UJI POTENSI AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTAL LIMA UJI POTENSI AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTAL LIMA EKSTRAK ETANOL RIMPANG FAMILI Zingiberaceae.
UJI POTENSI AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS
SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTAL LIMA
EKSTRAK ETANOL RIMPANG FAMILI Zingiberaceae
SKRIPSI
Oleh:
DIDIEK SETIAWAN
K100070161
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2011
UJI POT
TENSI AK
KTIVITAS
S PENANGKAP RA
ADIKAL BEBAS
B
SERTA PENET
TAPAN KA
ADAR FE
ENOLIK T
TOTAL LIMA
L
TRAK ET
TANOL RIIMPANG FAMILI Zingiberaaceae
EKST
S
SKRIPSI
Diajukan untuk
u
memeenuhi salah satu syarat mencapai
deerajat Sarjaana Farmassi (S.Farm) pada
p
Fakultas Farmasi
Uniiversitas Mu
uhammadiy
yah Surakarrta
dii Surakarta
a
Oleh:
DIDIE
EK SETIAWAN
K
K100070161
1
FAKUL
LTAS FAR
RMASI
UN
NIVERSIT
TAS MUHA
AMMADIIYAH SURAKART
TA
SUR
RAKART
TA
2011
ii
iii
Motto
Bermainlah diwaktu bermain..jangan bermain diwaktu serius tapi
bermainlah dengan serius…jangan asal bermain agar kau dapatkan
kesenangan dalam bermain…(anonim)
Keberanian adalah perlawanan terhadap ketakutan, pengendaliaan
terhadap ketakutan bukan peniadaan rasa takut (Mark Twain)
Sesungguhnya Allah tidak merubah keadaan sesuatu kaum
sehingga mereka merubah keadaan yang ada pada diri mereka
sendiri. (Ar-Ra’d:11)
“Bersungguh-sungguhlah kamu untuk melakukan hal-hal yang
mendatangkan manfaat untuk dirimu, minta tolonglah kepada
Allah, dan jangan pernah merasa lemah.”
(HR. Muslim)
“Maka sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan,
sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan, Maka apabila
engkau telah selesai (dari sesuatu urusan), tetaplah bekerja keras
(untuk urusan yang lain), dan hanya kepada Tuhanmulah engkau
berharap”
(Al-Insyirah: 5-8)
iv
PERSEMBAHAN
Allah SWT beserta Rasul-Nya
Keluarga penulis
Almamater UMS
v
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 25 Juni 2011
Peneliti
(Didiek Setiawan)
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Segala puji bagi Allah yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah
sehinga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang
berjudul: “UJI POTENSI AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS
SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTAL LIMA EKSTRAK ETANOL
RIMPANG FAMILI Zingiberaceae” sebagai salah satu syarat untuk mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
Dalam penyusunan ini penulis banyak mendapatkan bantuan dari
berbagai pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan sebagai pembimbing utama yang
telah banyak memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan dukungan
selama penulis melakukan penelitian dan penyusunan skripsi ini.
2.
Ibu Rosita Melannisa, M.Si., Apt selaku pembimbing pendamping yang
telah memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan dukungan selama
penelitian maupun penyusunan skripsi ini.
3.
Bapak Dr. Muhtadi, M.Si dan Broto Santoso, M.Sc., Apt selaku dosen
penguji yang telah memberikan banyak koreksi dan saran.
4.
Ibu Setyo Nurwaini S.Farm., Apt selaku pembimbing akademik dan Bapak
Ibu
Dosen
beserta
staf
karyawan
vii
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah Surakarta yang telah banyak memberikan pengarahan
selama penulis menempuh studi.
5.
Laboratorium Bagian Kimia Fakultas Farmasi, Ibu Ika Trisharyanti D.K.,
M.Farm., Apt, Bapak Ahwan, S.Farm., Apt , Pak Tony dan Pak Rahmat
yang telah banyak membantu selama penelitian.
