Pengaruh Pemberian Formaldehyde 0,1% terhadap Stabilitas Antigen HA Virus Newcastle Disease Galur La Sota
Dan tiadalah binatang-binataag yang ada
dan burung-burung yang kerbang, melainltan mat juga seper'brimu
...
Ire
(Q.S, G : S 8 )
Terun.i;uk yang t e r c i n t a :
nyah, Ibu, Mbak Biltik, Mas Y m ,
Mbak I i k , hi, E"ck dm Am
k u l i s a n ini kupersembahltan.
PENGARUH PEMBERl AN FORMALDEHYDE 0.1 X
TERWADAP STABltlPAS ANTIGEN HA
VIRUS NEWCASTLE DISEASE GAlUR L A S I
Oleh
SARASTINA
B 22,1253
FAKULTAS KEDQKTERAN HEWAN
INSTITWT PERTANlAN BOGOR
SARASPINA.
W n g a r u l ~Fernberim Formaldehyde 0,18 Terhadap
S-babfli-bas An-tigen HA Virus Newcastle Disease Galur La So-
ta,
(Bibaaah bimbtagm DR. M, B, M, MaloXe d a D r h , Su-
racbmi Se-tymhgslih),
Peneli-tim
jlii
b e r t u ju,m un-l;uk rne1lllaa-b pengaruh darl.
gembepian formaldehyde dengan k o n s e n t r a s i 0 , 1&;
terhadnp
stabilieas dari v i r u s ND galm La Sota selama Icwun waktu
t e r t s n t u pada penyimpanan temperatur f r e e z e r d m tempera-
t u p refrigera-tor. I'itras i antigen HA d i l a k u k a n dengan uji hemagglutinasi,
'enelli-t i m
31'3
i dilalc~~lcas?
selama empat bulan , menggu-
nakalz -t;elul- 'I-ert~uiasumur 10 hari sebanyalr 20 b u - t i r * Pen~upulzanlnenggunakan v i r u o ND galur La S O " ~ ddegan route
allcan-tois, .15 butrir d i i n o k u l a s i dan lima
j ~ ~ o k u l a ssuang
i
bu'tir sebagai kon-trol,
Caircm allan'-l;ois di.panen pada ha-
ri 1ceeaa.m sel;ekah pemupulran, dikumpul1ca.n dalam s a t u wadah,
dihornogenkai, d i s e n ' t r i f u g e dan d i u k u r pK s e r t a dilalctakan
u ji. hcrnagglu.f;;inasi,
Formaldehyde ycmg ciigunakalz adalah 40% p r o a n a l i t i k ,
D e n g a ~menggunalran larubl;an Phosphat B u f f e r Saline (PBS) ,
diencerlcan men j a d i 0,2:4.
ICemudian formaldehyde 0,276 h i
dicampur dengan cairax a l l m t o i s dengm volume yang a m a
secara homogen selama satu jam, sehjngga didapatlcan v i r u s
ND d a l a n formaldehyde
0 , '126.
Dua @luh ernpzk jani kemudian
d.ihomogenkan ltembali selama s a t u jsm.
Homogenisasi i n i
dilakulran dengan inengguuakan a l a i n a m e s t i r .
Setelah i t u
dilalculcan u j i hernagglutinasi untuii mengetahui t i t e r awal
penyimpanan, kemudian dimasukkai d:llam tabung-tabung flaIton t e r t u t u p dan disimpan dalam dua temperatur penyin~panan y a i t u t e q e r a t u r r e f r i g e r a t o r ( 4
.bur f r e e z e r (-4
- -8'
6).
- 9'
C)
dab tempera-
U j i IIA dilakukan s e t i a p minggu
d-imulai pada m i n g p ke-7 sampai minggu ke-16 pada kedua
temperatur penyimpanan.
H a s i l ycmg d i p e r o l e h menun jukkan pada penyimpanan
'kemperatur f r e e z e r s t a b i l i t a s a n t i ,en HA dapat b.ertdilzan
selnpai minggu lte-7 dan minggu kelO s~mpaiminggu ke-14.
Pada penyimpalian tempera-t;ur r e f r i g s r a t o r , h a s i l yang d i
-
pero:l-ell menu juklran bnh.\ia s t a b i l i t a s a n t i g e n HA dapat bertahan sampai minggu Ice-10 dan minggu he-13 sampai minggu
ice-1G.
Da.ri b a . s i l p e n e l i t i a n dapat d i t a r i k kesimpulan bahwa
formaldel~yde0,1 Fi m.mpu menstahilkan a n t i g e n I-@ v i r u s ND
g a l u r La S o t a selama lcurun walttu t e r t e n . 1 ; ~berdasarlcan
~
pada "cmpera.tur penjrimpanannya.
D a r i kedua temperatur pe-
nyimpanan yang t e l a h d d i t e l i t i , -1;ernyata pada temperatur
peny impanax r e f r i g e r a t o r mampu menstabilkan a n t i g e n I-IA
v i r u s NU g a l u r La S o t a untuk lturun waktu yang l e b i h lama.
