PENGENALAN DAN PENERAPAN HPLC DALAM ANALISIS INDUSTRI DAN LINGKUNGAN
PENGENALAN DAN PENERAPAN
HPLC DALAM ANALISIS INDUSTRI
DAN LINGKUNGAN
Yogyakarta, 6 April 2018
“I call such a preparation a chromatogram
and the corresponding method the
chromatographic method.” — M.S. Tswett
Mikhail Semenovich Tswett
FASE DIAM
(stationary
phase)
KROMATOGRAFI
FASE GERAK
(mobile phase)
UJI
KUALITATIF
UJI
PREPARATIF
UJI
KUANTITATI
F
Kategori interaksi
1. Adsorbsi
Senyawa diserap oleh permukaan padatan dan terjadi
keseimbangan jumlah solut pada fasa diam dan fasa gerak
2. Partisi
Lapisan cairan sebagai fasa diam yang diembankan pada
suatu padatan akan mendistribusi senyawa yang akan
dipisahkan dan membentuk keseimbangan dengan fasa
gerak
3. Molekular eksklusi/permeasi gel/gel fltrasi
Pemisahan berdasarkan ukuran molekul, dimana pada
keadaan ideal tidak ada keterikatan senyawa pada fasa diam
4. Penukaran ion
Senyawa ion dengan muatan berlawanan akan terikat pada
fasa diam melalui gaya elektrostatik
5. Afnitas
Adanya interaksi yang spesifk antara molekul jenis tertentu
dengan molekul lain yang terikat secara kovalen pada fasa
diam
Kromatograf kolom
Kolom terbuat dari gelas diisi
dengan fase diam berupa serbuk
penyerap (seperti selulosa, silika
gel, poliamida). Fase diam dialiri
(dielusi) dengan fase gerak berupa
pelarut.
•
•
•
Gambar kolom kromatograf
Faktor-faktor yang mempengaruhi
pemisahan dengan kromatograf
kolom adalah:
fase diam yang digunakan
kepolaran pelarut (fase gerak),
ukuran
kolom
(diameter
dan
panjang kolom)
kecepatan alir elusi
Kromatografi
KolomiTerbukaiii
Sistem pemasukan sampel: manual, tidak
volumetrik Injector
Color
Waktu analisis lama, mengandalkan gaya
gravitasi dan kapiler pompa
Hasil pemisahan kurang baik pengemasan
kolom
Kesulitan pengamatan hasil pemisahan untuk
analit tidak berwarna Detektor
Kesulitan penghitungan kadar integrator
Komponen HPLC
POMPA ( PENDORONG FASA GERAK)
TEMPAT INJEKSI (AUTO SAMPLER)
KOLOM (FASA DIAM)
DETEKTOR
KOMPUTER
Komponen HPLC
• Sistem pengalir fasa gerak
Mendorong/memompa fasa gerak sehingga bisa
mengalir ke seluruh sistem instrumen dengan laju alir
konstan (0,1-2 mL/menit)
• Injektor/autosampler
Memasukkan sampel ke dalam sistem aliran fasa gerak
• Kolom
Tabung stainless steel yang diisi fasa diam berfungsi
untuk memisahkan komponen-kompone dalam sampel
• Detektor
Sensor optik yang akan mendeteksi perubahan secara
karakteristik solven yang melalui
• Data system
Unit utama yang mengatur semua sistem komponen
dalam HPLC yaitu menyimpan, memproses, dan
menyajikan data hasil analisis.
