B. Kerangka Pemikiran
Ekstrak buah merah yang diambil dari daging buahnya utamanya telah diteliti dan telah diketahui banyak mengandung senyawa antioksidan yang dapat
meminimalisir resiko kanker dan juga ditemukan senyawa-senyawa yang dapat meningkatkan daya tahan tubuh sedangkan biji buahnya belum pernah diteliti
sebelumnya dan belum pernah ditemukan literatur mengenai komponen utama biji buah merah. Biji dan buah memiliki hubungan biologik yang kuat jika dilihat dari
proses pembentukannya sehingga diduga biji memiliki senyawa metabolit sekunder yang hampir mirip dengan bagian daging buah merah. Untuk lebih
mengoptimalkan potensi buah merah secara keseluruhan maka dilakukan isolasi dan metode pemisahan yang tepat, khususnya untuk komponen polar biji buah
merah. I Made budi 2001 menyatakan bahwa komponen non polar dari buah
merah sebagian besar terdiri dari asam lemak. Komponen non polarnya, khususnya asam lemak harus dihilangkan terlebih dahulu agar tidak ikut
terekstrak ke dalam pelarut polar yang akan digunakan untuk mengisolasi komponen polarnya. Proses sokhlet dilakukan untuk menghilangkan komponen
non polar. Residu hasil ekstraksi sokhlet yang diduga telah bebas dari senyawa non polarnya, dimaserasi dengan menggunakan etanol untuk mengekstrak
komponen polarnya. Selanjutnya, ekstrak etanol biji buah merah dlakukan skrinning fitokimia
sebagai uji pendahuluan senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam biji buah merah. Hasil skrinning fitokimia ini nantinya akan memberikan gambaran
senyawa metabolit sekunder apa saja yang terkandung dalam biji buah merah dan dapat dijadikan dasar metode pemisahan selanjutnya. Septiyaningsih 2010 telah
melakukan skrinning fitokimia ekstrak etanol biji buah merah . Hasil skrinning fitokimianya menunjukkan bahwa ekstrak etanol uji positif terhadap tanin,
glikosida antrakuinon dan fenolik, serta asam lemak. Hasil skrinning fitokimia awal ini belum menjelaskan jenis tanin,atau aglikon glikosida jenis apa yang
berada dalam ekstrak etanol biji buah merah. Selain itu, ekstrak etanol ini juga belum dilakukan pemisahan dan identifikasi lebih lanjut. Sehingga, kadar masing-
masing golongan senyawa tersebut di dalam ekstrak etanol biji buah merah belum dapat diketahui.
Senyawa fenolik merupakan senyawa yang jangkauannya cukup luas karena hampir semua senyawa bahan alam memiliki gugus fenolik. Bahkan,
antrakuinon dan tanin sendiri juga merupakan suatu fenolik Treutter, 2010. Antrakuinon merupakan senyawa bahan alam yang jarang ditemukan karena
senyawa ini mudah teroksidasi atau terurai oleh enzim Robinson, 1993. Sedangkan, Tanin merupakan senyawa metabolit sekunder yang memiliki berat
molekul cukup tinggi dan sering kali membentuk kompleks dengan protein dan karbohidrat Risnasari, 2002. Tanin dalam akar Tsuga heterophylla mencapai
90 dari kandungan senyawa totalnya Hernes and Hedges, 2004. Keberadaan tanin dalam jumlah besar pada tanaman diduga dapat
mengganggu proses pemisahannya. Untuk mengetahui pengaruh keberadaan tanin terhadap pemisahan komponen polar dalam biji buah merah dilakukan beberapa
metode pemisahan. Metode pemisahan yang akan dilakukan terhadap komponen polar biji buah merah meliputi kromatografi kolom Flash, kromatografi kolom
Sephadex, dan High Performance Liquid Chromatography HPLC. Kromatografi Sephadex-HPLC memberikan hasil pemisahan tanin yang bagus pada ekstrak
daun bearberry Pegg et al., 2008.
C. Hipotesis