B1J010019 15.

Lampiran 3. Identifikasi golongan senyawa metabolit sekunder dari miselium
dan filtrat kultur empat isolat L. edodes
a.

Uji alkaloid
Uji alkaloid dengan teknik KLT dilakukan dengan menggunakan fase diam
silica gel GF254, fase gerak metanol – amoniak pekat (200:3). Sampel yang
digunakan untuk uji KLT adalah 100 µl. Bercak yang terelusi dideteksi dengan
UV 366 nm, serta dengan pereaksi Dragendorff. Adanya alkaloid ditunjukkan
oleh terbentuknya bercak berwarna kuning jingga.

b.

Uji terpenoid
Uji terpenoid dilakukan dengan menggunakan fase diam silica gel GF254 dan
fase gerak kloroform – metanol – amoniak 25% (100:20:3). Sampel yang
digunakan adalah 100 µl. Bercak yang terelusi dideteksi dengan penyemprotan
yaitu vanillin-asam sulfat. Adanya terpenoid ditunjukkan oleh terbentuknya
bercak berwarna merah atau biru.

c.


Uji flavonoid
Uji flavonoid dilakukan dengan menggunakan fase diam silica gel GF254 dan
fase gerak asam asetat glasial - air (15:85). Sampel yang digunakan adalah 100
µl. Bercak yang terelusi dideteksi dengan sinar UV 366 nm akan terbentuk
warna kuning, biru atau hijau juga diperiksa setelah disemprot dengan pereaksi
AlCl3 kemudian dipanaskan 100 oC selama 5 menit, dilihat pada sinar UV 366
nm.

bio.unsoed.ac.id

24

Lampiran 4. Pembuatan pereaksi golongan senyawa metabolit sekunder empat
isolat L. edodes (Harborne, 1987)
a.

Pembuatan pereaksi Dragendorff
1. Larutan A : 0,85 g bismuth nitrat dilarutkan dalam 50 ml larutan (air : asam
asetat) 40:10

2. Larutan B : 9 g kalium iodide dilarutkan dalam 20 ml air.
3. Larutan stok : larutan A dan B dicampur dengan perbandingan sama banyak
kemudian campuran ini disimpan dalam lemari es.
4. Larutan penyemprot : 1 ml larutan stok ditambah 2 ml asam asetat glasial
dan 10 ml air sebelum digunakan.
5. Larutan yang sudah jadi dimasukkan kedalam botol penyemprot.

b.

Pembuatan reagen vanillin-HCl
Sebanyak 1,25 g vanillin dilarutkan dengan 5 ml HCl pekat, dimasukkan ke
dalam labu ukur 25 ml lalu diencerkan dengan etanol absolute hingga tanda
batas.

bio.unsoed.ac.id

25

Lampiran 5. Tabulasi data bobot kering miselium empat isolat L. edodes
Jenis isolat (t)

Yogyakarta
LW 26
W4
Jambo

Ulangan (g)
1
2
3
0,31
0,18
0,39
0,95

1,01
0,24
0,34
0,58

0,37

0,47
0,31
0,57

Total
(g)
1,69
0,89
1,04
2,1

Rataan
(g)
0,56
0,29
0,34
0,7

bio.unsoed.ac.id


26

Lampiran 6. Tabulasi data pH medium YEMR empat isolat L. edodes
Perlakuan (t)
t1
t2
t3
t4

I
5,2
5,2
5,2
5,2

pH awal
Ulangan
II
5,2
5,2

5,2
5,2

III
5,2
5,2
5,2
5,2

I
4,0
4,0
4,0
4,0

Ph akhir
Ulangan
II
4,0
4,0

4,0
4,0

bio.unsoed.ac.id

27

III
4,0
4,0
4,0
4,0

Lampiran 7. Tabulasi data bobot ekstrak filtrat kultur empat isolat L. edodes
pada medium YEMR
Jenis ekstrak (k)
Kloroform

Etil asetat


Jenis isolat (t)
Yogyakarta
LW 26
W4
Jambo
Yogyakarta
LW 26
W4
Jambo

Ulangan (g)
1
2
3
0,16
0,08
0,07
0,12
0,10
0,07

0,04
0,09
0,07
0,07
0,04
0,06
0,03
0,02
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,10
0,06
0,03
0,01
0,01

bio.unsoed.ac.id


28

Total
0,31
0,29
0,2
0,17
0,06
0,03
0,17
0,05

Rataan
0,103
0,097
0,067
0,057
0,02
0,01

0,057
0,017

Lampiran 8. Tabulasi data bobot ekstrak miselium empat isolat L. edodes pada
medium YEMR
Jenis ekstrak (k)
Kloroform

