PENETAPAN KADAR FLAVONOID DAN FENOLIK EKSTRAK AIR JINTEN HITAM (Nigella sativa L.) DAN UJI SITOTOKSIK PADA SEL Penetapan Kadar Flavonoid Dan Fenolik Ekstrak Air Jinten Hitam (Nigella Sativa L.) Dan Uji Sitotoksik Pada Sel Kanker Payudara Mcf-7 Dari Tiga

PENETAPAN KADAR FLAVONOID DAN FENOLIK EKSTRAK AIR
JINTEN HITAM (Nigella sativa L.) DAN UJI SITOTOKSIK PADA SEL
KANKER PAYUDARA MCF-7 DARI TIGA DAERAH : HABASYAH,
INDIA DAN INDONESIA

SKRIPSI

Oleh :

Apriliana Dwi Sejati
K 100 080 070

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012

PENETAPAN KADAR FLAVONOID DAN FENOLIK EKSTRAK AIR
JINTEN HITAM (Nigella sativa L.) DAN UJI SITOTOKSIK PADA SEL
KANKER PAYUDARA MCF-7 DARI TIGA DAERAH : HABASYAH,
INDIA DAN INDONESIA

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta

Oleh :
Apriliana Dwi Sejati
K 100 080 070

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012

i
v

ii
vi

iii
vii

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum Wr. Wb.

Segala puji bagi Allah yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah
sehinga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang
berjudul: “PENETAPAN KADAR FLAVONOID DAN FENOLIK EKSTRAK
AIR JINTEN HITAM (Nigella sativa L.) DAN UJI SITOTOKSIK PADA SEL
KANKER PAYUDARA MCF-7 DARI TIGA DAERAH : HABASYAH, INDIA
DAN INDONESIA” sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat Sarjana
Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Dalam penyusunan ini penulis banyak mendapatkan bantuan dari berbagai
pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terimakasih kepada:

1. Bapak Dr. Muhammad Da’i M.Si., Apt selaku dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan sebagai dosen penguji skripsi.
2. Ibu Rosita Melannisa M.Si., Apt selaku dosen penguji skrpsi.
3. Ibu Ika Trisharyanti. D. K, M.Farm., Apt selaku pembimbing utama.
4. Bapak Andi Suhendi, S.farm., Apt selaku pembimbing pendamping.
5. Bapak Gunawan Setiayadi, S.Farm., Apt selaku dosen pembimbing
akademik.
6. Segenap laboran : Pak Rahmad, Pak Toni, Mbak Nur.
7. Ayah, ibu dan kakak ku yang selalu mendukung dan memberiku semangat.
8. Sahabat-sahabatku, mbak Nita, Vika, Netri, mbak Akhir, Mitha, Mahfur,
Hanif.
9. Berbagai pihak yang telah membantu dan penyusunan skripsi ini.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi siapa saja yang
membacanya dan muncul kritik dan saran untuk perbaikan penulis selanjutnya.
Wa’alaikumsalam Wr. Wb.
Surakarta, Juli 2012
Penulis

iv
viii

DAFTAR ISI

Halaman
HALAMAN JUDUL ..........................................................................................

i

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................

ii

DEKLARASI ..................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................ iv
DAFTAR ISI .......................................................................................................

v

DAFTAR TABEL ............................................................................................... vi
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... vii

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................

x

INTISARI............................................................................................................ xi
BAB I. PENDAHULUAN ..................................................................................

1

A. Latar Belakang Masalah ......................................................................

1

B. Perumusan Masalah .............................................................................

2

C. Tujuan Penelitian .................................................................................

2

D. Tinjauan Pustaka ..................................................................................

2

1. Tanaman Nigella sativa ...............................................................

2

a. Sistematika Tanaman Nigella sativa ......................................

2

b. Morfologi Tanaman Nigella sativa.........................................

2

c. Nama Daerah Tanaman Nigella sativa ...................................

3

d. Kandungan Ekstrak Air Nigella sativa ..................................

3

e. Kegunaan Kimia Nigella sativa .............................................

4

2. Flavonoid dan Fenolik ...............................................................

4

3. Sel kanker MCF-7 .....................................................................

5

4. Uji sitotoksik ..............................................................................

6

BAB II. METODE PENELITIAN .....................................................................

7

A. Jenis Penelitian ....................................................................................

7

B. Alat dan Bahan .....................................................................................

7

C. Jalannya Penelitian ...............................................................................

8

ix

v

1. Penyiapan Bahan .......................................................................

8

2. Pembuatan Ekstrak Air Nigella sativa .......................................

8

3. Pemeriksaan Organoleptis Ekstrak Air Nigella sativa ..............

8

4. Penetapan Kadar Flavonoid ........................................................

8

a. Penetapan Operating Time (OT) .........................................

8

b. Penentuan Pajang Gelombang Maksimal ............................

9

c. Kurva Baku Quercetin .........................................................

9

d. Penetapan Kadar Flavonoid Dalam Sampel .........................

