AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona Squamosa Linn.) Aktivitas Sitotoksik Fraksi Semipolar Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona Squamosa Linn.) Terhadap Sel T47D.

AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK
ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona Squamosa Linn.)
TERHADAP SEL T47D
SKRIPSI

Oleh :

IWAN SETYA NUGROHO
K 100 080 002

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
2012

AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK
ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona Squamosa Linn.)
TERHADAP SEL T47D

SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta

Oleh:

IWAN SETYA NUGROHO
K100080002

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2012

ii

PENGESAHAN SKRIPSI
Berjudul:
AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK
ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona Squamosa Linn.)
TERHADAP SEL T47D


Oleh:

IWAN SETYA NUGROHO
K 100080002
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta
Pada tanggal:
15 Maret 2012
Mengetahui,
Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
Dekan,

Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt.
Pembimbing Utama

Pembimbing Pendamping

Dr. Haryoto, M.Sc.


Rosita Melannisa, M.Si.,Apt.

Penguji :
1.

Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt

2.

Dr. dr. EM. Sutrisna, M.Kes

3.

Dr. Haryoto, M.Sc

4.

Rosita Melannisa, M.Si., Apt


iii

DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, Februari 2012
Peneliti

(Iwan Setya Nugroho)

iv

KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr wb.
Segala puji bagi Allah SWT, Rabb semesta alam atas limpahan karunia-Nya
penulis memiliki kesempatan menyelesaikan penyusunan skripsi ini yang berjudul

“AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL

DAUN SRIKAYA (Annona Squamosa Linn.) TERHADAP SEL T47D”.
Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar
sarjana Strata 1 (S1) Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis banyak mendapatkan bimbingan, dukungan dan bantuan dari
berbagai pihak sehingga penyusunan skripsi ini dapat terselesaikan tepat waktu.
Untuk itu penulis menyampaikan terima kasih kepada :
1. Bapak Dr. Muhammad Da’i, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan penguji I.
2. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc. selaku pembimbing utama.
3. Ibu Rosita Melannisa, M.Si.,Apt., selaku dosen pembimbing pendamping.
4. Bapak Dr. dr. EM. Sutrisna, M.Kes selaku penguji II.
5. Bapak Andi Suhendi, S. Farm., Apt selaku pembimbing akademik.
6. Bapak Sukiman dan Ibu Ngatiyem, kedua orang tuaku.
7. Adi Christanto, Eva Zulfania, Indah Meiningrum dan seluruh tim uji sitotoksik
dengan tanaman srikaya.
8. Semua pihak yang tak bisa disebutkan satu persatu dalam pengantar ini yang
telah membantu penyusunan skripsi ini.
Akhir kata penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih banyak

kekurangan dan jauh dari sempurna. Penulis selalu terbuka untuk menerima kritik
dan saran. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca pada umumnya dan
khususnya dapat bermanfaat bagi penulis sendiri.
Wassalamu’alaikum wr wb.
Surakarta, Februari 2012
Penulis

v

DAFTAR ISI

Halaman
HALAMAN JUDUL ............................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................ iii
DEKLARASI .......................................................................................... iv
KATA PENGANTAR ............................................................................. v
DAFTAR ISI .......................................................................................... vi
DAFTAR TABEL ................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ x

DAFTAR SINGKATAN ........................................................................... xi
INTISARI ................................................................................................. xii
BAB I. PENDAHULUAN ....................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah ...................................................................... 1
B. Perumusan Masalah ............................................................................ 3
C. Tujuan Penelitian ................................................................................ 3
D. Tinjauan Pustaka ................................................................................. 3
A. Tanaman Srikaya (Annona squamosa Linn.) .................................. 3
a.
b.
c.
d.
e.

Kedudukan tanaman srikaya dalam sistem tumbuhan ..........................
Morfologi Tanaman srikaya ................................................................
Nama Daerah ......................................................................................
Kandungan kimia dan kegunaan ..........................................................

