Pembuatan Konstruksi Plasmid Pembawa Gen Apoptin Sebagai Tahap Awal Pengembangan Terapi Kanker Berbasis Gen.

(B. kesehatan)
Pembuatan Konstruksi Plasmid Pembawa Gen Apoptin Sebagai Tahap Awal Pengembangan
Terapi Kanker Berbasis Gen
Kata kunci: apoptin, pHM6
Suyatmi; Wulandari, R. Aj. Sri
Fakultas Kedokteran UNS, Penelitian, BOPTN UNS, Hibah Bersaing, 2012
Apoptin adalah protein yang disandikan oleh salah satu gen yang dimiliki oleh Chicken anemia virus.
Kemampuannya menginduksi kematian pada sel kanker menjadikan apoptin sebagai kandidat antikanker
di masa depan. Penelitian ini bertujuan untuk mengembangkan apoptin sebagai modalitas terapi kanker
yang berbasis gen. Penelitian ini akan dilakukan dalam tiga tahap. Tahap pertama adalah pembuatan
konstruksi plasmid pembawa gen penyandi apoptin. Pada tahap ini gen penyandi apoptin diklon
kemudian disisipkan pada plasmid pHM6. Hasil konstruksi plasmid pHM6-Apoptin tersebut lalu
ditransformasikan pada sel kompeten, dianalisis dengan enzym restriksi dan sekuensing. Selanjutnya,
sekuens flag HA pada plasmid pHM6-Apoptin tersebut dihilangkan dengan mutagenesis untuk
mendapatkan plasmid ekspresor mamalia untuk apoptin wild type yang tidak berlabel HA. Perbanyakan
plasmid kemudian dilakukan dengan mengklon plasmid menggunakan sel kompeten (E. coli XL-1 blue).
Pada tahun kedua akan dikonstruksi plasmid pETBlue-1-Apoptin. Pada tahun ketiga konstruksi pHM6apoptin ditransfeksikan pada sel sel kanker hati (SNU-182) dan sel ginjal kera normal (Vero) untuk
mengevaluasi kemampuan Apoptin menginduksi kematian sel.