AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH TUMBUHAN SALA (Cynometra ramiflora L.) TERHADAP Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kulit Buah Tumbuhan Sala (Cynometra ramiflora L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Dan Klebsiel
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH TUMBUHAN SALA (Cynometra ramiflora L.) TERHADAP
BAKTERI Staphylococcus aureus, Escherichia coli, DAN Klebsiella
pneumoniae
SKRIPSI
Oleh :
ANIES RINA YULIASTUTI
K 100 090 168
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 18 Juni 2013
(Anies Rina Yuliastuti )
iii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb.
Alhamdulillah, segala puji syukur hanya kepada Allah SWT yang selalu
memberikan jalan dan kemudahan sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi
dengan judul “Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kulit Buah Tumbuhan
Sala (Cynometra ramiflora L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus,
Escherichia coli, Dan Klebsiella pneumoniae”
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat mencapai gelar
Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis telah banyak dibimbing, dibantu dan didukung oleh berbagai
pihak. Maka dengan segala kerendahan hati mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2.
Bapak Dr. Haryoto, M.Sc. selaku pembimbing utama dan Bapak Peni
Indrayudha, M., Biotech, Apt selaku pembimbing pendamping.
3.
Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech. St selaku Penguji I dan Ibu Rima Munawaroh,
M.Sc., Apt selaku penguji II.
4.
Kedua orang tua tercinta, Ibu Ninuk, Bapak Sardi Arifin serta kakakku Arie
dan Yayuk.
5.
Kakak Herry Wijayanto.
6.
Teman seperjuanganku Sari, Rachmat, Anggi dan Imdad.
7.
Sahabatku Widyaningtyas Niken P. serta teman-teman kost Branjangan.
Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini jauh dari kata sempurna.
Oleh karena itu, penulis mengharap kritik dan saran bagi kesempurnaan skripsi
ini. Akhir kata, penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi pembaca dan
penulis sendiri. Terimakasih.
Wassalamu’alaikum wr.wb.
Surakarta, 18 Juni 2013
(Anies Rina Yuliastuti)
iv
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL........................................................................................ i
PENGESAHAN ............................................................................................... ii
DEKLARASI ................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv
DAFTAR ISI .................................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ............................................................................................ ix
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................. xi
INTISARI......................................................................................................... xii
BAB 1 PENDAHULUAN .............................................................................. 1
A. Latar Belakang .................................................................................. 1
B. Perumusan Masalah .......................................................................... 2
C. Tujuan Penelitian .............................................................................. 2
D. Tinjauan Pustaka ............................................................................... 3
1. Tumbuhan Sala ........................................................................... 3
2. Escherichia coli ........................................................................... 3
3. Staphylococcus aureus ................................................................. 4
4. Klebsiella pneumonia................................................................... 4
5. Antibakteri .................................................................................. 5
6. Uji aktivitas antibakteri ............................................................... 5
7. Kromatografi lapis tipis ............................................................... 6
E. Keterangan Empiris .......................................................................... 6
F. Hipotesis ............................................................................................ 7
BAB II. METODE PENELITIAN .................................................................. 8
A. Kategori Penelitian .............................................................................. 8
B. Variabel Penelitian .............................................................................. 8
C. Bahan dan Alat ..................................................................................... 8
1. Alat yang digunakan ..................................................................... 8
2. Bahan yang digunakan .................................................................. 9
D. Tempat Penelitian ................................................................................ 9
E. Jalannya Penelitian .............................................................................. 9
1. Determinasi tanaman ..................................................................... 9
2. Penyiapan bahan ............................................................................ 9
3. Pembuatan ekstrak etanol kulit buah tumbuhan Sala..................... 10
4. Sterilisasi alat ................................................................................ 10
5. Pembuatan media ........................................................................... 10
6. Pembuatan stok bakteri ................................................................. 10
7. Pembuatan suspensi bakteri .......................................................... 11
8. Pewarnaan bakteri ......................................................................... 11
9. Uji biokimiawi pada Escherichia coli dan Klebsiella
pneumoniae .................................................................................... 11
10. Uji biokimiawi Staphylococcus aureus .......................................... 11
11. Uji sensitivitas bakteri terhadap antibiotik .................................... 12
12. Pembuatan larutan stok ................................................................. 12
13. Pembuatan seri konsentrasi ........................................................... 12
14. Uji aktivitas antibakteri ................................................................. 12
15. Uji kandungan senyawa dengan kromatografi lapis tipis .............. 12
F. Analisis Data ........................................................................................ 13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 14
A. Determinasi Tanaman ......................................................................... 14
B. Ekstraksi .............................................................................................. 14
C. Identifikasi Bakteri .............................................................................. 15
D. Uji Aktivitas Antibakteri ..................................................................... 20
E. Kromatografi Lapis Tipis .................................................................... 22
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 24
A. Kesimpulan ......................................................................................... 24
B. Saran .................................................................................................... 24
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 25
LAMPIRAN .................................................................................................... 27
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.
