d. Detektor UV pada 280 nm
e. Jumlah sampel :20 µLinjeksi. Sampel yang diinjeksi meliputi pelarut etanol 95 standar dan ekstrak etanol biji buah merah
E. Teknik Pengumpulan dan Analisis Data
Data yang diperoleh dari hasil penelitian yaitu golongan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak etanol dari hasil skrining
fitokimia. Penentuan fasa diam dan eluen dengan menggunakan KLT akan diperoleh data berupa spot-spot hasil pemisahan dan nilai Rf untuk tiap
perbandingan eluen n-heksan dan etil asetat, yang selanjutnya hasil pemisahan yang baik akan digunakan dalam pemisahan kromatografi kolom flash.
Pemisahan komponen polar ekstrak etanol menggunakan kromatografi flash maupun kolom sephadex akan dihasilkan eluat. Tiap eluat diuji dengan KLT
dan menghasilkan nilai Rf yang kemudian dibandingkan dengan nilai Rf awal. Selain itu masing-masing eluat juga dilakukan skrinning fitokimia terhadap
golongan metabolit sekunder yang positif pada ekstrak etanol awal sebelum dipisahkan dengan kolom untuk mengetahui senyawa metabolit sekunder
tersebut dapat terpisah dengan baik atau tidak serta untuk mengetahui bagaimana pola pemisahan dan analisis kuantitatif masing- masing senyawanya.
Pemisahan komponen polar biji buah merah menggunakan HPLC menghasilkan data berupa profil kromatogram, waktu retensi, dan luas puncak.
Jumlah puncak menunjukkan jumlah komponen senyawa dalam ekstrak etanol kualitatif. Luas puncak digunakan untuk menghitung kandungan masing-
masing komponen polar senyawa dalam biji buah merah kuantitatif. Masing-masing
metode pemisahan
kromatografi kolom
flash, kromatografi kolom sephadex, dan HPLC dibandingkan satu sama lain untuk
mendapatkan metode pemisahan yang paling tepat. Metode pemisahan yang paling tepat untuk memisahkan komponen polar biji buah merah adalah metode
yang menghasilkan data terbaik baik dari sisi kualitatif maupun kuantitatifnya. Komponen
polar yang teridentifikasi baik dengan menggunakan metode pemisahan tersebut kemudian dianalisis golongan senyawa lebih lanjut.
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