FENGA411UI-I PXMBERIAN POH4ALDEI-IYDE 0,176
TXRI-IADXF STABILITAS RNTIC;EN RA
VIRUS XEblCASTLE DISXASE GALUR LA tSOTA
SKRIPSI
D i a jukan S e b a g a i S a l a h S a t u S y a r a t Untulc
Plemperoleh Gelm DoBter IIewan Pada
P a k u l t a s ICedokteran Hewan
I n s t i t u t 13ertanian Bogor
J U D n SKRDSI
:
PEMGAEUH I J E 3 m E R W FOMAI;IIEKYIXE 0,1%
TERHADAP STABILITAS ARTI@N
KA
VIRUS NEWCASTILT DISEASB G
m
U
R Lg SOTA
NAMA MAEASISWA
:
SAliASiCINA
NOMOR POKOK
:
B22.7253
Telah d i p e r i k s a dan d i s e t u j u i
Oleh:
-
ruan
P e n u l i s dilahirlcan pada t a n g g a l 15 J u n i 1967 d i Pasu-
.,
s e b a g a i anak keempat d a r i t u juh b e r s a u d a r a d a r i
ayahnda S jarkawi dan ibunda S r i Widati.
P e n u l i s menyelesaikan pendidikan s e k o l a h d a s a r d i SI)
Negeri Pelcuncen I Pasuruan pada tahun 1979, selrolah menengah pertama d i SMP Negeri I Pasuruan pada t a h u n 1982 dan
s e k o l a h meneagah a t a s d i SiqA Wegeri I Pasuruan pada tahun
1985.
Pada tahun 1985 p e n u l i s d i t e r i m a s e b a g a i maliasiawi
d i I n s L - i t u t P e r t m i a n Bogor m e l a l u i j a l u r Penelusuran M i na"can
IZernampuan (PIDIC) dan pada tahun 1986 d i t e r i m a se-
b a g a i mahasiswi d i Falrultas Kedokkerm EIewan Z n s t i t u t Pert a n i a n Dogor.
Lulus sar jana Icedokteran IIewan pada t a n g g a l
2 September 1989.
Selama menempuh pendidilcan d i F a k u l t a s Kedolcteran Iie-
wan 1nskitu-t p e r t a n i a n Bogor, p e n u l i s pernah men j a d i A s i s t e n Luar Biasa pada mata k u l i a h I l i s t o p a t o l o g i pada tahun
1989 dan t a h ~ m1990.
I* j i dan syulmr p e n u l i s pan jatkan lrehadirat I l a h i
Robbi a t a s s e g a l a karuniaNya, sehingga s k r i p s i i n i dapat
p e n ~ ~ l si es l e s a i k a n .
S k r i p s i ini merupakan h a s i l p e n e l i t i s 1 yang d i l a k s a nakan mulai t a n g g a l 10 P e b r u a r i s a n p a i 10 J u n i 1990, d i
laboratorium V i r o l o g i jurusan Ilmu Penyakit EIewan dan Ilesellatan PIasyarzltat Ve'teriner, Bakul'tias liedokteran I-Iewan
l3s.l;itu.l; P e r t a n i n n Bogor.
Slcripsi Lni disusun s e b a ~ a i
s a l a h s a t u s y a r a t un'kuk memperoleh g e l a r Dokter I-Iewan d l
Palrul.kas Iiedok'teran Iiewan Lnsti.tu't perkanian Bogor.
Dengan s e l e s a i n y a s l r r i p s i i n i p e n u l i s menyampaikan
ucapan t e r i m a ltasih kepada :
I. Bapalr DR.
M. B. M. Malole dan Ibu Drh. Surachmi Setya-
niilgsih selaltu d . ~ s e npembimbing yang t e l a h banyak membantu, meinberi bimbingan dan saran-saran s e r t a pengarahan kepada p e n u l i s
2.
.
Ayah, I l ~ u ,kalcalr dan a d i k yang senan"casa memberi semangat dan doa menu ju ire sulrsesan.
7.
Bapalc DR. Mans joer Ilavra,b dan pengurus l a b o r a t o r i ~ mD i oltimia yang t e l a h banyak membantu dalam penyediaan bahan-bahan kimia.
4.
Pengurus laboratorium Icimia l'erpadu yang t u r u t memban-tu
5.
selama peneli'1;im.
Bapak dan ibu p e n g e l o l a r u m g perpus.takaa1.
6.
Rekern-relcmlku : C a w i , Ros, T i n i , Chia, Yadi, Kalc Emi,
drl.1. E l i , Tomi d a i uda I n s e r t a semua pihalc yang t u ~ u rnembantu
t
dengan t u l u s ,
P e n u l i s menyadari bahwa s l c r i p s i i n i m a s i h jauh d a r i
sempurna.
Walaupun demikian, semoga s k r i p a i h i berman-
f a a t b a g i d u n i a pe'ternalcan, khususnya dalam b i d a n g pengemb m ~ g a np e t e r n a k a n unggas d i I n d o n e s i a .
Bogor, Nopember 1990
Halaman
DAPTAR TABEL
DAFTAR GAPlBAR
LAl"IP6RAIi.
.
1
.
II
.................................
.................................
.......................*.......
PENDAX-IULUAN
............................
........................
............................
TIitJAUAN PUSTAICA
ii
I
3
3
A :7
7
13
.
.
.....................
..*..............*......
S i f a t Biologi
Formaldehyde
..
B I Inalt-bivasi V i r u s dengan Pormaldehyde ...
13.2.
.......................
C . U j i IIemagglutb1asi ...*..............