6.
Keluarga penulis, Bapak Sadimin dan ibu Sutarmi, kakak Dini Wulandari,
Susilo Adi W yang telah memberikan dukungan dan motivasi selama studi.
7.
Keluarga BEMers Angkatan ’07: Ririn, Ratih, Vina, Atina, Risa, Indri,
Santi, Andi, Yudhist, Arief, Aby, Angkatan ‘05, ‘06, ’08, Angkatan ’09 dan
Angkatan ’10 untuk kerjasama dan perjuangan kalian dan lembaga KAMA
FF, majulah kawan.
8.
Kelompok penelitian lantai 4: Ririn, Ratih, Vina, Endah, Ayu, Arief, Atina,
Risa, Rifka, Nindy, Olib, Devi atas kerja sama dan suka duka dalam
penelitian. dan teman-teman kelas E serta kelas Sains ’07 untuk
kebersamaan dan kekompakan selama ini.
9.
Segenap pihak yang telah banyak membantu dan memberi dukungan yang
tidak dapat disebutkan satu persatu.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi siapa saja yang
membacanya dan muncul kritik dan saran untuk perbaikan penulis selanjutnya.
Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Surakarta, 25 Juni 2011
Peneliti
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL........................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN..........................................................................
iii
PERSEMBAHAN ............................................................................................
iv
MOTTO ...........................................................................................................
v
DEKLARASI ...................................................................................................
vi
KATA PENGANTAR .....................................................................................
vii
DAFTAR ISI ....................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ............................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................
xv
INTISARI......................................................................................................... xvii
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ..........................................................................................
1
B. Perumusan Masalah ..................................................................................
3
C. Tujuan Penelitian ......................................................................................
3
D. Tinjauan Pustaka .......................................................................................
4
1. Radikal Bebas .....................................................................................
4
2. Antioksidan .........................................................................................
4
ix
a. Antioksidan Primer........................................................................
5
b. Antioksidan Sekunder ...................................................................
5
c. Antioksidan Tersier .......................................................................
5
3. Famili Zingiberaceae ..........................................................................
6
a. Tanaman Jahe ...............................................................................
6
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
6
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
6
b. Tanaman Kencur ..........................................................................
7
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
7
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
7
c. Tanaman Lengkuas .......................................................................
8
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
8
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
8
d. Tanaman Lempuyang gajah ..........................................................
10
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
10
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
11
e. Tanaman Lempuyang pahit ...........................................................
12
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
12
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
13
4. Uji Aktivitas Antioksidan ...................................................................
14
E. Landasan Teori ..........................................................................................
15
F. Hipotesis....................................................................................................
16
x
BAB II METODE PENELITIAN
A. Ketegori Penelitian....................................................................................
17
B. Variabel Penelitian ....................................................................................
17
C. Alat Dan Bahan .........................................................................................
17
1. Alat Yang Digunakan .........................................................................
17
2. Bahan Yang Digunakan ......................................................................
18
D. Jalannya Penelitian....................................................................................
18
1. Uji Aktivitas Antioksidan Metode DPPH ...........................................
18
a. Pembuatan Larutan Pereaksi DPPH ..............................................
18
b. Pembuatan Larutan Stok Sampel Ekstrak Jahe, Kencur,
Lengkuas, Lempuyang Gajah, Lempuyang Pahit dan Vitamin E.
18
c. Penentuan Operating Time ............................................................
19
d. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum (λmaks) ......................
19
e. Penentuan IC50 Ekstrak Jahe, Kencur, Lengkuas, Lempuyang
Gajah, Lempuyang Pahit dan Vitamin E ......................................
19
2. Uji Kualitatif (Metode KLT Dengan Pereaksi Semprot) ....................
20
a. Uji Reaksi Semprot DPPH ............................................................
20
b. Uji Reaksi Semprot FeCl3 .............................................................
20
c. Uji Reaksi Semprot Sitroborat ......................................................
