicus

  , dan

  V. parahaemolyt icus

  salmonella t yphi

  d a n

  ,

  Pseudomonas aeruginosa

  ,

  dysent eriae

  , dan bakt eri Gram negat if penyebab penyakit p ad a m an u sia t e rm as u k Escher ichia coli , Shi g ell a

  Sarcina lut era

  , dan

  B. subt ilis

  ,

  Bacillus cereus

  ,

  St aphylo- coccus aureus

  merupakan jenis mangro ve yan g juga t elah b anyak dikaji se b agai an t ibakt e ri. Ke du a jenis man gro ve in i d ilapo rkan men ghamb at p ert u mb u h an b akt e ri Gram po sit if yait u

  V. h ar veyi

  V. parahaemolyt icus

  dan

  Ekstraksi M etanol dan Pengkisat an

  , sedangkan fraksi diet ilet e r dan but ano l dikisat kan menggunakan

  freezedr yer

  dilaru t kan d e n g a n p e la r u t d ie t ile t e r d a la m g e la s p ia la diho mo genkan dan dimasukkan ke co ro ng pemisah, die ndapkan h ingga t erb ent u k dua lapisan. Masing- m asin g lap isan d ike lu arkan d ari co ro n g p e m isah . Pelarut an ini diulang 3-4 kali hingga lapisan diet ilet er t e rlih at je rn ih . Se m e n t a ra, e n d ap an ya n g t e rsisa dilarutkan dengan but anol. Proses yang dilakukan sama dengan pemisahan dengan diet ilet er. Apabila lapisan b ut an o l t erlih at jernih, pe misahan dih en t ikan dan e nd ap an yan g t idak laru t dalam bu t ano l diko le ksi s e b a g a i fr ak s i air d a n d ik is at k a n m e n gg u n ak a n

  B. gymnnor rhiza

  dan

  S. alba

  Ekst rak

  Fraksinasi Hasil Ekstraksi

  Rot at or y evaporat or .

  sebanyak 5 g, dit ambahkan larut an met anol 80% hingga terendam. Cairan hasil penyaringan d it am p u n g s e d a n g ka n a m p a s d ir e n d am k e m b ali dengan met ano l selama 24 jam dan disaring kembali. Untuk memaksimalkan ekstrak bahan-bahan aktif maka perendaman selama 24 jam dilakukan t iga kali at au t e rgan t u n g t in gkat ke ke ru h an re n d am an . Ap ab ila re nd am an sud ah t erlihat je rn ih m aka pe re nd am an dihent ikan. Larut an simplisia hasil ekst raksi disaring ulang menggunakan kertas filter dan dikisatkan dengan menggunakan

  B. gymnnorrhiza

  Te p u ng (sim p lisia) d au n m an gro ve S. alba d an

  (ukuran 1 mm) dan diekst rak menggunakan pelarut met ano l 80%.

  , dari herbal mangro ve

  B. gymnnorrhiza kering, dit epung (simplisia), disaring

  d a n

  S. al ba

  Dau n (d a u n m u d a d an d au n t u a )

  Pem buat an Tepung (Sim plisia)

  yang digunakan p ad a p e n e lit ian in i m asin g-m asin g d iko le ksi d ari Kabu pat en Maro s dan Kabupat en Pangkep Pro vinsi Sulawesi Selat an (Gambar 1). Pengambilan sampel daun dilakukan secara keseluruhan baik daun t ua maupun masih muda, selanju t nya dibersihkan dan dikering- anginkan dalam suhu ruang selama kurang lebih dua minggu.

  B. gymnnorrhiza

  dan

  S. alba

  Daun

  BAHAN DAN M ETODE Pengambilan dan Pengeringan Daun M angrove

  dan B. gymnorrhiza pada budidaya udang.

  S. alba

  B. gymnorrhiza

  S. alba

  R. mucronat a

  ., 2010; Babuselvam

  Acant hus ilicifolius

  . (20 12) melap o rkan b ah wa fraksi b u t an o l d ari d au n

  et al

  ikan. Selanjut nya Sap t iani

  Flavobact erium spp penyebab penyakit bakt erial pada

  efektif t erhadap bakteri

   E. agallocha

  . (2011); Lait h & Najiah (2014) melapo rkan bahwa

  et al

  Se la in it u , je n is m a n g r o ve in i d a p a t d ijad ikan se b agai alt e rn at if p e n go b at an p e n yakit vibriosis pada larva lo bst er (Baskaran & Mo han, 2012). Sement ara, Lait h

  ., 2 0 1 2 ) .

  et al

  et al

  V. har veyi

  (Manilal

  V. parahaemolyticus

  , d a n

  V. h ar veyi

  ,

  Ser r at ia s p . Aer om on a s h yd r op h i l a

  ,

   Baci llus subt ilis

  , V. vulnificus , V. alginolyt icus , V. anginllarum , dan V. lohi . Kedua jenis mangro ve t ersebut juga efekt if t erhadap p at o ge n ika n se p e rt i