C .I. Neltanisme 1-Iemaggl.utinasi ...........
C .2 . ~ i p l i k a s iP r a k t i s I I e m a g g l u t i n a s i ....
D . T e l u r T e r t ~ u l a s ......................
111. 13AfIm DAN METODE PETmLITINV .............
A . Bahan ...............................
U . Metode P e n e l i t i a n ...................
...........
13.1.
Pemupukan T e l u r T e r t u n a s
13.2.
I n a l t t i v a s i VI'JD d e n g a l Formaldeliyde
13.3.
Uj i Hemagglutinasi
HAS=
3
3
11
14
Daya leer ja Formaldehyde dalam
. . . . Inali*r .. .
.l . i v a s i V i r u s
.
ii
. V i r u s ND
A . 1. ICLasifiltasi .......................
8. 2 . 1 ~ 4 o r f o l o g i
.......................
A
IV
2.
PEILBLITI&~
..
.................
.........................
16
17
20
21
22
2424
25
25
26
28
30
v.
ｰｲＺ［ｾｭａｈｓｎ＠
VI.
ImSINPULAN DAN SARAN
•
•
DlillTAR PUSTAKA
•
•
•
•
•
•
0
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
35
•• •••• ••• •••• •• •••• •• •
40
••••••• ••••••••
42
• ••••••••••••
DAF'rAR TABEL
1.
Halaman
Teks
Tabel
'riter Hll pada Temperatur Refrigerator! Forlnaldehyde ....... " ...............
0
••••
0
••
"
•
•
31
Titer HA pada Temperatur Freezer! Formaldehyde
32
3.
Titer
33
4.
Titer EA pada Temperatur Freezer/ PBS
2.
•
0
HA
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
pada Temperatur Refrigerator/ PBS
,
..
•
34
DAFTAR GAl'lBAR
Garnbar
1.
Teks
StruJdur Pararnyxovirus
o .. .. • • • 0 • .. .. • • • • 0 • • • •
Halaman
5
LAMP IRAN
1.
Kurva Modus Titer IU pada Temperatur Refri':'
gerator
0
...........................................
44
2.
Kurva l10dus Titer HA pada Ternperatur Freezer
45
3.
Kurva Modus Titer WI. VND Formaldehyde 0,1%
46
I.
PENDAHULUAN
Dalam usaha pengembangan peternal\:an di Indonesia baik
dalarn rangka pemenuhan gizi masyarakat termasuk pening]{atan ]wl1sumsi hewani, pemerintah telah berusaha membantu
u-
saha-usaha peterl1akan rakyat untuk meninglcatkan kualitas
dan kual1titas produlm:L, baik d:L bidang produksi telur, daging maupun air susu.
Se jalan dengan itu usaha
di Indones.ia memｰ･ﾷｾｲｮ｡ｫＱ＠
punyai dampak positif terhadap pertumbuhan ekol1omi ya11g
diharapkan dalam fJelita V.;,ini untuk memcapai sasaran lima
persen per tahtm.
PertumbUhan dan pergeseran struktur
konomi yang diperlukan dapat menyerap angkatan kerja.
eHal
ini dapat tercapai dengan adanya kecterpaduan dan hubungan
inter sektoral yang saling mendul;:ung.
Dalam Pelita V
di-
harapkan almn terjadi proses menuju keseimbangan antara
sektor rnigas dan sektor non migas . (Anonimous, 1989).
Sa-
lah satu diantaranya adalah sub sektor peternakan.
Dalam usaha pen,gembangan peternaJ{an banyak kendala
yang ditemukan. baik berasal dari manusia sendiri sebagai
pengeJ.ola maupun dari ternaknya.
Iiliususnya dalam bidang
peternakan ayam, berbagai kendala seperti timbulnya penyaIdt se r ing te r jadi.
Salah sa tu penyakit pa da ayam yang
men jadi persoalan bagi peternak dan pemerintah ]{arena banyak menimbulkan kerugian adalah penyakit
Nel,rcastle Disease (ND).
I
tetelo I
atau
Kerugian yang di timbulkan oleh
penyakit ini berupa penurunan produRsi. telur dan daya
2
tetasnya, angka l{ematian yang tinggi yaitu mencapa;i:
50%
sampai 100% serta pertumbuhan yang terhambat.
Upaya untu), melindungi ayam terhadap ND sudah banya!\:
dilalcukan.
1'enemuan vaksin dan metode vaksinasi saat ini
telah memberikan andil besar dalam menelmn kematian terhadap penyaldt ini, terutama untuk ayam-ayam komersial (Ras).
Untuk mengetahui hasil valminasi yang telah dilakukan
diperlulwn pengulmran titer antibodi dengan menggunakan
u ji penghambatan aglutinasi (haemagglutination inhibition).
Dalam uji tersebut diperlukan virus standar yang memiliki
stabilitas titer antigen dan antigen yang siap .-pakai.
Hal ini sullt dipenuhi di lapangan dan di tempat yang jauh
dari laboratoriuro.
1'eneli tian ini dilalmlmn untuk mengetahui apakah inaldivasi dengan formaldehyde 0, i% mampu menstabill,an antigen Hil virus ND selama kurun waktu tertentu yang disimpan
pada temperatur freezer dan temperatur refrigerator.