3

3
4
4

Penelitian sebelumnya................................................................ 5
B. Sel T47D ....................................................................................... 5
C. Uji Sitotoksik ................................................................................. 6
E. Landasan Teori .................................................................................... 7
F. Hipotesis .............................................................................................. 8
BAB II. METODE PENELITIAN .......................................................... 9
A. Kategori Penelitian.............................................................................. 9
B. Variabel Penelitian .............................................................................. 9
C. Bahan dan Alat ................................................................................... 9
1. Bahan ................................................................................................... 9
2. Alat .............................................................................................. 9
D. Jalannya Penelitian ............................................................................. 10
1. Pembuatan Ekstrak dan Fraksinasi Daun Srikaya ........................... 10

vi


2. Uji Sitotiksik ..................................................................................
a. Sterilisasi LAF ............................................................................
b. Sterilisasi Alat ............................................................................
c. Pembuatan Media Kultur ............................................................
d. Propagasi Sel ..............................................................................
e. Panen Sel ....................................................................................
f. Pembuatan Larutan Uji................................................................
g. Uji sitotoksik terhadap sel T47D dengan metode MTT assay ......
E. Cara Analisis Data ..............................................................................
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................
A. Determinasi Tanaman ........................................................................
B. Fraksinasi Ekstrak ...............................................................................
C. Identifikasi Kandungan Kimia .............................................................
D. Uji Sitotoksik ......................................................................................
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN..................................................
A. Kesimpulan .........................................................................................
B. Saran...................................................................................................

11
11

11
11
12
12
12
13
13
14
14
14
17
19
24
24
24

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 25
LAMPIRAN ............................................................................................. 29

vii


DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Perbandingan pelarut fraksinasi ...................................................... 11
Tabel 2. Penggabungan hasil dari tiap fraksinasi ........................................... 16
Tabel 3. Hasil analisis kandungan kimia menggunakan metode KLT ............. 18
Tabel 4. Hasil uji sitotoksik fraksi semipolar ekstrak etanol daun srikaya ...... 21

viii

DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 1.

Reaksi reduksi MTT menjadi formazan oleh enzim
suksinat reduktase .................................................................. 7

Gambar 2.

Optimasi fase gerak ekstrak etanol daun srikaya dengan
metode KLT .......................................................................... 15

Gambar 3.

Profil KLT hasil 3 kali fraksinasi ........................................... 16

Gambar 4.

Profil KLT terhadap hasil penggabungan fraksinasi (I-III)
ekstrak etanol daun srikaya ..................................................... 17

Gambar 5.

Hasil uji tabung senyawa alkaloid dengan reagen
Dragendorff dan Mayer .......................................................... 17

Gambar 6.

Profil KLT hasil identifikasi kandungan senyawa fraksi
semipolar ekstrak etanol daun srikaya .................................... 18

Gambar 7.

Morfologi sel kanker T47D.................................................... 21

Gambar 8.

Kristal formazan pada sel T47D setelah diberi
perlakuan sampel dan ditambah larutan MTT......................... 21

Gambar 9.

Grafik hubungan antara log konsentrasi dengan ratarata % sel hidup ..................................................................... 22

abel

ix

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman
Lampiran 1. Tanaman Srikaya (Annona squamosa L.) ............................... 29
Lampiran 2. Perhitungan kepadatan stok sel T47D .................................... 29
Lampiran 3. Pembuatan larutan stok dan perhitungan konsentrasi
fraksi semipolar ekstrak etanol daun srikaya .......................... 30
Lampiran 4.

Perhitungan kadar akhir dalam tiap sumuran .......................... 31

Lampiran 5.

Hasil Determinasi .................................................................. 32

Lampiran 6.

Rangkaian alat kromatografi cair vakum (KCV) .................... 33

Lampiran 7.

Uji tabung keberadaan senyawa flavonoid ............................. 33

Lampiran 8.

Hasil pembacaan ELISA reader ............................................. 34

Lampiran 9.