  Vibrio harveyi

  efekt if t erhadap

  Salichornia brachiata

  dan

  m e n gh a m b at p e r t u m b u h a n

  le b ih b aik dibanding ekst rak et ilaset at , sedangkan Ramesh

  Se la in je n is m an gro ve yan g t e lah d ise b u t kan ,

  V. har veyi

  V. har veyi .

  , dan

  V. parahaemolyt icus

  mampu menghambat pert umbuhan bakt eri pat o gen p a d a ik a n d i a n t a r a n ya Aer om ona s h yd r op hyl a ,

  Exocaria agllocha

  . (2010) melapo rkan bahwa met o de ekst rak dengan klo ro fo rm dari daun

  et al

  Ravikumar

  et al ., 2015).

  berbeda secara signifikan dengan ekst rak et ano l dan met ano l (Sreenivasa

  Escherichia coli

  , dan

  ,

  et al .

  Aeromonas hydrophyla

  t erhadap

  A. ilicifolius

  . Lapo ran lain m en yeb u t kan bah wa daya h amb at e t il ase t at d ari

  Rhizophora mucronat a

  , dan

  A. ofcinalis

  ,

  Avicenia marina

  VSH5 dengan diamet er hambat an 16,4 mm dibanding dengan ekst rak daun

  lebih po t ensial sebagai ant i V. har veyi

  A. ilicifolius

  (2 014) me lap o rkan b ahwa me t o d e ekst rak dengan acet o n dari daun

  rot at or y evaporat or . Co p yrigh t @ 20 16, Jurnal Riset Akuakultur, p -ISSN 1 907-675 4, e -ISSN 250 2-65 34

  283

  . Uji MIC dilakukan dengan merujuk pada p ro sedur yang diperkenalkan o leh Kasanah & Isn an se t yo (2 0 1 3 ) d e n g an m e n gg u n akan m e t o d e

  dilakukan dengan mengisi 40 µL media nut rien brot h

  (NB) ke dalam set iap sumur plat mikro , kecuali pada sumur plat mikro unt uk ko nt ro l (100 mL). Selanjut nya set iap sumura n ditambahkan 40 µL ekstrak mangrove. Pada sumur plat mikro unt uk ko nt ro l media, ko nt ro l pelarut (DMSO), dan kont ro l ant ibio tik t idak dilakukan penambahan ekst rak mangro ve. Pada kont ro l masing- masing digunakan 40 mL DMSO 10% (ko nt ro l pelarut ) dan ant ibio t ik rifampisin 40 mL (ko nt ro l ant ibio t ik).

  Selanjutnya, suspensi bakteri ditambahkan 20 µL ke

  dalam semua sumur plat mikro kecuali pada ko nt ro l media dan diinkubasi pada suhu ruang selama 24 jam. Pe n g u jia n d iu la n g s e b an yak t ig a ka li. In d ik a t o r

  pertumbuhan sel bakteri dengan menambahkan 10 µL

  la ru t an 3 -(4 ,5 -d im e t h ylt h iaz o l-2 -yl)-2 ,5 -d ip h e n yl- t et razo lium bro mid (MTT) 5 g/L (Wang et al ., 2010).

  Penentuan Nilai M inimum Inhibition Concentration (M IC) M inimum inhibit ion concent rat ion

  (MIC) dari ekst rak m e t a n o l d a n h a s il fr a k s in a s i S. a l ba d a n

  B. gymnnor r hi za

  d iu jika n t e rh ad a p

  V. har veyi

  d an

  V. parahaemolyt icus

  mikrowell plat e dilut ion assay .

  mikrow ell plat e assay

  Ekst rak m an gro ve h asil faraksin asi yan g t e lah dilarut kan dalam pelarut DMSO 10% (5 g/mL) sebanyak

  100 µL dimasukkan pada sumur plat mikro pertama

  dan ket ujuh, sedangkan pada sumur plat mikro yang

  lainnya diisi dengan 50 µL akuades. Selanjutnya sebanyak 50 µL ekstrak mangrove dari sumur plat

  m ik r o p e r t a m a d a n s u m u r p la t m ik r o k e t u ju h dipindahkan ke sumur plat mikro berikut nya (sumur p la t m ik r o k e d u a d a n k e d e la p a n ), k e m u d ia n d ih o m o g e n k a n d e n g a n p e m ip e t a n b e r u la n g . Pengenceran dilakukan hingga ke sumur plat mikro

  keenam dan dua belas. Media NB sebanyak 30 µL ke

  dalam masing-masin g sumu r plat mikro , b aik p ada Gambar1. Daun mangro ve S. alba (A) dan

  B. gymnnorrhiza (B) yang digunakan unt uk uji akt ivit as

  ant ibakt eri dan ant iWSSV pada udang windu

  

Figure 1. M angrove leaf of S. alba (A) and B. gymnnorrhiza (B) used for ant i-bact erial and ant i-WSSV

act ivit y on black t iger shrimp

  (A)