Virus ND yallg digunakan dalam peneli tian ini adalah
virus ND galur La Sota • karen a rnerupakan galur yang lentogenik atau avirulen.
Dipilihnya formaldehyde 0, 1% ｫ｡ｲ･ﾷｾ＠
na dad_ peneli tian terdahulu dengan menggunakan formaldehyde
0,08J{;
mampu menstabilkan an-tigel1 HA virus ND galur
La Sota untuk Imrull wal,tu dua bulan pada penyiIUpanan temperatur freezer,. refrigerator dan kamar.
ｾｪ｡ｬＬ＠
diharapkan
dengan menggunal,an lwnsentrasi yang lebih tinggi akan mamIJU
menstabill{an antigen EA virus ND galur La Sota untuk
Imrun waktu yang le bih lama.
II.
A.
Virus})TD
1•
Klas ifilms i
TlllJAUAN PUSTAKA
Agen dari Newcastle Disease ditemukan pada tahun 1926
oleh Doyle (1927) dari burung yang sakit.
Virus
ｈ･｜ｾ｣｡ｳｴｬ＠
Disease adalah salah satu anggota da-
ri ke16mpol< Paramyxovirus, yang
mengandung dua permukaan
glilwprotein dan paling sedikit empat . protein internal
(Nagai et ｾＮＬ＠
1976; Sato ｾ＠
a1., 1987; ｾｬ｣ｇｩｮ･ｳ＠
et al.,
1988 dalam Umino, Kohama, Sato dan Sugiura, 1990).
Genus ini sesudah dengan klasifikasi oleh Natthews
(1979) yang juga mencakup virus Parainfluenza dari mammals
1-5, virus HVJnps dan Avian Paramyxovirus (PMVs)
tidak-tidaknya ada tu juh serotipe.
yang se-
Virus ND memiliki se-
rotipe Pr'lV-1 (Hanson dan Beard dalam Hofstad et a1., 1984).
2.
Morfologi
l'lenurut Spradbrow dalam Copland (1987) Paramyxovirus
lIlempunyai sebuah gen berhelai tunggal, 'negative sense RNA'.
Partilml viral mempunyai 'envelope I dan paling sedikit mengandung enarn partikel yang spesifik.
HansOn dan Beard dalam Hofstad (1984)
menyatakan vi-
rion atau unit virus delVasa uls:ural1l1ya bervariasi dari 120
nm sampai 300Cnlll tetapi biasal1ya sekitar 1801111l.
terhadap
Sensitif
eter dan IJerusakan envelope secara osmotik, lIle-
mil,iki sebuah 1Jo1a proyeksi seperti batang (panjang 80 AO)
dan mengandung
lwmponen antigenik yang merangsang induk
semang untuh: menghasil]-;:an "hemagglutinin inhibitingll dan
netralisasi antibodi (Rott, 1964).
Nenurut ])ulbecco dan Ginsberg (1984) struktur Paramyxovirus terdiri dari hemagglutinin-neuraminidase glikoprotein, fussion glikoprotein, dua lapis lipid, matrilw
gli-
koprote in, nulde oprote in, polj,merase prote in serta RNA
(Gambar 1).
Komponen dalam atau internal (nukleocapsid) juga diIwtahui sebagai antigen G atau nul-;:leoprotein (NP) antigen
terlarut , terdiri dari sebuah tabung bergulung yang panjang dan banyak dengan diameter 180 AO •
Struktur unit
protein dari tabung tersusun dalam sebuah 'helix' melingkari pusat
gurasi
ｉｕｾａ＠
I
axis I berlubang; didalamnya ditentuk811 konfi-
(Hanson d811 Beard dalam Hofstad et a1., 1984).
Hussell dan Edington (1985) menyatakan batang glikopl.'otein mempunyai tiga fungsi yang terpisah yaitu untuk
menyerang' sel indul'i: semang melalui sisi reseptor induk semang, yang disebut hemagglutinin (H) dan untuk roerobek sel
dengan u jung virus yang dise but neuraminidase (N) serta
untuk melebur envelope virus dengan sel (persatuan bentuk
dan penetrasi viral) y811g disebut 'fussion' protein (F).
Sebagian besar massa virus adalah protein.
Kebanyak-
terdapat pada, bagian dalam selubung virus atau terikat dibagiall
dalam pada bah811 genetika virus yaitu asam ribonu-
kleat (mIA) , (Knight, 1975).
5
P
Swnber
PROTEIN
Dnlbe eeo dan Ginsberg (1984)
Ellight (1975) menjelaskan banyak virus di alam denga11
l1artikel yang telah matang
atau sempurna mengandung sema-
ta-mataasarn nuldeat dan prote in.
Asam nuldet prote in ini
merupalmn unsur polwk yang memegang peranan lebih banyak
dalam struktur dan fungsi virus, l1alaupun beberapa unsur
pokok lain yang jwnlahnya sedikit dalam Imsus tertentu
mel1jadi sangat penting.
Pada beberapa virus, protein ter-
dapat sebagai glilwprotein dan lipoprotein, secara khusus
adalah
antigen yang lebih baik dari unsur-unsur pokok vi-
rus yang lain.