Hasil pengecatan Gram bakteri Escherichia coli,
Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae ........................ 16
Gambar 2.
Hasil uji MSA pada uji Staphylococcus aureus ........................ 17
Gambar 3.
Hasil uji pada media KIA, LIA, dan MIO terhadap E. coli........ 18
Gambar 4.
Hasil uji pada media KIA, LIA, dan MIO terhadap K.
pneumoniae................................................................................. 18
Gambar 5.
Hasil uji sensitivitas bakteri E. coli, S. aureus,
dan K. pneumoniae terhadap antibiotik ..................................... 19
Gambar 6.
Hasil uji ekstrak kulit buah tumbuhan Sala pada bakteri
E. coli, K. pneumoniae, dan S. aureus ....................................... 20
Gambar 7.
Kromatogram ekstrak etanol kulit buah tumbuhan Sala
dengan fase gerak kloroform : n-heksan (5:5) v/v ..................... 23
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1.
Hasil uji biokimiawi bakteri Klebsiella pneumoniae dan
Eschericia coli ............................................................................... 17
Tabel 2.
Hasil uji sensitivitas antibiotik terhadap Staphylococcus
aureus, Eschericia coli, dan Klebsiella pneumoniae ................... 19
Tabel 3.
Hasil uji ekstrak etanol kulit buah tumbuhan Sala terhadap
bakteri E. coli, K. pneumoniae, dan S. aureus. ............................. 20
Tabel 4.
Hasil uji kromatografi lapis tipis terhadap ekstrak etanol
kulit buah tumbuhan Sala dengan fase gerak kloroform: nheksan dan fase diam silica gel GF 254 (jarak elusi 6 cm) .......... 22
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.
Surat determinasi .......................................................................25
Lampiran 2.
Perhitungan rendemen ekstrak ..................................................26
Lampiran 3.
Pembuatan seri konsentrasi ekstrak etanol kulit buah
tumbuhan Sala ...........................................................................27
ix
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infusion
MH
: Mueller Hilton
GF
: Gips Fluorecense
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
µL
: Mikroliter
UV
: Ultraviolet
VIS
: Visibel
mL
: Mililiter
mm
: Milimeter
g
: Gram
µg
: Mikrogram
mg
: Miligram
E.coli
: Escherichia coli
S.aureus
: Streptococcus aureus
K.pneumoniae
: Klebsiella pneumoniae
x
INTISARI
Tumbuhan Sala (Cynometra ramiflora L.) merupakan salah satu tanaman
yang dapat digunakan untuk mengatasi gangguan kesehatan. Tumbuhan ini
memiliki kandungan senyawa kimia berupa tanin, gum dan saponin. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah
tumbuhan Sala terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Klebsiella
pneumoniae.
Ekstraksi kulit buah tumbuhan sala menggunakan metode maserasi
dengan etanol 96%. Metode disk difusi (Kirby Bauer) digunakan dalam uji
aktivitas antibakteri ekstrak kulit buah tumbuhan Sala. Seri konsentrasi yang
digunakan dalam pengujian terhadap ketiga bakteri adalah 2 mg/disk, 3 mg/disk, 4
mg/disk dan 5 mg/disk. Uji KLT menggunakan fase diam silika gel GF 254 dan
fase gerak kloroform : n-heksan (5:5) v/v.
Hasil pengujian diperoleh bahwa ekstrak etanol kulit buah tumbuhan sala
tidak memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia
coli, dan Klebsiella pneumonia dengan tidak adanya diameter zona hambat pada
konsentrasi sampai 5 mg/disk. Hasil KLT menunjukkan ekstrak mengandung
senyawa fenolik.
