EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO
EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO SKRIPSI Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1 Disusun Oleh: NURWIRNAWATI (0801070040) PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2016
HALAMAN PERSETUJUAN
EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum)
TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRO
Oleh:
NURWIRNAWATI
0801070040
Telah diperiksa dan disetujui oleh Dosen pembimbing untuk dipertahankan di depan Dewan penguji Skripsi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto
Pembimbing I Pembimbing II
Drs. Heri Maryanto, M. Si Dini Siswani Mulia, S.Pi., M.Si
NIP. 196008131991031002 NIK. 2160124
Skripsi Berjudul:
EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH
(Piper crocatum) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI
Aeromonas hydrophila SECARA IN-VITRODipersiapkan dan disusun oleh :
NURWIRNAWATI
0801070040
Telah dipertahankan di depan Dewan Penguji Pada tanggal 23 Januari 2016 dan dinyatakan telah memenuhi syarat untuk diterima sebagai kelengkapan persyaratan mendapatkan gelar sarjana pendidikan Program Studi Pendidikan
Biologi Pembimbing 1. Drs. Heri Maryanto, M. Si. ...................................
NIP. 196008131991031002 2. Dini Siswani Mulia, S. Pi., M. Si. ................................... NIK. 2160124
Penguji 1. Drs. Arief Husin, M.Si ................................... NIK. 2160062 2. Drh. Cahyono Purbomartono, M.Sc ................................... NIP. 196209261994031001
Purwokerto, 10 Februari 2016 Universitas muhammadiyah purwokerto
Fakultas Keguruan Dan Ilmu Pendidikan Dekan,
Drs. Pudiyono, M. Hum
NIK. 19560508 198603 1 003
HALAMAN PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini : Nama : NURWIRNAWATI NIM : 0801070040 Program Studi : Pendidikan Biologi Fakultas : Keguruan dan Ilmu Pendidikan
Menyusun skripsi dengan judul :
EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila SECARA
IN-VITRO Menyatakan dengan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil karya tulis saya sendiri dan bukan dibuatkan orang lain atau jiplakan atau modifikasi karya orang lain. Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan, maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai ketentuan yang berlaku.
Purwokerto, 23 Januari 2016 Yang menyatakan
Nurwirnawati
PERSEMBAHAN
Skripsi ini saya persembahkan untuk:
1. Kedua orang tua saya, yang sangat saya sayangi dan hormati, terima kasih atas doa restu, nasehat dan motivasi yang sangat luar biasa.
2. Suamiku tercinta, Terimakasih untuk cinta, kasih sayang, kesabaran dan segalanya. Hanya Allah SWT yang mampu membalas semuanya.
3. Kakak dan adikku tersayang yang senantiasa memberi semangat untuk kelulusanku.
4. Untuk mutiaraku Aqila Rahmadani yang suatu saat nanti akan bersinar lebih terang.
MOTTO
Sesungguhnya sesudah kesulitan ada kemudahan. Maka apabila engkau telah selesai (dari suatu urusan), maka kerjakan urusan yang lain dengan sungguh- sungguh (Q.S. Al-Insyirah: 6-7).
Wahai orang-orang yang beriman ! Mohonlah pertolongan (kepada Alloh) dengan sabar dan sholat. Sesungguhnya Alloh beserta orang-orang yang sabar (Q.S. Al- Baqarah: 153).
UCAPAN TERIMA KASIH
Alhamdulillahirobil ‘alamin, segala puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala rahmat, dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul Efek Antibakteri Ekstrak Daun Sirih
Merah (Piper crocatum) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas
hydrophila Secara In-Vitro.Terima kasih dengan setulus-tulusnya penulis sampaikan kepada Drs. Heri Maryanto, M.Si. dan Dini Siswani Mulia, S. Pi., M. Si. yang telah membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulisan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai pihak, olek karena itu pada kesempatan kali ini penulis mengucapkan terimakasih yang tak terhingga kepada:
1. Drs. Pudiyono, M. Hum. selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M.Si. selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu PendidikanUniversitas Muhammadiyah Purwokerto.
