UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA DI SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO - repository perpustakaan
UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA DI SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO
SKRIPSI SKRIPSI Disusun untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1 OLEH Dwi Astuti 0901070034 PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2014 ii
iii iv
PERSEMBAHAN
Karya ini saya persembahkan untuk; Ayah dan Ibunda tercinta yang selalu memberi kasih sayang serta motivasi dan do’a yang tiada hentinya.
Suamiku tercinta yang selalu memberi do’a, semangat dan dukungan yang sangat besar untuk Aku menyelesaikan skripsi ini.
Mas dan Mbaku tersayang yang selalu berdo’a dan mendukungku . v
MOTO
Hadapi hidup dengan penuh senyuman meski dalam kesedihan “ Tidak peduli tentang apa, bila sudah mulai mengerjakan dan belum berhasil, maka jangan menyerah “ (William Shakespeare)
Kebahagiaan tidak datang dari luar, tapi tumbuh di dalam hati Anda, yang membibit dari kesyukuran dan berkembang karena ketegasan untuk memilih kebaikan sebagai jalan hidup ( Mario Teguh)
vi
UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA DI
SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH
PURWOKERTO
Dwi Astuti
0901070034
ABSTRAK
Penelitiaan yang berjudul Uji Potensi Enzimatik Isolat Bakteri dari Udara di Sekitar Kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto telah dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi dan Lingkungan sekitar Kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jenis bakteri yang ada di udara sekitar kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto serta isolat yang dapat menghasilkan enzim amilase, protease, dan lipase. Metode yang digunakan adalah metode survei, sedangkan isolasi bakteri menggunakan metode piranti benturan padat dan streak kuadran. Pengamatan makroskopis bakteri dilakukan langsung dengan melihat bentuk, elevasi, pigmentasi, tepi, permukaan, dan halus-kasarnya permukaan koloni. Pengamatan mikroskopis bakteri meliputi pewarnaan gram dan uji biokimia (uji indol, uji methyl red, uji fermentasi karbohidrat, uji katalase, uji voges proskaeur). Identifikasi bakteri menggunakan buku identifikasi bakteri dari Holt, dkk. (1994)
dalam Bergey’s of th determinative Bacteriology
9 . Bakteri yang berhasil diisolasi dari udara sebanyak 10 isolat, yaitu Klebsiella, Phenylobacterium, Serratia, Citrobacter, Azomonas,
Alcaligenes, Budvicia , Brucella, Neserria, Echerichia .Bakteri yang mempunyai
potensi enzimatik protease adalah Klebsiella, Serratia, dan Citrobacter. Bakteri yang mempunyai potensi enzimatik amilase adalah Klebsiella, Brucella, Neiserria
, dan Echerichia. Bakteri yang mempunyai potensi enzimatik lipase adalah
Serratia , Citrobacter, dan Alcaligenes. Hasil dianalisis secara deskriptif analitatifKata kunci : identifikasi, isolasi, isolat bakteri, piranti benturan padat, potensi enzimatik, udara. vii
Segala puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT. Karena atas berkah, rahmat, karunia dan ridho-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Uji Potensi Enzimatik Isolat Bakteri dari Udara di Sekitar Kampus
Universitas Muhammadiyah Purwokerto”. Dikesempatan kali ini penulis
mengucapkan terima kasih yang setulus-tulusnya kepada Bapak Drs. Heri Maryanto M.Si. dan Bapak Teguh Julianto M.Si. yang telah berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skrpsi dengan baik dan benar.
Penulis menyadari sepenuhnya akan segala keterbatasan pengetahuan dan kemampuan yang penulis miliki, sehingga diperlukan kritik dan saran yang membangun dan bermanfaat. Penulis telah berusaha semaksimal mungkin agar dapat mencapai tujuan yang diharapkan sesuai dengan kemampuan yang penulis miliki.
Selain itu penulis juga mengucapkan terimakasih kepada:
1. Drs. Ahmad, M.Pd selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M.Si selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto atas fasilitasi kelancaran skripsi.
