UJI RESISTENSI DAN UJI BIODEGRADASI LOGAM BERAT (Pb, Zn, dan Hg) OLEH ISOLAT BAKTERI LUMPUR PANTAI KENJERAN Repository - UNAIR REPOSITORY
Lampiran 1 Tabel-tabel hasil uji kemampuan isolat bakteri A. Tabel nilai diameter zona halo isolat bakteri dengan logam Pb, Zn, dan Hg
5 MB1C 1,4 1,1 1,2 0,152753 1,233333
0,035355339 0,875
6 OA2G 0,9 0,85
1
1
1
1
5 MB1C
4 SA2A1 0,75 0,7 0,75 0,028867513 0,733333
3 SA1A 1 1,2 1,05 0,1040833 1,083333
1 0A2E1 2 0A1E
7 OA2E2 0,85 0,85 0,85 0,85
No Kodeisolat Pb (10 Ppm) Sd Rerata
6 OA2G 0,95 0,85 1,05 0,1 0,95
4 SA2A1
Logam Pb
3 SA1A 0,7 0,7 0,7 1,36E-16 0,7
1 0A2E1 0,8 2 0A1E
7 OA2E2 1,05 1,05 1 0,028868 1,033333 No Kode
isolat Pb (5ppm) Sd Rerata
6 OA2G 0,75 0,8 0,8 0,028868 0,783333
1
1
1
5 MB1C
4 SA2A1 1,1 1,05 1 0,05 1,05
3 SA1A 1,05 0,95 0,95 0,057735 0,983333
2 0A1E
No Kode isolat Pb (1ppm) Sd Rerata 1 0A2E1
7 OA2E2 0,9 0,85 0,95 0,05 0,9 Logam Zn
No Kode
isolat Zn (1 Ppm) Sd Rerata
1 0A2E1
5 MB1C 0,7 0,8 0,8 0,057735027 0,766667
6 OA2G
5 MB1C 0,8 0,9 0,9 0,057735 0,866667
4 SA2A1 1,5 1,5 1,6 0,057735 1,533333
1
1
1
1
3 SA1A
2 0A1E
1 0,81 0,1
0,13435 0,905No Kode isolat Hg ( 1 Ppm) Sd Rerata 1 0A2E1
Logam Hg
7 OA2E2 1,05 1 1 0,028867513 1,016667
6 OA2G 1 1,05 1,1 0,05 1,05
4 SA2A1 1 1,05 0,9 0,076376262 0,983333
1 0,95 0,9 0,05 0,95 2 0A1E
3 SA1A 0,8 0,8 0,9 0,057735027 0,833333
1 0A2E1 1,1 1,05 1 0,05 1,05
2 0A1E 1,15 1,4 1,15 0,144337567 1,233333
7 OA2E2 1,05 1,1 1,1 0,028868 1,083333 No Kode
isolat Zn (10 Ppm) Sd Rerata
6 OA2G 1,1 1,1 1,2 0,057735 1,133333
5 MB1C 0,8 0,8 0,9 0,057735 0,833333
4 SA2A1 0,8 0,8 0,8 1,36E-16 0,8
3 SA1A 0,9 0,9 0,8 0,057735 0,866667
1 0A2E1 1,2 1,1 1,1 0,057735 1,133333
2 0A1E 1,2 1,4 1,2 0,11547 1,266667
7 OA2E2 1,1 1 1.1 0,057735 1,066667 No Kode isolat Zn (5 Ppm) Sd Rerata
1
6 OA2G 1,05 1 0,95 0,05
5 MB1C
4 SA2A1 1,1 0,95 0,8 0,15 0,95
3 SA1A
7 OA2E2 0,8 0,69 0,88 0,095394 0,79 No Kode
isolat Hg ( 5 Ppm) Sd Rerata
1 0A2E10,7 0,75 0,035355 0.725 2 0A1E
95
5
10
6
10
7
1 0A2E1 7 7 7 1920 816 2176 2304 1320 1104 1984 768 968 2 0A1E 7 7 7
74
79
86
75
84 51 103
92
3 SA1A 7 7 7 2784 185 156 1376 296 148 679 241 130
