UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL 70 % BUAH KEMUKUS ( UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL 70 % BUAH KEMUKUS ( Piper cubeba L.) TERHADAP SEL MYELOMA.
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL 70 %
BUAH KEMUKUS ( Piper cubeba L.)
TERHADAP SEL MYELOMA
SKRIPSI
Oleh :
RENI NURHAYATI
K100030108
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
2007
i
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL 70 %
BUAH KEMUKUS ( Piper cubeba L.)
TERHADAP SEL MYELOMA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi syarat mencapai Derajat Sarjana
Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta
Oleh :
RENI NURHAYATI
K100030108
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
2007
ii
PENGESAHAN SKRIPSI
Berjudul :
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL 70 %
BUAH KEMUKUS ( Piper cubeba L.)
TERHADAP SEL MYELOMA
Oleh :
RENI NURHAYATI
K100030108
Dipertahankan dihadapan Panitia Ujian Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakata
Pada Tanggal : 22 Januari 2007
Mengetahui,
Fakultas farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
Dekan,
Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt
Pembimbing utama
Maryati, M.Si., Apt
Penguji :
1. dr. E.M. Sutrisna
________________
2. Wahyu Utami, M.Si., Apt
3. Maryati, M.Si., Apt
_________________
________________
iii
MOTTO
Sesungguhnya sesudah kesulitan itu pasti ada kemudahan
(QS. Alam Nasyrah: 8)
Sebaik-baik manusia diantaramu adalah yang banyak manfaatnya bagi orang lain
(HR. Bukhari)
Mintalah pertolongan dengan kesabaran dan sholat, sesungguhnya ini amatlah berat
kecuali bagi orang-orang yang khusyu’
(QS. Al Baqarah: 45)
Janganlah engkau sibuk dengan nikmat dan lupa untuk mensyukurinya,
janganlah ilmu yang kau punya tidak engkau amalkan,
dan janganlah cepat ber buat maksiat dan lambat untuk bertaubat
(Syaqiq bin Ibrahim)
Allah tidak akan menyamakan orang yang berjuang untuk islam dengan orang yang tidak
memiliki saham apapun didalamnya
(HR. Abu Nuaim)
Janganlah engkau mengira bahwa orang-orang yang gugur di jalan Allah itu mati,
bahkan mereka hidup di sisi Tuhannya dengan mendapatkan rezeki
(QS. Ali Imran: 169)
Sesungguhnya orang yang disebut kaya itu bukan karena banyaknya harta benda,
tetapi kekayaan yang sesungguhnya adalah kekayaan jiwa
(HR. Bukhari)
Be Daimond Be Sukses
iv
PERSEMBAHAN
Ya Allah… segala puji dan syukur aku panjatkan pada-Mu atas rahmad, hidayah dan karunia
yang telah Engkau berikan. Dengan ridho-Mu dan dengan penuh kerendahan hati, cinta, sayang
dan doa. Karya ini aku persembahkan untuk:
Ibu dan Bapak tercinta
Sebagai tanda bakti dan rasa terima kasihku atas cinta, kasih saying, doa, dukungan,
pengorbanan yang tak terhitungkan, dan yang selalu menasehatiku
Saudara-saudaraku tersayang
Mas Joni, mba’ Wida, mba’ Indah, Dian genit n’ Taufiq terima kasih atas dukungan dan
doanya. Serta keponakan2 kecilku Akbar, Aqib dan calon keponakan baruku yang menambah
keceriaan dan kebahagiaan dalam keluarga besar ini
Shobat-shobatku
Ukhti Nung, Darwati, Suwarni, Sri, mba’ Ninik, Budi, mba’ Dwi, temen2 Zahra club (Rum,
Titax, Etik, Endang, Tri, Uwik, Amel, Nana, Ponco, dst) dan shobat-shobat Mentoring yang
mewarnai hidupku manjadi lebih hidup saat ini dan semoga sampai nanti
Seseorang yang nantinya menjadi pendmping dan pemimpin dalam hidupku untuk mencari
Rahmad dan Ridho-Nya. Kurindukan kedatanganmu
Almamater Universitas Muhammadiyah Surakarta Farmasi ’03 semoga kita selalu mendapatkan
Rahmad, Barokah, dan Ridho-Nya
v
DEKLARASI
Saya disini menyatakan bahwa penelitian/ karya ilmiah/ skripsi ini adlah
hasil pekerjaan saya sendiri dan sepanjang pengetahuan saya tidak berisi materi yang
dipublikasikan atau ditulis orang atau telah dipergunakan dan diterima sebagai
persyaratan penyelesaian studi pada Universitas yang lain, kecuali pada bagianbagian tertentu yang telah dinyatakan dalam teks.