  S. alba

  (B)

  d en gan 96 su m uran (Kasan ah & Isn an se t yo , 2 0 1 3). Me t o d e p e n gujian

  melalui m et o d e

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (3), 2016, 281-289 Uji Aktivitas Anti-Bakt erial Secara Kualitatif

  V. har veyi

  Uji bio assay unt uk melihat akt ivit as ant i-

  V. har veyi

  d a n a n t i- V. p a r a ha em ol yt i cu s d a r i S. a l ba d a n

  B. g ym nnor r hi za

  d ilak u ka n d e n g an t e k n ik “

  Hi g h Throughput Screening

  ” (Langfield

  et al

  ., 2004; Ganju

  et al

  ., 2008; Karuppusamy & Rajasekaran, 2009). Hasil fr ak sin as i d a n e ks t r ak m e t a n o l d ar i ke d u a je n is m a n g r o ve t e r s e b u t d it im b a n g m a s in g -m a s in g sebanyak 5 mg dan 10 mg, kemudian dilarut kan dengan 1 mL DMSO (

  dimet hylsulfoxide

  ) 10% dalam tabung mikro volume 1,5 mL (Kasanah & Isnansetyo , 2013). Suspensi iso lat

  (ko de 275) dan

  B. gymnorrhiza

  V. parahaemolyt icus

  (ko de iso lat -3) masing-masing dikult ur dalam media

  nut rient brot h

  (NB) 10 mL selama 24 jam pada suhu ruang sambil digo yang. Sebanyak 1 mL hasil kult ur t ersebut selanjut nya di subkult ur selama empat jam dalam 10 mL media NB (10 8 CFU/mL) dan diencerkan hingga dipero leh kepadat an suspensi bakt eri V. har veyi dan

  V. parahaemolyt icus

  sebesar 10 5 CFU/mL (Kadriah, 2012).

  Su s p e n s i

  V. h ar veyi

  d a n

  V. pa r ah aem ol yt i cu s

  d igu n akan se b agai b io in d ikat o r p ad a u ji bioassay ekst rak mangro ve

  S. alba

  dan

  B. gymnnorrhiza Co p yrig ht @ 20 16, Jurnal Riset Aku akultur, p -ISSN 1 907-675 4, e-ISSN 250 2-65 34 Aktivit as antibakt eri penyebab vibriosis terhadap udang windu ..... (M uliani)

  ko nt ro l maupun pada sumur plat mikro yang berisi

  B. gymnorrhiza

  Posit ive Positif

  S. alba Positif

  V. ha rveyi V. paraha emolyticus V. harveyi V. pa rahaemolyticus V. harveyi V. parahaemolyticus V. harveyi V. para haemolyticus

  V. parahaemolyt icus

Table 1. Result of qualit at ive bioassay t est of S. alba and B. gymnorrhiza on V. harveyi and V. parahaemolyticus

  dan

  V. har veyi

  t erhadap

  dan

  Posit ive Positif

  S. alba

  secara kualit at if

  bioassay

  Tabel 1. Hasil uji

  V. parahemolyt icus (Tabel 1).

  menunjukkan bahwa kedua jenis mangro ve t ersebut po sit if mengandung ant i- V. har veyi dan ant i-

  V. parahaemolyt icus

  Posit ive Pos itif

  Posit ive Posit if

  V. har veyi

  Posit ive Positif

  Buthanol fract ion Fraksi d ietileter

  M eta nol ext raction Fraksi butan ol

  Anti-bacterial activities ) Ekstrak etanol

  Kinds of mangrove Aktivitas an tibakteri (

  W ater fract ion Jen is mangrove

  Posit ive Fraksi air

  Posit ive Positif

  Posit ive Pos itif

  Posit ive Pos itif

  Posit ive Posit if

  Posit ive Positif

  Posit ive Pos itif

  Posit ive Positif

  B. gym norrhi za Positif

  Posit ive

  Posit ive Positif

  Posit ive Positif

  dan

  t erhadap

  ekstrak mangrove. Suspensi bakteri sebanyak 20 µL

  Ekst rak met ano l

   in vit ro

  pada ko nsent rasi 1 mg/L, 10 mg/L, 100 mg/L, 1.000 mg/L, dan 10.000 mg/L dengan ulangan masing-masing t iga kali. Uji t ant ang ekst rak mangro ve secara

  V. har veyi

  diuji t ant ang dengan

   B. gymnorrhiza

  dan

  S. alba

  Uji Tantang Secara In Vitro M etanol S. alba dan B. gymnorrhiza Terhadap V. harveyi

  V. har veyi

  Penentuan nilai MBC dilakukan set elah pengamat an MIC, yait u d e n gan cara b iakan d a lam p lat m ikro dikult ur pada m edia TCBSA unt uk menge t ahui ada t id akn ya p e rt um b u h an b akt e ri. Biakan d iin ku b asi selama 24 jam pada suhu 28°C. Ko nsent rasi ekst rak mangrove t erendah diindikasikan dengan tidak adanya pert umbuhan ko lo ni bakt eri (nilai MBC). Dat a hasil uji nilai MBC dianalisis secara dekript if.