Pompa untuk optimasi
•
•
•
Butuh 2 pompa tekanan
tinggi dan pengatur
gradien (mahal)
Dibatasi oleh sistem
dua pelarut
Laju alir yang berbeda
di awal dan akhir
tahapan
Pompa untuk optimasi
•
•
•
•
Sistem pelarut yang
lebih banyak dg
kekuatan dan
selektivitas yang
berbeda (lebih feksibel)
Perubahan laju alir
teratasi
Hanya butuh 1 pompa
(murah)
Pelarut disemprotkan
helium (degassing
process) secara
menyeluruh
Klasifkasi HPLC
1. Partisi (liquid-liquid chromatography)
2. Adsorpsi (liquid-solid
chromatography)
3. Pertukaran ion (ion chromatography)
4. Size exclusion chromatography
5. Afnity chromatography
6. Chiral chromatography
Separation
mechanism
Type of
stationary
phase
Fasa
diam
(polar)
Triethylene
glycol
Water
Normal phase
Fasa
gerak
(non
polar)
Hexane
Propyl ether
Fasa diam
(non polar)
Hydrocarbon
Fasa gerak
(polar)
Water
Methanol
Acetonitrile
THF
Reversed
phase
Typical application of High
Performance Partition
chromatography
Field
Typical mixture separated
Pharmaceutical
Antibiotics, steroids, analgesics
Biochemicals
Amino acids, proteins, carbohydrates, lipids
Food products
Artifcial sweeteners, antioxidants, afatoxins,
additives
Industrial chemicals
Condensed aromatics, surfactants,
propellants, dyes
Pollutants
Pesticides, herbicides, phenols, PCBs
Forensic chemistry
Drugs, poisons, blood alcohol, narcotics
Clinical medicine
Drugs metabolits, urine extracts, estrogens,
bile acids
75%
aplikasi pemisahan HPLC
Lebih dari
menggunakan reversed phase, bonded phase
(octyl or octyldecyl-siloxane) packings dan fasa
geraknya antara lain metanol, acetonitrile, atau
THF
Fase diam
Fase diam
Mekanisme sorpsi
Kerakteristik
Silika yg tidak
dimodifkasi
Adsorpsi, fase normal
Polar, waktu retensi
bervariasi karena ada
air yg diserap
Fase terikat (ODS,
okta desil silan)
Partisi, fase terbalik
Non polar, mampu
memisahkan sejumlah
besar solut
Fase terikat
aminopropil
Partisi yang
dimodifkasi
Polar, memisahkan
senyawa karbohidrat
Fase terikat asam
sulfonat
Penukar kation
Tranfer massa lambat,
puncak melebar
Fase terikat amin
kuarterner
Penukar anion
-
Fase terikat silika dg
porositas terkendali
Eklusi ukuran
Fase gerak organik
Polimer
Partisi, eklusi,
pertukaran ion
Non polar jika polimer
tdk dimodifkasi
Ligan pada Fasa Diam
Fase
gerak/pelarut/solvet/eluen
Pelarut dalam HPLC
• N-heksana
• Sikloheksana
• Tetraklorometa
na
• Triklorometana
• diklorometana
• Metil benzene
• Tetrahidrofura
n (THF)
•
•
•
•
•
•
Propanon
Asetonitril
Isopropanol
Etanol
Metanol
Asam
etanoat
• Air
Bulk property
(general
detectors)
GENERAL
TYPES
Solute property
(selective
detectors)
Mengukur perubahan
sifat fsika fasa gerak +
solut secara keseluruhan
Karakteristik solut
Sensitivitas dan
selektivitas
Fleksibilitas
Sensitif hanya
terhadap beberapa
sifat solut
Sistem Elusi Pelarut
pengaruh kuat pelarut
Detektor
Yang umum dipakai
Detektor Ultraviolet / Visible (UV/VIS) :
untuk senyawa yang dapat menyerap
sinar UV-Vis
Detektor Fluorescence (RF) : komponen
yang keluar dari kolom dikenai sinar UV
dan akan berfuorosensi
Detektor Konduktivitas (CDD) : untuk
senyawa ionik
Detektor Refraktive Indeks (RID) : setiap
senyawa memiliki indek bias spesifk
Detektor spektrometer massa
UV-Vis
Fluorescence
MS
Response
Refractive
Indeks
Universal
Selective
Selective
Selective
Sensitivity
4 microgram
5 nanogram