Dan apabila penelitian/ karya ilmiah/ skripsi ini merupakan jiplakan dari
skripsi orang lain, maka saya siap menerima sanksi baik secara akademis maupun
hokum.
Surakarta, 18 Januari 2007
Peneliti,
RENI NURHAYATI
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb
Alhamdulillah, penulis panjatkan puji syukur kehadirat Allah SWT atas
segala rahmat, taufiq dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan penulisan skripsi dengan judul “Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70 %
Buah Kemukus (Piper cubeba L.) Terhadap Sel Myeloma”.
Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana
Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, semoga segala yang tersaji dalam
skripsi ini dapat memberikan manfaat dan pengetahuan bagi pembaca dan untuk
perkembangan ilmu pengetahuan.
Penulis ucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu
jalannya penelitian, baik langsung maupun tidak langsung, antara lain:
1. Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt., selaku dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
2. Ibu Maryati, M.Si., Apt., selaku pembimbing utama yang telah membeikan
pengarahan, bimbingan, saran hingga terselesaikannya skripsi ini.
3. Bapak dr. E.M. Sutrisna selaku penguji I dan ibu Wahyu Utami, M.Si., Apt
selaku penguji II yang telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran untuk
menguji skripsi ini.
4. Bapak Aziz Saifidin, S.F., Apt., selaku pembimbing akademik yang telah
memberikan bimbingan dan motivasi selama studi.
5. Bapak dan ibu dosen Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta yang telah memberikan ilmunya selama penulis menempuh studi
dan staf Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
vii
6. Mbak Rumbi selaku teknisi dan staf karyawan Laboratorium Parasitologi
Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada yang telah membantu
penulis selama pengujian sitotoksik.
7. Ibu dan bapak tercinta, sembah baktiku dengan doa, cinta dan kasih saying
yang tulus, dukungan dan semangat yang telah kalian berikan.
8. Saudara-saudaraku mas Joni, mbak Wida, mbak Indah, Dian dan Taufiq
yang selalu memberikan semangat dan dukungan.
9. Teman seperjuanganku Dian, Novi, Tini dan Laila terima kasih atas
kerjasamanya saat penelitian.
10. Ukhti Nung, Rum, Titax, Etik, Indung, Uwik, Surya terima kasih atas
persahabatan yang tulus.
11. Teman-teman di kost Az-zahra aku rindukan kebersamaan dengan kalian.
12. Nur (SD), Rini dan Minarni (SMP), Triyanti, Ratna, Sari, Ijup, Nung, Rum
(SMU), Rofi’, Surya, Upenk, Tini, Yanti (Psi), Mimink, Fitria, dek Nur,
Desti, Hesti, Anna, Nana, Puah, Rini, Ika, KH, CH, Mufid, Ufah (Farma)
tidak akan pernah aku lupakan kenangan bersama kalian.
13. Semua pihak yang telah membantu terselesainya skripsi ini yang tidak bisa
kami sebutkan satu persatu.
Semoga Allah SWT membalas kebaikan dan kemurahan hati mereka,
selanjutnya penulis mengharapkan saran dan kritik yang bersifat membangun guna
memperbaiki dan menyempurnakan tulisan ini.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb
Surakarta,
Januari 2007
Penulis
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................
ii
HALAMAN MOTTO ..................................................................................
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN ..................................................................
v
HALAMAN DEKLARASI .........................................................................
vi
KATA PENGANTAR .................................................................................
vii
DAFTAR ISI ................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL.........................................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN.................................................................................
xiv
DAFTAR SINGKATAN ..............................................................................
xv
INTISARI......................................................................................................
xvi
BAB I. PENDAHULUAN .........................................................................
