PENETAPAN KADAR DOMPERIDONE DALAM SEDIAAN TABLET DENGAN NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
PENETAPAN KADAR DOMPERIDONE DALAM SEDIAAN TABLET DENGAN NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT) SKRIPSI OLEH: ARYANTO NIM 091501058
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN2013
PENETAPAN KADAR DOMPERIDONE DALAM SEDIAAN TABLET DENGAN NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT) SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara OLEH: ARYANTO NIM 091501058
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN2013
PENETAPAN KADAR DOMPERIDONE DALAM SEDIAAN TABLET DENGAN NAMA GENERIK DAN NAMA DAGANG SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT) OLEH: ARYANTO NIM 091501058
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 11 Oktober 2013 Pembimbing I, Panitia Penguji, Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt. a Prof. Dr. Siti M. Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP 195306191983031001 NIP 195008281976032002 Pembimbing II, Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt.
NIP 195306191983031001 Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. Drs. Syafruddin, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002 NIP 194811111976031003 Dra. Sudarmi, M.Si., Apt.
NIP 195409101983032001 Medan, Oktober 2013 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Dekan, Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002 Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Kuasa yang telah melimpahkan anugerah dan karuniaNya sehingga penulis dapat meyelesaikan skripsi yang berjudul “Penetapan Kadar Domperidone dalam Sediaan Tablet dengan Nama Generik dan Nama Dagang Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT)”.
Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., dan Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan, arahan, dan bantuan selama masa penelitian dan penulisan skripsi ini berlangsung, kepada Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan fasilitas dan masukan selama masa pendidikan dan penelitian. Penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih a kepada Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., Drs. Syafruddin, M.Si., Apt., dan
Dra. Sudarmi, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini serta kepada Ibu Dwi Lestari P, S.Si., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing akademik yang selalu membimbing selama masa pendidikan.
Penulis juga ingin menyampaikan rasa terima kasih serta penghargaan yang tulus dan tak terhingga kepada orang tua tersayang Ayahanda Suryanto dan Ibunda Mariayung atas doa dan dukungan baik moril maupun materiil, abang dan bantuan dalam penyelesaian skripsi ini.
Semoga Tuhan Yang Maha Kuasa memberikan balasan yang berlipat ganda kepada semua pihak yang telah membantu dalam penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan. Oleh karena itu, sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.
Medan, Oktober 2013 Penulis, Aryanto
NIM 091501058 Tablet domperidone merupakan obat antiemetik dan anti-mual yang bekerja sebagai antagonis reseptor dopamine. Dalam Farmakope Indonesia Edisi
IV (1995) tidak memuat monografi domperidone baik dalam bentuk bahan baku maupun dalam bentuk sediaan tablet. Menurut British Pharmacopoeia (2009) penetapan kadar domperidone tablet ditentukan secara KCKT menggunakan kolom Hypersil BDS (100 x 4,6 mm) dengan fase gerak metanol, laju alir 1,5 ml/menit dan dideteksi pada panjang gelombang 280 nm, sedangkan menurut Suparna, dkk (2012) menggunakan kolom Qualisil, C18, BDS (250 x 4,6 mm) dengan fase gerak air:metanol (55:45), laju alir 1 ml/menit dan dideteksi pada panjang gelombang 291 nm. Tujuan penelitian ini adalah menetapkan kadar domperidone dalam tablet generik dan nama dagang secara KCKT serta melakukan uji validasi terhadap metode yang digunakan.
Metode yang dipilih pada penelitian ini adalah secara KCKT menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) dengan perbandingan fase gerak metanol:air (90:10), laju air 1 ml/menit dan dideteksi pada panjang gelombang 285 nm.
Dari hasil penelitian yang dilakukan, diperoleh kadar tablet domperidone generik dari beberapa perusahaan yaitu: PT Indofarma 96,60% ± 0,56%, PT Novell 103,04% ± 0,47%, PT Dexa Medica 100,25% ± 0,35%, PT Bernofarm
®
96,42% ± 0,50%, dan tablet dengan nama dagang yaitu: Dometa (PT Ikapharmindo Putramas) 104,38% ± 0,22%, Motilium™ (Janssen-Cilag)
® ®
96,81% ± 0,27%, Vomitas (PT Kalbe Farma) 96,97% ± 0,34%, Vosedon (PT Sanbe Farma) 99,16% ± 0,41%. Semua tablet yang dianalisis memenuhi persyaratan kadar yang tercantum dalam British Pharmacopoeia (2009), yaitu mengandung domperidone tidak kurang dari 95,0% dan tidak lebih dari 105,0% dari jumlah yang tertera pada etiket. Uji validasi metode yang dilakukan terhadap tablet domperidone (PT Novell) diperoleh % Recovery 99,88% dengan Relatif Standar Deviasi (RSD) 0,71%. Ini berarti metode yang digunakan memiliki ketepatan dan ketelitian yang baik. Batas Deteksi (LOD) = 1,1924 µg/ml dan Batas Kuantitasi (LOQ) = 3,9747 µg/ml.