7
4 SA2A1 7 7 7 664 268 156 576 112 30 456
73
32
5 MB1C 7 7 7 2624 437 139 2368 816 256 3520 447 172
6 OA2G 7 7 7
68
25
42 25 202
24
7
77
24
10
10
0,9 0,1
7 OA2E2 1,22 1,2 1,18 0,02 1,2 B.
0,8 0,070711 0,85
3 SA1A 1,1 0,9 0,9 0,11547 0,966667
4 SA2A1 0,8 0,8 0,8 1,36E-16 0,8
5 MB1C 0,9 0,95 1 0,05 0,95
6 OA2G 0 0
7 OA2E2 1,24 0,86 0,75
0,077782 0,805 No Kode isolat Hg ( 10 Ppm) Sd Rerata
1 0A2E1 0,8 0,8 0,8 1.35974E-16 0,8 2 0A1E 1,1 1,1 1,1 1,1
3 SA1A 1,2 1,1 1 0,1 1,1
4 SA2A1 0,9 0,85 0,9 0,028867513 0,883333
5 MB1C 0,7 0,7 0,7 1,35974E-16 0,7
6 OA2G 0,95
Tabel TPC dan ppH masing-masing isolat pada tiap logam (Pb, Zn, dan Hg) dengan waktu inkubasi selama 7 hari.
6
Tabel TPC dan pH isolat hari ke-0 No pH
1
2
3 Kode isolat 1 2 3
10
5
10
6
10
7
10
5
10
7 OA2E2 7 7 7 635 266 247 1008 461 200 694 228 Logam Pb Tabel TPC dan pH isolat bakteri pada logam Pb pada hari ke-3 pH
1
4 SA2A1 9 9.2 9.2 3208 1600 968 77 444 340 77 447 325
2
1
3 No Kode isolat
2
1
7 OA2E2 8.8 9.2 9.1 2416 2400 335 1728 1296 1104 1728 1488 752 Logam Zn Tabel TPC dan pH isolat bakteri pada logam Zn pada hari ke-3 pH
6 OA2G 8.6 8.9 8.7 6240 3120 1488 8448 3584 1696 8448 3680 888
5 MB1C 9.1 8.8 8.9 7296 1904 1360 5552 2240 652 5552 1648 527
3 SA1A 9 8.9 8.5 1480 287 111 1272 636 370 1272 968 336
10
1 0A2E1 9.1 8.9 9 1488 721 502 2608 1208 475 2608 510 335 2 0A1E 9.1 8.6 8.5 4432 2304 610 5312 1648 920 5312 3616 1586
9
10
8
10
7
10
9
10
3
7
10
7
6 OA2G 7.8 7.9 7.8 336 202 61 2720 496 62 6480 1040 123
5 MB1C 7.6 8.0 7.9 1312 109 81 13056 552 112 4592 760 114
4 SA2A1 7.6 8.1 7.4 18144 616 139 576 116 117 5152 488 181
3 SA1A 8.8 8.1 8.9 6192 688 245 4928 560 135 1664 464 199
1 0A2E1 8.2 8.5 8.1 4096 304 158 4832 1584 152 9216 832 251 2 0A1E 8.1 8.2 8.0 2016 544 132 1664 856 53 1408 298 122
9
10
8
10
10
10
9
10
8
10
7
10
9
10
8
8
7
2
10
10
7
10
9
10
8
10
7
9
10
10
8
10
7
10
3
2
1
3 No Kode isolat
8
9
10
3 No Kode isolat
9
10
8
10
7
10
3
2
1
2
1 0A2E1 9 9.8 9.1 3872 584 72 12000 936 170 3552 1488 320 2 0A1E 8.8 9.3 9.2 6768 1472 1400 3568 1008 276 2208 6496 668
1
43 Tabel TPC dan pH isolat bakteri pada logam Pb pada hari ke-7 pH