1
A. Latar Belakang ........................................................................
1
B. Perumusan Masalah .................................................................
3
C. Tinjauan Pustaka ......................................................................
3
1. Tanaman Kemukus ( Piper cubeba L.) .............................
3
a. Taksonomi....................................................................
3
b. Morfologi ....................................................................
4
c. Nama Daerah................................................................
4
d. Kandungan Kimia tanaman .........................................
5
e. Manfaat Tanaman.........................................................
5
2. Ekstraksi.............................................................................
5
ix
3. Kanker ................................................................................
6
a. Definisi Kanker ............................................................
6
b. Sifat Kanker .................................................................
7
c. Janis Kanker .................................................................
7
d. Penyebab Kanker .........................................................
8
e. Siklus Sel Kanker ........................................................
8
f. Gejala Kanker...............................................................
11
g. Pencegahan dan Pengobatan Kanker ..........................
12
4. Sel Myeloma ......................................................................
13
5. Sitotoksik ...........................................................................
14
6. Kromatografi Lapis Tipis...................................................
15
a. Fase Diam ....................................................................
16
b. Fase Gerak....................................................................
16
D. Hipotesis...................................................................................
18
BAB II METODE PENELITIAN...............................................................
19
A. Kategori Penelitian...................................................................
19
B. Bahan dan Alat.........................................................................
19
C. Jalannya Penelitian ..................................................................
20
1. Determinasi Tanaman .......................................................
20
2. Pengambilan bahan ...........................................................
20
3. Pembuatan Serbuk .............................................................
21
4. Pembuatan Ekstrak ............................................................
21
5. Uji Sitotoksik ....................................................................
22
a. Sterilisasi Alat .............................................................
22
b. Pembuatan Media Kultur ............................................
22
x
c. Preparasi Sel Myeloma ...............................................
22
1) Propagasi Sel .........................................................
22
2) Pemanenan Sel Myeloma ......................................
23
d. Pembuatan Larutan Uji ...............................................
23
e. Uji Sitotoksik secara MTT assay ................................
23
f. DMSO ..........................................................................
24
6. Uji Kualitatif Kromatografi Lapis Tipis ...........................
25
D. Cara Analisis ............................................................................
26
1. Uji Sitotoksik ....................................................................
26
2. Uji Kualitatif Kromatografi Lapis Tipis ...........................
27
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN .....................................................
29
A. Determinasi Tanaman .............................................................
29
B. Ekstraksi ..................................................................................
29
C. Uji Sitotoksik ..........................................................................
31
D. Kromatografi Lapis Tipis ........................................................
37
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN......................................................
42
A. Kesimpulan ..............................................................................
42
B. Saran.........................................................................................
42
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
43
LAMPIRAN..................................................................................................
45
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Pengaruh berbagai Konsentrasi DMSO terhadap
% Sel Myeloma Hidup…………………………
Tabel 2.
32
Pengaruh Berbagai Konsentrasi Ekstrak Etanol 70%
Buah Kemukus
Tabel 3.
……………….
terhadap Sel Hidup Myeloma…………………
35
Kromatografi Ekstrak Etanol 70% Buah Kemukus………………..
39
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Siklus Pertumbuhan Sel…………………………………….….
10
Gambar 2.
Skema Kerja untuk mendapat Larutan Uji…………………….
21
Gambar 3.
Skema Kerja Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70%
Buah Kemukus terhadap Sel Myeloma……………..…………
Gambar 4.
Skema Kerja Penelitian Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70%
Buah Kemukus terhadap Sel Myeloma…………………………
Gambar 5.
25
28
Grafik Hubungan Konsentrasi DMSO terhadap Prosentase
Sel Hidup………………………………..……………………...
32
Gambar 6.
Mekanisme Reduksi Sel Hidup Sel Myeloma terhadap MTT …
34
Gambar 7.
Foto Sel Myeloma ………………………………………………
34
Gambar 8.
Grafik Hubungan Konsentrasi Ekstrak Etanol 70% Buah
Kemukus Versus % Sel Hidup Sel Myeloma………………….
36
Gambar 9.