Protein virus berfungsi melindungi asam
null,eat dari perusakan oleh nuklease-nuklease atau agenagen degradatif lainnya, selain itu juga berfungsi sebagai
6
perantara proses infeksi, yang sering menentukan induk semallg spesifil
dan burung-burung yang kerbang, melainltan mat juga seper'brimu
...
Ire
(Q.S, G : S 8 )
Terun.i;uk yang t e r c i n t a :
nyah, Ibu, Mbak Biltik, Mas Y m ,
Mbak I i k , hi, E"ck dm Am
k u l i s a n ini kupersembahltan.
PENGARUH PEMBERl AN FORMALDEHYDE 0.1 X
TERWADAP STABltlPAS ANTIGEN HA
VIRUS NEWCASTLE DISEASE GAlUR L A S I
Oleh
SARASTINA
B 22,1253
FAKULTAS KEDQKTERAN HEWAN
INSTITWT PERTANlAN BOGOR
SARASPINA.
W n g a r u l ~Fernberim Formaldehyde 0,18 Terhadap
S-babfli-bas An-tigen HA Virus Newcastle Disease Galur La So-
ta,
(Bibaaah bimbtagm DR. M, B, M, MaloXe d a D r h , Su-
racbmi Se-tymhgslih),
Peneli-tim
jlii
b e r t u ju,m un-l;uk rne1lllaa-b pengaruh darl.
gembepian formaldehyde dengan k o n s e n t r a s i 0 , 1&;
terhadnp
stabilieas dari v i r u s ND galm La Sota selama Icwun waktu
t e r t s n t u pada penyimpanan temperatur f r e e z e r d m tempera-
t u p refrigera-tor. I'itras i antigen HA d i l a k u k a n dengan uji hemagglutinasi,
'enelli-t i m
31'3
i dilalc~~lcas?
selama empat bulan , menggu-
nakalz -t;elul- 'I-ert~uiasumur 10 hari sebanyalr 20 b u - t i r * Pen~upulzanlnenggunakan v i r u o ND galur La S O " ~ ddegan route
allcan-tois, .15 butrir d i i n o k u l a s i dan lima
j ~ ~ o k u l a ssuang
i
bu'tir sebagai kon-trol,
Caircm allan'-l;ois di.panen pada ha-
ri 1ceeaa.m sel;ekah pemupulran, dikumpul1ca.n dalam s a t u wadah,
dihornogenkai, d i s e n ' t r i f u g e dan d i u k u r pK s e r t a dilalctakan
u ji. hcrnagglu.f;;inasi,
Formaldehyde ycmg ciigunakalz adalah 40% p r o a n a l i t i k ,
D e n g a ~menggunalran larubl;an Phosphat B u f f e r Saline (PBS) ,
diencerlcan men j a d i 0,2:4.
ICemudian formaldehyde 0,276 h i
dicampur dengan cairax a l l m t o i s dengm volume yang a m a
secara homogen selama satu jam, sehjngga didapatlcan v i r u s
ND d a l a n formaldehyde
0 , '126.
Dua @luh ernpzk jani kemudian
d.ihomogenkan ltembali selama s a t u jsm.
Homogenisasi i n i
dilakulran dengan inengguuakan a l a i n a m e s t i r .
Setelah i t u
dilalculcan u j i hernagglutinasi untuii mengetahui t i t e r awal
penyimpanan, kemudian dimasukkai d:llam tabung-tabung flaIton t e r t u t u p dan disimpan dalam dua temperatur penyin~panan y a i t u t e q e r a t u r r e f r i g e r a t o r ( 4
.bur f r e e z e r (-4
- -8'
6).
- 9'
C)
dab tempera-
U j i IIA dilakukan s e t i a p minggu
d-imulai pada m i n g p ke-7 sampai minggu ke-16 pada kedua
temperatur penyimpanan.
H a s i l ycmg d i p e r o l e h menun jukkan pada penyimpanan
'kemperatur f r e e z e r s t a b i l i t a s a n t i ,en HA dapat b.ertdilzan
selnpai minggu lte-7 dan minggu kelO s~mpaiminggu ke-14.
Pada penyimpalian tempera-t;ur r e f r i g s r a t o r , h a s i l yang d i
-
pero:l-ell menu juklran bnh.\ia s t a b i l i t a s a n t i g e n HA dapat bertahan sampai minggu Ice-10 dan minggu he-13 sampai minggu
ice-1G.
Da.ri b a . s i l p e n e l i t i a n dapat d i t a r i k kesimpulan bahwa
formaldel~yde0,1 Fi m.mpu menstahilkan a n t i g e n I-@ v i r u s ND
g a l u r La S o t a selama lcurun walttu t e r t e n . 1 ; ~berdasarlcan
~
pada "cmpera.tur penjrimpanannya.
D a r i kedua temperatur pe-
nyimpanan yang t e l a h d d i t e l i t i , -1;ernyata pada temperatur
peny impanax r e f r i g e r a t o r mampu menstabilkan a n t i g e n I-IA
v i r u s NU g a l u r La S o t a untuk lturun waktu yang l e b i h lama.
