AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP Aktivitas Antibakteri Dan Bioautografi Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona Muricata L.) Terhadap Klebsiella Pneumoniae Dan Staphyloco

AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI POLAR
EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP
Klebsiella pneumoniae DAN Staphylococcus epidermidis

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta

Oleh :
KOSWORO
K 100 080 019

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012
 

i 
 

 

ii 
 

DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, 27 Juni 2012
Peneliti

Kosworo

iii 
 

KATA PENGANTAR
Assalamuallaikum Warohmatullahi Wabarokatuh
Alhamdulillahirobbil’alamin, puji syukur penulis panjatkan hanya untukMu ya Allah atas segala rahmat, nikmat, barokah, dan kekuatan yang tak
terhingga untukku untuk terus melangkah. Sholawat dan salam semoga senantiasa
tercurah kepada baginda tercinta Muhammad SAW hamba dan panutan terbaik
segenap umat manusia, penyeru kebenaran dan pengingat manusia dari kelalaian.
Alhamdulillah, penulis telah dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
“AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI POLAR
EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP
Klebsiella pneumoniae DAN Staphylococcus epidermidis”, disusun sebagai salah
satu syarat mencapai Drajat sarjana Farmasi (S. Farm) Program Ilmu Studi
Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta (UMS).
Penulis banyak mendapatkan bimbingan, dukungan dan bantuan dari
berbagai pihak sehingga penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan. Untuk itu
penulis menyampaikan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt. selaku dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.

2. Bapak Andi Suhendi, S. Farm., Apt. selaku dosen pembimbing akademik.
3. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc selaku dosen pembimbing utama dan Bapak Peni
Indrayudha, M.Biotech., Apt. selaku dosen pembimbing pendamping.
4. Bapak Dr. Muhtadi, M.Si selaku penguji I dan Ibu Ika Trisharyanti DK,
M.Farm., Apt selaku penguji II.
5. Kedua orang tua penulis tercinta, Bapak Hartono dan Ibu Ngadiyem, serta
adikku Aji Kuncoro.
6. Tim peneliti ekstrak etanol daun sirsak, Henggar Prasetyo, Septianingrum, dan
Jayanti.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari kesempurnaan. Oleh karena
itu, penulis mengharapkan kritik dan saran membangun demi kesempurnaan
skripsi ini.
Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi
pembaca pada umumnya dan khususnya dapat bermanfaat bagi penulis sendiri.
Wassalamualaikum Warohmatullahi Wabarokatuh
Surakarta, 27 Juni 2012.

(Kosworo)
 

iv 
 

DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ……………………………………………………....... i
HALAMAN PENGESAHAN……………………………………………...... ii
HALAMAN DEKLARASI ………………………………………………..... iii
KATA PENGANTAR …………………………………………………… .... iv
DAFTAR ISI ……………………………………………………………… ... v
DAFTAR GAMBAR …………………………………………………….. .... viii
DAFTAR TABEL ………………………………………………………… ... ix
DAFTAR LAMPIRAN …………………………………………………… ... x
DAFTAR SINGKATAN …………………………………………………. ... xi
INTISARI ………………………………………………………………….... xii
BAB I. PENDAHULUAN……………………………………………...…. ... 1
Latar Belakang masalah………………………………………...…. ............... 1
Rumusan Masalah…….………………………………………….... ............... 3
Tujuan Penelitian………………………………………………...... ............... 3
Tinjauan Pustaka…………………………………………………... ............... 4

Tanaman Sirsak..…………………………………………......... ..................... 4
Sistematika Tanaman Sirsak……….……………………..... .......................... 4
Nama daerah…..……………………............................................................... 4
Kandungan kimia………………………………………….. ........................... 4
Khasiat tanaman ............................................................................................... 4
1.

Metode Penyarian.......................................................................... 5

2.

Staphylococcus epidermidis .......................................................... 5

3.

Klesiella pneumonia ...................................................................... 6

4.

Uji Aktivitas Antibakteri ............................................................... 7

5.

Bioautografi................................................................................... 8

A. Landasan Teori .......................................................................................... 8
B. Hipotesis ................................................................................................... 9

v 
 

BAB II. METODE PENELITIAN….……………………………………... 10
A. Kategori Penelitian….……………………………………………... 10
B. Variabel Penelitian….……………………………………………... 10
C. Alat dan Bahan……………...…………………………...……….... 10
D. Tempat Penelitian …………………………………………………. 11
E. Jalannya Penelitian………….………………………...………….... 11
1. Determinasi Tanaman…….……………………………………. 11
2. Pengumpulan Bahan……………………………...……………. 12
3. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirsak………..……………... 12