Etil asetat

Jenis isolat (t)
Yogyakarta
LW 26
W4
Jambo
Yogyakarta
LW 26
W4
Jambo

Ulangan (g)
1
2
3
0,01
0,02
0,01
0,01
0,01
0,02
0,03
0,02
0,01
0,02
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01
0,01

bio.unsoed.ac.id

29

Total
0,04
0,04
0,06
0,04
0,03
0,03
0,03
0,03

Rataan
0,013
0,013
0,02
0,013
0,01
0,01
0,01
0,01

Lampiran 9. Data pengukuran Rf (Retardation Factor) golongan senyawa
alkaloid, flavonoid dan terpenoid dengan kromatografi lapis
tipis
No

Perlakuan

1
2
3
4
5
6
7
8

k1t1
k1t2
k1t3
k1t4
k2t1
k2t2
k2t3
k2t3

Rf Alkaloid (cm)
Ekstrak
Ekstrak
Filtrat
miselium
0,31
0,44
0,22
0,34
-

Rf Flavonoid (cm)
Ekstrak
Ekstrak
filtrat
miselium
0,40
0,30
0,29
0,29
0,41
0,42
0,41
0,49

Keterangan :
k1t1
k1t2
k1t3
k1t4
k2t1
k2t2
k2t3
k3t4

: ekstrak kloroform isolat Yogya
: ekstrak kloroform isolat LW 26
: ekstrak kloroform isolat W4
: ekstrak kloroform isolat Jambo
: ekstrak etil asetat isolat Yogya
: ekstrak etil asetat isolat LW 26
: ekstrak etil asetat isolat W4
: ekstrak etil asetat isolat Jambo

bio.unsoed.ac.id

30

Rf Terpenoid (cm)
Ekstrak
Ekstrak
filtrat
miselium
0,51;0,95 0,30;0,95
0,51;0,95 0,28;0,95
0,51;0,95 0,32;0,95
0,51;0,95 0,75;0,95
0,98
0,90
0,98
0,90
0,90
0,90
-

Lampiran 10. Karakterisasi senyawa aktif golongan alkaloid, flavonoid dan terpenoid ekstrak filtrat dan miselium empat isolat L. edodes

Pereaksi AlCl3
Flavonoid
Adanya
Keterangan
golongan
senyawa
flavonoid
+

No

Perlakuan

Warna

1

k1t1

Biru

2

k1t2

Biru

+

Biru

3

k1t3

Biru

+

Biru

4

k1t4

Biru

+

Biru

5

k2t1

Biru

+

Biru

6

k2t2

Biru

+

Biru

7

k2t3

Biru

+

Biru

8

k2t3

Biru

+

Biru

Warna

Biru

Pereaksi Dragendorff
Alkaloid
Adanya
Keterangan
golongan
senyawa
alkaloid
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna

bio.unsoed.ac.id

31

Warna

Kuning
Kuning
Kuning
Kuning
Kuning
Kuning
Kuning
Kuning

Pereaksi Vanilin-Asam Sulfat
Terpenoid
Adanya
Keterangan
golongan
senyawa
terpenoid
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna
Tidak terelusi dengan
sempurna

Lampiran 11. Dokumentasi peremajaan empat isolat L. edodes

Isolat Yogya

Isolat LW 26

Isolat W4

Isolat Jambo

bio.unsoed.ac.id

32

Lampiran 12. Dokumentasi kultivasi miselium empat isolat L. edodes selama 40
hari

Isolat Yogya

Isolat LW 26

Isolat W4

Isolat Jambo

bio.unsoed.ac.id
Miselium Basah Isolat LW 26

Miselium Basah Isolat Yogya

33

Miselium Basah Isolat W4

Miselium Basah Isolat Jambo

Menyaring Miselium Dan Filtrat

Filtrat Empat Isolat

bio.unsoed.ac.id Miselium Kering

Menghaluskan Miselium

34

Lampiran 13. Dokumentasi ekstraksi filtrat dan miselium empat isolat L. edodes

Ekstraksi Kloroform

Ekstraksi Etil Asetat

Penguapan ekstrak Etil Asetat

Penguapan ekstrak Kloroform

bio.unsoed.ac.id
Ekstraksi Maserasi

35

Lampiran 14. Dokumentasi ekstrak filtrat empat isolat L. edodes pelarut
kloroform

Isolat yogya

Isolat LW26

Isolat W4

Isolat Jambo

bio.unsoed.ac.id

36

Lampiran 15. Dokumentasi ekstrak filtrat empat isolat L. edodes pelarut etil
asetat

Isolat Yogya

Isolat LW26

Isolat W4

Isolat Jambo

bio.unsoed.ac.id

37

Lampiran 16. Dokumentasi ekstrak miselium empat isolat L. edodes pelarut
kloroform