7 OA2E2 9 8.4 9.1 2368 352 134 9520 1920 364 832 292
6 OA2G 9.5 9.2 8.6 2208 600 170 4288 202 198 1664 424 268
5 MB1C 8.9 9.1 9.6 1520 276 148 7168 504 190 12288 328 142
4 SA2A1 9.2 8.2 9.2 4160 1536 197 4560 880 387 4512 1360 372
38
94
3 SA1A 8.9 8.8 9.6 1360 263 63 2144 1664 460 348
7 OA2E2 8.3 8.1 8.7 7760 1256 480 7232 880 240 11440 872 223
Tabel TPC dan pH isolat bakteri pada logam Zn pada hari ke-7 pH
6 OA2G 7.4 7.5 7.5 341 254 55 431 109 28 1037 2240 572
10
7
10
3
2
1
3 No Kode isolat
2
1
7 OA2E2 7.7 8.3 8.3 1408 248 97 1168 632 228 1168 332 218 pH
74 33 767 320 554
10
5 MB1C 7.4 7.3 7.3 349 196 6 236
4 SA2A1 7.3 7.3 7.3 358 241 128 358 267 238 448 228 134
71
35
36 9 601
3 SA1A 7.4 7.4 7.4 440 214 181 29
26 2 0A1E 7.4 7.2 7.2 0
70 30 255 103
1 0A2E1 7.3 7.2 7.3 328 106 16 236
13
8
9
12
1
6 OA2G 8.3 8.2 8.1 3232 3648 4432 3712 328 34 1884 2592 1056
5 MB1C 8.5 8.5 8.7 4848 1392 540 3520 1072 179 2880 1872 560
4 SA2A1 8.4 7.8 8.0 3792 1304 808 3588 2484 724 3312 2784 776
94
3 SA1A 8.5 8.7 8.1 2608 337 111 568 363 108 496 223
2 2 0A1E 8.2 8.5 8.3 4880 2056 0312 2240 1872 769 3168 1888 956
1
6
4
1
1 0A2E1 8.4 8.1 8.2 2
10
9
10
8
10
7
10
9
10
8
10
7
10
10
1
11
13
10
12
10
11
10
13
10
12
10
10
3 SA1A 7.2 8.1 8.0 80
13
10
12
10
11
10
3
2
1
3 No Kode isolat
2
1 0A2E1 8.8 8.8 8.0 792 388 554 640 224 184 888 492 154 2 0A1E 7.9 8.4 8.4 3328 624 376 1024 576 209 752 1744 290
32 15 456 212 165 2212 1142 364
11
10
10
13
10
12
10
11
10
13
10
12
11
4 SA2A1 8.0 8.3 8.2 343 135 151 456 764 272 276 384 155
10
3
2
1
3 No Kode isolat
2
1
Logam Hg Tabel TPC dan pH isolat bakteri pada logam Hg pada hari ke-3 Tabel TPC dan pH isolat bakteri pada logam Hg pada hari ke-7 pH
7 OA2E2 7.7 8.3 8.3 1408 248 97 1168 632 228 1168 332 218
6 OA2G 8 7.8 8.1 1032 552 268 1008 1096 226 1120 384 364
5 MB1C 7.7 7.4 7.9 308 112 76 219 156 192 612 168 131
7 OA2E2 8.6 8.4 8.7 3648 2640 500 3936 1680 544 2336 1712 53
Lampiran 2 Dokumentasi penelitian A. Dokumentasi isolat bakteri B. Dokumentasi zona halo dari tiap isolat bakteri terhadap pemberian logam dengan konsentrasi 1 ppm, 5 ppm, 10 ppm.