  Penentuan Nilai M inimum Bactericidal Concentration (M BC)

  B. gymnorrhiza .

  dan

  S. alba

  ekst rak mangro ve dianalisis secara dekript if unt uk menget ahui nilai MIC dari

  bioassay

  dit ambahkan ke dalam campuran sumur plat mikro kecuali pada ko nt ro l media dan diinkubasi pada suhu ru ang selama 24 jam. Pen ambahan MTT dilakukan set et lah 24 jam masa inkubasi. Perubahan warna me- dia dari kuning menjadi ungu, menunjukkan adanya p ert u m bu han se l bakt e ri (e kst rak m an gro ve t idak memiliki akt ivit as ant ibakt eri), sedangkan jika warna media t et ap ber warna kuning (t idak berubah set elah penambahan MTT) t idak ada pert umbuhan sel bakt eri. Hal ini mengindikasikan adanya akt ivit as ant ibakt eri dari ekst rak mangro ve. Ko nsent rasi ekst rak mangro ve t erendah di mana t idak t erjadi perubahan warna (t idak ada pert umbuhan sel bakt eri) merupakan nilai MIC dari ekst rak t ersebut (Kasanah & Isnanset yo , 2013). Dat a hasil uji

  dengan

  pada 2.000 mg/L, 4.000 mg/L, 6.000 mg/L, dan 8.000 mg/L dilakukan t erhadap

  B. gymnrrhiza

  in vitro

  dan

  S. alba

  Hasil u ji akt ivit as an t ib akt e ri se cara ku alit at if ekst rak met ano l (ekst rak kasar) dan hasil fraksinasi dari

  HASIL DAN BAHASAN Hasil Uji Bioassay Secara Kualitatif

  . Lar va udang yang digunakan adalalh PL-12 yang diambil dari unit perbenihan ko mersil di Kabupat en Barru, Sulawesi Selat an. Wadah kaca digunakan sebagai wadah uji, diisi air laut 2 L dengan salinit as 28 ppt d a n la r va u d a n g w in d u PL-1 2 se b a n ya k 3 0 e ko r. Mo rt alit as udang windu diamat i set elah 96 jam.

  alba

  , 1 mg/L, 10 mg/L, 100 mg/L, 1.000 mg/L, dan 10.000 m g/L de ngan ulan gan m asin g-masin g t iga kali. Uji t o ksisit as dengan ko nsent rasi 2.000 mg/L, 4.000 mg/ L, 6.000 mg/L, dan 8.000 mg/L dilakukan t erhadap S.

  t erhadap lar va udang windu digunakan ko nsent rasi yang sama pada uji t antang secara

  S. alba

  B. gymnorrhiza

  Uji t o k s is it a s e k s t r a k m e t a n o l S. a l ba d a n

  B. gymnorrhiza Terhadap Larva Udang W indu

  Uji Toksisitas Ekstrak M etanol S. alba dan

  V. har veyi maka d ilakukan p en gam at an p o p ulasi V. har veyi menggunakan media TCBS agar.

  d alam t ab u n g ad alah 1 0 6 CFU/m L. Ta b u n g ku lt u r diinkubasi selama 24 jam pada suhu ruang dengan digo yang. Unt uk m en ge t ah ui p en garuh p em be rian e kst rak h e rb al m an gro ve , t e rh ad ap p e rt u m b u h an

  mL) sebanyak 100 µL sehingga konsentrasi V. har veyi

  dengan t iga kali ulangan. Ke dalam set iap t abu ng yang berisi ekst rak mangro ve se suai konsent rasi yang telah dit entukan, dimasukkan biakan bakt eri yang berumur empat jam (10 8 CFU/

  Dietileter fraction Co p yrigh t @ 20 16, Jurnal Riset Akuakultur, p -ISSN 1 907-675 4, e -ISSN 250 2-65 34

  285

  masing 24 ± 3,78 unt uk daun dan 24 ± 3,78 unt uk bat ang (Melki

  . (2013) menyat akan bahwa bahan antibakteri memiliki daya hamb at yang kuat jika nilai MIC-nya

  et al

  m e m ilik i a k t ivit a s a n t ib a k t e r i ya n g le b ih k u a t dibanding ekst rak daun dengan daya hambat masing 10,33 ± 1,53 unt uk rant ing dan 6,00 ± 1,73 ekst rak air pada konsentrasi yang sama yaitu 1.000 µg/mL. Abed

  S. alba

  lebih t inggi dibanding ekst rak air. Lebih lanjut d ikat akan b ah wa e kst rak m et an o l ran t ing

  har veyi

  memiliki daya hambat t erhadap V.

  S. caseolaris

  ., 2011). Avenido & Serrano (2012) melapo rkan bahwa ekst rak met ano l dari rant ing dan daun

  et al

  harveyi yang t ergo lo ng kuat dengan diamet er masing-

  nya berkisar 600-1. 500 µg/mL, dan daya hambat rendah jika nilai MIC lebih besar dari 1.600

  me m iliki akt ivit as an t i- V.