Isolat Yogya

Isolat LW26

Isolat W4

Isolat Jambo

bio.unsoed.ac.id

38

Lampiran 17. Dokumentasi ekstrak miselium empat isolat L. edodes pelarut etil
asetat

Isolat Yogya

Isolat LW26

Isolat W4

Isolat Jambo

bio.unsoed.ac.id

39

BIODATA PENULIS
Dena Rahayu, lahir di Tangerang, 28 Desember 1991 anak
dari ayah Tanto Sumartoyo dan Ibu Partinah. Penulis
berasal dari Perum Bumi Indah RT 01/02, Kec. Pasar
Kemis, Kab. Tangerang. Penulis berhasil menamatkan
pendidikannya di TK Pertiwi lulus tahun 1997, SD N Pasar
Kemis 2 tahun lulus 2003, SMP N 1 Tangerang lulus tahun
2007, SMA Yuppentek 1 Tangerang lulus tahun 2010,
kemudian melanjutkan studi di Fakultas Biologi Universitas
Jenderal Soedirman tahun angkatan 2010. Pengalaman organisasi antara lain
tergabung dalam kepengurusan Unit Kegiatan Mahasiswa Islam (UKMI) Fakultas
Biologi selama empat tahun. Staff Departemen Humas Divisi Infokom 2011, Staff
Departemen Kewirausahaan (KWU) Divisi Pengembangan Skill Usaha 2012, Kepala
Departemen KWU 2013, Dewan Riset 2014. Penulis juga aktif pada beberapa
kegiatan meliputi; Anggota bela diri Bandung Karate Club (BKC) 2011, Panitia
OSMB Matriks sebagai Tatib 2011, Panitia OSMB Taksonomi sebagai Humas 2012,
Peserta Training Kemuslimahan 2010, Peserta Indigenus 2011, Stadium General
UKMI 2011, Peserta Training Kehumasan 2011, Peserta Seminar dan Toefl
HIMAPAS 2013, Peserta Talkshow Lentera Jiwa 2013, Peserta Workshop Optimize
Your Presentation Skills (OPYS) 2014, peserta Talkshow Dialog Kebangsaan 2014,
Peserta Seminar Kewirausahaan 2014, Peserta SIMPOSIUM UKMI 2014. Prestasi
yang pernah diraih adalah Juara 1 Ganda Campuran Biology Badminton Cup 2011,
Juara 2 Tunggal Putri dan Juara 2 Ganda Campuran Badminton Pekan Olahraga
Fakultas Biologi (PORFABI) 2013.

bio.unsoed.ac.id

Purwokerto,

Januari 2015

Penulis

40

BIODATA PENULIS
Dena Rahayu, lahir di Tangerang, 28 Desember 1991 anak
dari ayah Tanto Sumartoyo dan Ibu Partinah. Penulis
berasal dari Perum Bumi Indah RT 01/02, Kec. Pasar
Kemis, Kab. Tangerang. Penulis berhasil menamatkan
pendidikannya di TK Pertiwi lulus tahun 1997, SD N Pasar
Kemis 2 tahun lulus 2003, SMP N 1 Tangerang lulus tahun
2007, SMA Yuppentek 1 Tangerang lulus tahun 2010,
kemudian melanjutkan studi di Fakultas Biologi Universitas
Jenderal Soedirman tahun angkatan 2010. Pengalaman
organisasi antara lain tergabung dalam kepengurusan Unit
Kegiatan Mahasiswa Islam (UKMI) Fakultas Biologi
selama empat tahun. Staff Departemen Humas Divisi Infokom 2011, Staff
Departemen Kewirausahaan (KWU) Divisi Pengembangan Skill Usaha 2012, Kepala
Departemen KWU 2013, Dewan Riset 2014. Penulis juga aktif pada beberapa
kegiatan meliputi; Anggota bela diri Bandung Karate Club (BKC) 2011, Panitia
OSMB Matriks sebagai Tatib 2011, Panitia OSMB Taksonomi sebagai Humas 2012,
Peserta Training Kemuslimahan 2010, Peserta Indigenus 2011, Stadium General
UKMI 2011, Peserta Training Kehumasan 2011, Peserta Seminar dan Toefl
HIMAPAS 2013, Peserta Talkshow Lentera Jiwa 2013, Peserta Workshop Optimize
Your Presentation Skills (OPYS) 2014, Peserta Seminar Kewirausahaan 2014,
Peserta SIMPOSIUM UKMI 2014. Prestasi yang pernah diraih adalah Juara 1 Ganda
Campuran Biology Badminton Cup 2011, Juara 2 Tunggal Putri dan Juara 2 Ganda
Campuran Badminton Pekan Olahraga Fakultas Biologi (PORFABI) 2013.

bio.unsoed.ac.id

41