FENGA411UI-I PXMBERIAN POH4ALDEI-IYDE 0,176
TXRI-IADXF STABILITAS RNTIC;EN RA
VIRUS XEblCASTLE DISXASE GALUR LA tSOTA
SKRIPSI
D i a jukan S e b a g a i S a l a h S a t u S y a r a t Untulc
Plemperoleh Gelm DoBter IIewan Pada
P a k u l t a s ICedokteran Hewan
I n s t i t u t 13ertanian Bogor
J U D n SKRDSI
:
PEMGAEUH I J E 3 m E R W FOMAI;IIEKYIXE 0,1%
TERHADAP STABILITAS ARTI@N
KA
VIRUS NEWCASTILT DISEASB G
m
U
R Lg SOTA
NAMA MAEASISWA
:
SAliASiCINA
NOMOR POKOK
:
B22.7253
Telah d i p e r i k s a dan d i s e t u j u i
Oleh:
-
ruan
P e n u l i s dilahirlcan pada t a n g g a l 15 J u n i 1967 d i Pasu-
.,
s e b a g a i anak keempat d a r i t u juh b e r s a u d a r a d a r i
ayahnda S jarkawi dan ibunda S r i Widati.
P e n u l i s menyelesaikan pendidikan s e k o l a h d a s a r d i SI)
Negeri Pelcuncen I Pasuruan pada tahun 1979, selrolah menengah pertama d i SMP Negeri I Pasuruan pada t a h u n 1982 dan
s e k o l a h meneagah a t a s d i SiqA Wegeri I Pasuruan pada tahun
1985.
Pada tahun 1985 p e n u l i s d i t e r i m a s e b a g a i maliasiawi
d i I n s L - i t u t P e r t m i a n Bogor m e l a l u i j a l u r Penelusuran M i na"can
IZernampuan (PIDIC) dan pada tahun 1986 d i t e r i m a se-
b a g a i mahasiswi d i Falrultas Kedokkerm EIewan Z n s t i t u t Pert a n i a n Dogor.
Lulus sar jana Icedokteran IIewan pada t a n g g a l
2 September 1989.
Selama menempuh pendidilcan d i F a k u l t a s Kedolcteran Iie-
wan 1nskitu-t p e r t a n i a n Bogor, p e n u l i s pernah men j a d i A s i s t e n Luar Biasa pada mata k u l i a h I l i s t o p a t o l o g i pada tahun
1989 dan t a h ~ m1990.
I* j i dan syulmr p e n u l i s pan jatkan lrehadirat I l a h i
Robbi a t a s s e g a l a karuniaNya, sehingga s k r i p s i i n i dapat
p e n ~ ~ l si es l e s a i k a n .
S k r i p s i ini merupakan h a s i l p e n e l i t i s 1 yang d i l a k s a nakan mulai t a n g g a l 10 P e b r u a r i s a n p a i 10 J u n i 1990, d i
laboratorium V i r o l o g i jurusan Ilmu Penyakit EIewan dan Ilesellatan PIasyarzltat Ve'teriner, Bakul'tias liedokteran I-Iewan
l3s.l;itu.l; P e r t a n i n n Bogor.
Slcripsi Lni disusun s e b a ~ a i
s a l a h s a t u s y a r a t un'kuk memperoleh g e l a r Dokter I-Iewan d l
Palrul.kas Iiedok'teran Iiewan Lnsti.tu't perkanian Bogor.
Dengan s e l e s a i n y a s l r r i p s i i n i p e n u l i s menyampaikan
ucapan t e r i m a ltasih kepada :
I. Bapalr DR.
M. B. M. Malole dan Ibu Drh. Surachmi Setya-
niilgsih selaltu d . ~ s e npembimbing yang t e l a h banyak membantu, meinberi bimbingan dan saran-saran s e r t a pengarahan kepada p e n u l i s
2.
.
Ayah, I l ~ u ,kalcalr dan a d i k yang senan"casa memberi semangat dan doa menu ju ire sulrsesan.
7.
Bapalc DR. Mans joer Ilavra,b dan pengurus l a b o r a t o r i ~ mD i oltimia yang t e l a h banyak membantu dalam penyediaan bahan-bahan kimia.
4.
Pengurus laboratorium Icimia l'erpadu yang t u r u t memban-tu
5.
selama peneli'1;im.
Bapak dan ibu p e n g e l o l a r u m g perpus.takaa1.
6.
Rekern-relcmlku : C a w i , Ros, T i n i , Chia, Yadi, Kalc Emi,
drl.1. E l i , Tomi d a i uda I n s e r t a semua pihalc yang t u ~ u rnembantu
t
dengan t u l u s ,
P e n u l i s menyadari bahwa s l c r i p s i i n i m a s i h jauh d a r i
sempurna.
Walaupun demikian, semoga s k r i p a i h i berman-
f a a t b a g i d u n i a pe'ternalcan, khususnya dalam b i d a n g pengemb m ~ g a np e t e r n a k a n unggas d i I n d o n e s i a .
Bogor, Nopember 1990
Halaman
DAPTAR TABEL
DAFTAR GAPlBAR
LAl"IP6RAIi.
.
1
.
II
.................................
.................................
.......................*.......
PENDAX-IULUAN
............................
........................
............................
TIitJAUAN PUSTAICA
ii
I
3
3
A :7
7
13
.
.
.....................
..*..............*......
S i f a t Biologi
Formaldehyde
..
B I Inalt-bivasi V i r u s dengan Pormaldehyde ...
13.2.
.......................
C . U j i IIemagglutb1asi ...*..............
C .I. Neltanisme 1-Iemaggl.utinasi ...........