  S. alba

  dari kedua jenis mangro ve ini t ergo lo ng kuat pada semua fraksi yang diuji dengan nilai MIC ant ara 0,05-50 mg/L. Ekst rak met ano l dari d au n d an bat an g

  V. parahaemolyt icus

  t e r g o lo n g k u a t (MIC 5 0 m g /L d a n 5 0 0 m g /L), sedangkan fraksi air lemah (MIC 5.000 mg/L). Akt ivit as ant i

  B. gymnorrhiza fraksi but ano l dan diet ilet er

  mangro ve

  V. har veyi

  mg/L), sedangkan fraksi die t ile t er t ergo lo n g le mah dengan nilai MIC sebesar 5.000 mg/L). Ant i-

  V. har veyi yang t ergo lo ng kuat (MIC 50 mg/L dan 500

  memiliki ant i-

  adalah 500 µg/mL, daya hambat sedang jika nilai MIC-

  µg/mL.

  masing-masing pada ko nsent rasi 150 µg/mL dan 175 µg/mL. Fraksi air dan fraksi but ano l

  W at er fract ion Fraksi butanol But hanol fract ion

  Jenis mangrove Kinds of mangrove

  50 M IC dan M BC (mg/L) terhadap V. parahaemolyt icus M IC and M BC (mg/L) on V. parahaemolyt i cus

  0.05

  0.05 B. gymnorrhi za 5,000

50 500 500

  0.05

  0.05

  S. alba 50 500 5,000

  Fraksi dietileter Dietileter fraction

  Fraksi butanol But hanol fraction

  Fraksi air W ater fraction

  Fraksi dietileter Dietilet er fract ion

  parahaemolyt icus

Tabel 2. Result of M IC and M BC t est of S. alba and B. gymnorrhiza fract inat ions on V. harveyi and V. parahaemolyt icus

Fraksi air

  Hasil Uji Tantang Secara In Vitro dengan V. harveyi

  d an V.

  V. har veyi

  t e rh ad ap

  B. gymnor r hiza

  d an

  

S. alba

  disajikan pada Tabel 3. Pada Tabel Tabel 2. Hasil u ji MIC d an MBC h asil fraksin asi

  V. har veyi

  u n t u k m e lih at ko nsen t rasi amban g bawah dan amb ang at as yang mematikan

  in vit r o

  Hasil u ji t ant an g se cara

  S. alba

  parahemolyt icus

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (3), 2016, 281-289 Hasil Uji M IC dan M BC

  lebih t inggi dibanding nilai MIC d a n MBC t e r h a d a p

  V. parahaemolyt icus sama pada set iap fraksi yait u 0,05

  t ert inggi pada fraksi air dengan nilai 50 mg/L, kemudian fraksi but ano l dan selanjut nya fraksi diet ilet er dengan nilai MIC masing-masing 500 mg/L dan 5.000 mg/L. Nilai MIC mangro ve ini t erhadapi

  S. alba

  dari

  V. har veyi

  . Semakin rendah nilai MIC dan MBC suat u bahan akt if maka efekt ivit as bahan t ersebut semakin t inggi, demikian pula sebaliknya. Hasil uji MIC dan MBC pada Tabel 2 menunjukkan bahwa akt ivit as ant i-

  V. har veyi

  dibanding t erhadap

  V. parahemolyt icus

  . Ha l in i mengindikasikan bahwa kedua jenis mangro ve lebih efekt if terhadap

  V. p a r a h em ol yt i cus

  V. har veyi

  S. alba

  Pada Tabel 2 t erlihat pula bahwa nilai MIC dan MBC hasil fraksinasi dari kedu a jenis mangro ve t ersebut t erhadap

  V. parahemolyt icus .

  dan ant i-

  V. har veyi

  d ari ke d u a je n is m angro ve t ersebut t idak berbeda. Hal ini menunjukkan bahwa ke d ua je n is m an gro ve t erse b u t p o t e n sial se bagai penghasil ant i-

  V. par ahemolyt icus

  d an

  V. harveyi

  Nilai MIC dan MBC dari semua fraksi t erhadap

  B. gymnorrhiza disajikan pada Tabel 2.

  Hasil uji MIC dan MBC t erhadap hasil fraksinasi dari S. alba dan

  mg/L. Hasil penelit ian sebelumnya menunjukkan bahwa nilai MIC ekst rak met ano l

  t erhadap

  dan V.

  dan

  V. angillar um

  Sedangkan Dhayanit hi et al . (2013) melapo rkan bahwa ekst rak met ano l menunjukkan adanya akt ivit as an t ib akt eri t erh ad ap

  Vi br i o sp . penyebab penyakit pada udang adalah 0,1 µg/L.

  t e rh ad a p e n am je n is b akt e ri

  caseol ar i s

  . (2 0 1 3 ) melapo rkan bahwa nilai MIC ekst rak air mangro ve S.

  et al

  po t ensial sebagai penghasil ant i-vibrio sis pada b u d id aya u d an g win d u. Sh am su d d in