3. Segenap Dosen Program Studi Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. viii
4. Staf karyawan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan.
5. Staf laboran yang telah memberi bantuan selama penelitian.
6. Bapak dan Ibu yang senantiasa selalu memberikan Do’a dan semangat, beribu-ribu terima kasih untuk semuanya yang tak akan cukup jika diungkapkan dengan kata-kata dan yang tak akan mungkin terbalaskan sampai kapanpun.
7. Suami tercinta yang selalu mendo’akan, memberi semangat dan dukungan serta segala bantuan yang telah diberikan.
8. Keluarga besarku yang telah memberikan dukungan dan do’a.
9. Agun Gunawan rekan kerja di Laboratorium Mikrobiologi, terimakasih atas bantuan dan kerjasamanya selama penulis melaksankan penelitian dan penulisan skripsi ini.
10. Teman-teman seperjuangan di Prodi Pendidikan Biologi 2009 atas kerjasamanya selama ini.
11. Kepada semua pihak yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu yang telah membantu dalam penyusunan skripsi ini.
Semoga amal dan kebaikan amal dan kebaikan yang telah diberikan Bapak dan Ibu dosen serta teman-teman semua kepada penulis mendapat balasan yang setimpal dari Allah SWT. Semoga dapat bermanfaat bagi pembaca.
Purwokerto, .......................
Penulis ix
DAFTAR ISI
Halaman
UCAPAN TERIMA KASIH ......................................................................... vii
DAFTAR ISI ...................................................................................................ix
DAFTAR TABEL .......................................................................................... xii
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xivBAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Masalah ..........................................................................
1 1.2 Rumusan Masalah ...................................................................................
3 1.3 Tujuan Penelitan......................................................................................
4 1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................................
4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Isolasi Bakteri dari Suatu Campuran.......................................................
5 2.2 Identifikasi Bakteri ................................................................................
6 2.3 Bakteri .....................................................................................................
6
2.3.1 Ukuran Bakteri ........................................................................... 7
2.3.2 Bentuk Bakteri ............................................................................. 7 2.3.3 Struktur Sel Bakteri .....................................................................
8 2.3.4 Pengaruh Faktor Lingkungan pada Pertumbuhan Bakteri ..........
10
2.4 Mikrobiologi Udara ................................................................................ 14
2.4.1. Udara dalam Ruangan................................................................... 14 x
2.4.2. Udara di Luar (Atmosfer) ............................................................
14 2.5. Enzim ........................................................................................................
15 2.5.1. Enzim Protease .............................................................................
16 2.5.2. Enzim Amilase..............................................................................
16 2.5.3. Enzim Lipase ................................................................................
16 BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian ....................................................................
18 3.2. Alat dan Bahan yang digunakan ...............................................................
18 3.2.1. Alat .........................................................................................................
18 3.2.2. Bahan ............................................................................................
18 3.3. Metode Penelitian......................................................................................
19 3.4. Prosedur Penelitian....................................................................................
19 3.4.1. Pengambilan Sampel ....................................................................
19 3.4.2. Pembuatan Media .........................................................................
19 3.4.3. Isolasi Bakteri ...............................................................................
22 3.4.4. Pengamatan Karakteristik Bakteri ................................................
24 3.5. Identifikasi Bakteri ....................................................................................
27 3.6. Pengujian Potensi Enzim ..........................................................................
28 3.6.1. Pengujian Penghasil Protease .......................................................
28 3.6.2. Pengujian Penghasil Amilase .......................................................
28 3.6.3. Pengujian Penghasil Lipase ..........................................................
28 xi
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Hasil ..........................................................................................................
29 4.1.1. Hasil Isolasi Bakteri ......................................................................
29 4.1.2. Hasil Pengamatan Makroskopis Isolat Bakteri .............................
29 4.1.3. Hasil Pengamatan Karakteristik Mikroskopis .............................
30 4.1.4. Hasil Uji Biokimia ........................................................................
31 4.1.5. Hasil Identifikasi ...........................................................................