Grafik Hubungan Log Konsentrasi dengan Nili Probit ………..
36
Gambar 10.
Kronmatografi Ekstrak Etanol 70% Buah Kemukus…………...
39
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Hasil Determinasi Kemukus (Piper cubeba L.)…………………
45
Lampiran 2.
Foto Tanaman Kemukus (Pier cubeba L. )……………………..
50
Lampiran 3.
Foto Buah Kemukus (Piper cubeba L. )………………………...
51
Lampiran 4.
Foto Mikroplate 96 Sumuran untuk Uji Sitotoksik……………..
52
Lampiran 5.
Foto ELISA reader……………………………………………...
53
Lampiran 6.
Perhitungan Hasil Rendemen……………………………………
54
Lampiran 7.
Perhitungan seri konsentrasi…………………………………….
54
Lampiran 8.
Tabel Absorbansi pada Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70%
Buah Kemukus (Piper cubeba L. )………………………………. 55
Lampiran 9.
Tabel Probit………………………………………………………
55
Lampiran 10. Perhitungan Prosen Sel Hidup………………………………….
56
Lampiran 11. Surat Pemesanan Bahan di BPTO Tawangmangu……………...
61
Lampiran 12. Surat Bebas Laboratorium UGM……………………………….
62
xiv
DAFTAR SINGKATAN
DMSO
: Dimetil Sulfoxid
DNA
: Deoxyribo Nucleic Acid
ELISA
: Enzim-Linked Immuno-Sorbent Assay
FBS
: Fetal Bovin Serum
IC 50
: Inhibitory Consentration 50
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
MTT
: (3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-difenil-tetrazolium bromide)
PBS
: Phosphat-Bufer Saline
Pen-sterp
: Penisilin Streptomisin
Rf
: Retention factor
RNA
: Ribo Nucleic Acid
RPMI
: Rosewell Park Memorial Institute
SDS
: Sodium Dedocyl Sulphate
WHO
: Word Health Organisation
xv
INTISARI
Kanker merupakan salah satu penyakit yang menyebabkan kematian
terbesar abad ini. Selama ini terapi kanker dengan kemoterapi belum memperoleh
hasil yang memuaskan, oleh karena itu perlu dilakukan penelitian guna mendapat
bahan obat alam yang dapat dikembangkan sebagai obat kanker. Salah satu bahan
alam yang diduga mempunyai efek sitotosik adalah buah kemukus (Piper cubeba L.).
Ini didasarkan pada penelitian Sunila dan Kutan yang menunjukkan bahwa piperin
dalam ekstrak alkohol Piper lonum mempunyai efek toksik terhadap sel DLA
(Dalton’s Lymphoma Ascites) dan sel EAC (Earlich Ascites Carcinoma). Penelitian
ini bertujuan untuk mengetahui potensi sitotoksik ekstrak etanol buah kemukus
terhadap sel Myeloma.
Ekstrak buah kemukus diperoleh dengan maserasi serbuk buah kemukus
dengan pelarut etanol 70%. Kemudian dilakukan uji kualitatif kandungan piperin
dengan Kromatografi Lapis Tipis, fase diam yang digunakan adalah silika gel GF254
dan fase gerak heksana-etil setat (7:3) v/v serta pereaksi semprot anisaldehid H2SO4.
Uji sitotoksik terhadap sel Myeloma dilakukan dengan menggunakan metode MTT
dengan seri konsentrasi 500 Pg/ml ,250 Pg/ml, 125 Pg/ml, 62,5 Pg/ml dan
31,25 Pg/ml. Hasil absorbansi menggambarkan banyaknya sel hidup. Nilai IC50
dihitung dengan menggunakan analisis probit.
Dari hasil Kromatografi Lapis Tipis menunjukkan adanya piperin dalam
ekstrak etanol 70% buah kemukus. Uji sitotoksik menunjukkan bahwa ekstrak etanol
70% buah kemukus mempunyai efek sitotoksik terhadap sel Myeloma pada inkubasi
24 jam dengan nilai IC50 sebesar 76,10 Pg/ml.