Kata kunci: Domperidone, KCKT, validasi, generik dan nama dagang
LIQUID CHROMATOGRAPHY (HPLC)
ABSTRACTDomperidone tablet is an antinausea and antiemetic drug that work as dopamine receptor antagonists. In Indonesia Farmakope Fourth Edition doesn’t contain domperidone monograph either from pure substance or in tablet dosage forms. According to British Pharmacopoeia (2009), determination of domperidone tablet was confirmed by HPLC using column Hypersil BDS (100 x 4,6 mm) with mobile phase methanol, flow rate 1.5 ml/minute and detected at wavelength of 280 nm, While according to Suparna, et al (2012) using column Qualisil, C18, BDS (250 x 4,6 mm) with mobile phase water:methanol (55:45), flow rate 1 ml/minute and detected at wavelength of 291 nm. The purposes of this study is the determination of domperidone in the tablet of generic and trade names by HPLC and also to conduct a validation test of the used method.
The method used in this research was HPLC using column VP-ODS (250 x 4,6 mm) with mobile phase methanol:water (90:10), flow rate 1 ml/minute and detected at wavelength of 285 nm.
Results obtained from this research showed that the levels of domperidone with generic names from certain company are : PT Indofarma 96.60% ± 0.56%, PT Novell 103.04% ± 0.47, PT Dexa Medica 100.25% ± 0.35, PT Bernofarm 96.42% ± 0.50%, and domperidone tablet with trade names are :
® ™
Dometa (PT Ikapharmindo Putramas) 104.38% ± 0.22%, Motilium (Janssen-
® ®
Cilag) 96.81% ± 0.27%, Vomitas (PT Kalbe Farma) 96.97% ± 0.34%, Vosedon (PT Sanbe Farma) 99.16% ± 0.41%. All the analyzed domperidone tablets meet the requirements levels specified in British Pharmacopoeia (2009), which contains not less than 95.0 percent and not more than 105.0 percent domperidone of the labeled amount. Validation test performed at the domperidone tablets (PT Novell) shows the percent recovery 99.88% with Relative Standard Deviation (RSD) 0.71%. This means that the method used has good accuracy and precision. The Limit of Detection (LOD) = 1.1924 µg/ml and the Limit of Quantitation (LOQ) = 3.9747 µg/ml.
Keywords: Domperidone, HPLC, validation, generic and trade names
Halaman JUDUL ...................................................................................................... i HALAMAN JUDUL ................................................................................ ii LEMBAR PENGESAHAN ...................................................................... iii KATA PENGANTAR .............................................................................. iv ABSTRAK ................................................................................................ vi ABSTRACT .............................................................................................. vii DAFTAR ISI ............................................................................................. viii DAFTAR TABEL ..................................................................................... xii DAFTAR GAMBAR ................................................................................ xiii DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. xv BAB I PENDAHULUAN ....................................................................
1 1.1 Latar Belakang ..................................................................
1 1.2 Perumusan Masalah ...........................................................
2 1.3 Hipotesis ............................................................................
3 1.4 Tujuan Penelitian ...............................................................
3 1.5 Manfaat Penelitian .............................................................
3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...........................................................
4 2.1 Domperidone .....................................................................
4 2.1.1 Sifat fisikokimia ......................................................
4 2.1.2 Farmakologi .............................................................
4 2.2 Kromatografi .....................................................................
5 2.2.1 Penggunaan Kromatografi .......................................
5
2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi .....................................
13 2.3.4.1 Wadah Fase Gerak ......................................
18 2.4.1 Akurasi (Kecermatan) .............................................
18 2.4 Validasi Metode ................................................................
18 2.3.7 Elusi Gradien dan Isokratik ......................................
17 2.3.6 Fase Diam .................................................................
17 2.3.5 Fase Gerak ................................................................
16 2.3.4.6 Perekam ......................................................
16 2.3.4.5 Detektor ......................................................
14 2.3.4.4 Kolom .........................................................
14 2.3.4.3 Injektor .......................................................
14 2.3.4.2 Pompa .........................................................
12 2.3.4 Instrumen KCKT ....................................................
6 2.3.1 Jenis KCKT ............................................................
11 2.3.3.7 Faktor Ikutan dan Faktor Asimetri .............
10 2.3.3.6 Resolusi ......................................................