Logam Pb No Kode Logam Pb dengan konsentrasi- isolat bakteri
1
5
10
1
0A2E1
2
0A1E
3 SA1A
4 SA2A1
5 MB1C
6 OA2G
7 OA2E2 Logam Zn
No Kode isolat bakteri
Logam Zn dengan konsentrasi-
1
5
10
1
0A2E1
2
0A1E
3 SA1A
4 SA2A1
5 MB1C
6 OA2G
7 OA2E2
Logam Hg No Kode isolat bakteri
Logam Zn dengan konsentrasi-
1
5
10
1
0A2E1
2
0A1E
3 SA1A
4 SA2A1
5 MB1C
6 OA2G
7 OA2E2 C.
Dokumentasi uji pertumbuhan isolat bakteri pada media Mueller Hinton Broth dengan pemberian logam Pb, Zn, dan Hg 10 ppm
No Media Mueller Hinton Broth tanpa biakan
1 Biakan isolat bakteri dalam media Mueller Hinton dengan pemberian
berbagai logam berat dengan konsentrasi 10 ppm
Pb 10 ppm No Nama isolat bakteri
Foto media pada hari ke-3 Foto media pada hari ke-7
1
0A2E1
2
0A1E
3 SA1A
4 SA2A1
5 MB1C
6 OA2G
7 OA2E2
Zn 10 ppm No Nama Foto media pada hari ke-3 Foto media pada hari ke-7 isolat bakteri
1
0A2E1
2
0A1E
3 SA1A
4 SA2A1
5 MB1C
6 OA2G
7 OA2E2 Hg 10 ppm
No Nama Foto media pada hari ke-3 Foto media pada hari ke-7 isolat bakteri
1
0A2E1
2
0A1E
3 SA1A
4 SA2A1
5 MB1C
6 OA2G
7 OA2E2
D. Hasil uji oksidase
Kode isolat bakteri
0A1E MB1C OA2G Keterangan: uji positif dengan adanya perubahan warna (ungu) pada kertas uji E.
Dokumentasi identifikasi isolat terpilih menggunakan Kit
No Kode Jam ke-0 Jam ke-24 sebelum Jam ke-24 setelah isolat penambahan reagen penambahan reagen bakteri
1
0A1E
2 MB1C
3 OA2G
F.
2 O
2 Hasil uji H
Kode isolat bakteri
0A1E MB1C OA2G Keterangan: terdapat gelembung gas yang menandakan uji positif G.
Hasil uji amilolitik
Kode isolat bakteri
0A1E MB1C OA2G Keterangan: uji positif menunjukan adanya zona halo pada media
H. Hasil uji proteolitik
Kode isolat bakteri
0A1E MB1C OA2G Keterangan: uji positif menunjukan adanya zona halo pada media I.
Dokumentasi alat dan bahan
No Foto Nama
1 Autoclave
2 Spectrofotometer
3 Timbangan digital
4 Oven
5 Inkubator
6 Colony counter
7 Kompor listrik
8 Alat laboratorium lainnya
9 Logam uji
10 Pewarnaan gram
Lampiran 3 Data hasil biodegradasi dan identifikasi isolat bakteri terpilih A. Hasil uji biodegradasi logam Pb, Zn, dan Hg oleh isolat bakteri terpilih dengan menggunakan AAS
B. Hasil uji kit dan uji fisiologis isolat bakteri terpilih 1.
8 Indole tidak berwarna agak kuning
15 Inositol biru
14 Malonate Kuning (-)
(-)
13 Gelatin tidak berwarna
12 TDA Kuning (-)
11 Citrate Hijau (-)
10 VP Merah bata (+/-)
9 Urease warna jerami (-)
(-)
(-)
0A1E
7 ONPG tidak berwarna
6 Xylose kuning tua (+)
5 Mannitol biru - hijau (-)
4 Glucose Kuning (-)
3 H2S warna jerami (-)
(-)
2 Ornithine kuning - hijau
(-)
1 Lysine kuning - hijau
No. Substrat Warna Hasil Keterangan
(-)
- – hijau
- – hijau
- – hijau
- – hijau
- – hijau
- – hijau
- – hijau
- – hijau
(-)
23 Salicin biru
30 Proteolitik (-)
29 Amilum (+)
28 Motility (+)
(+) ada gelembung udara
27 H2O2 tidak berwarna
26 Nitrat (+Zn) tidak dilakukan
25 Nitrat merah ceri (+)
24 Arginine Kuning (+)
(-)
(-)
17 Rhamnose biru
22 Raffinose biru
(-)
21 Adonitol biru
20 Arabinose Kuning (+)
(-)
19 Lactose biru
(-)
18 Sucrose biru
(-)
16 Sorbitol biru
2. MB1C
23 Salicin biru - hijau (-)
17 Rhamnose hijau (-)
18 Sucrose biru - hijau (-)
19 Lactose biru - hijau (-)
20 Arabinose Kuning (+)
21 Adonitol biru - hijau (-)
22 Raffinose biru - hijau (-)