  S. alba

  adalah 0,1 mg/L. Hasil uji MIC dan MBC pada Tabel 2 menunjukkan bahwa fraksi air

  V. parahaemolyt icus

  B. gymnorrhiza t erhadap V. har veyi

  V. har veyi

  . (2015) melaporkan bahwa nilai MIC ekst rak met an o l

  et al

  t e rt in ggi pada fraksi bu t ano l de ngan n ilai MIC 5 0 mg/L disusul dengan fraksi diet ile t er d an fraksi air dengan nilai MIC masing-masing 500 mg/L dan 5.000 mg/L. Seme nt ara akt ivit as an t i V. par t ahaemolyt icus t ert inggi pada fraksi but ano l dengan nilai MIC 0,05 mg/L; kemudian fraksi diet ilet er dan selanjut nya fraksi air dengan nilai MIC masing-masing 50 mg/L dan 500 mg/L. Muliani

  B. g ym n or r h i za

  d a r i

  V. har veyi

  Ak t ivit a s a n t i

  et al ., 2015).

  adalah 0,1 mg/L (Muliani

  V. par ahaemolyt icus

  adalah 1 mg/L sedang t e rhadap

  M IC dan M BC (mg/L) terhadap V. harveyi M IC and M BC (mg/L) on V. harveyi

  Aktivit as antibakt eri penyebab vibriosis terhadap udang windu ..... (M uliani)

  Tabel 3. Po pulasi V. har veyi (lo g CFU/mL) set elah 24 uji t ant ang secara in vit ro

  S. alba

  B. gymnorrhiza

  dengan ekst rak met ano l dan

  

Table 3. V. harveyi populat ion (log CFU/mL) aft er 24 hours in vit ro challenge wit h

met hanol ext ract of S. alba and B. gymnorrhiza Vibrio

  Konsent rasi sp. ( Vibrio sp. Concentr ation ) Konsent rasi (log CFU/m L) Concetr ations S. alba

  B. gym nor rihza 1 mg /L 7 .6 9 7 .9 8 1 0 m g/L 7 .8 2 7 .6 7 1 0 0 mg /L 7 .8 6 7 .8 1 1 ,00 0 m g/L 6 .7 1 6 .6 7 1 0 ,0 0 0 mg /L

  7 .9 8 Ko n tr o l (tan p a ekstr ak mang r o ve) 8 .9 6 8 .2 6

  Control (without mangrove ext ract) Sum ber ( ): Muliani . (201 5)

  Source et al S. alba

  3 t erlih at b ah wa e kst rak m e t ano l d e n gan penelit ian sebelumnya menunjukkan bahwa po pulasi

  Vibrio V. har veyi

  ko nsentrasi 10.000 mg/L memat ikan bakt eri sp. bakt eri pada ko nsent rasi 1, 10, 10 0, dan

  B. gymnorrhiza

  hingga 100%, sedangkan memat ikan 1.000 mg/L, masing-masing adalah 6,69; 7,82; 7,86;

  Vibrio

  sp. sekit ar 3,4% dibanding dengan ko nt ro l. Oleh dan 6,71 lo g CFU/mL; sed angkan pada ko nsent rasi karena it u, uji in vit ro ke t ah ap b eriku t nya den gan 10.0 00 mg/L t idak ad a lagi p ert umbuh an V. har veyi

  et al ko nsent rasi 2.000 mg/L, 4.000 mg/L, 6.000 mg/L, dan (Muliani ., 2015). S. alba 8.000 mg/L hanya menggunakan (Gambar 2).

  Hasil Uji Toksisit as V. har veyi

  Pada Gambar 2 t erlihat bahwa po pulasi Hasil u ji t o ksist as u nt u k m e lih at ko nse n t rasi t ert inggi set elah 24 jam kult ur t erdapat pada ko nt ro l ambang bawah dan ambang atas yang mematikan udang

  (t an p a e kst rak m an gro ve ), ke m u d ian ko n se n t rasi windu disajikan pada Tabel 4. Pada Tabel 4 t erlihat 2.000 mg/L dan 4.000 mg/L. Pada Gambar 2 t erlihat

  S. alba

  bahwa baik ekst rak met ano l maupun ekst rak

  V. har veyi

  pula bahwa t idak ada pert umbuhan pada met ano l

  B. gymnorrhiza dengan ko nsent rasi 10.000

  k o n s e n t r a s i 6 .0 0 0 m g /L d a n 8 .0 0 0 m g /L. Ha s il

  9

  )

8 L

  7.57

  8

  /m U

6.79 F

  7

  i C ey g

  6

  o rv

  (l a h n

  5 .

  o

  V

  

3.87

ti

  4

  si la u la p u o

  3

  p p o i

  P y

  2

  e rv

  1

  a h .