20
3. Penentuan Kadar Fenolik Total ..........................................................
20
a. Penentuan Operating Time ...........................................................
21
b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum .................................
21
c. Penentapan Kurva Baku ................................................................
21
xi
d. Penentapan Kadar Fenolik Total Dalam Ekstrak ..........................
22
E. Analisis Data .............................................................................................
22
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Penentuan Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol Rimpang Famili
Zingiberaceae
(Jahe,
Kencur,
Lengkuas,
Lempuyang
Gajah,
Lempuyang Pahit) .....................................................................................
24
B. Uji Kualitatif Senyawa Fenolik dan Flavonoid Dengan Metode KLT .....
28
C. Penentuan Kadar Fenolik Total ................................................................
31
D. Korelasi Antara
Aktivitas
Penangkap
Radikal
Dengan
Kadar
Fenolik Total .............................................................................................
32
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan ..........................................................................................
37
B. Saran.....................................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
38
LAMPIRAN .....................................................................................................
45
xii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Perbandingan Aktivitas Antiradikal Ekstrak .................................
Tabel 2.
Hasil Penentuan IC50 Ekstrak Etanol Rimpang Jahe, Lengkuas
26
dan Lempuyang Pahit Dibandingkan Dengan Vitamin E .............
27
Tabel 3.
Tabel Hasil KLT ...........................................................................
30
Tabel 4.
Penentuan Kadar Fenolik Total .....................................................
32
Tabel 5.
Korelasi Antara Antiradikal (%) Dengan Kadar Fenolik Total
(GAE) ............................................................................................
Tabel 6.
Korelasi Antara Aktivitas Antioksidan (IC50) Dengan Kadar
Fenolik Total (GAE) .....................................................................
xiii
33
34
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Reaksi Radikal DPPH dengan Antioksidan (Windono et al.,
2001) .............................................................................................
15
Gambar 2. Uji Kualitatif Antiradikal Vit. E, Jahe, Kencur, Lengkuas,
Lempuyang Pahit, Lempuyang Gajah.. Terlihat pemucatan
warna. Digunakan fase diam Silika Gel GF 254, reagen semprot
DPPH 0,4 mM. ..............................................................................
25
Gambar 3. Uji Kualitatif Senyawa Fenolik dan Flavonoid Ekstrak Etanol
Rimpang
Jahe,
Kencur,
Lengkuas,
Lempuyang
Gajah,
Lempuyang Pahit Yang Dibandingkan Dengan Asam Galat Dan
Quersetin. Digunakan fase diam Silika Gel GF 254, reagen
semprot FeCl3 dan reagen semprot Sitroborat. .............................
29
Gambar 4. Kurva korelasi kadar fenolik total versus % antiradikal dengan
R2= 0,720.......................................................................................
33
Gambar 5. Kurva korelasi kadar fenolik total versus rerata IC50 dengan R2=
0,954 ..............................................................................................
xiv
34
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Penentuan Panjang Gelombang maksimum DPPH ..................
Lampiran 2.
Orientasi Potensi % Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol
47
Rimpang Jahe, Kencur, Lengkuas, Lempuyang Gajah Dan
Lempuyang Pahit ......................................................................
Lampiran 3.
Contoh Perhitungan IC50 Dari Data Hasil Penentuan IC50
Ekstrak Etanol Rimpang Jahe ...................................................
Lampiran 4.
48
49
Hasil Penentuan IC50 Vitamin E, Ekstrak Etanol Rimpang
Jahe, Lengkuas dan Lempuyang Pahit .....................................
50
Lampiran 5.
Hasil Penentuan Operating Time Asam Galat..........................
53
Lampiran 6
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Asam Galat dan
Lampiran 7.
Kurva Baku Asam Galat...........................................................
54
Contoh Perhitungan Kadar Fenolik Total.................................
