AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI NONPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona Aktivitas Antibakteri Dan Bioautografi Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Sirsak (Annona Muricata L.) Terhadap Klebsiella Pneumoniae Dan Staphylococous Epidermidis
AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI
NONPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona
muricata L.) TERHADAP Klebsiella pneumoniae DAN
Staphylococous epidermidis
SKRIPSI
Oleh:
RISKA UMAMI DWI SEPTIANINGRUM
K 100 080 181
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012
AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI
NONPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona
muricata L.) TERHADAP Klebsiella pneumoniae DAN
Staphylococcus epidermidis
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat sarjana farmasi (S.Farm) pada fakultas farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
RISKA UMAMI DWI SEPTIANINGRUM
K 100 080 181
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012
ii
iii
MOTTO
“ Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka apabila
kamu telah selesai dari satu urusan, kerjakanlah dengan sungguhsungguh urusan yang lain.”
(QS. Alam Naysrah : 6-7)
Serendah-rendah ilmu adalah yang berhenti di lidah, dan yang paling
tinggi adalah yang tampak di anggota-anggota badan.
(„Ali bin Abi Thalib)
Bila kau menginginkan pengetahuan sebagaimana kau menginginkan
udara, kau akan mendapatkannya.
(Socrates)
Jika orang lain bisa untuk mengerjakan sesuatu dan berhasil
mendapatkan sesuatu, maka kita harus optimis bahwa kita pasti
juga bisa untuk mendapatkanya.
(Penulis)
iv
PERSEMBAHAN
Kupersembahkan karya sederhana ini teruntuk:
Ibunda (Sri Widayati) dan Ayahanda (Marwoto) tercinta
Sebagai wujud rasa hormat, bakti, terima kasih, serta kasih
sayangku kepadamu. Engkau telah memberiku doa,
kesabaran, pengorbanan dan motivasi yang tak pernah letih
dan selalu menuntun dengan cinta serta kasih sayang.
Keluarga kecil kakakku tersayang mas Riki, mbak Yani serta
keponakan cantikku Bilqis Dafila Meca yang selalu
memberiku motivasi dan rasa kasih sayang yang tiada henti.
Seluruh keluarga besarku dan Septian Ilham Yulyansyah
yang senantiasa memberikan motivasi , perhatian dan kasih
sayang .
Almameter Universitas Muhammadiyah Surakarta
v
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu`alaikum warohmatullahi wabarokatuh
Alhamdulillahirobbil`alamin, puji syukur penulis panjatkan hanya untuk-
Mu ya Allah atas segala rahmat, nikmat, barokah, dan kekuatan yang tak
terhingga untukku untuk terus melangkah.
Alhamdulillah, penulis telah dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
aktivitas antibakteri fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak (Annona
muricata
L.)
Terhadap Klebsiella pneumoniae dan Staphylococcus
epidermidis sebagai salah satu syarat mencapai derajat sarjana Farmasi (S. Farm)
Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
Penulis menyampaikan terima kasih sebesar-besarnya kepada :
1. Bapak Dr. Muhammad Da'i, M.Si., Apt., Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Dr. Haryoto, M. Sc. Dosen Pembimbing I yang dengan penuh kesabaran
memberikan bimbingan, nasihat, pengarahan, dan petunjuk, serta perhatian
selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini.
3. Bapak Peni Indrayudha, M.,Biotech., Apt. Dosen pembimbing II yang telah
meluangkan waktu dan kesempatan untuk memberikan bimbingan nasihat,
pengarahan, dan petunjuk serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan
penyelesaian skripsi ini.
vii
4. Ibu Ika Trisharyanti D.K., M.Farm., Apt, Reviewer yang memberikan
pengarahan, petunjuk, serta perhatian selama penyusunan, dan penyelesaian
usulan skripsi.
5. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech. St dan Bapak Dr. Muhtadi, M.Si Dosen penguji
yang telah banyak memberi masukan dan saran.
6. Bapak dan Ibu dosen beserta seluruh staf dan karyawan Fakultas Farmasi UMS
yang telah banyak membantu.
7. Teman terbaik satu tim yang telah dengan setia melewati berbagai suka duka
bersama selama penelitian dan penyusunan skripsi : Yuli, Wikan, dan
Kosworo, serta semua anak bimbing bapak Haryoto.