3 picogram
1 picogram
Linear Range
10
10
10
10
Flow Sensitive
Yes
No
No
Yes
Temperature
sensitive
Yes
No
No
No
Resolusi
Kolom
(Rs)
Ukuran kemampuan kolom
untuk memisahkan dua
komponen
Rs
: nilai resolusi
t0
: waktu retensi pelarut
tR1 : waktu retensi puncak 1
tR2 : waktu retensi puncak 2
W1 : lebar puncak 1
W2 : lebar puncak 2
Kelebihan HPLC
• Dapat digunakan untuk senyawa non
volatile dan senyawa dengan BM tinggi
• Biasanya digunakan pada suhu kamar
sehingga aman bagi senyawa yang tidak
tahan panas
• Fase gerak dapat diubah dengan mencapur
berbagai pelarut dengan berbagai
komposisi
• Dapat digunakan untuk menganalisis
berbagai senyawa sekaligus
Kekurangan HPLC
• Sulit mengidentifkasi senyawa jika tidak
memiliki larutan standar harus
dihubungkan dengan MS
• Jika campuran sangat komplek maka
resolusi yang baik sulit diperoleh
Bidang aplikasi HPLC
• Obat-obatan dan farmasi (parasetamol,
amoksilin)
• Bahan pengawet (formalin)
• Zat aditif (sakarin, asam benzoat)
• Antioksidan
• Zat-zat aktif pada produk makanan
(kafein)
• Produk perawatan (senyawa fenolik)
• Pestisida (residu pestisida diazinon pada
sayuran)
Gambar senyawa fenolik dalam produk perawatan (personal
care products)
Gambar kromatogram hasil pemisahan senyawa fenolik dalam
produk perawatan menggunakan HPLC
Kromatogram Standar Kafein dengan Perbandingan Fase Gerak MetanolBufer Ammonium Asetat pH 4 Perbandingan (A) 40:60, (B) 50:50, (C) 60:40
Kromatogram Standar Asam Benzoat dengan Perbandingan Fase Gerak
Metanol-Bufer Ammonium Asetat (A) 40:60 (B) 50:50 (C) 60:40
Contoh kromatogram analisis obat dalam
urin
Tetrahidrokanabi
nol (THC) : zat
aktif dalam
daun ganja
Pemisahan vitamin dalam tablet suplemen
Pengujian Campuran Zat
Aktif Obat Menggunakan
HPLC
Penentuan Kondisi Metode
HPLC
1. Penentuan kesesuaian sistem
Rasio fase gerak, laju alir, panjang gelombang,
2. Pembuatan kurva kalibrasi
3. Validasi metode
•
•
•
•
•
Kecermatan atau ketepatan (Akurasi)
Keseksamaan atau ketelitian (Presisi)
Linieritas
Batas deteksi
Batas kuantitasi
Gambar1. Kromatogram HPLC untuk uji kesesuaian
sistem
Penentuan kecermatan&keseksamaan
Pengujian Zat Aktif Obat
Menggunakan HPLC
Penentuan Kondisi Metode
HPLC
1. Penentuan kesesuaian sistem
Uji ini menggunakan pengulangan injeksi sebanyak
6 kali larutan standar 0.2 mg/L dilanjutkan
penghitungan nilai waktu retensi dan AUC (Area
Under the Curve) dan penentuan RSD
2. Pembuatan kurva kalibrasi
3. Validasi metode
• Kecermatan
• Keseksamaan
• Linieritas
• LOD
• LOQ
Kondisi Pengujian
• Metode elusi isokratik
• Optimasi pelarut
– Air deionisasi
– Air deionisasi panas (60-70°C)
– Air deionisasi:asetonitril (9:1)
– Air deionisasi:asetonitril (8:2)
• Optimasi fase gerak (eluen)
– Air deionisasi (100 v/v)
– Air deionisasi:asetonitril (90:10 v/v)
– Air deionisasi:asetonitril (80:20 v/v)
• Laju alir optimum injeksi larutan standar dengan
konsentrasi tertentu pada variasi kecepatan 0.2 – 1
mL/menit
• Temperatur kolom optimum injeksi larutan standar
dengan konsentrasi tertentu pada variasi temperatur
50 – 80 °C
Kromatogram zat aktif obat standar (1mg/mL)
Kromatogram zat aktif obat standar
(1mg/mL) dalam matriks
Kromatogram zat aktif obat dalam sampel
Pengujian Linieritas
Pengujian Presisi dan Akurasi
Pengujian Akurasi menggunakan metode standar adisi seperti
tertera pada Tabel di atas.