55
xv
INTISARI
Radikal bebas yang berlebih di dalam tubuh dapat berakibat pada
munculnya penyakit degeneratif. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa
berbagai tanaman dan buah-buahan terbukti dapat membantu melindungi tubuh
manusia terhadap bahaya radikal bebas. Rimpang famili Zingiberaceae diketahui
memiliki kandungan kimia yang berperan sebagai antiradikal, diantaranya adalah
senyawa fenol dan flavonoid. Oleh karenanya dilakukan penelitian untuk melihat
korelasi kandungan fenolik total terhadap aktivitas antiradikalnya.
Aktivitas antiradikal ditentukan dengan menggunakan metode DPPH (1,1
difenil-2-pikrilhidrazil) kemudian dihitung nilai Inhibitory Concentration (IC50),
yaitu konsentrasi sampel yang mampu menangkap 50% radikal DPPH.
Kandungan fenol total ditetapkan secara spektrofotometri menggunakan pereaksi
Folin-Ciocalteu dan dihitung sebagai GAE (gallic acid equivalent).
Penelitian menunjukkan aktivitas antiradikal, kadar fenolik total serta IC50
dari ekstrak etanol jahe, kencur, lengkuas, lempuyang gajah dan lempuyang pahit
berturut-turut yaitu 80,03%; 73,992mg/g; 27,38µg/mL; 35,58%; 23,848mg/g;
46,04%; 37,841mg/g; 93,27µg/mL; 38,61%; 49,725mg/g; 55,31%; 40,802mg/g;
105,08µg/mL; untuk lempuyang gajah dan kencur tidak ditetapkan IC50 karena
kurang dari 50% penghambatan terhadap DPPH sedangkan aktivitas antiradikal
ekstrak etanol rimpang jahe, lengkuas, lempuyang pahit sebesar 95,4 %
disumbangkan oleh kandungan fenolik dan 4,6% disumbangkan oleh senyawa lain
dalam ekstrak.
Kata kunci: Antiradikal, DPPH, fenolik total, Zingiberaceae.
xvi
SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTAL LIMA
EKSTRAK ETANOL RIMPANG FAMILI Zingiberaceae
SKRIPSI
Oleh:
DIDIEK SETIAWAN
K100070161
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2011
UJI POT
TENSI AK
KTIVITAS
S PENANGKAP RA
ADIKAL BEBAS
B
SERTA PENET
TAPAN KA
ADAR FE
ENOLIK T
TOTAL LIMA
L
TRAK ET
TANOL RIIMPANG FAMILI Zingiberaaceae
EKST
S
SKRIPSI
Diajukan untuk
u
memeenuhi salah satu syarat mencapai
deerajat Sarjaana Farmassi (S.Farm) pada
p
Fakultas Farmasi
Uniiversitas Mu
uhammadiy
yah Surakarrta
dii Surakarta
a
Oleh:
DIDIE
EK SETIAWAN
K
K100070161
1
FAKUL
LTAS FAR
RMASI
UN
NIVERSIT
TAS MUHA
AMMADIIYAH SURAKART
TA
SUR
RAKART
TA
2011
ii
iii
Motto
Bermainlah diwaktu bermain..jangan bermain diwaktu serius tapi
bermainlah dengan serius…jangan asal bermain agar kau dapatkan
kesenangan dalam bermain…(anonim)
Keberanian adalah perlawanan terhadap ketakutan, pengendaliaan
terhadap ketakutan bukan peniadaan rasa takut (Mark Twain)
Sesungguhnya Allah tidak merubah keadaan sesuatu kaum
sehingga mereka merubah keadaan yang ada pada diri mereka
sendiri. (Ar-Ra’d:11)
“Bersungguh-sungguhlah kamu untuk melakukan hal-hal yang
mendatangkan manfaat untuk dirimu, minta tolonglah kepada
Allah, dan jangan pernah merasa lemah.”