8. Sahabat-sahabat tersayang : Yennie, Lisa, Puput, Nuvia, Bety, Ira dan Esty
dengan penuh perhatian selalu memberikan semangat bagi penulis.
9. Sahabat-sahabat satu perjuangan serta teman-teman kelas D angkatan 2008 atas
semangatnya..
Akhir kata semoga apa yang penulis sajikan bisa bermanfaat bagi
perkembangan dunia ilmu pengetahuan khususnya di bidang kefarmasian.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb.
Surakarta, 18 januari 2012
Penulis
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .........................................................................................
i
HALAMAN PENGAJUAN ...............................................................................
ii
HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................... iii
MOTTO ............................................................................................................ iv
PERSEMBAHAN ............................................................................................
v
DEKLARASI .................................................................................................... vi
KATA PENGANTAR ...................................................................................... vii
DAFTAR ISI ..................................................................................................... ix
DAFTAR TABEL ............................................................................................. xii
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ xiii
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xiv
DAFTAR SINGKATAN .................................................................................. xv
INTISARI .......................................................................................................... xvi
BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah ...............................................................
1
B. Perumusan Masalah .....................................................................
2
C. Tujuan Penelitian .........................................................................
3
D. Tinjauan Pustaka ..........................................................................
3
1. Daun Sirsak (Annona muricata L.) ........................................
3
2. Metode Penyarian ...................................................................
4
3. Klebsiella pneunomiae ............................................................
4
4. Staphylococcus epidermidis ...................................................
5
5. Fraksinasi ...............................................................................
6
6. Uji Aktivitas Antibakteri ........................................................
6
7. Kromatografi Lapis Tipis .......................................................
7
ix
8. Bioautografi ............................................................................ 77
E. Landasan Teori ............................................................................. 88
F. Hipotesi………………………………………………………….. 8
BAB II. CARA PENELITIAN ......................................................................... 99
A. Metode Penelitian ......................................................................... 99
B. Variabel Penelitian ....................................................................... 99
C. Bahan dan Alat ............................................................................. 99
D. Tempat Penelitian ……………………………………………... 1010
E. Jalannya Penelitian ....................................................................... 11
11
1. Determinasi Tanaman ............................................................ 11
11
2. Pengumpulan Bahan ............................................................... 11
11
3. Ekstraksi ................................................................................ 11
11
4. Fraksinasi ………………………………………………….. 1111
5. Sterilisasi Alat dan Bahan ...................................................... 12
12
6. Pembuatan Media ................................................................... 12
12
7. Pemeliharaan Bakteri ............................................................. 12
12
8. Pewarnaan bakteri ………………………………………… 1313
9. Identifikasi Bakteri ……………………………………….. 1313
10. Penyiapan Stok Bakteri .......................................................... 13
13
11. Pembuatan Seri Konsentrasi .................................................. 14
14
12. Pembuatan Kontrol ................................................................. 15
15
13. Uji Antibakteri Metode Dilusi Padat ..................................... 15
15
14. Uji Kromatografi Lapis Tipis ................................................. 15
15
15. Uji Bioautografi ..................................................................... 15
15
F. Analisis Data…………………………………………………… 1616
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 17
17
A. Determinasi Tanaman .................................................................. 17
17
B. Ekstraksi ....................................................................................... 17
17
C. Fraksinasi ……………………………………………………… 1818
D. Identifikasi Bakteri ....................................................................... 19
19
E. Uji Aktivitas Antibakteri .............................................................. 22
22
x
F. Analisis Kualitatif Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Sirsak
25
G. Uji Bioautografi ........................................................................... 28
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 32
A. Kesimpulan .................................................................................. 32
B. Saran ............................................................................................. 32
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 33
LAMPIRAN ...................................................................................................... 36
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak terhadap K. pneunomiae ....................................... 23
Tabel 2. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak terhadap S. epidermidis ....................................... 24
Tabel 3. Keterangan Hasil Analisis KLT Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak ............................................................................... 27
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Skema Pembuatan Seri Konsentrasi Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak ..................................................................
14
Gambar 2. Gambar KLT fraksinasi ...........................................................
18
Gambar 3. Hasil Pengecatan Gram ... ............................................................. 19
Gambar 4. Hasil Test Manitol terhadap S. epidermidis .. ............................... 20
Gambar 5.