  V 4,000 mg/L 6,000 mg/L 8,000 mg/L Ko ntro l ( Control ) Awal ( Init ial ) 2,000 mg/L

  Konsent rasi ( Concent rat ion )

  V. har veyi

  Gambar 2. Po pulasi (lo g CFU/mL) set elah 24 jam uji t ant ang dengan ekst rak met ano l

  S. alba

Figure2. V. harveyi populat ion (log CFU/mL) aft er 24 hours challenged wit h met hanol ext ract of

S. alba

  Co p yrig ht @ 20 16, Jurnal Riset Aku akultur, p -ISSN 1 907-675 4, e-ISSN 250 2-65 34

  Jurnal Riset Akuakult ur, 11 (3), 2016, 281-289

  Tabel 4. Hasil uji t o ksisit as ekst rak met ano l S. alba dan B. gymnorrhiza t erhadap lar va udang windu pada ko nsent rasi yang berbeda

  

Table 4. Toxicit y t est result of met hanol ext ract ed of S. alba and B. gymnorrhiza on t iger shrimp post

larvae at different concent rat ions Mort ali t as (%) larva udang windu set elah 96 j am Konsent rasi

  Tiger shr imp post lar vae m or tality (%) after 9 6 hour s Concetrations S. alba

  B. gymnor r ihza 1 mg /L 1 2 .2 2 13 .3 3 1 0 m g /L 1 2 .2 2 5 .5 5 1 0 0 m g/L 1 7 .7 8 18 .8 9 1 ,00 0 mg /L 3 1 .1 1 95 .5 6 1 0 ,0 0 0 m g/L 10 0 1 0 0 Ko n tr o l (tan p a ekstr ak man gr o ve)

  1 7 .7 8 17 .7 8 Control (without mangrove extract)

  Sum ber ( Source ): Muliani et al . (2 015) S. alba

  Tabel 5. Hasil uji To ksisit as e kst rak m et ano l d aun t erhadap benur u dang windu

  P. monodon

  ( ) set elah 96 jam

  

Table 5. Toxisit y t est of met hanol ext ract of S. alba leaf on t iger shrimp post lar vae (P. monodon)

aft er 96 hours Perl akuan Ti ngkat kem at ian l arva udang wi ndu

  Treatments M or tality of tiger shr imp post lar vae (%) 0 mg /L (ko n tr o l/ cont rol ) 3 6 .6 7 2 ,00 0 m g/L 7 6 .6 7 4 ,00 0 m g/L 1 00 6 ,00 0 m g/L 1 00 8 ,00 0 m g/L 1 00

  mg/L memat ikan udang 100%. Pada ko nsent rasi 1.000 2 01 6). Lapo ran lain m en ye bu t kan b ah wa p o p ulasi

  S. alba Vibrio

  mg/L ekst rak metano l memat ikan udang windu bakteri sp. dalam air pemeliharaan udang windu

  B. gymnorrhiza

  hingga 31,11% sedangkan 95,56%. Oleh set elah 96 jam perendaman dengan ekst rak met ano l 3 karena it u, uji t o ksisit as ke t ahap berikut nya dengan S. alba 1.000 mg/L adalah 1,78 x 10 CFU/mL (Nurbaya

  et al ko nsent rasi 2.000 mg/L, 4.000 mg/L, 6.000 mg/L, dan ., 2016). S. alba 8.000 mg/L hanya menggunakan (Tabel 5).

KESIM PULAN

  Pada Tabel 5 t erlihat bahwa pada ko nsent rasi 4.000 Akt ivit as an t ib akt e ri e kst rak h e rb al m an gro ve

  S. alba

  mg/L, 6.00 0 mg/L, dan 8.00 0 mg/L e kst rak

  S. a l ba t e r t in g g i p a d a fr a k s i a ir s e d a n g k a n sudah bersifat t o ksik t erhadap benur udang windu.

  B. gymnorrhiza

  pada fraksi but ano l. Ant ibakt eri dari Ha s il p e n e lit ia n s e b e lu m n ya d ila p o r k a n b a h w a kedua jenis mangro ve t ersebut t ergo lo ng kuat dan mo rt alit as u dang windu p ada p enggu naan ekst rak memiliki akt ivit as ant i- V. parahemolyt icus lebih t inggi

  S. alba

  me t ano l pada ko n se n t rasi 1.0 00 m g/L dan

  V. har veyi S. alba

  d ib an din g an t i- . Ekst rak m et an o l 10.000 mg/L masing-masing sebesar 26,67% dan 100% b ersifat t o ksik t e rh ad ap be nu r ud an g win du p ad a

  et al

  (Muliani ., 20 15). Hal in i m enu nju kkan bah wa ko nsent rasi di at as 2.000 mg/L. ekst rak metano l dari daun mangro ve ini sudah bersifat t o ksik di at as ko nsent rasi 1.000 mg/mL. Uji t ant ang

  UCAPAN TERIM A KASIH in vivo

  secara dalam wadah pemeliharaan udang windu

  Vibrio

  menunjukkan bahwa po pulasi bakt eri sp. pada Te rim a kas ih ke p ad a re kan -re kan p e n e lit i d an