Perhitungan konsentrasi DMSO ............................................. 35

Lampiran 10. Perhitungan harga IC50 ........................................................... 37

x

DAFTAR SINGKATAN

Caspase

cysteinyl aspartate-specific protease

DMSO

Dimetil sulfoksida

ELISA

Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay

FBS

Fetal Bovine Serum

IC50

Inhibitory Concentration 50%

KLT

Kromatografi Lapis Tipis

LAF

Laminar Air Flow

MTT

3-(4,5-Dimetilltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide

PBS

Phosphate Buffered Saline

Penstrep

Penicillin Streptomycin

Rf

Retardation fact

UV

Ultraviolet

xi

INTISARI
Senyawa kimia dalam tanaman tertentu terbukti berpotensi sebagai agen
kemoterapi. Beberapa penelitian menunjukkan bahwa senyawa asetogenin dalam
srikaya mempunyai aktivitas antimikroba dan antikanker. Penelitian ini dilakukan
untuk mengetahui aktivitas sitotoksik fraksi semipolar ekstrak etanol 96% daun
srikaya (Annona Squamosa L.) terhadap sel kanker payudara (T47D)
Fraksi semipolar dibuat dengan cara fraksinasi dengan metode
kromatografi cair vakum (KCV) terhadap ekstrak etanol daun srikaya yang
diperoleh secara maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Fraksinasi
menggunakan fase diam Silika gel G254 dan fase gerak kombinasi heksan : etil
asetat. Fraksi semipolar ekstrak diuji aktivitas sitotoksiknya terhadap sel T47D
dengan seri konsentrasi 150; 100; 50; 25; 10; 5 µg/mL. Análisis kualitatif
senyawa yang terkandung dalam fraksi semipolar ekstrak etanol daun srikaya
dengan menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT). Fase gerak yang digunakan
dalam fraksinasi maupun uji KLT adalah heksan dan etil asetat dengan
perbandingan tertentu, sedangkan fase diam adalah silika gel 254 nm.
Hasil uji sitotoksik menggunakan metode MTT Assay menunjukkan
bahwa fraksi semipolar ekstrak etanol daun srikaya memiliki nilai IC50 sebesar
184,49,41 µg/mL. Nilai ini menunjukkan bahwa efek toksik dari fraksi semipolar
terhadap sel T47D tergolong rendah. Hasil identifikasi kandungan kimia
memperlihatkan bahwa fraksi semipolar ekstrak etanol daun srikaya mengandung
senyawa alkaloid, flavonoid, dan tanin.
Kata Kunci: Annona squamosa L., Sel T47D, MTT assay, KCV, KLT

xii

Dokumen yang terkait

PENDAHULUAN Aktivitas Sitotoksik Fraksi Semipolar Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona Squamosa Linn.) Terhadap Sel T47D.

0 0 8

AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI NONPOLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona squamosa Linn.) Aktivitas Sitotoksik Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona Squamosa Linn.) Terhadap Sel T47D.

0 1 13

PENDAHULUAN Aktivitas Sitotoksik Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona Squamosa Linn.) Terhadap Sel T47D.

0 0 8

DAFTAR PUSTAKA Aktivitas Sitotoksik Fraksi Nonpolar Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona Squamosa Linn.) Terhadap Sel T47D.

0 2 5

AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI POLAR EKSTRAK ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona squamosa L.) Aktivitas Sitotoksik Fraksi Polar Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona Squamosa L.) Terhadap Sel T47d.

0 2 11

UJI SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL KULIT BATANG SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP Uji Sitotoksik Fraksi Semipolar Ekstrak Etanol Kulit Batang Srikaya (Annona Squamosa L.) Terhadap Sel T47D.

0 0 13

AKTIVITAS SITOTOKSIK FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL BIJI SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP SEL Aktivitas Sitotoksik Fraksi Semipolar Ekstrak Etanol Biji Srikaya (Annona Squamosa L.) Terhadap Sel T47D.

0 5 13

PENDAHULUAN Aktivitas Sitotoksik Fraksi Semipolar Ekstrak Etanol Biji Srikaya (Annona Squamosa L.) Terhadap Sel T47D.

1 9 11

DAFTAR PUSTAKA Aktivitas Sitotoksik Fraksi Semipolar Ekstrak Etanol Biji Srikaya (Annona Squamosa L.) Terhadap Sel T47D.

0 2 4

AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL DAUN SRIKAYA (Annona squamosa L) TERHADAP SEL T47D Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona Squamosa L) Terhadap Sel T47d.

0 0 13