Kata kunci
:Cynometra ramiflora L, antibakteri, Staphylococcus aureus,
Escherichia coli, dan Klebsiella pneumoniae. KLT
xi
BUAH TUMBUHAN SALA (Cynometra ramiflora L.) TERHADAP
BAKTERI Staphylococcus aureus, Escherichia coli, DAN Klebsiella
pneumoniae
SKRIPSI
Oleh :
ANIES RINA YULIASTUTI
K 100 090 168
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 18 Juni 2013
(Anies Rina Yuliastuti )
iii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb.
Alhamdulillah, segala puji syukur hanya kepada Allah SWT yang selalu
memberikan jalan dan kemudahan sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi
dengan judul “Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Kulit Buah Tumbuhan
Sala (Cynometra ramiflora L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus,
Escherichia coli, Dan Klebsiella pneumoniae”
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat mencapai gelar
Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis telah banyak dibimbing, dibantu dan didukung oleh berbagai
pihak. Maka dengan segala kerendahan hati mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
2.
Bapak Dr. Haryoto, M.Sc. selaku pembimbing utama dan Bapak Peni
Indrayudha, M., Biotech, Apt selaku pembimbing pendamping.
3.
Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech. St selaku Penguji I dan Ibu Rima Munawaroh,
M.Sc., Apt selaku penguji II.
4.
Kedua orang tua tercinta, Ibu Ninuk, Bapak Sardi Arifin serta kakakku Arie
dan Yayuk.
5.
Kakak Herry Wijayanto.
6.
Teman seperjuanganku Sari, Rachmat, Anggi dan Imdad.
7.
Sahabatku Widyaningtyas Niken P. serta teman-teman kost Branjangan.
Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini jauh dari kata sempurna.
Oleh karena itu, penulis mengharap kritik dan saran bagi kesempurnaan skripsi
ini. Akhir kata, penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi pembaca dan
penulis sendiri. Terimakasih.
Wassalamu’alaikum wr.wb.
Surakarta, 18 Juni 2013
(Anies Rina Yuliastuti)
iv
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL........................................................................................ i
PENGESAHAN ............................................................................................... ii
DEKLARASI ................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv
DAFTAR ISI .................................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ............................................................................................ ix
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................. xi
INTISARI......................................................................................................... xii
BAB 1 PENDAHULUAN .............................................................................. 1
A. Latar Belakang .................................................................................. 1
B. Perumusan Masalah .......................................................................... 2
C. Tujuan Penelitian .............................................................................. 2
D. Tinjauan Pustaka ............................................................................... 3
1. Tumbuhan Sala ........................................................................... 3
2. Escherichia coli ........................................................................... 3
3. Staphylococcus aureus ................................................................. 4
4. Klebsiella pneumonia................................................................... 4
5. Antibakteri .................................................................................. 5
6. Uji aktivitas antibakteri ............................................................... 5
7. Kromatografi lapis tipis ............................................................... 6
E. Keterangan Empiris .......................................................................... 6
F. Hipotesis ............................................................................................ 7
BAB II. METODE PENELITIAN .................................................................. 8
A. Kategori Penelitian .............................................................................. 8
B. Variabel Penelitian .............................................................................. 8
C. Bahan dan Alat ..................................................................................... 8
1. Alat yang digunakan ..................................................................... 8
2. Bahan yang digunakan .................................................................. 9
D. Tempat Penelitian ................................................................................ 9
E. Jalannya Penelitian .............................................................................. 9
1. Determinasi tanaman ..................................................................... 9
2. Penyiapan bahan ............................................................................ 9
3. Pembuatan ekstrak etanol kulit buah tumbuhan Sala..................... 10
4. Sterilisasi alat ................................................................................ 10
5. Pembuatan media ........................................................................... 10
6. Pembuatan stok bakteri ................................................................. 10
7. Pembuatan suspensi bakteri .......................................................... 11
8. Pewarnaan bakteri ......................................................................... 11
9. Uji biokimiawi pada Escherichia coli dan Klebsiella
pneumoniae .................................................................................... 11
10. Uji biokimiawi Staphylococcus aureus .......................................... 11
11. Uji sensitivitas bakteri terhadap antibiotik .................................... 12
12. Pembuatan larutan stok ................................................................. 12
13. Pembuatan seri konsentrasi ........................................................... 12
14. Uji aktivitas antibakteri ................................................................. 12
15. Uji kandungan senyawa dengan kromatografi lapis tipis .............. 12
F. Analisis Data ........................................................................................ 13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 14
A. Determinasi Tanaman ......................................................................... 14
B. Ekstraksi .............................................................................................. 14
C. Identifikasi Bakteri .............................................................................. 15
D. Uji Aktivitas Antibakteri ..................................................................... 20
E. Kromatografi Lapis Tipis .................................................................... 22
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 24
A. Kesimpulan ......................................................................................... 24
B. Saran .................................................................................................... 24
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 25
LAMPIRAN .................................................................................................... 27
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.