Hasil Test KIA, LIA, MIO terhadap K. Pneunomiae ...............
Gambar 6.
Hasil Uji Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun
Gambar 7.
Sirsak terhadap K. pneunomiae .. ................................................. 23
Hasil Uji Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun
Gambar 8.
Sirsak terhadap S. epidermidis . .................................................... 23
Hasil KLT Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Sirsak ............ 24
Gambar 9.
Hasil Uji Bioautografi Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun
21
Sirih terhadap K. pneunomiae .. .................................................... 26
Gambar 10. Hasil Uji Bioautografi Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun
Sirih terhadap S. epidermidis ………………........................... 3030
Gambar 11. Struktur Senyawa Antibakteri Dalam Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak……………………………………………… 31
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Determinasi ......................................................................
37
Lampiran 2. Surat Bakteri Staphylococcus epidermidis .................................
39
Lampiran 3. Surat Bakteri Klebsiella pneunomiae .................................
40
Lampiran 4. Perhitungan ...............................................................................
42
Lampiran 5. Komposisi Media Bakteri ........................................................
46
Lampiran 6. Komposisi Cat Gram .................................................................
47
Lampiran 7. Pembuatan reagen ………………………………………… 48
Lampiran 8. Foto Daun Sirsak.............................................................
49
Lampiran 9. Foto Alat........................................................................
xiv
50
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infusion
CFU
: Colony Forming Unit
CMC-Na
: Carboxyl Methyl Cellulosa Natrium
KBM
: Kadar Bunuh Minimum
KIA
: Kligler Iron Agar
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
K.pneunomiae
: Klebsiella pneunomiae
LAF
: Laminar Air Flow
LIA
: Lysine Iron agar
MH
: Mueller Hinton
MIO
: Motility Indol Ornithine
MSA
: Mannitol Salt Agar
Rf
: Retardation factor
SDA
: Sabouroud Dextrose Agar
S. epidermidis
: Staphylococcus epidermidis
UV
: Ultraviolet
xv
INTISARI
Famili dari Annonaceae mengandung senyawa asetogenin yang
toksisitasnya tinggi pada sel manusia, bakteri, virus dan serangga. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui Kadar Bunuh Minimum (KBM) fraksi nonpolar
ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata .L) terhadap Klebsiella pneumoniae
dan Staphylococcus epidermidis serta mengetahui golongan senyawa yang
terdapat dalam fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata .L).
Daun sirsak diekstraksi dengan etanol 96% secara maserasi. Fraksi
nonpolar ekstrak etanol daun sirsak diperoleh dengan cara fraksinasi
menggunakan Kromatografi Cair Vakum (KCV). Uji aktivitas antimikroba
menggunakan metode dilusi padat. Seri konsentrasi ekstrak yang digunakan
adalah 2,5% b/v, 3% b/v, 3,5% b/v, 4% b/v, dan 4,5% b/v. Kromatografi Lapis
Tipis menggunakan fase diam silika gel GF254 dan fase gerak heksan:etilasetat
(7:3) untuk identifikasi golongan senyawa dalam ekstrak. Metode bioautografi
digunakan untuk mengetahui golongan senyawa dalam ekstrak yang memiliki
aktivitas antibakteri.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi nonpolar ekstrak etanol daun
sirsak mempunyai aktivitas antimikroba terhadap Klebsiella pneumoniae dan
Staphylococcus epidermidis dengan Kadar Bunuh Minimum berturut-turut sebesar
3,5% b/v dan 4% b/v. Golongan senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak
tersebut adalah saponin, flavonoid, polifenol, antrakuinon, triterpenoid. Golongan
senyawa dari fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak yang memiliki aktivitas
antibakteri terhadap K. pneumoniae kemungkinan merupakan senyawa golongan
polifenol dan flavonoid, sedangkan golongan senyawa yang memiliki aktivitas
antibakteri terhadap S. epidermidis kemungkinan merupakan senyawa golongan
flavonoid, antron, antranol dan polifenol.
