PENGUJIAN KADAR ASAM URAT DALAM PLASMA DARAH MENGGUNAKAN KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT).
PENGUJIAN KADAR ASAM URAT
DALAM PLASMA DARAH MENGGUNAKAN
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
*)
ANANDHITA UTAMI, NASRUL WATHONI, GOFARANA WILAR
Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran
ABSTRAK
Asam urat merupakan hasil akhir dari metabolisme purin, yaitu perombakan
enzimatis sel-sel tubuh dari asam dinukleotida atau asam ribonukleotida. Tujuan
penelitian ini adalah untuk menemukan metode yang tepat untuk menganalisis
asam urat dalam plasma darah. Analisis ini menggunakan metode kromatografi
cair kinerja tinggi menggunakan kolom fase balik C18, Fase diam (kolom) yang
digunakan adalah octadecyl silane (ODS) 250 x 2,6 mm, ukuran partikel 10
μm,dengan menggunakan campuran dari dapar asetat pH 5,0 : acetonitril (98 : 2
v/v) sebagai fase gerak, dengan laju alir 0,5 mL/menit. Asam urat dideteksi pada
panjang gelombang 292 nm menggunakan detektor UV dengan waktu retensi
asam urat 6,183 menit dan resolusi 1,4 dari plasma darah. Linearitas diperoleh
dengan membuat laruran baku asam urat konsentrasi 2, 30, 60, 90, 120, dan 150
μg/ml, koefisien korelasi (r) = 0.999. Batas deteksi dan batas kuantifikasi asam
urat 3,8224 μg/ml dan 12,7416 μg/ml. Nilai akurasi konsentrasi 30 ; 90 dan 120
μg/ml adalah 101,211%; 95,919%; dan 99,299% sedangkan presisi adalah
1,059%; 0,386%; dan 1,826%. Hasil uji kesesuaian sistem dan keterulangan
terhadap waktu retensi dan rasio luas area kromatogram menunjukkan KV < 10%.
Hasil dari metode validasi memenuhi persyaratan sehingga dapat digunakan untuk
menentukan kadar asam urat dalam plasma darah.
Kata kunci : Asam Urat, KCKT, Plasma Darah
*) Penelitian ini dibiayai oleh dana Dikti/Unpad, tahun anggaran 2011, melalui
skim penelitian Hibah Bersaing yang diketuai oleh Nasrul Wathoni, M.Si., Apt.
iii
URIC ACID LEVELS MEASUREMENT IN BLOOD
USING HIGH PERFORMANCE LIQUID
CHROMATOGRAPHY (HPLC) *)
ANANDHITA UTAMI, NASRUL WATHONI, GOFARANA WILAR
Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran
ABSTRACT
Uric acid is the end result of purine metabolism, the enzymatic turnover of body
cells from amino acid dinucleotide or ribonucleotides. The purpose of this study is
to find the right method to analyze uric acid in blood plasma. This analysis uses
high-performance liquid chromatography method using a reversed phase C18
column, stationary phase (column) used was octadecyl silane (ODS) 250 x 2.6
mm, particle size 10 μm, using a mixture of acetate buffer pH 5.0: acetonitril (98:
2 v / v) as mobile phase, with a flow rate of 0.5 mL / min. Uric acid was detected
at a wavelength of 292 nm using a UV detector with uric acid retention time 6.183
min and a resolution of 1.4 from the blood plasma. Linearity is obtained by
making a standard solution of uric acid concentrations of 2, 30, 60, 90, 120, and
150 μg/ml, the correlation coefficient (r) = 0999. Limits of detection and limit of
quantification of uric acid is 3.8224 μg/ml and 12.7416 μg/ml. Accuracy of the
concentration values 30 ; 90 and 120 μg/ml is 101.211%, 95.919%, and 99.299%,
while precision is 1.059%, 0.386% and 1.826%. System suitability test results and