10 2.3.3.5 Efisiensi Kolom ..........................................
9 2.3.3.4 Selektivitas .................................................
9 2.3.3.3 Faktor Kapasitas .........................................
8 2.3.3.2 Waktu tambat ..............................................
8 2.3.3.1 Tinggi dan Luas Puncak .............................
7 2.3.3 Parameter Penting dalam Kromatografi Cair ..........
2.3.2 Proses Pemisahan dalam Kolom Kromatografi Cair
6
19
2.4.3 Batas Deteksi (limit of detection, LOD) ..................
19 2.4.4 Batas Kuantitasi (limit of quantitation, LOQ) .........
20 BAB III METODE PENELITIAN .........................................................
21 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ...........................................
21 3.2 Alat-alat .............................................................................
21 3.3 Bahan-bahan ......................................................................
21 3.4 Pengambilan Sampel .........................................................
22 3.5 Prosedur Penelitian ............................................................
22 3.5.1 Pembuatan Fase Gerak .............................................
22 3.5.2 Prosedur Analisis .....................................................
23
3.5.2.1 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ...................................................
23 3.5.2.2 Penyiapan KCKT .........................................
23
3.5.2.3 Penentuan Perbandingan Fase Gerak yang Optimum ......................................................
23 3.5.3 Analisis Kualitatif Menggunakan KCKT ................
23
3.5.3.1 Uji Identifikasi Domperidone Menggunakan KCKT ...................................
23 3.5.4 Analisis Kuantitatif ..................................................
24
3.5.4.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Domperidone ................................................ ...........
24 3.5.4.2 Pembuatan Kurva Kalibrasi Domperidone ..
24 3.5.4.3 Penetapan Kadar Sampel .............................
25
3.5.4.4 Analisis Data Penetapan Kadar Secara Statistik .........................................................
25 3.5.5 Validasi Metode .......................................................
26
3.5.5.2 Presisi (Keseksamaan) .................................
27
3.5.5.3 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) ...........................................................
28 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................
29
4.1 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ...................... 29 4.2 Optimasi Komposisi Fase Gerak Metanol:Air ..................
30 4.3 Analisis Kualitatif ..............................................................
32 4.4 Analisis Kuantitatif ...........................................................
35 4.4.1 Penentuan Kurva Kalibrasi ......................................
35 4.4.2 Penetapan Kadar Domperidone dalam Sampel .........
36 4.5 Hasil Uji Validasi ..............................................................
36 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................
39 5.1 Kesimpulan ........................................................................
39 5.2 Saran ..................................................................................
39 DAFTAR PUSTAKA ...............................................................................
40 LAMPIRAN ..............................................................................................
42
Halaman Tabel 1. Data Absorbansi dari Kurva Serapan Maksimum ..................
29 Tabel 2. Hasil Penetapan Kadar Domperidone dalam Sediaan Tablet dengan Nama Generik dan Nama Dagang ..................
36 Tabel 3. Hasil Pengujian Validasi, dengan parameter Akurasi, Presisi, Batas Deteksi (LOD), Batas Kuantitasi (LOQ) Domperidone pada tablet domperidone generik (PT Novell) .......................
37
Halaman Gambar 1. Struktur Domperidone .......................................................
4 Gambar 2. Ilustrasi proses pemisahan yang terjadi di dalam kolom KCKT ................................................................................
8 Gambar 3. Tiga jenis puncak ...............................................................
12 Gambar 4. Pengukuran derajat asimetris puncak ................................
12 Gambar 5. Instrumen Dasar KCKT .....................................................
13 Gambar 6. Tipe Injektor Putaran .........................................................
15 Gambar 7. Kurva Serapan Domperidone Baku dengan konsentrasi 20 µg/ml .................................................................................
29 Gambar 8. Kromatogram domperidone menggunakan kolom VP- ODS (250 x 4,6 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (85:15) v/v ....................................................
30 Gambar 9. Kromatogram domperidone menggunakan kolom VP- ODS (250 x 4,6 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (90:10) v/v ....................................................
31 Gambar 10. Kromatogram domperidone menggunakan kolom VP- ODS (250 x 4,6 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (95:5) v/v ......................................................
31 Gambar 11. Kromatogram domperidone baku secara KCKT menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (90:10) v/v ..........
32 Gambar 12. Kromatogram tablet domperidone secara KCKT menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (90:10) v/v ..........
33 Gambar 13. Kromatogram tablet domperidone sebelum penambahan baku secara KCKT menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (90:10) v/v ......................................................................................
34 Gambar 14. Kromatogram tablet domperidone hasil spike secara KCKT menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (90:10) v/v ..........