PENGUJIAN PESTISIDA
ORGANOFOSFOR PADA SAYURAN
Preparasi
pelaru
t
pelaru
t
Kondisi Optimasi
Chlorpyrifo
s
Prophenof
os
Kromatogram pestisida
Data Hasil Validasi
Parameter
Chlorpyrifos
Prophenofos
Linearity range (n=6)
0.01-1.5
0.01-1.5
Regression
Y= 8141879x-14225
Y= 90697x-7971
Correlation coefcient
(r)
0.990
0.990
Intra-day precision
(n=9)
0.99-1,02
0.4-1.25
Inter-day precision
(n=9)
0.89-1.3
0.47-1.25
Repeatibility
1.66
1.51
Specifcity
Specifc
Specifc
LOD (μg/mL)
0.00053
0.00094
LOQ (μg/mL)
0.0016
0.0028
Recovery (%) ±SD
(n=9)
99.99±0.94 –
101.9±0.68
99.86±0.71 –
101.12±1.02
Robustness
Robust
Robust
TERIMA KASIH
HPLC DALAM ANALISIS INDUSTRI
DAN LINGKUNGAN
Yogyakarta, 6 April 2018
“I call such a preparation a chromatogram
and the corresponding method the
chromatographic method.” — M.S. Tswett
Mikhail Semenovich Tswett
FASE DIAM
(stationary
phase)
KROMATOGRAFI
FASE GERAK
(mobile phase)
UJI
KUALITATIF
UJI
PREPARATIF
UJI
KUANTITATI
F
Kategori interaksi
1. Adsorbsi
Senyawa diserap oleh permukaan padatan dan terjadi
keseimbangan jumlah solut pada fasa diam dan fasa gerak
2. Partisi
Lapisan cairan sebagai fasa diam yang diembankan pada
suatu padatan akan mendistribusi senyawa yang akan
dipisahkan dan membentuk keseimbangan dengan fasa
gerak
3. Molekular eksklusi/permeasi gel/gel fltrasi
Pemisahan berdasarkan ukuran molekul, dimana pada
keadaan ideal tidak ada keterikatan senyawa pada fasa diam
4. Penukaran ion
Senyawa ion dengan muatan berlawanan akan terikat pada
fasa diam melalui gaya elektrostatik
5. Afnitas
Adanya interaksi yang spesifk antara molekul jenis tertentu
dengan molekul lain yang terikat secara kovalen pada fasa
diam
Kromatograf kolom
Kolom terbuat dari gelas diisi
dengan fase diam berupa serbuk
penyerap (seperti selulosa, silika
gel, poliamida). Fase diam dialiri
(dielusi) dengan fase gerak berupa
pelarut.
•
•
•
Gambar kolom kromatograf
Faktor-faktor yang mempengaruhi
pemisahan dengan kromatograf
kolom adalah:
fase diam yang digunakan
kepolaran pelarut (fase gerak),
ukuran
kolom
(diameter
dan
panjang kolom)
kecepatan alir elusi
Kromatografi
KolomiTerbukaiii
Sistem pemasukan sampel: manual, tidak
volumetrik Injector
Color
Waktu analisis lama, mengandalkan gaya
gravitasi dan kapiler pompa
Hasil pemisahan kurang baik pengemasan
kolom
Kesulitan pengamatan hasil pemisahan untuk
analit tidak berwarna Detektor
Kesulitan penghitungan kadar integrator
Komponen HPLC
POMPA ( PENDORONG FASA GERAK)
TEMPAT INJEKSI (AUTO SAMPLER)
KOLOM (FASA DIAM)
DETEKTOR
KOMPUTER
Komponen HPLC
• Sistem pengalir fasa gerak
Mendorong/memompa fasa gerak sehingga bisa
mengalir ke seluruh sistem instrumen dengan laju alir
konstan (0,1-2 mL/menit)
• Injektor/autosampler
Memasukkan sampel ke dalam sistem aliran fasa gerak
• Kolom
Tabung stainless steel yang diisi fasa diam berfungsi
untuk memisahkan komponen-kompone dalam sampel
• Detektor
Sensor optik yang akan mendeteksi perubahan secara
karakteristik solven yang melalui
• Data system
Unit utama yang mengatur semua sistem komponen
dalam HPLC yaitu menyimpan, memproses, dan
menyajikan data hasil analisis.