repeatability of retention time and area ratio chromatograms showed the value of
%CV (Coefisient variation) is
DALAM PLASMA DARAH MENGGUNAKAN
KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)
*)
ANANDHITA UTAMI, NASRUL WATHONI, GOFARANA WILAR
Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran
ABSTRAK
Asam urat merupakan hasil akhir dari metabolisme purin, yaitu perombakan
enzimatis sel-sel tubuh dari asam dinukleotida atau asam ribonukleotida. Tujuan
penelitian ini adalah untuk menemukan metode yang tepat untuk menganalisis
asam urat dalam plasma darah. Analisis ini menggunakan metode kromatografi
cair kinerja tinggi menggunakan kolom fase balik C18, Fase diam (kolom) yang
digunakan adalah octadecyl silane (ODS) 250 x 2,6 mm, ukuran partikel 10
μm,dengan menggunakan campuran dari dapar asetat pH 5,0 : acetonitril (98 : 2
v/v) sebagai fase gerak, dengan laju alir 0,5 mL/menit. Asam urat dideteksi pada
panjang gelombang 292 nm menggunakan detektor UV dengan waktu retensi
asam urat 6,183 menit dan resolusi 1,4 dari plasma darah. Linearitas diperoleh
dengan membuat laruran baku asam urat konsentrasi 2, 30, 60, 90, 120, dan 150
μg/ml, koefisien korelasi (r) = 0.999. Batas deteksi dan batas kuantifikasi asam
urat 3,8224 μg/ml dan 12,7416 μg/ml. Nilai akurasi konsentrasi 30 ; 90 dan 120
μg/ml adalah 101,211%; 95,919%; dan 99,299% sedangkan presisi adalah
1,059%; 0,386%; dan 1,826%. Hasil uji kesesuaian sistem dan keterulangan
terhadap waktu retensi dan rasio luas area kromatogram menunjukkan KV < 10%.
Hasil dari metode validasi memenuhi persyaratan sehingga dapat digunakan untuk
menentukan kadar asam urat dalam plasma darah.
Kata kunci : Asam Urat, KCKT, Plasma Darah
*) Penelitian ini dibiayai oleh dana Dikti/Unpad, tahun anggaran 2011, melalui
skim penelitian Hibah Bersaing yang diketuai oleh Nasrul Wathoni, M.Si., Apt.
iii
URIC ACID LEVELS MEASUREMENT IN BLOOD
USING HIGH PERFORMANCE LIQUID
CHROMATOGRAPHY (HPLC) *)
ANANDHITA UTAMI, NASRUL WATHONI, GOFARANA WILAR
Fakultas Farmasi, Universitas Padjadjaran
ABSTRACT
Uric acid is the end result of purine metabolism, the enzymatic turnover of body
cells from amino acid dinucleotide or ribonucleotides. The purpose of this study is
to find the right method to analyze uric acid in blood plasma. This analysis uses
high-performance liquid chromatography method using a reversed phase C18
column, stationary phase (column) used was octadecyl silane (ODS) 250 x 2.6
mm, particle size 10 μm, using a mixture of acetate buffer pH 5.0: acetonitril (98:
2 v / v) as mobile phase, with a flow rate of 0.5 mL / min. Uric acid was detected
at a wavelength of 292 nm using a UV detector with uric acid retention time 6.183
min and a resolution of 1.4 from the blood plasma. Linearity is obtained by
making a standard solution of uric acid concentrations of 2, 30, 60, 90, 120, and
150 μg/ml, the correlation coefficient (r) = 0999. Limits of detection and limit of
quantification of uric acid is 3.8224 μg/ml and 12.7416 μg/ml. Accuracy of the
concentration values 30 ; 90 and 120 μg/ml is 101.211%, 95.919%, and 99.299%,
while precision is 1.059%, 0.386% and 1.826%. System suitability test results and
repeatability of retention time and area ratio chromatograms showed the value of
%CV (Coefisient variation) is