3. Arif Prasetio Kurniawan yang selalu saya cintai yang telah memberikan doa, motivasi, dan semangat yang luar biasa.
4. Keluarga besar saya yang senantiasa saya banggakan yang tidak pernah lelah memberikan doa dan motifasi untuk menyelesaikan skripsi ini.
5. Anakku Aqila Rahmadani yang selalu menjadi motivasi untuk meneyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari sepenuhnya akan segala keterbatasan pengetahuan dan kemampuan yang penulis miliki, sehingga diperlukan kritik dan saran yang membangun dan bermanfaat.
Akhir kata semoga Alloh SWT selalu melimpahkan rahmat, karunia dan hidayah-Nya dan semoga skripsi ini bermanfaat bagi para pembaca.
Purwokerto, 23 Januari 2016 Penulis
EFEK ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum)
TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila
SECARA IN-VITRO
NURWIRNAWATI
(0801070040)
ABSTRAK
Telah dilakukan penelitian yang bertujuan untuk mengetahui efektivitas ekstrak daun sirih merah terhadap bakteri Aeromonas hydrophila. Penelitian dilaksanakan selama 6 bulan di laboratorium Mikrobiologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan dan Laboratorium Biologi-Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Metode uji dilakukan menggunakan difusi kertas cakram. Rancangan penelitian menggunakan rancangan acak lengkap dengan pengulangan masing-masing 3 kali pada konsentrasi ekstrak daun sirih merah 0%, 10%, 15%, 25% dan kontrol positif (Kloramfenikol). Parameter yang diamati adalah diameter zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak daun sirih merah dan kloramfenikol. Analisis data dilakukan dengan menggunakan Analysis of
Variance (ANOVA) dengan tingkat kepercayaan 95 %, dilanjutkan dengan uji
Beda Nyata Terkecil (BNT) dengan tingkat kepercayaan 95%. Berdasarkan uji fitokimia dengan uji reaksi warna Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ekstrak daun sirih merah mengandung senyawa flafonoid, alkaloid, dan tanin. Hasil penelitian menunjukkan bahwa semua perlakuan (selain kontrol) dapat menghambat pertumbuhan bakteri A. hydrophila. Berdasarkan analisis dengan uji F menunjukkan terdapat perbedaan bermakna antar perlakuan. Hasil uji BNT menunjukkan bahwa perlakuan konsentrasi ekstrak paling kecil yang masih menghambat bakteri adalah 10% dan konsentrasi ekstrak 25% adalah yang paling tinggi pengaruhnya terhadap pertumbuhan bakteri A. hydrophila. Namun hasilnya belum dikatakan efektif, karena belum memenuhi standar zona hambat antibiotik menurut CLSI. Hasil kesetaraan kekuatan ekstrak daun sirih merah dibanding dengan kloramfenikol menunjukkan perbandingan 1:1778,35 (dalam satuan ppm).
Kata kunci : Aeromonas hydrophila, antibakteri, sirih merah.
DAFTAR ISI
Halaman UCAPAN TERIMAKASIH ............................................................................. vii ABSTRAK ....................................................................................................... ix DAFTAR ISI .................................................................................................... x DAFTAR TABEL ........................................................................................... xi DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xiv BAB I PENDAHULUAN ...........................................................................
1 1.1 Latar Belakang..........................................................................
1 1.2 Perumusan Masalah ..................................................................
4 1.3 Tujuan Penelitian ......................................................................
4 1.4 Manfaat Penelitian ....................................................................
4 1.5 Hipotesis Penelitian ..................................................................
4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................
5 2.1 Tanaman sirih merah (Piper crocatum) ....................................
5 2.1.1 Klasifikasi Tanaman Sirih Merah (Piper crocatum) .......
5 2.1.2 Deskripsi Tanaman Sirih Merah (Piper crocatum) .........
5 2.1.3 Kandungan Kimia Daun Sirih Merah (Piper crocatum) ..
6 2.2 Bakteri Aeromonas hydrophila ..................................................
9 2.2.1 Klasifikasi bakteri Aeromonas hydrophila........... ............
9 2.2.2 Deskripsi bakteri Aeromonas hydrophila .........................