4. Fraksinasi Ekstrak Etanol Daun Sirsak….……...……………... 12
5. Sterilisasi Alat dan Bahan……………………………………... 13
6. Pembuatan Media……….………………………………….….. 13
7. Pembuatan stok bakteri……..…………………………………. 13
8. Pembuatan Suspensi Bakteri…………………………….…….. 13
9. Pewarnaan Bakteri dan Uji Biokimia Bakteri………..………. 14
10. Pembuatan Seri Konsentrasi Fraksi Semipolar……………..…. 14
11. Pembuatan Kontrol…………………………………………….. 14
12. Uji Antibakteri dengan Metode Dilusi Padat………………….. 15
13. Uji Komatografi Lapis Tipis…………………………………… 15
14. Analisis Hasil…………………………………………………... 16
15. Pengujian Bioautografi………………………………………… 16
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN………………………………….. 17
A. Determinasi Tanaman…….……………………………………. 17
B. Fraksinasi Ekstrak Etanol Daun Sirsak….…………..………... 17
C. Identifikasi Bakteri…………………………………………….. 21
D. Uji Aktivitas Antibakteri………………………………………. 23
E. Analisis Kualitatif Fraksi polar………………………………... 26
F. Uji Bioautografi…………………………………………...…… 29

vi 
 

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 31
A. Kesimpulan ............................................................................................. 31
B. Saran ..................................................................................................... 31
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 32
LAMPIRAN ..................................................................................................... 35

vii 
 

DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Optimasi Fase Gerak ...................................................................... 18
Gambar 2. Fraksinasi 1 .................................................................................... 18
Gambar 3. Fraksinasi 2 .................................................................................... 19
Gambar 4. Fraksinasi 3 .................................................................................... 19
Gambar 5. Pengelompokkan fraksi .................................................................. 20
Gambar 6. Hasil Pengecatan Gram .................................................................. 21

Gambar 7. Hasil Uji Test Mannitol terhadap Klebsiella pneumoniae dan
Staphylococcus epidermidis ........................................................... 22
Gambar 8. Hasil Uji Penanaman Bakteri Klebsiella pneumonia pada Media
KIA, LIA, dan MIO ...................................................................... 23
Gambar 9. Hasil Uji Antibakteri Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Sirsak
terhadap Staphylococcus epidermidis dan Klebsiella Pneumoniae 24
Gambar 10. Hasil Bercak Dideteksi dengan UV dan Berbagai Reaksi
Semprot ........................................................................................ 27
Gambar 11. Struktur senyawa yang Terdapat dalam Tumbuhan Sirsak .......... 28
Gambar 12. Hasil Uji Bioautografi Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun
sirsak (Annona muricata L.) terhadap Klebsiella pneumoniae (A)
dan Staphylococcus epidermidis (B) ........................................... 29

viii 
 

DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Sirsak terhadap
Staphylococcus epidermidis dan Klebsiella pneumoniae .............. 24

Tabel 2. Hasil Analisis KLT Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Sirsak
(Annona muricata) ......................................................................... 27

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

ix 
 

DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Determinasi ........................................................................ 35
Lampiran 2. Surat Keterangan Bakteri Staphylococus epidermidis................. 37
Lampiran 3. Surat Keterangan Bakteri Klebsiella pneumoniae ....................... 38
Lampiran 4. Perhitungan Rendemen dan Konsentrasi Fraksi Polar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak...................................................................... 40
Lampiran 5. Perhitungan Harga Rf dan hRf pada Hasil Analisis KLT ........... 42
Lampiran 6. Komposisi Media Bakteri ............................................................ 43
Lampiran 7. Kompisisi Cat Gram .................................................................... 44
Lampiran 8. Pembuatan Reagen ...................................................................... 45
Lampiran 9. Foto Simplisia Daun Sirsak dan Fraksinasi ................................. 46
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

x 
 

DAFTAR SINGKATAN
GF

:

Gips Flourecense

UV

:

Ultraviolet

VIS

:

Visibel

KLT

:

Kromatografi Lapis Tipis

KHM

:

Kadar Hambat Minimal

LB

:

Liebermann Burchard (LB)

µL

:

Mikroliter

mL

:

Mililiter

g

:

Gram

µg

:

Mikrogram

mg

:

Miligram

cm

:

Sentimeter

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

xi 
 

INTISARI
Tumbuhan sirsak (Annona muricata L.) merupakan salah satu tumbuhan
yang digunakan sebagai obat tradisional. Annonaceae mengandung alkaloid,
acetogenin, polifenol, terpen, dan senyawa aromatik. Penelitian ini bertujuan
untuk mengetahui Kadar Hambat Minimum (KHM) fraksi polar ekstrak etanol
daun sirsak (Annona muricata L.) terhadap Klebsiella pneumonia dan
Staphylococcus epidermidis serta senyawa yang yang bertanggung jawab terhadap
aktivitas tersebut.
Daun sirsak diekstraksi dengan etanol 96% secara maserasi dan dilakukan
fraksinasi dengan Kromatografi Cair Vakum (KCV). Fraksi diuji aktivitas
antibakteri menggunakan metode dilusi padat. Seri konsentrasi fraksi polar yang
digunakan adalah 2,5% b/v, 3% b/v, 3,5 b/v, 4% b/v, dan 4,5% b/v. Uji
kandungan senyawa dilakukan dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT), fase
diam silika, dan fase gerak heksan : etil asetat (3:7). Uji bioautografi dengan
menempelkan lempeng KLT yang diinokulasi suspensi bakteri, senyawa
antibakteri ditunjukkan zona jernih.
Hasil penelitian menunjukkan fraksi polar ekstrak etanol daun sirsak
(Annona muricata L.) mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Klebsiella
pneumonia dan Staphylococcus epidermidis dengan KHM berturut-turut sebesar
3% dan 3,5%. Golongan senyawa yang memiliki aktivitas antibakteri baik
terhadap Klebsiella pneumonia maupun Staphylococcus epidermidis merupakan
senyawa golongan flavonoid, polifenol, antron dan triterpenoid.
Kata kunci: Annona muricata L., antibakteri, fraksi polar, Klebsiella
pneumoniae, Staphylococcus epidermidis.

 

xii