Pompa untuk optimasi
•
•
•
Butuh 2 pompa tekanan
tinggi dan pengatur
gradien (mahal)
Dibatasi oleh sistem
dua pelarut
Laju alir yang berbeda
di awal dan akhir
tahapan
Pompa untuk optimasi
•
•
•
•
Sistem pelarut yang
lebih banyak dg
kekuatan dan
selektivitas yang
berbeda (lebih feksibel)
Perubahan laju alir
teratasi
Hanya butuh 1 pompa
(murah)
Pelarut disemprotkan
helium (degassing
process) secara
menyeluruh
Klasifkasi HPLC
1. Partisi (liquid-liquid chromatography)
2. Adsorpsi (liquid-solid
chromatography)
3. Pertukaran ion (ion chromatography)
4. Size exclusion chromatography
5. Afnity chromatography
6. Chiral chromatography
Separation
mechanism
Type of
stationary
phase
Fasa
diam
(polar)
Triethylene
glycol
Water
Normal phase
Fasa
gerak
(non
polar)
Hexane
Propyl ether
Fasa diam
(non polar)
Hydrocarbon
Fasa gerak
(polar)
Water
Methanol
Acetonitrile
THF
Reversed
phase
Typical application of High
Performance Partition
chromatography
Field
Typical mixture separated
Pharmaceutical
Antibiotics, steroids, analgesics
Biochemicals
Amino acids, proteins, carbohydrates, lipids
Food products
Artifcial sweeteners, antioxidants, afatoxins,
additives
Industrial chemicals
Condensed aromatics, surfactants,
propellants, dyes
Pollutants
Pesticides, herbicides, phenols, PCBs
Forensic chemistry
Drugs, poisons, blood alcohol, narcotics
Clinical medicine
Drugs metabolits, urine extracts, estrogens,
bile acids
75%
aplikasi pemisahan HPLC
Lebih dari
menggunakan reversed phase, bonded phase
(octyl or octyldecyl-siloxane) packings dan fasa
geraknya antara lain metanol, acetonitrile, atau
THF
Fase diam
Fase diam
Mekanisme sorpsi
Kerakteristik
Silika yg tidak
dimodifkasi
Adsorpsi, fase normal
Polar, waktu retensi
bervariasi karena ada
air yg diserap
Fase terikat (ODS,
okta desil silan)
Partisi, fase terbalik
Non polar, mampu
memisahkan sejumlah
besar solut
Fase terikat
aminopropil
Partisi yang
dimodifkasi
Polar, memisahkan
senyawa karbohidrat
Fase terikat asam
sulfonat
Penukar kation
Tranfer massa lambat,
puncak melebar
Fase terikat amin
kuarterner
Penukar anion
-
Fase terikat silika dg
porositas terkendali
Eklusi ukuran
Fase gerak organik
Polimer
Partisi, eklusi,
pertukaran ion
Non polar jika polimer
tdk dimodifkasi
Ligan pada Fasa Diam
Fase
gerak/pelarut/solvet/eluen
Pelarut dalam HPLC
• N-heksana
• Sikloheksana
• Tetraklorometa
na
• Triklorometana
• diklorometana
• Metil benzene
• Tetrahidrofura
n (THF)
•
•
•
•
•
•
Propanon
Asetonitril
Isopropanol
Etanol
Metanol
Asam
etanoat
• Air
Bulk property
(general
detectors)
GENERAL
TYPES
Solute property
(selective
detectors)
Mengukur perubahan
sifat fsika fasa gerak +
solut secara keseluruhan
Karakteristik solut
Sensitivitas dan
selektivitas
Fleksibilitas
Sensitif hanya
terhadap beberapa
sifat solut
Sistem Elusi Pelarut
pengaruh kuat pelarut
Detektor
Yang umum dipakai
Detektor Ultraviolet / Visible (UV/VIS) :
untuk senyawa yang dapat menyerap
sinar UV-Vis
Detektor Fluorescence (RF) : komponen
yang keluar dari kolom dikenai sinar UV
dan akan berfuorosensi
Detektor Konduktivitas (CDD) : untuk
senyawa ionik
Detektor Refraktive Indeks (RID) : setiap
senyawa memiliki indek bias spesifk
Detektor spektrometer massa
UV-Vis
Fluorescence
MS
Response
Refractive
Indeks
Universal
Selective
Selective
Selective
Sensitivity
4 microgram
5 nanogram
3 picogram
1 picogram
Linear Range
10
10
10
10
Flow Sensitive
Yes
No
No
Yes
Temperature
sensitive
Yes
No
No
No
Resolusi
Kolom
(Rs)
Ukuran kemampuan kolom
untuk memisahkan dua
komponen
Rs
: nilai resolusi
t0
: waktu retensi pelarut
tR1 : waktu retensi puncak 1
tR2 : waktu retensi puncak 2
W1 : lebar puncak 1