C .2 . ~ i p l i k a s iP r a k t i s I I e m a g g l u t i n a s i ....
D . T e l u r T e r t ~ u l a s ......................
111. 13AfIm DAN METODE PETmLITINV .............
A . Bahan ...............................
U . Metode P e n e l i t i a n ...................
...........
13.1.
Pemupukan T e l u r T e r t u n a s
13.2.
I n a l t t i v a s i VI'JD d e n g a l Formaldeliyde
13.3.
Uj i Hemagglutinasi
HAS=
3
3
11
14
Daya leer ja Formaldehyde dalam
. . . . Inali*r .. .
.l . i v a s i V i r u s
.
ii
. V i r u s ND
A . 1. ICLasifiltasi .......................
8. 2 . 1 ~ 4 o r f o l o g i
.......................
A
IV
2.
PEILBLITI&~
..
.................
.........................
16
17
20
21
22
2424
25
25
26
28
30
v.
ｰｲＺ［ｾｭａｈｓｎ＠
VI.
ImSINPULAN DAN SARAN
•
•
DlillTAR PUSTAKA
•
•
•
•
•
•
0
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
35
•• •••• ••• •••• •• •••• •• •
40
••••••• ••••••••
42
• ••••••••••••
DAF'rAR TABEL
1.
Halaman
Teks
Tabel
'riter Hll pada Temperatur Refrigerator! Forlnaldehyde ....... " ...............
0
••••
0
••
"
•
•
31
Titer HA pada Temperatur Freezer! Formaldehyde
32
3.
Titer
33
4.
Titer EA pada Temperatur Freezer/ PBS
2.
•
0
HA
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
•
pada Temperatur Refrigerator/ PBS
,
..
•
34
DAFTAR GAl'lBAR
Garnbar
1.
Teks
StruJdur Pararnyxovirus
o .. .. • • • 0 • .. .. • • • • 0 • • • •
Halaman
5
LAMP IRAN
1.
Kurva Modus Titer IU pada Temperatur Refri':'
gerator
0
...........................................
44
2.
Kurva l10dus Titer HA pada Ternperatur Freezer
45
3.
Kurva Modus Titer WI. VND Formaldehyde 0,1%
46
I.
PENDAHULUAN
Dalam usaha pengembangan peternal\:an di Indonesia baik
dalarn rangka pemenuhan gizi masyarakat termasuk pening]{atan ]wl1sumsi hewani, pemerintah telah berusaha membantu
u-
saha-usaha peterl1akan rakyat untuk meninglcatkan kualitas
dan kual1titas produlm:L, baik d:L bidang produksi telur, daging maupun air susu.
Se jalan dengan itu usaha
di Indones.ia memｰ･ﾷｾｲｮ｡ｫＱ＠
punyai dampak positif terhadap pertumbuhan ekol1omi ya11g
diharapkan dalam fJelita V.;,ini untuk memcapai sasaran lima
persen per tahtm.
PertumbUhan dan pergeseran struktur
konomi yang diperlukan dapat menyerap angkatan kerja.
eHal
ini dapat tercapai dengan adanya kecterpaduan dan hubungan
inter sektoral yang saling mendul;:ung.
Dalam Pelita V
di-
harapkan almn terjadi proses menuju keseimbangan antara
sektor rnigas dan sektor non migas . (Anonimous, 1989).
Sa-
lah satu diantaranya adalah sub sektor peternakan.
Dalam usaha pen,gembangan peternaJ{an banyak kendala
yang ditemukan. baik berasal dari manusia sendiri sebagai
pengeJ.ola maupun dari ternaknya.
Iiliususnya dalam bidang
peternakan ayam, berbagai kendala seperti timbulnya penyaIdt se r ing te r jadi.
Salah sa tu penyakit pa da ayam yang
men jadi persoalan bagi peternak dan pemerintah ]{arena banyak menimbulkan kerugian adalah penyakit
Nel,rcastle Disease (ND).
I
tetelo I
atau
Kerugian yang di timbulkan oleh
penyakit ini berupa penurunan produRsi. telur dan daya
2
tetasnya, angka l{ematian yang tinggi yaitu mencapa;i:
50%
sampai 100% serta pertumbuhan yang terhambat.
Upaya untu), melindungi ayam terhadap ND sudah banya!\:
dilalcukan.
1'enemuan vaksin dan metode vaksinasi saat ini
telah memberikan andil besar dalam menelmn kematian terhadap penyaldt ini, terutama untuk ayam-ayam komersial (Ras).
Untuk mengetahui hasil valminasi yang telah dilakukan
diperlulwn pengulmran titer antibodi dengan menggunakan
u ji penghambatan aglutinasi (haemagglutination inhibition).
Dalam uji tersebut diperlukan virus standar yang memiliki
stabilitas titer antigen dan antigen yang siap .-pakai.
Hal ini sullt dipenuhi di lapangan dan di tempat yang jauh
dari laboratoriuro.
1'eneli tian ini dilalmlmn untuk mengetahui apakah inaldivasi dengan formaldehyde 0, i% mampu menstabill,an antigen Hil virus ND selama kurun waktu tertentu yang disimpan
pada temperatur freezer dan temperatur refrigerator.
Virus ND yallg digunakan dalam peneli tian ini adalah
virus ND galur La Sota • karen a rnerupakan galur yang lentogenik atau avirulen.
