IMUNOGENISITAS BAKTERI Aeromonas hydrophila STRAIN GPl - 02 DAN GPl - 03 TERHADAP LELE DUMBO (Clarias gariepinus)
IMUNOGENISITAS BAKTERI Aeromonas hydrophila STRAIN GPl - 02 DAN GPl - 03 TERHADAP LELE DUMBO (Clarias gariepinus) SKRIPSI
Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana - S1
Oleh :
MIKA PRAWESJEKI 0901070033 PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PRNDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2015
MOTTO
Janganlah kamu bersikap lemah, dan janganlah (pula) kamu bersedih hati, padahal kamulah orang-orang yang paling tinggi (derajatnya), jika kamu orang-orang yang beriman.
(Q.S. Ali Imran : 139) Bukankahsuatuaibjika kamu gagal dalam suatu usaha, yang merupakan aib adalah jika kamu tidak bangkit dari kegagalan itu.
(Ali bin Abu Thalib) Sesuatu yang terkadang kita anggap tidak mungkin akan menjadi mungkin apabila kita selalu yakin dan percaya kepada Allah bahwa keajaiban itu selalu ada.
Janganlah berputus asa karenamu`jizatitunyata Terusberjuangdalammeraih mimpi yang selalu disertai dengan doa. Mengejar sesuatu dengan kesungguhan tidak akan sia-sia v
HALAMAN PERSEMBAHAN
Segala Puji syukur saya panjatkan kehadirat Allah SWT yang selalu melimpahkan segala rahmat, hidayah dan inayahNya memberikan berrkah sehingga diberikan kemudahan dan kelancaran. Skripsi ini saya persembahkan kepada :
Bapak (Kastam) dan Mamah (Sumiyati) tercinta yang tidak henti-hentinya selalu memberikan dukungan yang luar biasa baik secara moril dan materiil serta selalu membimbing saya.
Kakak saya Arian Hatmawan dan Rumiyati yang selalu memberikan semangat.
Rizky B. Nugroho yang selalu memberikan dukungan
Sahabat saya Nunu, Siti Nurfaidah, AdhiPradana, Husnun Fauzy, dan
Wiwit yang selalumemberikansemangatdandukungan vi
UCAPAN TERIMAKASIH
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat, karunia serta hidayahnya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “IMUNOGENISITAS BAKTERI Aeromonas hydrophila STRAIN GPl-02 dan GPl-03 TERHADAP LELE DUMBO (Clarias gariepinus)”.
Penulis menyadari bahwa terselesainya penyusuanskripsi ini pastinya berkat dukungan, bimbingan serta bantuan dari berbagai pihak yang terlibat baiksecara langsung maupun tidak langsung. Oleh sebab itu, dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yangsebesar-besarnya kepada yang terhormat Ibu Dini Siswani Mulia, S.Pi., M.Si selaku dosen pembimbing I dan Drs. Heri Maryanto. M.Si selaku dosen pembimbing II yang telah memberikan bimbingan dan pengarahan sehingga skripsi ini dapat diselesaikan dengan baik.
Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada : 1. Drs. Ahmad, M. Pd, selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2. Drs. Arief Husin, M. Si, selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto 3. Dewan Penguji Skripsi Program Studi Pendidikan Biologi Fakultas
Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto 4. Seluruh Dosen Program Studi Pendidikan Biologi Universitas
Muhammadiyah Purwokerto yang selalu membimbing penulis selama perkuliahan
5. Staff Laboratorium Program Studi Pendidikan Biologi Universitas Muahammadiyah Purwokerto vii
6. Bapak dan ibu tercinta serta keluarga besaku yang selalu memberikan doa semangat dan dukungan
Siti Nurfaidah,terimakasihataskerjasamanyadariawalpenelitiansampaiterselesai nyaskripsiini
7. Sahabatku
8. Teman-teman dari Program Studi Pendidikan Biologi yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang senantiasa mendukung selama penelitian berlangsung
Penulisberharapdanberdoa semoga amal budi baik yang telah diberikan Bapak dan Ibu dosen serta teman-teman semua kepada penulis mendapatkan balasan kebaikan dari Allah SWT.Penulis menyadari bahwa penulisan ini masih jauh dari sempurna.Oleh karena itu, kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan demi kesempurnaan skripsi ini dan semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua
Purwokerto, 01 Agustus 2015 Penulis
IMUNOGENISITAS BAKTERI Aeromonas hydrophila STRAIN GPl-02
DAN GPl-03 TERHADAP LELE DUMBO (Clarias gariepinus)
Mika Prawesjeki
0901070033
Ikan lele dumbo (Clarias gariepinus) merupakan salah satu ikan air tawar yang banyak
dibudidayakan karena perkembangan dan perawatan yang tergolong mudah. Dalam budidaya
terdapat kendala yaitu sering ditemukan penyakit MAS. MAS (Motile Aeromonas Septicemia)
merupakan penyakit pada ikan yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila. Bakteri A
. hydrophila sulit untuk ditangani karena memiliki banyak jenis, salah satunya strain GPl-02
dan GPl-03. Untuk dapat mengatasi serangan penyakit MAS dilakukan dengan antibiotik dan
obat-obatan, tetapi akan mengakibatkan mikroorganisme menjadi resisten. Oleh karena itu
dilakuan pencegahan dengan menggunakan vaksin. Pembuatan vaksin menggunakan bakteri
strain GPl-02 dan GPl-03 untuk diperoleh imunogenisitas yang tinggi. Penelitian ini bertujuan
mengetahui imunogenisitas antigen yang berasal dari bakteri A. hydrophila strain GPl-02 dan
GPl-03 yang diberikan dalam bentuk vaksin kepada lele dumbo. Penelitian menggunakan
metode eksperimen. Rancangan penrlitian yang digunakan adalah rancangan Acak Lengkap
(RAL) dengan 3 perlakuan 5 ulangan, yaitu P1 = strain GPl-02, P2 = strain GPl-03, dan P3
= kontrol (non vaksin). Penelitian dilaksanaan di Laboratorium Mikrobiologi dan
Laboratorium Zoologi, Program Studi Pendidikan Biologi, Universitas Muhammadiyah
Purwokerto selama 5 bulan. Lele dumbo yang digunakan berumur sekitas 2 bulan dengan
ukuran panjang 10-13 cm. Parameter utama yang diamati pada penelitian ini adalah titer
antibodi dan uji reaksi silang, sedangkan parameter pendukung adalah suhu, pH, oksigen
terlarut. Pengamatan titer antibodi dilakukan 5 kali yaitu minggu ke-0 (sebelum vaksinasi),
minggu ke-1 (setelah vaksinasi), minggu ke-2 (satu minggu setelah booster), minggu ke-3(satu minggu setelah booster), dan minggu ke-4 (dua minggu setelah booster) menggunakan
metode Anderson (1974). Uji reaksi silang dilakukan pada minggu ke-4 dengan menggunakan
serum darah ikan yang diberikan vaksinasi yang mengandung strain GPl-02 dan GPl-03 yang
disilangkan dengan antigen GPl-02, GPl-03, GPl-05, GL-02, GK-01, dan GB-01. Data titer
antibodi dianalisis menggunakan Analisis Sidik Ragam (Analysis of variance/ANOVA) untuk
mengetahui pengaruh dari perlakuan. Apabila terdapat perbedaan nyata dilanjutkan dengan uji
DMRT (Duncan Multiple Range Test) pada taraf uji 5%, sedangkan data uji reaksi silang dan
kualitas air dianalisis secara deskriptif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa imunogenisitas
bakteri A. hydrophila strain GPl-02 dan GPl-03 berbeda nyata (P<0,05) terhadap ikan lele
dumbo. Strain yang memiliki imunogenisitas paling tinggi adalah strain P2 (GPl-03). Dalam
uji reaksi silang antigen bereaksi positif dengan semua strain. Kualitas air selama penelitian
dalam kisaran optimal yaitu suhu 26-28,5°C, pH 6,5-8,1 dan oksigen terlarut 6-7,3 mg/l.Kata kunci : A. hydrophila, imunogenisitas, lele dumbo, strain GPl-02, GPl-03, vaksin
DAFTAR ISI
HalamanUCAPAN TERIMAKASIH ......................................................................... vii ABSTRAK .................................................................................................... ix DAFTAR ISI ............................................................................................... x DAFTAR TABEL ......................................................................................... xiii DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xv
BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang .................................................................................