Kata kunci : Annona muricata Linn, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus
epidermidis, ekstrak etanol, fraksi nonpolar, KLT, bioautografi.
xvi
NONPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona
muricata L.) TERHADAP Klebsiella pneumoniae DAN
Staphylococous epidermidis
SKRIPSI
Oleh:
RISKA UMAMI DWI SEPTIANINGRUM
K 100 080 181
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012
AKTIVITAS ANTIBAKTERI DAN BIOAUTOGRAFI FRAKSI
NONPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SIRSAK (Annona
muricata L.) TERHADAP Klebsiella pneumoniae DAN
Staphylococcus epidermidis
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat sarjana farmasi (S.Farm) pada fakultas farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
RISKA UMAMI DWI SEPTIANINGRUM
K 100 080 181
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012
ii
iii
MOTTO
“ Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka apabila
kamu telah selesai dari satu urusan, kerjakanlah dengan sungguhsungguh urusan yang lain.”
(QS. Alam Naysrah : 6-7)
Serendah-rendah ilmu adalah yang berhenti di lidah, dan yang paling
tinggi adalah yang tampak di anggota-anggota badan.
(„Ali bin Abi Thalib)
Bila kau menginginkan pengetahuan sebagaimana kau menginginkan
udara, kau akan mendapatkannya.
(Socrates)
Jika orang lain bisa untuk mengerjakan sesuatu dan berhasil
mendapatkan sesuatu, maka kita harus optimis bahwa kita pasti
juga bisa untuk mendapatkanya.
(Penulis)
iv
PERSEMBAHAN
Kupersembahkan karya sederhana ini teruntuk:
Ibunda (Sri Widayati) dan Ayahanda (Marwoto) tercinta
Sebagai wujud rasa hormat, bakti, terima kasih, serta kasih
sayangku kepadamu. Engkau telah memberiku doa,
kesabaran, pengorbanan dan motivasi yang tak pernah letih
dan selalu menuntun dengan cinta serta kasih sayang.
Keluarga kecil kakakku tersayang mas Riki, mbak Yani serta
keponakan cantikku Bilqis Dafila Meca yang selalu
memberiku motivasi dan rasa kasih sayang yang tiada henti.
Seluruh keluarga besarku dan Septian Ilham Yulyansyah
yang senantiasa memberikan motivasi , perhatian dan kasih
sayang .
Almameter Universitas Muhammadiyah Surakarta
v
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu`alaikum warohmatullahi wabarokatuh
Alhamdulillahirobbil`alamin, puji syukur penulis panjatkan hanya untuk-
Mu ya Allah atas segala rahmat, nikmat, barokah, dan kekuatan yang tak
terhingga untukku untuk terus melangkah.
Alhamdulillah, penulis telah dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
aktivitas antibakteri fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak (Annona
muricata
L.)
Terhadap Klebsiella pneumoniae dan Staphylococcus
epidermidis sebagai salah satu syarat mencapai derajat sarjana Farmasi (S. Farm)
Program Studi Ilmu Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
Penulis menyampaikan terima kasih sebesar-besarnya kepada :
1. Bapak Dr. Muhammad Da'i, M.Si., Apt., Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Dr. Haryoto, M. Sc. Dosen Pembimbing I yang dengan penuh kesabaran
memberikan bimbingan, nasihat, pengarahan, dan petunjuk, serta perhatian
selama penelitian, penyusunan, dan penyelesaian skripsi ini.
3. Bapak Peni Indrayudha, M.,Biotech., Apt. Dosen pembimbing II yang telah
meluangkan waktu dan kesempatan untuk memberikan bimbingan nasihat,
pengarahan, dan petunjuk serta perhatian selama penelitian, penyusunan, dan
penyelesaian skripsi ini.
vii
4. Ibu Ika Trisharyanti D.K., M.Farm., Apt, Reviewer yang memberikan
pengarahan, petunjuk, serta perhatian selama penyusunan, dan penyelesaian
usulan skripsi.
5. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech. St dan Bapak Dr. Muhtadi, M.Si Dosen penguji
yang telah banyak memberi masukan dan saran.
6. Bapak dan Ibu dosen beserta seluruh staf dan karyawan Fakultas Farmasi UMS
yang telah banyak membantu.
7. Teman terbaik satu tim yang telah dengan setia melewati berbagai suka duka
bersama selama penelitian dan penyusunan skripsi : Yuli, Wikan, dan
Kosworo, serta semua anak bimbing bapak Haryoto.