(HR. Muslim)
“Maka sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan,
sesungguhnya bersama kesulitan ada kemudahan, Maka apabila
engkau telah selesai (dari sesuatu urusan), tetaplah bekerja keras
(untuk urusan yang lain), dan hanya kepada Tuhanmulah engkau
berharap”
(Al-Insyirah: 5-8)
iv
PERSEMBAHAN
Allah SWT beserta Rasul-Nya
Keluarga penulis
Almamater UMS
v
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, 25 Juni 2011
Peneliti
(Didiek Setiawan)
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Segala puji bagi Allah yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah
sehinga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang
berjudul: “UJI POTENSI AKTIVITAS PENANGKAP RADIKAL BEBAS
SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTAL LIMA EKSTRAK ETANOL
RIMPANG FAMILI Zingiberaceae” sebagai salah satu syarat untuk mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
Dalam penyusunan ini penulis banyak mendapatkan bantuan dari
berbagai pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan sebagai pembimbing utama yang
telah banyak memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan dukungan
selama penulis melakukan penelitian dan penyusunan skripsi ini.
2.
Ibu Rosita Melannisa, M.Si., Apt selaku pembimbing pendamping yang
telah memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan dukungan selama
penelitian maupun penyusunan skripsi ini.
3.
Bapak Dr. Muhtadi, M.Si dan Broto Santoso, M.Sc., Apt selaku dosen
penguji yang telah memberikan banyak koreksi dan saran.
4.
Ibu Setyo Nurwaini S.Farm., Apt selaku pembimbing akademik dan Bapak
Ibu
Dosen
beserta
staf
karyawan
vii
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah Surakarta yang telah banyak memberikan pengarahan
selama penulis menempuh studi.
5.
Laboratorium Bagian Kimia Fakultas Farmasi, Ibu Ika Trisharyanti D.K.,
M.Farm., Apt, Bapak Ahwan, S.Farm., Apt , Pak Tony dan Pak Rahmat
yang telah banyak membantu selama penelitian.
6.
Keluarga penulis, Bapak Sadimin dan ibu Sutarmi, kakak Dini Wulandari,
Susilo Adi W yang telah memberikan dukungan dan motivasi selama studi.
7.
Keluarga BEMers Angkatan ’07: Ririn, Ratih, Vina, Atina, Risa, Indri,
Santi, Andi, Yudhist, Arief, Aby, Angkatan ‘05, ‘06, ’08, Angkatan ’09 dan
Angkatan ’10 untuk kerjasama dan perjuangan kalian dan lembaga KAMA
FF, majulah kawan.
8.
Kelompok penelitian lantai 4: Ririn, Ratih, Vina, Endah, Ayu, Arief, Atina,
Risa, Rifka, Nindy, Olib, Devi atas kerja sama dan suka duka dalam
penelitian. dan teman-teman kelas E serta kelas Sains ’07 untuk
kebersamaan dan kekompakan selama ini.
9.
Segenap pihak yang telah banyak membantu dan memberi dukungan yang
tidak dapat disebutkan satu persatu.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi siapa saja yang
membacanya dan muncul kritik dan saran untuk perbaikan penulis selanjutnya.
Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Surakarta, 25 Juni 2011
Peneliti
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL........................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN..........................................................................
iii
PERSEMBAHAN ............................................................................................
iv
MOTTO ...........................................................................................................
v
DEKLARASI ...................................................................................................
vi
KATA PENGANTAR .....................................................................................
vii
DAFTAR ISI ....................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL ............................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................
xv
INTISARI......................................................................................................... xvii
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ..........................................................................................
1
B. Perumusan Masalah ..................................................................................
3
C. Tujuan Penelitian ......................................................................................
3
D. Tinjauan Pustaka .......................................................................................
4
1. Radikal Bebas .....................................................................................
4
2. Antioksidan .........................................................................................
4
ix
a. Antioksidan Primer........................................................................
5
b. Antioksidan Sekunder ...................................................................
5
c. Antioksidan Tersier .......................................................................