Kata Kunci : Buah Kemukus (Piper cubeba L. ), sel Myeloma, MTT, IC50
xvi
BUAH KEMUKUS ( Piper cubeba L.)
TERHADAP SEL MYELOMA
SKRIPSI
Oleh :
RENI NURHAYATI
K100030108
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
2007
i
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL 70 %
BUAH KEMUKUS ( Piper cubeba L.)
TERHADAP SEL MYELOMA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi syarat mencapai Derajat Sarjana
Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta
Oleh :
RENI NURHAYATI
K100030108
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
2007
ii
PENGESAHAN SKRIPSI
Berjudul :
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL 70 %
BUAH KEMUKUS ( Piper cubeba L.)
TERHADAP SEL MYELOMA
Oleh :
RENI NURHAYATI
K100030108
Dipertahankan dihadapan Panitia Ujian Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakata
Pada Tanggal : 22 Januari 2007
Mengetahui,
Fakultas farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
Dekan,
Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt
Pembimbing utama
Maryati, M.Si., Apt
Penguji :
1. dr. E.M. Sutrisna
________________
2. Wahyu Utami, M.Si., Apt
3. Maryati, M.Si., Apt
_________________
________________
iii
MOTTO
Sesungguhnya sesudah kesulitan itu pasti ada kemudahan
(QS. Alam Nasyrah: 8)
Sebaik-baik manusia diantaramu adalah yang banyak manfaatnya bagi orang lain
(HR. Bukhari)
Mintalah pertolongan dengan kesabaran dan sholat, sesungguhnya ini amatlah berat
kecuali bagi orang-orang yang khusyu’
(QS. Al Baqarah: 45)
Janganlah engkau sibuk dengan nikmat dan lupa untuk mensyukurinya,
janganlah ilmu yang kau punya tidak engkau amalkan,
dan janganlah cepat ber buat maksiat dan lambat untuk bertaubat
(Syaqiq bin Ibrahim)
Allah tidak akan menyamakan orang yang berjuang untuk islam dengan orang yang tidak
memiliki saham apapun didalamnya
(HR. Abu Nuaim)
Janganlah engkau mengira bahwa orang-orang yang gugur di jalan Allah itu mati,
bahkan mereka hidup di sisi Tuhannya dengan mendapatkan rezeki
(QS. Ali Imran: 169)
Sesungguhnya orang yang disebut kaya itu bukan karena banyaknya harta benda,
tetapi kekayaan yang sesungguhnya adalah kekayaan jiwa
(HR. Bukhari)
Be Daimond Be Sukses
iv
PERSEMBAHAN
Ya Allah… segala puji dan syukur aku panjatkan pada-Mu atas rahmad, hidayah dan karunia
yang telah Engkau berikan. Dengan ridho-Mu dan dengan penuh kerendahan hati, cinta, sayang
dan doa. Karya ini aku persembahkan untuk:
Ibu dan Bapak tercinta
Sebagai tanda bakti dan rasa terima kasihku atas cinta, kasih saying, doa, dukungan,
pengorbanan yang tak terhitungkan, dan yang selalu menasehatiku
Saudara-saudaraku tersayang
Mas Joni, mba’ Wida, mba’ Indah, Dian genit n’ Taufiq terima kasih atas dukungan dan
doanya. Serta keponakan2 kecilku Akbar, Aqib dan calon keponakan baruku yang menambah
keceriaan dan kebahagiaan dalam keluarga besar ini
Shobat-shobatku
Ukhti Nung, Darwati, Suwarni, Sri, mba’ Ninik, Budi, mba’ Dwi, temen2 Zahra club (Rum,
Titax, Etik, Endang, Tri, Uwik, Amel, Nana, Ponco, dst) dan shobat-shobat Mentoring yang
mewarnai hidupku manjadi lebih hidup saat ini dan semoga sampai nanti
Seseorang yang nantinya menjadi pendmping dan pemimpin dalam hidupku untuk mencari
Rahmad dan Ridho-Nya. Kurindukan kedatanganmu
Almamater Universitas Muhammadiyah Surakarta Farmasi ’03 semoga kita selalu mendapatkan
Rahmad, Barokah, dan Ridho-Nya
v
DEKLARASI
Saya disini menyatakan bahwa penelitian/ karya ilmiah/ skripsi ini adlah
hasil pekerjaan saya sendiri dan sepanjang pengetahuan saya tidak berisi materi yang
dipublikasikan atau ditulis orang atau telah dipergunakan dan diterima sebagai
persyaratan penyelesaian studi pada Universitas yang lain, kecuali pada bagianbagian tertentu yang telah dinyatakan dalam teks.