35 4.1.6. Hasil Uji Potensi Bakteri ..............................................................
51 4.2. Pembahasan ...............................................................................................
54 4.2.1. Jenis Bakteri..................................................................................
54 4.2.2. Hasil Pewarnaan Gram .................................................................
59 4.2.3. Hasil Uji Biokimia ...................................
60 4.2.4. Hasil Uji Potensi ...........................................................................
64 BAB V KESIMPULAN 5.1. Simpulan ...................................................................................................
71 5.2. Saran ..........................................................................................................
71 DAFTAR PUSTAKA .....................................................................................
72 xii
DAFTAR TABEL
Nomor Judul Tabel Halaman45 Tabel 4.11. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Brucella ..........................................................................................
69
66 Tabel 4.18. Luas daya degradasi yang terbentuk pada uji enzimatik lipase ...............
64 Tabel 4.17. Luas daya degradasi yang terbentuk pada uji enzimatik amilase ............
54 Tabel 4.16. Luas daya degradasi yang terbentuk pada uji enzimatik protease ...........
51 Tabel 4.15. Tabel isolat bakteri yang telah diidentifikasi ...........................................
50 Tabel 4.14. Hasil pengamatan potensi bakteri ............................................................
48 Tabel 4.13. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Echerichia .......................................................................................
47 Tabel 4.12. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Neisseria .........................................................................................
44 Tabel 4.10. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Budvicia ..........................................................................................
Tabel 4.1. Kode isolat bakteri yang berhasil diisolasi dari udara yang ada di sekitar kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto ....................................42 Tabel 4.9. Hasil pengmatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Alcaligenes ......................................................................................
41 Tabel 4.8. Hasil Pengamatan makroskopi, mikroskopi, dan uji biokimia pada genus Azomonas ..................................................................................................
39 Tabel 4.7. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Citrobacter......................................................................................
38 Tabel 4.6. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Serratia ...........................................................................................
36 Tabel 4.5. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada genus Phenylobacterium ...........................................................................
31 Tabel 4.4. Hasil pengamatan karakteristik makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia genus Klebsiella .........................................................................
30 Tabal 4.3. Hasil uji biokimia .......................................................................................
29 Tabel 4.2. Hasil pengamatan karakteristik mikroskopis .............................................
xiv
DAFTAR GAMBAR
Nomor Judul Gambar Halaman Gambar 4.1. Hasil pengamatan karakteristik makroskopisbakteri...................
30 Gambar 4.2. Hasil uji fermentasi karbohidrat ..................................................
32 Gambar 4.3. Hasil uji indole ............................................................................
33 Gambar 4.4. Hasil uji katalase .........................................................................
33 Gambar 4.5. Hasil uji voges proskauer ............................................................
34 Gambar 4.6. Hasil uji methyl red .....................................................................
35 Gambar 4.7. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-1 ...................
37 Gambar 4.8. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-2 ...................
38 Gambar 4.9. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-3 ...................
40 Gambar 4.10. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-4 .................
41 Gambar 4.11. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-5 .................
43 Gambar 4.12. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-6 .................
44 Gambar 4.13. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-7 .................
46 Gambar 4.14. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-8 .................
47 Gambar 4.15. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-9 dan UD-11 49 Gambar 4.16. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-10 ...............
50 Gambar 4.17. Hasil pengamatan uji enzim protease ........................................
52 Gambar 4.18. Hasil pengamatan uji enzim amilase .........................................
53 Gambar 4.19. Hasil pengamatan uji enzim lipase ............................................
54 Gambar 4.20. Reaksi penguraian trytophan oleh enzim trytophanase .............
61 Gambar 4.21. Persamaan reaksi penguraian H
2 O 2 oleh enzim katalase ..........
62 Gambar 4.22. Persamaan reaksi fermentasi karbohidrat ..................................
62 Gambar 4.23. Persamaan reaksi perubahan warna pada medium uji Voges Proskaue....................................................................................
63 Gambr 4.24. Persamaan reaksi hidrolisis glukosa ...........................................
63 xiv