10
2.3 Antibiotik Pembanding ..............................................................
3.4.3 Analisis Fitokimia Ekstrak Daun Sirih Merah (Piper
21 3.11 Analisis Data ...........................................................................
21 3.10 Pengamatan ..............................................................................
3.9 Penentuan Kesetaraan Efektifitas Ekstrak Daun Sirih Merah Dengan Antibiotik Pembanding ................................................
20
3.8 Uji Efektifitas antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah (Piper crocatum) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila ................................................................................
19
3.7 Uji Sensitivitas Antibiotik Pembanding (kloramfenikol) Terhadap Bakteri Aeromonas hydrophila.................................
18
3.6 Penentuan Jumlah Sel Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila) Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC) ......................
18
crocatum ) dengan Metode kromatografi lapis tipis (KLT) 16 3.5 Kultur Biakan Aeromonas hydrophila .......................................
16
11 2.4 Ekstraksi ....................................................................................
15 3.4.2.3 Medium GSP (Glutamate Strach Phenil) ............
15 3.4.2.2 Medium TSB (Tryptic Soya Broth ......................
15 3.4.2.1 Medium TSA (Tryptic Soya Agar) ......................
15 3.4.2 Pembuatan medium ...................... ..................................
15 3.4.1 Ekstraksi Daun Sirih Merah ............................................
14 3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................
13 3.3 Rancangan Penelitian ...............................................................
13 3.2.2 Bahan ...............................................................................
13 3.2.1 Alat ..................................................................................
13 3.2 Alat dan BahanPenelitian .........................................................
13 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian ..................................................
11 BAB III METODE PENELITIAN ................................................................
21
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................
27
33 LAMPIRAN .....................................................................................................
32 DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
32 5.2 Saran .........................................................................................
32 5.1 Simpulan ....................................................................................
29 BAB V SIMPULAN DAN SARAN.............................................................
4.7 Kesetaraan Efektifitas Ekstrak Daun Sirih Merah Dengan Perbandingan Antibiotik Kloramfenikol ...................................
26 4.6 Uji Efektifitas Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah ......................
22 4.1 Ekstraksi Daun Sirih Merah ......................................................
4.5 Uji Sensitifitas Antibiotik Kloramfenikol Sebagai Antibiotik Pembanding ...............................................................................
25
4.4 Penentuan Jumlah Sel Bakteri Uji (Aeromonas hydrophila) Menggunakan Metode Total Plate Count (TPC .......................
24
23 4.3 Purifikasi Biakan Bakteri Aeromonas hydrophila .....................
4.2 Analisis Fitokimia Ekstrak Daun Sirih Merah Dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ...............................................
22
37
DAFTAR TABEL
Nomor Judul Tabel Halaman 4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Daun Sisih Merah dan Hasilnya ...............
22 4.2 Hasil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Daun Sirih Merah .....
23 4.3 Hasil Penentuan Jumlah Sel Bakteri Aeromonas hydrophila .............
25
4.4 Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik Kloramfenikol Sebagai Antibiotik Pembanding ..........................................................................................
26 4.5 Hasil Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah ......................
27
DAFTAR TABEL
Nomor Judul Tabel Halaman 4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Daun Sisih Merah dan Hasilnya ...............
22 4.2 Hasil Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Daun Sirih Merah .....
23 4.3 Hasil Penentuan Jumlah Sel Bakteri Aeromonas hydrophila .............
25
4.4 Hasil Uji Sensitivitas Antibiotik Kloramfenikol Sebagai Antibiotik pembanding ..........................................................................................
27 4.5 Hasil Uji Efektivitas Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah ......................
27
DAFTAR GAMBAR
Nomor Judul Gambar Halaman
4.1 Hasil penapisan fitokimia senyawa metabolit sekunder ekstrak daun sirih merah. Hasil positif terdapat A. flavonoid B. Alkaloid C. tanin .................................................................................................
23 4.2 Kultur bakteri Aeromonas hydrophila dalam media GSP ....................
24
4.3 Kurva hubungan antara diameter zona hambat kloramfenikol dengan ekstrak daun sirih merah .......................................................... 30