Dan apabila penelitian/ karya ilmiah/ skripsi ini merupakan jiplakan dari
skripsi orang lain, maka saya siap menerima sanksi baik secara akademis maupun
hokum.
Surakarta, 18 Januari 2007
Peneliti,
RENI NURHAYATI
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb
Alhamdulillah, penulis panjatkan puji syukur kehadirat Allah SWT atas
segala rahmat, taufiq dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan penulisan skripsi dengan judul “Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70 %
Buah Kemukus (Piper cubeba L.) Terhadap Sel Myeloma”.
Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana
Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, semoga segala yang tersaji dalam
skripsi ini dapat memberikan manfaat dan pengetahuan bagi pembaca dan untuk
perkembangan ilmu pengetahuan.
Penulis ucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu
jalannya penelitian, baik langsung maupun tidak langsung, antara lain:
1. Dra. Nurul Mutmainah, M.Si., Apt., selaku dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
2. Ibu Maryati, M.Si., Apt., selaku pembimbing utama yang telah membeikan
pengarahan, bimbingan, saran hingga terselesaikannya skripsi ini.
3. Bapak dr. E.M. Sutrisna selaku penguji I dan ibu Wahyu Utami, M.Si., Apt
selaku penguji II yang telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran untuk
menguji skripsi ini.
4. Bapak Aziz Saifidin, S.F., Apt., selaku pembimbing akademik yang telah
memberikan bimbingan dan motivasi selama studi.
5. Bapak dan ibu dosen Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta yang telah memberikan ilmunya selama penulis menempuh studi
dan staf Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
vii
6. Mbak Rumbi selaku teknisi dan staf karyawan Laboratorium Parasitologi
Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada yang telah membantu
penulis selama pengujian sitotoksik.
7. Ibu dan bapak tercinta, sembah baktiku dengan doa, cinta dan kasih saying
yang tulus, dukungan dan semangat yang telah kalian berikan.
8. Saudara-saudaraku mas Joni, mbak Wida, mbak Indah, Dian dan Taufiq
yang selalu memberikan semangat dan dukungan.
9. Teman seperjuanganku Dian, Novi, Tini dan Laila terima kasih atas
kerjasamanya saat penelitian.
10. Ukhti Nung, Rum, Titax, Etik, Indung, Uwik, Surya terima kasih atas
persahabatan yang tulus.
11. Teman-teman di kost Az-zahra aku rindukan kebersamaan dengan kalian.
12. Nur (SD), Rini dan Minarni (SMP), Triyanti, Ratna, Sari, Ijup, Nung, Rum
(SMU), Rofi’, Surya, Upenk, Tini, Yanti (Psi), Mimink, Fitria, dek Nur,
Desti, Hesti, Anna, Nana, Puah, Rini, Ika, KH, CH, Mufid, Ufah (Farma)
tidak akan pernah aku lupakan kenangan bersama kalian.
13. Semua pihak yang telah membantu terselesainya skripsi ini yang tidak bisa
kami sebutkan satu persatu.
Semoga Allah SWT membalas kebaikan dan kemurahan hati mereka,
selanjutnya penulis mengharapkan saran dan kritik yang bersifat membangun guna
memperbaiki dan menyempurnakan tulisan ini.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb
Surakarta,
Januari 2007
Penulis
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN.......................................................................
ii
HALAMAN MOTTO ..................................................................................
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN ..................................................................
v
HALAMAN DEKLARASI .........................................................................
vi
KATA PENGANTAR .................................................................................
vii
DAFTAR ISI ................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL.........................................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN.................................................................................
xiv
DAFTAR SINGKATAN ..............................................................................
xv
INTISARI......................................................................................................
xvi
BAB I. PENDAHULUAN .........................................................................