W2 : lebar puncak 2
Kelebihan HPLC
• Dapat digunakan untuk senyawa non
volatile dan senyawa dengan BM tinggi
• Biasanya digunakan pada suhu kamar
sehingga aman bagi senyawa yang tidak
tahan panas
• Fase gerak dapat diubah dengan mencapur
berbagai pelarut dengan berbagai
komposisi
• Dapat digunakan untuk menganalisis
berbagai senyawa sekaligus
Kekurangan HPLC
• Sulit mengidentifkasi senyawa jika tidak
memiliki larutan standar harus
dihubungkan dengan MS
• Jika campuran sangat komplek maka
resolusi yang baik sulit diperoleh
Bidang aplikasi HPLC
• Obat-obatan dan farmasi (parasetamol,
amoksilin)
• Bahan pengawet (formalin)
• Zat aditif (sakarin, asam benzoat)
• Antioksidan
• Zat-zat aktif pada produk makanan
(kafein)
• Produk perawatan (senyawa fenolik)
• Pestisida (residu pestisida diazinon pada
sayuran)
Gambar senyawa fenolik dalam produk perawatan (personal
care products)
Gambar kromatogram hasil pemisahan senyawa fenolik dalam
produk perawatan menggunakan HPLC
Kromatogram Standar Kafein dengan Perbandingan Fase Gerak MetanolBufer Ammonium Asetat pH 4 Perbandingan (A) 40:60, (B) 50:50, (C) 60:40
Kromatogram Standar Asam Benzoat dengan Perbandingan Fase Gerak
Metanol-Bufer Ammonium Asetat (A) 40:60 (B) 50:50 (C) 60:40
Contoh kromatogram analisis obat dalam
urin
Tetrahidrokanabi
nol (THC) : zat
aktif dalam
daun ganja
Pemisahan vitamin dalam tablet suplemen
Pengujian Campuran Zat
Aktif Obat Menggunakan
HPLC
Penentuan Kondisi Metode
HPLC
1. Penentuan kesesuaian sistem
Rasio fase gerak, laju alir, panjang gelombang,
2. Pembuatan kurva kalibrasi
3. Validasi metode
•
•
•
•
•
Kecermatan atau ketepatan (Akurasi)
Keseksamaan atau ketelitian (Presisi)
Linieritas
Batas deteksi
Batas kuantitasi
Gambar1. Kromatogram HPLC untuk uji kesesuaian
sistem
Penentuan kecermatan&keseksamaan
Pengujian Zat Aktif Obat
Menggunakan HPLC
Penentuan Kondisi Metode
HPLC
1. Penentuan kesesuaian sistem
Uji ini menggunakan pengulangan injeksi sebanyak
6 kali larutan standar 0.2 mg/L dilanjutkan
penghitungan nilai waktu retensi dan AUC (Area
Under the Curve) dan penentuan RSD
2. Pembuatan kurva kalibrasi
3. Validasi metode
• Kecermatan
• Keseksamaan
• Linieritas
• LOD
• LOQ
Kondisi Pengujian
• Metode elusi isokratik
• Optimasi pelarut
– Air deionisasi
– Air deionisasi panas (60-70°C)
– Air deionisasi:asetonitril (9:1)
– Air deionisasi:asetonitril (8:2)
• Optimasi fase gerak (eluen)
– Air deionisasi (100 v/v)
– Air deionisasi:asetonitril (90:10 v/v)
– Air deionisasi:asetonitril (80:20 v/v)
• Laju alir optimum injeksi larutan standar dengan
konsentrasi tertentu pada variasi kecepatan 0.2 – 1
mL/menit
• Temperatur kolom optimum injeksi larutan standar
dengan konsentrasi tertentu pada variasi temperatur
50 – 80 °C
Kromatogram zat aktif obat standar (1mg/mL)
Kromatogram zat aktif obat standar
(1mg/mL) dalam matriks
Kromatogram zat aktif obat dalam sampel
Pengujian Linieritas
Pengujian Presisi dan Akurasi
Pengujian Akurasi menggunakan metode standar adisi seperti
tertera pada Tabel di atas.
PENGUJIAN PESTISIDA
ORGANOFOSFOR PADA SAYURAN
Preparasi
pelaru
t
pelaru
t
Kondisi Optimasi
Chlorpyrifo
s
Prophenof
os
Kromatogram pestisida
Data Hasil Validasi
Parameter
Chlorpyrifos
Prophenofos
Linearity range (n=6)
0.01-1.5
0.01-1.5
Regression
Y= 8141879x-14225
Y= 90697x-7971
Correlation coefcient
(r)
0.990
0.990
Intra-day precision
(n=9)
0.99-1,02
0.4-1.25
Inter-day precision
(n=9)
0.89-1.3
0.47-1.25
Repeatibility
1.66
1.51
Specifcity
Specifc
Specifc
LOD (μg/mL)
0.00053
0.00094
LOQ (μg/mL)
0.0016
0.0028
Recovery (%) ±SD
(n=9)
99.99±0.94 –
101.9±0.68
99.86±0.71 –
101.12±1.02
Robustness
Robust
Robust
TERIMA KASIH