24 Arginine kuning (-)
15 Inositol biru - hijau (-)
25 Nitrat merah ceri (+)
26 Nitrat (+Zn) tidak dilakukan
27 H2O2 tidak berwarna
(+) ada gelembung udara
28 Motility (+)
29 Amilum (+)
30 Proteolitik (+)
16 Sorbitol biru - hijau (-)
No. Substrat Warna Hasil Keterangan
1 Lysine kuning (-)
(-)
2 Ornithine kuning (-)
3 H2S warna jerami (-)
4 Glucose Hijau (+)
5 Mannitol biru - hijau (-)
6 Xylose kuning tua (+)
7 ONPG tidak berwarna
8 Indole tidak berwarna agak kuning
(-)
(-)
9 Urease Merah muda (-)
10 VP Merah Cerry
(+/-)
11 Citrate kuning (-)
12 TDA Kuning (-)
13 Gelatin tidak berwarna
14 Malonate Kuning (-)
3. OA2G
22 Raffinose biru - hijau (-)
16 Sorbitol biru - hijau (-)
17 Rhamnose biru - hijau (-)
18 Sucrose biru - hijau (-)
19 Lactose biru - hijau (-)
20 Arabinose kuning (+)
21 Adonitol biru - hijau (-)
23 Salicin biru - hijau (-)
14 Malonate kuning (-)
24 Arginine Kuning- hijau
(+)
25 Nitrat merah ceri (+)
26 Nitrat (+Zn) tidak dilakukan
27 H2O2 tidak berwarna
(+) ada gelembung udara
28 Motility (+)
15 Inositol biru - hijau (-)
No. Substrat Warna Hasil Keterangan
1 Lysine kuning - hijau
6 Xylose kuning tua (+)
(-)
2 Ornithine kuning - hijau
(-)
3 H2S warna jerami (-)
4 Glucose Biru hijau (-)
5 Mannitol biru - hijau (-)
7 ONPG tidak berwarna
13 Gelatin tidak berwarna
(-)
8 Indole tidak berwarna
(-)
9 Urease warna jerami (-)
10 VP Merah cerry
11 Citrate Hijau (-)
12 TDA kuning (-)
(-)
- d d + d d d d d d - - d d
- d d d - -
- d - - -
14 Raffinose - - - - - - - d + d + + + + + + d +
21 VP (Voges Proskauer) d + + + + - - - + d + d + d d + d d
20 Indole - - - - - - - - - - - - + - - - - -
19 Urease - - d d - - + d - d - - d - - - - -
18 Citrate - - d d + - - + + + d d - - - d - -
17 ONPG - - - d - d + + + + d d d + + + d -
16 Xylose + - - - - - - + d + d d - + + + d -
15 Salicin - - + d d - d + + + + d d + + + d d
13 Mannose (Manitol) - - - - d d + d + + d + d + + + + +
23 Oksidase + d d d d - + - - - - - + - + - - -
12 Galactose (Gelatin) - - - d - - d + d + d d d + + + - -
11 Cellubiose (Hydrolysis selulase) d - d d d - d + + + + d + + + + d d
10 Glucose - +
d d - - - - d + + + + d + Uji produksi asam dari fermentasi karbohidrat
7 Pembengkakan sel spora -
X
X V T
22 Reduksi nitrate + + + + + + - d + + + d - d + + + d
24 Hidrolisis kasein (Protein)
X V
58
61
50
62
59
41
61
49
57
25 Hidrolisis tepung (Amilum)
41
39
31
66
52
66
65
X V
X V
70
4
12
11
10
9
7
6
5
3
16
2
1
2G
B. megaterium ;(9) B.subtilis;(10) B. licheniformis;(11) B. amyloliquefaciens;(12) B. coagulans;(14) B. alvei;(16)
B.circulans; (18) B. macerans;(19) B.polymyxa;(22) B. stearothermophilus;(24) B. stearothermophilus
No Jenis Uji OA(1) B. anthracis; (2) B. cereus, B. anthracoide;(3) B. mycoides;(4) B. thuringiensis;(5) B. firmus;(6) B. lentus;(7)
Tabel Persamaan Karakteristik Keterangan: (T) spora terminal, (V) spora sentral atau subteminal, (X) spora oval,(Y) spora bulat.
C.
14
18
X V T
VX VX
X V
V T
V X
VX VX
VX VX
VX VX
VX VX
6 Bentuk dan ukuran spora
19
5 Panjang sel > 3 µm -
4 Motilitas + - + - + + + + + + +
3 Sel yang membentuk rantai
2 Bentuk sel bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt bt
1 Pewarnaan gram + + + + + d + + + + + d d d - - d d
24
22
- d
- Koefisien sebanding (%)