Hasil pengecatan Gram bakteri Escherichia coli,
Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae ........................ 16
Gambar 2.
Hasil uji MSA pada uji Staphylococcus aureus ........................ 17
Gambar 3.
Hasil uji pada media KIA, LIA, dan MIO terhadap E. coli........ 18
Gambar 4.
Hasil uji pada media KIA, LIA, dan MIO terhadap K.
pneumoniae................................................................................. 18
Gambar 5.
Hasil uji sensitivitas bakteri E. coli, S. aureus,
dan K. pneumoniae terhadap antibiotik ..................................... 19
Gambar 6.
Hasil uji ekstrak kulit buah tumbuhan Sala pada bakteri
E. coli, K. pneumoniae, dan S. aureus ....................................... 20
Gambar 7.
Kromatogram ekstrak etanol kulit buah tumbuhan Sala
dengan fase gerak kloroform : n-heksan (5:5) v/v ..................... 23
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1.
Hasil uji biokimiawi bakteri Klebsiella pneumoniae dan
Eschericia coli ............................................................................... 17
Tabel 2.
Hasil uji sensitivitas antibiotik terhadap Staphylococcus
aureus, Eschericia coli, dan Klebsiella pneumoniae ................... 19
Tabel 3.
Hasil uji ekstrak etanol kulit buah tumbuhan Sala terhadap
bakteri E. coli, K. pneumoniae, dan S. aureus. ............................. 20
Tabel 4.
Hasil uji kromatografi lapis tipis terhadap ekstrak etanol
kulit buah tumbuhan Sala dengan fase gerak kloroform: nheksan dan fase diam silica gel GF 254 (jarak elusi 6 cm) .......... 22
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.
Surat determinasi .......................................................................25
Lampiran 2.
Perhitungan rendemen ekstrak ..................................................26
Lampiran 3.
Pembuatan seri konsentrasi ekstrak etanol kulit buah
tumbuhan Sala ...........................................................................27
ix
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infusion
MH
: Mueller Hilton
GF
: Gips Fluorecense
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
µL
: Mikroliter
UV
: Ultraviolet
VIS
: Visibel
mL
: Mililiter
mm
: Milimeter
g
: Gram
µg
: Mikrogram
mg
: Miligram
E.coli
: Escherichia coli
S.aureus
: Streptococcus aureus
K.pneumoniae
: Klebsiella pneumoniae
x
INTISARI
Tumbuhan Sala (Cynometra ramiflora L.) merupakan salah satu tanaman
yang dapat digunakan untuk mengatasi gangguan kesehatan. Tumbuhan ini
memiliki kandungan senyawa kimia berupa tanin, gum dan saponin. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah
tumbuhan Sala terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Klebsiella
pneumoniae.
Ekstraksi kulit buah tumbuhan sala menggunakan metode maserasi
dengan etanol 96%. Metode disk difusi (Kirby Bauer) digunakan dalam uji
aktivitas antibakteri ekstrak kulit buah tumbuhan Sala. Seri konsentrasi yang
digunakan dalam pengujian terhadap ketiga bakteri adalah 2 mg/disk, 3 mg/disk, 4
mg/disk dan 5 mg/disk. Uji KLT menggunakan fase diam silika gel GF 254 dan
fase gerak kloroform : n-heksan (5:5) v/v.
Hasil pengujian diperoleh bahwa ekstrak etanol kulit buah tumbuhan sala
tidak memiliki aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus, Escherichia
coli, dan Klebsiella pneumonia dengan tidak adanya diameter zona hambat pada
konsentrasi sampai 5 mg/disk. Hasil KLT menunjukkan ekstrak mengandung
senyawa fenolik.
Kata kunci
:Cynometra ramiflora L, antibakteri, Staphylococcus aureus,
Escherichia coli, dan Klebsiella pneumoniae. KLT
xi