5
3. Famili Zingiberaceae ..........................................................................
6
a. Tanaman Jahe ...............................................................................
6
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
6
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
6
b. Tanaman Kencur ..........................................................................
7
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
7
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
7
c. Tanaman Lengkuas .......................................................................
8
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
8
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
8
d. Tanaman Lempuyang gajah ..........................................................
10
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
10
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
11
e. Tanaman Lempuyang pahit ...........................................................
12
1) Klasifikasi Tanaman ...............................................................
12
2) Kandungan Kimia dan Kegunaannya .....................................
13
4. Uji Aktivitas Antioksidan ...................................................................
14
E. Landasan Teori ..........................................................................................
15
F. Hipotesis....................................................................................................
16
x
BAB II METODE PENELITIAN
A. Ketegori Penelitian....................................................................................
17
B. Variabel Penelitian ....................................................................................
17
C. Alat Dan Bahan .........................................................................................
17
1. Alat Yang Digunakan .........................................................................
17
2. Bahan Yang Digunakan ......................................................................
18
D. Jalannya Penelitian....................................................................................
18
1. Uji Aktivitas Antioksidan Metode DPPH ...........................................
18
a. Pembuatan Larutan Pereaksi DPPH ..............................................
18
b. Pembuatan Larutan Stok Sampel Ekstrak Jahe, Kencur,
Lengkuas, Lempuyang Gajah, Lempuyang Pahit dan Vitamin E.
18
c. Penentuan Operating Time ............................................................
19
d. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum (λmaks) ......................
19
e. Penentuan IC50 Ekstrak Jahe, Kencur, Lengkuas, Lempuyang
Gajah, Lempuyang Pahit dan Vitamin E ......................................
19
2. Uji Kualitatif (Metode KLT Dengan Pereaksi Semprot) ....................
20
a. Uji Reaksi Semprot DPPH ............................................................
20
b. Uji Reaksi Semprot FeCl3 .............................................................
20
c. Uji Reaksi Semprot Sitroborat ......................................................
20
3. Penentuan Kadar Fenolik Total ..........................................................
20
a. Penentuan Operating Time ...........................................................
21
b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum .................................
21
c. Penentapan Kurva Baku ................................................................
21
xi
d. Penentapan Kadar Fenolik Total Dalam Ekstrak ..........................
22
E. Analisis Data .............................................................................................
22
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Penentuan Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol Rimpang Famili
Zingiberaceae
(Jahe,
Kencur,
Lengkuas,
Lempuyang
Gajah,
Lempuyang Pahit) .....................................................................................
24
B. Uji Kualitatif Senyawa Fenolik dan Flavonoid Dengan Metode KLT .....
28
C. Penentuan Kadar Fenolik Total ................................................................
31
D. Korelasi Antara
Aktivitas
Penangkap
Radikal
Dengan
Kadar
Fenolik Total .............................................................................................
32
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan ..........................................................................................
37
B. Saran.....................................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
38
LAMPIRAN .....................................................................................................
45
xii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Perbandingan Aktivitas Antiradikal Ekstrak .................................
Tabel 2.
Hasil Penentuan IC50 Ekstrak Etanol Rimpang Jahe, Lengkuas
26
dan Lempuyang Pahit Dibandingkan Dengan Vitamin E .............
27
Tabel 3.
Tabel Hasil KLT ...........................................................................
30
Tabel 4.
Penentuan Kadar Fenolik Total .....................................................
32
Tabel 5.
Korelasi Antara Antiradikal (%) Dengan Kadar Fenolik Total
(GAE) ............................................................................................
Tabel 6.
Korelasi Antara Aktivitas Antioksidan (IC50) Dengan Kadar
Fenolik Total (GAE) .....................................................................
xiii
33
34
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Reaksi Radikal DPPH dengan Antioksidan (Windono et al.,
2001) .............................................................................................