1 1.2. Perumusan Masalah ............................................................................
4 1.3. Tujuan Penelitian ................................................................................
4 1.4. ManfaatPenelitian ...............................................................................
5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1. IkanLele Dumbo .................................................................................
6 2.2. BakteriAeromonashydrophila .............................................................
7 2.3. Vaksin .................................................................................................
11 2.4. Imunogenisitas ....................................................................................
12 2.5. Kualitas Air .........................................................................................
13 BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Waktu dan Tempat Penelitian .............................................................
15
3.2. Alat dan Bahan Penelitian 3.2.1. Alat Kultur Bakteri A. hydrophila ............................................
16 3.2.2. Alat Pembuatan Antigen A. hydrophila ....................................
16 3.2.3. AlatPemeliharaanLele Dumbo .................................................
17 3.2.4. AlatPengukur Titer Antibodi ....................................................
17 3.2.5. BahanPembuatanVaksin ...........................................................
17 3.2.6.Ikanuji ........................................................................................
18
3.3. Metode Penelitian 3.3.1. Perlakuan ..................................................................................
18 3.3.2. Parameter yang diamati ............................................................
18
3.3.2.1. Parameter Utama 3.3.2.1.1. Titer Antibodi .................................................................
19 3.3.2.1.2. UjiReaksiSilang ...........................................................
20
3.3.2.2. Parameter Pendukung 3.3.2.2.1. Suhu .............................................................................
21 3.3.2.2.2. pH ................................................................................
22 3.3.2.2.2. Dissolved Oxygen (DO) ..............................................
22
3.4. Prosedur Penelitian
3.4.1. Pembuatan Media Kultur 3.4.1.1. GSP (Glutamate Starch Phenile) ........................................
22 3.4.1.2. TSA (Tryptone Soya Agar) ..................................................
22 3.4.1.3. TSB (Tryptone Soya Broth) .................................................
23 3.4.1.4. PBS (Phosphate Buffer Saline) ...........................................
23 3.4.2. Kultur Bakteri Murni A. hydrophila ...........................................
23 3.4.3. Pembuatan Antigen Bakteri A. hydrophila .................................
24 3.4.4. PemberianVaksinasi ....................................................................
25 3.5. Analisis Data ....................................................................................
25 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Titer Antibodi ...................................................................................
26 4.2. UjiReaksiSilang ...............................................................................
33 4.3. Kualitas Air ....................................................................................
34 BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1. Simpulan ..........................................................................................
37 5.2. Saran ..............................................................................................
37 DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................
38 LAMPIRAN ................................................................................................
42
DAFTAR TABEL
Halaman Tabel. 2.2. Karakteristik bakteri Aeromonas hydrophila ...............................
9 Tabel. 4.1.1. Data titer antibodi pada minggu ke-0 ........................................
26 Tabel. 4.1.2. Data titer antibodi minggu ke-1 ................................................
27 Tabel. 4.1.3.Data titer antibodi minggu ke-2 ...............................................
28 Tabel. 4.1.4.Data titer antibodi pada minggu ke-3 .........................................
29 Tabel. 4.1.5. Data titer antibodi pada minggu ke-4 ........................................
29 Tabel. 4.2. Reaksi Silang ................................................................................
33 Tabel. 4.3. Kualitas Air ..................................................................................
35
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar. 1. Panen Bakteri A. hydrophilastrain GPl-02 dan GPl-03 ...............
49 Gambar. 2. Vaksin Bakteri A. hydrophilastrain GPl-02 dan GPl-03 ..............
49 Gambar. 3. Vaksinkepadatan 10
8 strain GPl-02 dan GPl-03 ...........................
50 Gambar. 4. TempatPemeliharaanLeledumboselamaPenelitian ......................
50 Gambar. 5. PengambilandarahpadaIkan .........................................................
51 Gambar. 6. Titer AntibodidanUjiReaksiSilang ..............................................
51