  S. alba

  pemberian ekst rak met ano l pada ko nsent rasi t eknisi Labo rat o rium Kesehat an Ikan dan Lingkungan 5

   et al

  1.000 mg/L adalah 5,68 x 10 CFU/mL (Muliani ., yang penuh dedikasi dan t anggung jawab membant u

  Co p yrigh t @ 20 16, Jurnal Riset Akuakultur, p -ISSN 1 907-675 4, e -ISSN 250 2-65 34

  287 Co p yrig ht @ 20 16, Jurnal Riset Aku akultur, p -ISSN 1 907-675 4, e-ISSN 250 2-65 34 Aktivit as antibakt eri penyebab vibriosis terhadap udang windu ..... (M uliani)

  t erlaksananya penelit ian ini. Penelitian ini didanai o leh APBN DIPA BPPBAP Maro s Tahun 2014.

  Jounal of M icrobiol- ogy and Ant imocrobial , 6(2), 29-36.

  .

  Rhi zophor a mucronat a

  Ma n ila l, A. , Me r d e k io s , B., t d h a ya d h u lla , A. , Mut hukumar, C., & Melkie, M. (2010). An in vit ro an t a go n ist ic e ffica cy valid at io n o f

  Jour n a l of Et hnophrmacology , 94, 279-281.

  Peper om i a g al i oi des .

  Langfield, R.D., Scarano , F.J., Heit zman, M.E., Ko no do , M., Hammo nd, G.B., & Net o , C.C. (2004). Use o f mo dified micro plat e bio assay met ho d t o invest i- gat e ant ibcat erial ac t ivit y in t he Peruvian medici- n a l p la n t

  against select ed bact erial pat ho gens.

  Melki, So edharma, D., Effendi, H., & Must o pa, A.Z.

  Excoecaria agallocha

  , p. 43- 47. Lait h, A.A., & Najiah, M. (2014). Ant imo cro bial act ivi- t ies o f blinding t ree,

  UMTAS

  Flavobacterium spp.

  against

  agallocha

  S.H.M.A.W., Sifzizul, T.M., Nadirah, M., & Habsah, M. (2011). In vit ro antimicrobial activity o f Exoecaria

  Asian Pac. J. Trop. Dis ., 5(1):28-32.

  (20 11 ). Bio po t en si t u mb u han m an gro ve un t u k pencegahan penyakit vibrio sis pada udang windu.

  M at eri workshop dan Pelat ihan Bi op r osp ek t i n g Ba h an Al a m Kel a ut a n I I .

  Vibrio

  against

  Cardiospermum halicacubum

  Ra ja s e k a r, T. , Us h a r a n i, J. , Sa k t h ive l, M., & Deivasigamani, B. (2011). Immuno st imulat o r y ef- fect s o f

  Forum Inovasi Teknologi Akuakult ur (FITA) Surbaya, 25-26 April 2016, 9 hlm.

  Nurbaya, Susianingsih, E., & Muliani. (2016). Pengaruh t eknik ekst raksi daun mangro ve t erhadap param- eter immun, to tal vibrio, dan sint asan udang windu pada skala labo rat o rium.

  M a ka l a h t el a h diseminarkan pada Seminar Nasional Tahunan XIII UGM pada t anggal 13 Agust us 2016 . Jo gjakart a, 15 hlm.

  , re sp o n s im u n , d an sint asan p ascalar va u d an g windu pada penggunaan ekst rak mangro ve dengan t e k n ik p e m b e r ia n b e r b e d a .

  Muliani, Nurhidayah, & Nurbaya. (2016). To t al

  M aspari Journal , 02, 39-47.

  Penaeus mondon . J. Ris. Akuakult ur , 10(3), 405-414.

  p en yeb ab p en yakit pad a u dan g win d u

  Vibrio harveyi

  Muliani, Nurhidayah, & Kurniayawan, K. (2015). Herbal mangrove sebagai sumber anti bakteri

  IJPSR , 3(7), 2233-2237.

  Sonnerat ia alba bark.

  Millo n , M.A., Mu h it , M.A., Go sh wami, D., Masu d , M.M., & Begum, B. (2012). Ant io xidant , cyt o t o xic and ant imicro bial act ivit y o f

  Lab o rat o rium Hidro bio lo gi. Jurusan Pe rikan an , Fak u lt as Pe r t an ia n , Un ive rs it as Gad jah Ma d a. Jo gjakart a, 22 hlm. La it h , A. A. , Na jia h , M. , Za in , S. M. , Effe n d y,

  dalam penemuan senyawa bio akt if dari alam.

  DAFTAR ACUAN

  In- t ernat ional Journal of Applied M iocrobiology Science ,

  Indian Journal of Geo-M arine Science , 41(3), 218-222.

  L. against mult i drug resist en Vibrio spp. iso lat ed fro m marine wat e r lo bst e r ’s lar vae hat che ries.

  Rhizophora mucronat a

  ant ibact e- rial activit y o f leaf extract s o f

  In vit ro

  1(3), 20-25. Baskaran, R., & Mo h

Dokumen yang terkait

Dokumen baru