1
A. Latar Belakang ........................................................................
1
B. Perumusan Masalah .................................................................
3
C. Tinjauan Pustaka ......................................................................
3
1. Tanaman Kemukus ( Piper cubeba L.) .............................
3
a. Taksonomi....................................................................
3
b. Morfologi ....................................................................
4
c. Nama Daerah................................................................
4
d. Kandungan Kimia tanaman .........................................
5
e. Manfaat Tanaman.........................................................
5
2. Ekstraksi.............................................................................
5
ix
3. Kanker ................................................................................
6
a. Definisi Kanker ............................................................
6
b. Sifat Kanker .................................................................
7
c. Janis Kanker .................................................................
7
d. Penyebab Kanker .........................................................
8
e. Siklus Sel Kanker ........................................................
8
f. Gejala Kanker...............................................................
11
g. Pencegahan dan Pengobatan Kanker ..........................
12
4. Sel Myeloma ......................................................................
13
5. Sitotoksik ...........................................................................
14
6. Kromatografi Lapis Tipis...................................................
15
a. Fase Diam ....................................................................
16
b. Fase Gerak....................................................................
16
D. Hipotesis...................................................................................
18
BAB II METODE PENELITIAN...............................................................
19
A. Kategori Penelitian...................................................................
19
B. Bahan dan Alat.........................................................................
19
C. Jalannya Penelitian ..................................................................
20
1. Determinasi Tanaman .......................................................
20
2. Pengambilan bahan ...........................................................
20
3. Pembuatan Serbuk .............................................................
21
4. Pembuatan Ekstrak ............................................................
21
5. Uji Sitotoksik ....................................................................
22
a. Sterilisasi Alat .............................................................
22
b. Pembuatan Media Kultur ............................................
22
x
c. Preparasi Sel Myeloma ...............................................
22
1) Propagasi Sel .........................................................
22
2) Pemanenan Sel Myeloma ......................................
23
d. Pembuatan Larutan Uji ...............................................
23
e. Uji Sitotoksik secara MTT assay ................................
23
f. DMSO ..........................................................................
24
6. Uji Kualitatif Kromatografi Lapis Tipis ...........................
25
D. Cara Analisis ............................................................................
26
1. Uji Sitotoksik ....................................................................
26
2. Uji Kualitatif Kromatografi Lapis Tipis ...........................
27
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN .....................................................
29
A. Determinasi Tanaman .............................................................
29
B. Ekstraksi ..................................................................................
29
C. Uji Sitotoksik ..........................................................................
31
D. Kromatografi Lapis Tipis ........................................................
37
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN......................................................
42
A. Kesimpulan ..............................................................................
42
B. Saran.........................................................................................
42
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
43
LAMPIRAN..................................................................................................
45
xi
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Pengaruh berbagai Konsentrasi DMSO terhadap
% Sel Myeloma Hidup…………………………
Tabel 2.
32
Pengaruh Berbagai Konsentrasi Ekstrak Etanol 70%
Buah Kemukus
Tabel 3.
……………….
terhadap Sel Hidup Myeloma…………………
35
Kromatografi Ekstrak Etanol 70% Buah Kemukus………………..
39
xii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Siklus Pertumbuhan Sel…………………………………….….
10
Gambar 2.
Skema Kerja untuk mendapat Larutan Uji…………………….
21
Gambar 3.
Skema Kerja Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70%
Buah Kemukus terhadap Sel Myeloma……………..…………
Gambar 4.
Skema Kerja Penelitian Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70%
Buah Kemukus terhadap Sel Myeloma…………………………
Gambar 5.
25
28
Grafik Hubungan Konsentrasi DMSO terhadap Prosentase
Sel Hidup………………………………..……………………...
32
Gambar 6.
Mekanisme Reduksi Sel Hidup Sel Myeloma terhadap MTT …
34
Gambar 7.
Foto Sel Myeloma ………………………………………………
34
Gambar 8.
Grafik Hubungan Konsentrasi Ekstrak Etanol 70% Buah
Kemukus Versus % Sel Hidup Sel Myeloma………………….
36
Gambar 9.
Grafik Hubungan Log Konsentrasi dengan Nili Probit ………..