15
Gambar 2. Uji Kualitatif Antiradikal Vit. E, Jahe, Kencur, Lengkuas,
Lempuyang Pahit, Lempuyang Gajah.. Terlihat pemucatan
warna. Digunakan fase diam Silika Gel GF 254, reagen semprot
DPPH 0,4 mM. ..............................................................................
25
Gambar 3. Uji Kualitatif Senyawa Fenolik dan Flavonoid Ekstrak Etanol
Rimpang
Jahe,
Kencur,
Lengkuas,
Lempuyang
Gajah,
Lempuyang Pahit Yang Dibandingkan Dengan Asam Galat Dan
Quersetin. Digunakan fase diam Silika Gel GF 254, reagen
semprot FeCl3 dan reagen semprot Sitroborat. .............................
29
Gambar 4. Kurva korelasi kadar fenolik total versus % antiradikal dengan
R2= 0,720.......................................................................................
33
Gambar 5. Kurva korelasi kadar fenolik total versus rerata IC50 dengan R2=
0,954 ..............................................................................................
xiv
34
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Penentuan Panjang Gelombang maksimum DPPH ..................
Lampiran 2.
Orientasi Potensi % Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol
47
Rimpang Jahe, Kencur, Lengkuas, Lempuyang Gajah Dan
Lempuyang Pahit ......................................................................
Lampiran 3.
Contoh Perhitungan IC50 Dari Data Hasil Penentuan IC50
Ekstrak Etanol Rimpang Jahe ...................................................
Lampiran 4.
48
49
Hasil Penentuan IC50 Vitamin E, Ekstrak Etanol Rimpang
Jahe, Lengkuas dan Lempuyang Pahit .....................................
50
Lampiran 5.
Hasil Penentuan Operating Time Asam Galat..........................
53
Lampiran 6
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Asam Galat dan
Lampiran 7.
Kurva Baku Asam Galat...........................................................
54
Contoh Perhitungan Kadar Fenolik Total.................................
55
xv
INTISARI
Radikal bebas yang berlebih di dalam tubuh dapat berakibat pada
munculnya penyakit degeneratif. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa
berbagai tanaman dan buah-buahan terbukti dapat membantu melindungi tubuh
manusia terhadap bahaya radikal bebas. Rimpang famili Zingiberaceae diketahui
memiliki kandungan kimia yang berperan sebagai antiradikal, diantaranya adalah
senyawa fenol dan flavonoid. Oleh karenanya dilakukan penelitian untuk melihat
korelasi kandungan fenolik total terhadap aktivitas antiradikalnya.
Aktivitas antiradikal ditentukan dengan menggunakan metode DPPH (1,1
difenil-2-pikrilhidrazil) kemudian dihitung nilai Inhibitory Concentration (IC50),
yaitu konsentrasi sampel yang mampu menangkap 50% radikal DPPH.
Kandungan fenol total ditetapkan secara spektrofotometri menggunakan pereaksi
Folin-Ciocalteu dan dihitung sebagai GAE (gallic acid equivalent).
Penelitian menunjukkan aktivitas antiradikal, kadar fenolik total serta IC50
dari ekstrak etanol jahe, kencur, lengkuas, lempuyang gajah dan lempuyang pahit
berturut-turut yaitu 80,03%; 73,992mg/g; 27,38µg/mL; 35,58%; 23,848mg/g;
46,04%; 37,841mg/g; 93,27µg/mL; 38,61%; 49,725mg/g; 55,31%; 40,802mg/g;
105,08µg/mL; untuk lempuyang gajah dan kencur tidak ditetapkan IC50 karena
kurang dari 50% penghambatan terhadap DPPH sedangkan aktivitas antiradikal
ekstrak etanol rimpang jahe, lengkuas, lempuyang pahit sebesar 95,4 %
disumbangkan oleh kandungan fenolik dan 4,6% disumbangkan oleh senyawa lain
dalam ekstrak.
Kata kunci: Antiradikal, DPPH, fenolik total, Zingiberaceae.
xvi