34
menggunakan kolom VP-ODS (250 x 4,6 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (90:10) v/v ..........
35 Gambar 16. Spektrofotometer UV-Visible (UV-1800, Shimadzu) ...... 132
Gambar 17. Alat KCKT (Shimadzu) .................................................... 133
Gambar 18. Alat Sonifikator (Branson 1510) ........................................ 134
Gambar 19. Pompa Vakum (Gast DO A-PG04-BN) dan AlatPenyaring Fase Gerak ........................................................ 134 Gambar 20. Sonifikator Kudos ..............................................................
135
Gambar 21. Neraca Analitik .................................................................. 135
Gambar 22. Syringe KCKT ................................................................... 136
Halaman Lampiran 1. Kromatogram Larutan Domperidone baku pada Pembuatan Kurva Kalibrasi ...............................................
dari Penyuntikkan Larutan Tablet Domperidone Generik (PT Indofarma) ..................................................................
89 Lampiran 14. Kromatogram dari Larutan tablet Domperidone Generik (PT Bernofarm) .................................................................
88 Lampiran 13. (Lanjutan) Analisis Data Statistik Larutan Tablet Domperidone Generik (PT Dexa Medica) ........................
84 Lampiran 12. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Penyuntikkan Larutan Tablet Domperidone Generik (PT Dexa Medica) .............................................................
82 Lampiran 11. Kromatogram dari Larutan tablet Domperidone Generik (PT Dexa Medica) .............................................................
78 Lampiran 10. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Penyuntikkan Larutan Tablet Domperidone Generik (PT Novell) ........................................................................
76 Lampiran 9. Kromatogram dari Larutan tablet Domperidone Generik (PT Novell) ........................................................................
Lampiran 8. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
42 Lampiran 2. Perhitungan Persamaan Regresi dari Kurva Kalibrasi Domperidone yang Diperoleh secara KCKT pada Panjang Gelombang 285 nm .............................................
(PT Indofarma) .................................................................. 72
Lampiran 7. Kromatogram dari Larutan tablet Domperidone Generik
70 Lampiran 6. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas kuantitasi (LOQ) ................................................................................ 71
58 Lampiran 5. Contoh Perhitungan % Recovery dengan Metode Adisi Standar ...............................................................................
54 Lampiran 4. Kromatogram Hasil Recovery dari sampel Domperidone Generik (PT Novell) ...........................................................
52 Lampiran 3. Perhitungan Recovery dengan Metode Adisi Standar .......
91
dari Penyuntikkan Larutan Tablet Domperidone Generik (PT Bernofarm) .................................................................
Lampiran 21. Kromatogram dari Larutan tablet Vomitas ®
Lampiran 28. Daftar Spesifikasi Sampel ................................................. 127
Lampiran 29. Tabel Nilai Distribusi t ...................................................... 130
Lampiran 30. Sertifikat Analisis Domperidone Maleat BPFI ................. 131
Lampiran 31. Gambar Spektrofotometer UV-Visible (UV-1800,Domperidone Generik (PT Novell) ................................... 126
Lampiran 25. Contoh Perhitungan Penimbangan Sampel ........................ 122
Lampiran 26. Hasil Analisa Kadar Domperidone dalam Sampel ............ 123
Lampiran 27. Contoh Perhitungan untuk Mencari Kadar Tablet(PT Sanbe Farma) ............................................................................... 120
®
dari Penyuntikkan Larutan Tablet Vosedon
Lampiran 24. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
(PT Sanbe Farma) ............................................................................... 116
Lampiran 23. Kromatogram dari Larutan tablet Vosedon ®
(PT Kalbe Farma) ............................................................................... 114
®
dari Penyuntikkan Larutan Tablet Vomitas
Lampiran 22. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
(PT Kalbe Farma) ............................................................................... 110
(Janssen- Cilag) ................................................................................. 108
95 Lampiran 16. Kromatogram dari Larutan tablet Dometa
™
dari Penyuntikkan Larutan Tablet Motilium
Lampiran 20. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya
(Janssen- Cilag) ................................................................................. 104
Lampiran 19. Kromatogram dari Larutan tablet Motilium ™
(PT Ikapharmindo) ............................................ 102
®
Dometa
Lampiran 18. (Lanjutan) Analisis Data Statistik Larutan Tablet
(PT Ikapharmindo) ................................................................... 101
®
97 Lampiran 17. Analisis Data Statistik untuk Mencari Kadar Sebenarnya dari Penyuntikkan Larutan Tablet Dometa
(PT Ikapharm indo) ...................................................................................
®
Shimadzu) ........................................................................... 132
Lampiran 33. Gambar Sonifikator (Branson 1510) dan Penyaring .........
134