36
Gambar 10.
Kronmatografi Ekstrak Etanol 70% Buah Kemukus…………...
39
xiii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Hasil Determinasi Kemukus (Piper cubeba L.)…………………
45
Lampiran 2.
Foto Tanaman Kemukus (Pier cubeba L. )……………………..
50
Lampiran 3.
Foto Buah Kemukus (Piper cubeba L. )………………………...
51
Lampiran 4.
Foto Mikroplate 96 Sumuran untuk Uji Sitotoksik……………..
52
Lampiran 5.
Foto ELISA reader……………………………………………...
53
Lampiran 6.
Perhitungan Hasil Rendemen……………………………………
54
Lampiran 7.
Perhitungan seri konsentrasi…………………………………….
54
Lampiran 8.
Tabel Absorbansi pada Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol 70%
Buah Kemukus (Piper cubeba L. )………………………………. 55
Lampiran 9.
Tabel Probit………………………………………………………
55
Lampiran 10. Perhitungan Prosen Sel Hidup………………………………….
56
Lampiran 11. Surat Pemesanan Bahan di BPTO Tawangmangu……………...
61
Lampiran 12. Surat Bebas Laboratorium UGM……………………………….
62
xiv
DAFTAR SINGKATAN
DMSO
: Dimetil Sulfoxid
DNA
: Deoxyribo Nucleic Acid
ELISA
: Enzim-Linked Immuno-Sorbent Assay
FBS
: Fetal Bovin Serum
IC 50
: Inhibitory Consentration 50
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
MTT
: (3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl)-2,5-difenil-tetrazolium bromide)
PBS
: Phosphat-Bufer Saline
Pen-sterp
: Penisilin Streptomisin
Rf
: Retention factor
RNA
: Ribo Nucleic Acid
RPMI
: Rosewell Park Memorial Institute
SDS
: Sodium Dedocyl Sulphate
WHO
: Word Health Organisation
xv
INTISARI
Kanker merupakan salah satu penyakit yang menyebabkan kematian
terbesar abad ini. Selama ini terapi kanker dengan kemoterapi belum memperoleh
hasil yang memuaskan, oleh karena itu perlu dilakukan penelitian guna mendapat
bahan obat alam yang dapat dikembangkan sebagai obat kanker. Salah satu bahan
alam yang diduga mempunyai efek sitotosik adalah buah kemukus (Piper cubeba L.).
Ini didasarkan pada penelitian Sunila dan Kutan yang menunjukkan bahwa piperin
dalam ekstrak alkohol Piper lonum mempunyai efek toksik terhadap sel DLA
(Dalton’s Lymphoma Ascites) dan sel EAC (Earlich Ascites Carcinoma). Penelitian
ini bertujuan untuk mengetahui potensi sitotoksik ekstrak etanol buah kemukus
terhadap sel Myeloma.
Ekstrak buah kemukus diperoleh dengan maserasi serbuk buah kemukus
dengan pelarut etanol 70%. Kemudian dilakukan uji kualitatif kandungan piperin
dengan Kromatografi Lapis Tipis, fase diam yang digunakan adalah silika gel GF254
dan fase gerak heksana-etil setat (7:3) v/v serta pereaksi semprot anisaldehid H2SO4.
Uji sitotoksik terhadap sel Myeloma dilakukan dengan menggunakan metode MTT
dengan seri konsentrasi 500 Pg/ml ,250 Pg/ml, 125 Pg/ml, 62,5 Pg/ml dan
31,25 Pg/ml. Hasil absorbansi menggambarkan banyaknya sel hidup. Nilai IC50
dihitung dengan menggunakan analisis probit.
Dari hasil Kromatografi Lapis Tipis menunjukkan adanya piperin dalam
ekstrak etanol 70% buah kemukus. Uji sitotoksik menunjukkan bahwa ekstrak etanol
70% buah kemukus mempunyai efek sitotoksik terhadap sel Myeloma pada inkubasi
24 jam dengan nilai IC50 sebesar 76,10 Pg/ml.
Kata Kunci : Buah Kemukus (Piper cubeba L. ), sel Myeloma, MTT, IC50
xvi