8. Sahabat-sahabat tersayang : Yennie, Lisa, Puput, Nuvia, Bety, Ira dan Esty
dengan penuh perhatian selalu memberikan semangat bagi penulis.
9. Sahabat-sahabat satu perjuangan serta teman-teman kelas D angkatan 2008 atas
semangatnya..
Akhir kata semoga apa yang penulis sajikan bisa bermanfaat bagi
perkembangan dunia ilmu pengetahuan khususnya di bidang kefarmasian.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb.
Surakarta, 18 januari 2012
Penulis
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .........................................................................................
i
HALAMAN PENGAJUAN ...............................................................................
ii
HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................... iii
MOTTO ............................................................................................................ iv
PERSEMBAHAN ............................................................................................
v
DEKLARASI .................................................................................................... vi
KATA PENGANTAR ...................................................................................... vii
DAFTAR ISI ..................................................................................................... ix
DAFTAR TABEL ............................................................................................. xii
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ xiii
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xiv
DAFTAR SINGKATAN .................................................................................. xv
INTISARI .......................................................................................................... xvi
BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah ...............................................................
1
B. Perumusan Masalah .....................................................................
2
C. Tujuan Penelitian .........................................................................
3
D. Tinjauan Pustaka ..........................................................................
3
1. Daun Sirsak (Annona muricata L.) ........................................
3
2. Metode Penyarian ...................................................................
4
3. Klebsiella pneunomiae ............................................................
4
4. Staphylococcus epidermidis ...................................................
5
5. Fraksinasi ...............................................................................
6
6. Uji Aktivitas Antibakteri ........................................................
6
7. Kromatografi Lapis Tipis .......................................................
7
ix
8. Bioautografi ............................................................................ 77
E. Landasan Teori ............................................................................. 88
F. Hipotesi………………………………………………………….. 8
BAB II. CARA PENELITIAN ......................................................................... 99
A. Metode Penelitian ......................................................................... 99
B. Variabel Penelitian ....................................................................... 99
C. Bahan dan Alat ............................................................................. 99
D. Tempat Penelitian ……………………………………………... 1010
E. Jalannya Penelitian ....................................................................... 11
11
1. Determinasi Tanaman ............................................................ 11
11
2. Pengumpulan Bahan ............................................................... 11
11
3. Ekstraksi ................................................................................ 11
11
4. Fraksinasi ………………………………………………….. 1111
5. Sterilisasi Alat dan Bahan ...................................................... 12
12
6. Pembuatan Media ................................................................... 12
12
7. Pemeliharaan Bakteri ............................................................. 12
12
8. Pewarnaan bakteri ………………………………………… 1313
9. Identifikasi Bakteri ……………………………………….. 1313
10. Penyiapan Stok Bakteri .......................................................... 13
13
11. Pembuatan Seri Konsentrasi .................................................. 14
14
12. Pembuatan Kontrol ................................................................. 15
15
13. Uji Antibakteri Metode Dilusi Padat ..................................... 15
15
14. Uji Kromatografi Lapis Tipis ................................................. 15
15
15. Uji Bioautografi ..................................................................... 15
15
F. Analisis Data…………………………………………………… 1616
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 17
17
A. Determinasi Tanaman .................................................................. 17
17
B. Ekstraksi ....................................................................................... 17
17
C. Fraksinasi ……………………………………………………… 1818
D. Identifikasi Bakteri ....................................................................... 19
19
E. Uji Aktivitas Antibakteri .............................................................. 22
22
x
F. Analisis Kualitatif Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Sirsak
25
G. Uji Bioautografi ........................................................................... 28
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 32
A. Kesimpulan .................................................................................. 32
B. Saran ............................................................................................. 32
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 33
LAMPIRAN ...................................................................................................... 36
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak terhadap K. pneunomiae ....................................... 23
Tabel 2. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak terhadap S. epidermidis ....................................... 24
Tabel 3. Keterangan Hasil Analisis KLT Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak ............................................................................... 27
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Skema Pembuatan Seri Konsentrasi Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak ..................................................................
14
Gambar 2. Gambar KLT fraksinasi ...........................................................
18
Gambar 3. Hasil Pengecatan Gram ... ............................................................. 19
Gambar 4. Hasil Test Manitol terhadap S. epidermidis .. ............................... 20
Gambar 5.