Dipilihnya formaldehyde 0, 1% ｫ｡ｲ･ﾷｾ＠
na dad_ peneli tian terdahulu dengan menggunakan formaldehyde
0,08J{;
mampu menstabilkan an-tigel1 HA virus ND galur
La Sota untuk Imrull wal,tu dua bulan pada penyiIUpanan temperatur freezer,. refrigerator dan kamar.
ｾｪ｡ｬＬ＠
diharapkan
dengan menggunal,an lwnsentrasi yang lebih tinggi akan mamIJU
menstabill{an antigen EA virus ND galur La Sota untuk
Imrun waktu yang le bih lama.
II.
A.
Virus})TD
1•
Klas ifilms i
TlllJAUAN PUSTAKA
Agen dari Newcastle Disease ditemukan pada tahun 1926
oleh Doyle (1927) dari burung yang sakit.
Virus
ｈ･｜ｾ｣｡ｳｴｬ＠
Disease adalah salah satu anggota da-
ri ke16mpol< Paramyxovirus, yang
mengandung dua permukaan
glilwprotein dan paling sedikit empat . protein internal
(Nagai et ｾＮＬ＠
1976; Sato ｾ＠
a1., 1987; ｾｬ｣ｇｩｮ･ｳ＠
et al.,
1988 dalam Umino, Kohama, Sato dan Sugiura, 1990).
Genus ini sesudah dengan klasifikasi oleh Natthews
(1979) yang juga mencakup virus Parainfluenza dari mammals
1-5, virus HVJnps dan Avian Paramyxovirus (PMVs)
tidak-tidaknya ada tu juh serotipe.
yang se-
Virus ND memiliki se-
rotipe Pr'lV-1 (Hanson dan Beard dalam Hofstad et a1., 1984).
2.
Morfologi
l'lenurut Spradbrow dalam Copland (1987) Paramyxovirus
lIlempunyai sebuah gen berhelai tunggal, 'negative sense RNA'.
Partilml viral mempunyai 'envelope I dan paling sedikit mengandung enarn partikel yang spesifik.
HansOn dan Beard dalam Hofstad (1984)
menyatakan vi-
rion atau unit virus delVasa uls:ural1l1ya bervariasi dari 120
nm sampai 300Cnlll tetapi biasal1ya sekitar 1801111l.
terhadap
Sensitif
eter dan IJerusakan envelope secara osmotik, lIle-
mil,iki sebuah 1Jo1a proyeksi seperti batang (panjang 80 AO)
dan mengandung
lwmponen antigenik yang merangsang induk
semang untuh: menghasil]-;:an "hemagglutinin inhibitingll dan
netralisasi antibodi (Rott, 1964).
Nenurut ])ulbecco dan Ginsberg (1984) struktur Paramyxovirus terdiri dari hemagglutinin-neuraminidase glikoprotein, fussion glikoprotein, dua lapis lipid, matrilw
gli-
koprote in, nulde oprote in, polj,merase prote in serta RNA
(Gambar 1).
Komponen dalam atau internal (nukleocapsid) juga diIwtahui sebagai antigen G atau nul-;:leoprotein (NP) antigen
terlarut , terdiri dari sebuah tabung bergulung yang panjang dan banyak dengan diameter 180 AO •
Struktur unit
protein dari tabung tersusun dalam sebuah 'helix' melingkari pusat
gurasi
ｉｕｾａ＠
I
axis I berlubang; didalamnya ditentuk811 konfi-
(Hanson d811 Beard dalam Hofstad et a1., 1984).
Hussell dan Edington (1985) menyatakan batang glikopl.'otein mempunyai tiga fungsi yang terpisah yaitu untuk
menyerang' sel indul'i: semang melalui sisi reseptor induk semang, yang disebut hemagglutinin (H) dan untuk roerobek sel
dengan u jung virus yang dise but neuraminidase (N) serta
untuk melebur envelope virus dengan sel (persatuan bentuk
dan penetrasi viral) y811g disebut 'fussion' protein (F).
Sebagian besar massa virus adalah protein.
Kebanyak-
terdapat pada, bagian dalam selubung virus atau terikat dibagiall
dalam pada bah811 genetika virus yaitu asam ribonu-
kleat (mIA) , (Knight, 1975).
5
P
Swnber
PROTEIN
Dnlbe eeo dan Ginsberg (1984)
Ellight (1975) menjelaskan banyak virus di alam denga11
l1artikel yang telah matang
atau sempurna mengandung sema-
ta-mataasarn nuldeat dan prote in.
Asam nuldet prote in ini
merupalmn unsur polwk yang memegang peranan lebih banyak
dalam struktur dan fungsi virus, l1alaupun beberapa unsur
pokok lain yang jwnlahnya sedikit dalam Imsus tertentu
mel1jadi sangat penting.
Pada beberapa virus, protein ter-
dapat sebagai glilwprotein dan lipoprotein, secara khusus
adalah
antigen yang lebih baik dari unsur-unsur pokok vi-
rus yang lain.
Protein virus berfungsi melindungi asam
null,eat dari perusakan oleh nuklease-nuklease atau agenagen degradatif lainnya, selain itu juga berfungsi sebagai
6
perantara proses infeksi, yang sering menentukan induk semallg spesifil