9

5. Penetapan Kadar Fenolik ............................................................

9

a. Penetapan Operating Time (OT) ......................................... 10
b. Penentuan Pajang Gelombang Maksimal ........................... 10

c. Kurva Baku Asam Galat ...................................................... 10
d. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel ............................ 10
6. Uji Sitotoksik ............................................................................. 11
7. Analisa Data ............................................................................... 12
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 13
A. Determinasi ......................................................................................... 13
B. Ekstraksi .............................................................................................. 13
C. Penetapan Kadar Flavonoid Total ......................................................... 14
D. Penetapan Kadar Fenolik Total ............................................................ 16
E. Uji Sitotoksik Terhadap MCF-7 .......................................................... 18
F. Korelasi Flavonoid Fenolik dan Aktivitas Sitotoksik ......................... 20
BAB IV

KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 23

A. Kesimpulan .......................................................................................... 23
B. Saran ................................................................................................... 23
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 24
LAMPIRAN ....................................................................................................... 29

vi
x

DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.

Hasil Ekstraksi Biji Jinten Hitam ..................................................... 13

Tabel 2. Pemerikasaan Organoleptis Ekstrak Air Jinten Hitam ...................... 13
Tabel 3. Kadar Flavonoid Ekstrak Air Jinten Hitam ....................................... 15
Tabel 4.

Kadar Fenolik Ekstrak Air Jinten Hitam .......................................... 17

Tabel 5. Persentase Sel Hidup Ekstrak Air Jiten Hitam .................................. 20
Tabel 6. Kadar Flavonoid Fenolik Dan% Sel Hidup Konsentrasi
100 µg/mL ......................................................................................... 21

vii
xi

DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.

Struktur Kimia Yang Terkandung Dalam Nigella sativa...............

4

Gambar 2.

Struktur Umum Flavonoid ............................................................

5

Gambar 3.

Kuva Baku Kuersetin .................................................................... 14

Gambar 4.

Kurva Baku Asam Galat ............................................................... 16

Gambar 5.

Sel MCF-7 ...................................................................................... 18

Gambar 6.

Grafik Hubungan Konsentrasi Dan % Sel Hidup .......................... 20

Gambar 7.

Grafik Korelasi Kadar Flavonoid Fenolik Dan % Sel hidup
konsentrasi 100 µg/mL .................................................................. 21

viii
xii

DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi ..................................................... 30
Lampiran 2. Foto Biji Jinten Hitam .................................................................. 32
Lampiran 3. Foto Ekstrak Air Jinten Hitam ..................................................... 32
Lampiran 4. Gambar Alat Penetapan Kadar Flavonoid Dan Fenolik ............. 32
Lampiran 5. Gambar Alat Uji Sitotoksik........................................................... 32
Lampiran 6. Data Hasil Penetapan Kadar Flavonoid ........................................ 33
Lampiran 7. Data Hasil Penetapan Kadar Fenolik ............................................ 35
Lampiran 8. Data Hasil Uji Sitotoksik .............................................................. 37

ix
xiii

DAFTAR SINGKATAN
ATCC

American Type and Culture Collection

cm

centimeter

µg

mikrogram

DMSO

Dimeilsulfoksida

ER

Estrogen Reseptor

FBS

Fetal Bovine Serum

GAE

Gallic Acid Equivalen

HER-2

Hormone Estrogen Reseptor-2

IC50

Inhibitory Concentration 50

KLT

Kromatigrafi Lapis Tipis

MTT

(3-4,5dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromid)

mL

mililiter

PBS

Phospate Buffer Saline

RPMI

Roawall Park Memorial Institute

SDS

Sodium Dodesil Sulfat

UV

Ultra Violet

Vis

Visibel

QE

Quercetin Equivalen

x
xiv

INTISARI
Jinten hitam (Nigella sativa L.), merupakan tanaman obat yang
mengandung senyawa flavonoid dan fenolik yang mempunyai aktivitas
antioksidan dan antikanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar
flavonoid dan fenolik ekstrak air Nigella sativa Habasyah, India dan Indonesia
dan aktivitas sitotoksik terhadap sel MCF-7.
Penetapan kadar flavonoid ekstrak air jinten hitam ditentukan dengan
metode Chang. Penetapan kadar fenolik dilakukan dengan metode FolinCiocalteu. Uji sitotoksik pada sel MCF-7 dilakukan dengan metode MTT assay.
Hasil penelitian menunjukkan ekstrak air jinten hitam Habasyah, India,
dan Indonesia mempunyai kadar flavonoid berturut-turut 58,30±1,97 mg/100
gram; 12,90±0,50 mg/100 gram; 3,10±0,15 mg/100 gram. Kadar fenolik hitam
552,10±20,40 mg/100 gram (Habbsyah); 432,50±29,30 mg/100 gram (India);
49,50±2,50 mg/100 gram (Indonesia). Nilai IC50 ekstrak air jinten hitam Habasyah
dan India >100 µg/mL. Nilai IC50 ekstrak air jinten hitam Indonesia < 100 µg/mL.
Nilai korelasi (R2) kadar flavonoid dan fenolik dengan % sel hidup pada
konsentrasi 100 µg/mL dari ekstrak air jinten hitam adalah 0,004; 0,432.
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak air jinten hitam
Habasyah dan India tidak poten digunakan sebagai agen sitotoksik dan kandungan
flavonoid dan fenolik mempengaruhi aktivitas sitotoksik sebesar 0,4% dan 43%.
Kata kunci : Nigella sativa Linn., flavonoid total, fenolik total, aktivitas
sitotoksik, sel MCF-7.

xi
xv