Hasil Test KIA, LIA, MIO terhadap K. Pneunomiae ...............
Gambar 6.
Hasil Uji Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun
Gambar 7.
Sirsak terhadap K. pneunomiae .. ................................................. 23
Hasil Uji Antibakteri Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun
Gambar 8.
Sirsak terhadap S. epidermidis . .................................................... 23
Hasil KLT Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Sirsak ............ 24
Gambar 9.
Hasil Uji Bioautografi Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun
21
Sirih terhadap K. pneunomiae .. .................................................... 26
Gambar 10. Hasil Uji Bioautografi Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun
Sirih terhadap S. epidermidis ………………........................... 3030
Gambar 11. Struktur Senyawa Antibakteri Dalam Fraksi Nonpolar Ekstrak
Etanol Daun Sirsak……………………………………………… 31
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Determinasi ......................................................................
37
Lampiran 2. Surat Bakteri Staphylococcus epidermidis .................................
39
Lampiran 3. Surat Bakteri Klebsiella pneunomiae .................................
40
Lampiran 4. Perhitungan ...............................................................................
42
Lampiran 5. Komposisi Media Bakteri ........................................................
46
Lampiran 6. Komposisi Cat Gram .................................................................
47
Lampiran 7. Pembuatan reagen ………………………………………… 48
Lampiran 8. Foto Daun Sirsak.............................................................
49
Lampiran 9. Foto Alat........................................................................
xiv
50
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infusion
CFU
: Colony Forming Unit
CMC-Na
: Carboxyl Methyl Cellulosa Natrium
KBM
: Kadar Bunuh Minimum
KIA
: Kligler Iron Agar
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
K.pneunomiae
: Klebsiella pneunomiae
LAF
: Laminar Air Flow
LIA
: Lysine Iron agar
MH
: Mueller Hinton
MIO
: Motility Indol Ornithine
MSA
: Mannitol Salt Agar
Rf
: Retardation factor
SDA
: Sabouroud Dextrose Agar
S. epidermidis
: Staphylococcus epidermidis
UV
: Ultraviolet
xv
INTISARI
Famili dari Annonaceae mengandung senyawa asetogenin yang
toksisitasnya tinggi pada sel manusia, bakteri, virus dan serangga. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui Kadar Bunuh Minimum (KBM) fraksi nonpolar
ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata .L) terhadap Klebsiella pneumoniae
dan Staphylococcus epidermidis serta mengetahui golongan senyawa yang
terdapat dalam fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak (Annona muricata .L).
Daun sirsak diekstraksi dengan etanol 96% secara maserasi. Fraksi
nonpolar ekstrak etanol daun sirsak diperoleh dengan cara fraksinasi
menggunakan Kromatografi Cair Vakum (KCV). Uji aktivitas antimikroba
menggunakan metode dilusi padat. Seri konsentrasi ekstrak yang digunakan
adalah 2,5% b/v, 3% b/v, 3,5% b/v, 4% b/v, dan 4,5% b/v. Kromatografi Lapis
Tipis menggunakan fase diam silika gel GF254 dan fase gerak heksan:etilasetat
(7:3) untuk identifikasi golongan senyawa dalam ekstrak. Metode bioautografi
digunakan untuk mengetahui golongan senyawa dalam ekstrak yang memiliki
aktivitas antibakteri.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi nonpolar ekstrak etanol daun
sirsak mempunyai aktivitas antimikroba terhadap Klebsiella pneumoniae dan
Staphylococcus epidermidis dengan Kadar Bunuh Minimum berturut-turut sebesar
3,5% b/v dan 4% b/v. Golongan senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak
tersebut adalah saponin, flavonoid, polifenol, antrakuinon, triterpenoid. Golongan
senyawa dari fraksi nonpolar ekstrak etanol daun sirsak yang memiliki aktivitas
antibakteri terhadap K. pneumoniae kemungkinan merupakan senyawa golongan
polifenol dan flavonoid, sedangkan golongan senyawa yang memiliki aktivitas
antibakteri terhadap S. epidermidis kemungkinan merupakan senyawa golongan
flavonoid, antron, antranol dan polifenol.
Kata kunci : Annona muricata Linn, Klebsiella pneumoniae, Staphylococcus
epidermidis, ekstrak etanol, fraksi nonpolar, KLT, bioautografi.
xvi